用于纯化藻蓝蛋白的方法与流程

文档序号:26995838发布日期:2021-10-19 21:33阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种从包含一种或多种藻蓝蛋白和糖原的溶液中纯化藻蓝蛋白的方法,所述方法的特征在于它包括(i)用适用于在低于6的ph和低于40℃的反应温度下降解糖原的酶进行酶降解所述糖原的步骤和(ii)从糖原降解产物中分离藻蓝蛋白的步骤。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所述温度低于30℃和/或所述ph小于或等于5。3.根据权利要求1或2中任一项所述的方法,其特征在于所述酶具有α1

4葡萄糖苷酶或聚半乳糖醛酸酶活性。4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于所述酶是果胶酶。5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,其特征在于所述酶是一种酶混合物,所述酶混合物除具有α1

4葡萄糖苷酶或聚半乳糖醛酸酶活性的酶外,还包含具有α1

6葡萄糖苷酶活性的酶。6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于所述具有α1

6葡萄糖苷酶活性的酶是普鲁兰酶。7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于所述酶混合物包含果胶酶和普鲁兰酶。8.根据权利要求1至3中任一项所述的方法,其特征在于所述酶具有α1

4葡萄糖苷酶或聚半乳糖醛酸酶活性以及α1

6葡萄糖苷酶活性。9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于所述酶是葡糖淀粉酶。10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法,其特征在于所述包含一种或多种藻蓝蛋白和糖原的溶液是在产生藻蓝蛋白的微生物生物质的细胞裂解后获得的粗悬浮液。11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法,其特征在于所述包含一种或多种藻蓝蛋白和糖原的溶液是在产生藻蓝蛋白的微生物生物质的细胞裂解后获得的粗悬浮液本身的过滤后获得的粗溶液。12.一种生产微生物来源的藻蓝蛋白的方法,所述方法包括以下步骤:(a)如上所述,在培养条件下培养产生藻蓝蛋白的微生物以产生包含多于30g/l干物质和基于干物质的至少4%藻蓝蛋白的发酵汁,(b)细胞裂解以释放产生的藻蓝蛋白和糖原以获得如上所定义的粗悬浮液,(c)分离所述粗悬浮液以回收包含藻蓝蛋白和糖原的粗溶液,并且然后任选地(d)将藻蓝蛋白从所述粗溶液中分离,然后任选地(e)对分离的藻蓝蛋白进行纯化,其特征在于,用适用于在低于6的ph和低于40℃的反应温度下降解糖原的酶进行所述糖原的酶裂解步骤,所述酶裂解是对在(b)中获得的粗悬浮液和/或在(c)中获得的粗溶液进行的。13.根据权利要求12所述的方法,其特征在于所述温度低于30℃和/或所述ph小于或等于5。14.根据权利要求12或13中任一项所述的方法,其特征在于所述酶具有α1

4葡萄糖苷酶或聚半乳糖醛酸酶活性。15.根据权利要求14所述的方法,其特征在于所述酶是果胶酶。16.根据权利要求12至15中任一项所述的方法,其特征在于所述酶是一种酶混合物,所述酶混合物除具有α1

4葡萄糖苷酶或聚半乳糖醛酸酶活性的酶外,还包含具有α1

6葡萄糖
苷酶活性的酶。17.根据权利要求16所述的方法,其特征在于所述具有α1

6葡萄糖苷酶活性的酶是普鲁兰酶。18.根据权利要求17所述的方法,其特征在于所述酶混合物包含果胶酶和普鲁兰酶。19.根据权利要求12至14中任一项所述的方法,其特征在于所述酶具有α1

4葡萄糖苷酶或聚半乳糖醛酸酶活性以及α1

6葡萄糖苷酶活性。20.根据权利要求19所述的方法,其特征在于所述酶是葡糖淀粉酶。21.根据权利要求12至20中任一项所述的方法,其特征在于所述包含一种或多种藻蓝蛋白和糖原的溶液是在(b)中获得的粗悬浮液。22.根据权利要求12至20中任一项所述的方法,其特征在于所述酶裂解是对在(c)中获得的粗溶液进行的。23.根据权利要求12至22中任一项所述的方法,其特征在于所述藻蓝蛋白是微生物来源的藻蓝蛋白,其由选自以下的微生物产生:节旋藻属(arthrospira)、螺旋藻属(spirulina)、聚球藻属(synechococcus)、cyanidioschyzon、cyanidium和galdieria的物种,更特别地是嗜硫原始红藻(galdieria sulphuraria)。24.一种分离的藻蓝蛋白,其通过根据权利要求1至23中任一项所述的方法获得。25.根据权利要求24所述的分离的藻蓝蛋白,其特征在于它包含痕量的具有α1

4和/或1

6葡萄糖苷酶活性的酶。26.根据权利要求24或25中任一项所述的分离的藻蓝蛋白,其特征在于它含有作为糖原的酶裂解产物的葡萄糖低聚物。27.一种藻蓝蛋白提取物,其包含藻蓝蛋白和糖原,所述藻蓝蛋白提取物的特征在于糖原与藻蓝蛋白的干重比率小于6并且特征在于它包含痕量的具有α1

4和/或1

6葡萄糖苷酶活性的酶和/或作为糖原的酶裂解产物的葡萄糖低聚物。28.根据权利要求27所述的提取物,其特征在于所述糖原与藻蓝蛋白的干重比率小于4。29.根据权利要求27所述的提取物,其特征在于所述糖原与藻蓝蛋白的干重比率小于3。30.根据权利要求27所述的提取物,其特征在于所述糖原与藻蓝蛋白的干重比率小于2.5。31.根据权利要求27所述的提取物,其特征在于所述糖原与藻蓝蛋白的干重比率小于1。32.根据权利要求24至26中任一项所述的分离的藻蓝蛋白或根据权利要求27至31中任一项所述的提取物作为食物着色剂的用途。33.一种食物,其特征在于它包含根据权利要求24至26中任一项所述的分离的藻蓝蛋白或根据权利要求27至31中任一项所述的提取物。

技术总结
本发明涉及一种用于纯化通过发酵微藻类产生的特别是由嗜硫原始红藻产生的藻蓝蛋白的新方法,所述方法包括糖原的酶降解。所述方法包括糖原的酶降解。


技术研发人员:O
受保护的技术使用者:费尔曼塔格公司
技术研发日:2020.01.10
技术公布日:2021/10/18
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