专利名称：化疗栓塞用紫杉醇的混合组合物、该组合物的油包水型乳剂及它们的制造方法
技术领域：
本发明涉及通过使紫杉醇可溶化而得到的用于动脉化疗栓塞术(transcatheter arterial chemoembolization；TACE)的油性的紫杉醇组合物和制剂及它们的制造方法。动脉化疗栓塞术(TACE)是一种治疗癌症的方法，其在使用造影剂使手术过程显像的同时，通过将抗癌剂和栓塞物质注入到肿瘤的营养动脉中，从而阻断向癌组织供给营养。
背景技术：
应用最广泛的动脉化疗栓塞术是用于肝癌治疗的肝动脉化疗栓塞术。造影剂作为显像工具在手术期间或手术后使用，并在肿瘤内诱发栓塞。将多柔比星(adriamycin，阿霉素)、顺铂、卡铂这样的抗癌剂溶解或分散在油性造影剂中使用。
动脉化疗栓塞术中最频繁使用的造影剂之一是例如超液化碘油(Lipiodol)等碘化油。但是，含有超液化碘油和上述抗癌剂的分散体系的物理性质不稳定，手术时有很多限制。以往，诊断放射学广泛使用阿霉素、表阿霉素等抗癌剂来治疗肝癌。但是，这些抗癌剂大部分是水溶性的，所以TACE手术中一直使用悬浊型制剂而不是油性溶液(YoshihiroKatagiri等，Cancer Chemother.Pharmacol 1989，23，238-242)。但是，随着时间的推移，这样的悬浊型制剂的颗粒逐渐聚集而形成沉淀，所以不能长期保存。为了克服这样的稳定性问题，采用了将抗癌剂溶解在水性造影剂后，将该水相分散到像超液化碘油那样的油性造影剂中的方法。也就是说，在对患者给药前，才将抗癌剂溶解在水性造影剂中，再通过泵送法将其与油性造影剂混合。
为了使乳液的稳定性最大化，使用比重与超液化碘油比重(1.275至1.290)相近的水性造影剂，如泛影葡胺(Urografin，1.328-1.332)或碘必乐(Iopamiro，1.17-1.41)(Takashi Kanematsu等，Journal of surgical oncology1984，25，218-226以及Takafumi Ichida等，Cancer Chemother.Pharmacol1994，33，74-78)。但是，通过所述方法只能形成暂时性乳液，该乳液制成后几分钟内就再次发生相分离。而不稳定的乳液系统不能提供充分的栓塞效果。实际上，在手术期间就观察到导管内发生了相分离。施用该不稳定乳液时，阿霉素被组织立即吸收，不能提供持续释放抗癌剂的效果。
理想的肝癌治疗方法之一是使用合成高分子抗癌剂，也就是使用净司他丁(聚(苯乙烯-马来酸)新制癌菌素)(SMANCS)。SMANCS兼具亲水性和亲油性，可以直接溶解在超液化碘油中(Konno，T.和Maeda，H.，Targetting chemotherapy of hepatocellular carcinoma.Neoplasma of the liver，Eds.Okuda，K.，和Ishak，K.G.，Springger-Verlag，柏林，P343-352)。但是，SMANCS/超液化碘油制剂虽然解决了阿霉素/超液化碘油制剂中存在的稳定性问题，但因为其价格高，并且具有严重的毒副作用，所以没有被普遍使用。
另外，抗癌剂紫杉醇作为对卵巢癌、乳腺癌、食道癌、黑素瘤、白血病有显著细胞毒性的物质为人们所熟知。紫杉醇的商用产品是百时美施贵宝公司的商标为泰素(Taxol)的注射剂。
紫杉醇是一种难溶性药物，所以从开发阶段就同时开始了增溶技术的开发。作为这样的增溶技术的一个例子，可以举出为了在静脉注射等全身给药中应用而使用增溶剂。所述泰素使用聚氧乙烯蓖麻油(Cremophor EL聚氧乙烯35-蓖麻油)和乙醇作为增溶剂。泰素是一种乳剂预浓缩型制剂，该制剂在过量的水中分散时就会自发地形成微乳液(microemulsion)(参考美国专利第5438072号)。但是，已知泰素中所使用的增溶剂会引起毒副作用。所以，为了开发具有高抗癌活性和低毒性的新型紫杉醇制剂，进行了多种研究。
动脉化疗栓塞术中，肝动脉化疗栓塞术最具代表性，除肝动脉化疗栓塞术以外，动脉化疗栓塞术还可以用于多种实体瘤。例如，通过在肾动脉实施动脉化疗栓塞术，已将SMANCS/超液化碘油制剂用于肾癌的靶向治疗(K.Tsuchiya.Tumor-targeted chemotherapy with SMANCS inLipiodol for renal cell carcinomalonger survival with larger size tumors.Urology.2000 Apr；55(4)495-500)。
发明内容
到目前为止，还没有把紫杉醇用作血管栓塞或血管造影用抗癌剂的例子。本发明的目的是通过使紫杉醇与油性造影剂及水性造影剂一起乳化，从而将紫杉醇用于动脉化疗栓塞术。
以往的阿霉素/超液化碘油/碘必乐乳剂最大的问题是稳定性低。通过泵送法形成乳剂后几分钟内就发生相分离，常常在导管内就可以观察到这种相分离。现有的制剂达不到预期持续输送抗癌剂的效果。
因此，需要开发一种新型的化疗栓塞用制剂，与以往的阿霉素/超液化碘油/碘必乐制剂不同，所述新型制剂应当在动脉化疗栓塞手术中或甚至手术后都能维持乳剂的稳定性，并且该制剂应当比以往的SMANCS/超液化碘油制剂更便宜、毒副作用更小。
所以，本发明的目的是提供可以使紫杉醇可溶的新型紫杉醇组合物。
更具体地说，本发明的目的是提供可以在治疗实体瘤的动脉化疗栓塞术中使用的紫杉醇乳剂。
本发明的另一个目的是提供紫杉醇的混合组合物和油包水(w/o)型乳剂的制造方法。
图1是含有0.8ml的超液化碘油和0.2ml的碘必乐的组合物(左侧)和含有0.8ml的超液化碘油、8mg的紫杉醇和0.2ml的碘必乐的组合物(右侧)，在涡动处理前、涡动结束时、涡动结束3小时后的照片。
图2是含有0.8ml的超液化碘油、0.2ml的碘必乐和4mg的多柔必星的组合物(左侧)和含有0.8ml的超液化碘油、8mg的紫杉醇、0.2ml的碘必乐和4mg的多柔必星的组合物(右侧)，在涡动处理前、涡动结束时、涡动结束3小时后的照片。
图3是含有0.8ml的超液化碘油、0.2ml的碘必乐和4mg的卡铂的组合物(左侧)和含有0.8ml的超液化碘油、8mg的紫杉醇、0.2ml的碘必乐和4mg的卡铂的组合物(右侧)，在涡动处理前、涡动结束时、涡动结束3小时后的照片。
图4是含有0.8ml的超液化碘油、0.2ml的碘必乐和4mg的顺铂的组合物(左侧)和含有0.8ml的超液化碘油、8mg的紫杉醇、0.2ml的碘必乐和4mg的顺铂的组合物(右侧)，在涡动处理前、涡动结束时、涡动结束3小时后的照片。
图5是含有0.8ml的超液化碘油、0.2ml的碘必乐和各种抗癌剂的油包水型乳剂的粒度在涡动结束时、涡动结束3小时后的图，其中将无紫杉醇的情况(左侧)与有紫杉醇的情况(右侧)进行了比较。
图6是表示多柔比星从含有超液化碘油/碘必乐/多柔比星(0.8ml/0.2ml/4mg)的组合物和含有超液化碘油/碘必乐/多柔比星/紫杉醇(0.8ml/0.2ml/4mg/8mg)的组合物中体外溶出结果的曲线图。
具体实施例方式
为达到上述目的，本发明人在研究中意外地发现，油性造影剂/水性造影剂/紫杉醇的油包水型乳剂远比以往用于动脉化疗栓塞术的超液化碘油/碘必乐/多柔比星乳剂稳定。也就是说，发现使用紫杉醇代替以往的超液化碘油/碘必乐/多柔比星制剂中的多柔比星时，可以有效地使紫杉醇可溶化，其乳剂体系的物理性质极其稳定，由此本发明得以完成。
本发明仅通过向作为现有制剂的超液化碘油/碘必乐/多柔比星乳剂中添加紫杉醇，就大大增加了所述乳剂的稳定性。
更具体地说，本发明提供了包含50％～98.9％(V/V；体积比)的溶有0.01％～1％(W/V；重量体积比)紫杉醇的油性造影剂和0.1％～50％(V/V)的水性造影剂的混合组合物。
本发明还提供通过物理力使所述的使紫杉醇可溶的混合组合物中油性造影剂和水性造影剂混合均匀而得到的稳定的油包水型乳剂。
如上述，超液化碘油/碘必乐/多柔比星制剂虽然是经过100次以上的泵吸制造的，但是制成后的几分钟内就会发生相分离，是极不稳定的乳液体系。
与之相对，本发明的紫杉醇/油性造影剂/水性造影剂的油包水型乳剂1个月以上也不会发生相分离。所以，可以认为紫杉醇其本身对提高油性造影剂/水性造影剂体系的稳定性有重要作用。因此，即使在实施动脉化疗栓塞术的几个小时前，通过预先物理混合本发明的混合组合物，形成的乳剂也可以保持稳定。一旦形成乳剂，水相和油相就能完全并且稳定地混合。因此，本发明的混合组合物解决了以往乳剂的稳定性问题。
本发明的油性造影剂/水性造影剂/紫杉醇乳剂的物性比含多柔比星那样的水溶性抗癌剂的现有超液化碘油制剂有很大改善，并且本发明的油性造影剂/水性造影剂/紫杉醇乳剂具有类似于SMANCS/超液化碘油制剂的特性。但是，与SMANCS/超液化碘油制剂的成本过高，并且具有严重的毒副作用不同，本发明的混合组合物使用较廉价的原料物质并且容易制造，所以可降低制造成本。
作为本发明在制造紫杉醇/油性造影剂/水性造影剂的混合组合物时使用的油性造影剂的例子有碘化油。碘化油包括超液化碘油(Lipiodol；Laboratoire Guerbet，法国)、乙碘油(Ethiodol；Savage Laboratories，Melville，NY)等的碘化罂粟种子油(iodized poppy seed oil)或碘化大豆油(iodized soybean oil)。Ma Tai已对碘化大豆油作了详细说明(The effect oforal iodized oil on prevention and treatment of endemic goiter.Chinese Med.J.61(9)533，1981)。
本发明的紫杉醇/油性造影剂/水性造影剂的混合组合物中以及乳剂中紫杉醇的量设定在0.001％～1.5％(W/V)范围。紫杉醇的量如果超过1.5％(W/V)，过量的紫杉醇会沉淀，所以不是优选的。另一方面，紫杉醇的量如果不足0.001％(W/V)，抗癌活性过低，而且乳剂不稳定，所以也不是优选的。
本发明中，作为油性造影剂所使用的碘化油中的含碘量优选为30重量％～50重量％。更优选的含碘量为35重量％～45重量％。最优选使用超液化碘油(Lipiodol)作为油性造影剂。
本发明的紫杉醇/油性造影剂/水性造影剂乳剂中，油性造影剂的含量为50％～98.9％(V/V)，优选为75％～80％(V/V)。油性造影剂的量如果不足50％(V/V)或超过98.9％(V/V)，所述乳剂不稳定，所以不是优选的。
本发明的紫杉醇/油性造影剂/水性造影剂的混合组合物中以及乳剂中，所述水性造影剂可以从甲泛葡胺(Metrizamide)、泛影酸盐(Diatrizoate)、碘克沙酸盐(Ioxaglate)、碘喷托(Iopentol)、碘帕醇(Iopamidol)、碘美普尔(Iomeprol)、碘曲仑(Iotrolan)、碘海醇(Iohexol)、碘佛醇(Ioversol)、碘昔兰(Ioxilan)、碘普胺(Iopromide)、碘克沙醇(Iodixanol)和碘比醇(Iobitridol)构成的组中选择使用。其中，最优选使用商标为碘必乐(Iopamiro)的市售碘帕醇。
水性造影剂的含量为0.1％～50％(V/V)，优选为20％～25％(V/V)。
除紫杉醇之外，本发明的紫杉醇/油性造影剂/水性造影剂的混合组合物及乳剂还可以额外包含其他的抗癌剂。允许添加的抗癌剂包括多柔比星(也称为阿霉素)、5-氟尿嘧啶、卡铂、顺铂、卡莫司汀(Carmustine)、达卡巴嗪(Dacarbazine)、依托泊苷(Etoposide)、长春瑞滨(Vinorelbine)、托泊替康(Topotecan)、伊立替康(Irinotecan)、雌莫司汀(Estramustine)等。附加抗癌剂的量为全部混合组合物的0.0001％～2％(W/V)。
本发明的紫杉醇/油性造影剂/水性造影剂的混合组合物及乳剂还可以额外含有0.0001重量％～20重量％的乳化剂。乳化剂可以溶解于水性造影剂中，所述乳化剂包括磷脂、非离子性表面活性剂、阴离子性表面活性剂、阳离子性表面活性剂或胆汁盐等。
用作本发明乳化剂的磷脂有磷脂酰胆碱(PC)及其衍生物、磷脂酰乙醇胺(PE)及其衍生物、磷脂酰丝氨酸(PS)及其衍生物或磷脂上共价键合了亲水性聚合物的聚合物类脂质。
用作本发明乳化剂的非离子性表面活性剂有泊洛沙姆(Poloxamer，聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物)、氢化蓖麻籽油(HCO)、山梨坦酯(Sorbitanesters，Span)、聚氧乙烯-山梨聚糖脂肪酸酯(Tween)或聚氧乙烯醚(Brij)。
用作本发明乳化剂的阴离子表面活性剂有磷脂酰丝氨酸(PS)及其衍生物、磷脂酸(PA)及其衍生物、十二烷基磺酸钠(SDS)。
用作本发明乳化剂的阳离子表面活性剂有1，2-二油酰基-3-三甲基铵-丙烷(DOTAP)、二甲基双十八烷基铵溴(DDAB)、N-[1-(1，2-二油酰氧基)丙基]-N，N，N-三甲基铵氯(DOTMA)、1，2-二油酰基-3-乙基磷脂酰胆碱(DOEPC)、3 β-[N-[(N’，N’-二甲氨基)乙烷]氨基甲酰基]胆甾醇(DC-Chol)。
用作本发明乳化剂的胆汁盐有胆酸及其盐和衍生物、去氧胆酸及其盐和衍生物、鹅胆酸及其盐和衍生物、熊去氧胆酸及其盐和衍生物和石胆酸及其盐和衍生物。
本发明的紫杉醇/油性造影剂/水性造影剂的混合组合物可通过以下步骤简便地制得1)向油性造影剂中，所述组成范围添加适量的紫杉醇，搅拌使其溶解、2)添加所述组成范围的水性造影剂。此时，为了加速溶解可以加热到约35～45℃或者在槽式超声波仪中进行超声处理。这样制造的本发明的紫杉醇/油性造影剂/水性造影剂的混合组合物经灭菌后，进行保存。也可以在无菌条件下混合已灭菌的原料。另外，可以使紫杉醇/油性造影剂组合物通过无菌的注射过滤器(孔径为200μm，PVDF灭菌滤膜)进行注射以便灭菌。另外，可以采用γ-射线或EO气体灭菌法，先将碘化罂粟种子油和紫杉醇灭菌后，再进行混合，或者先将其混合后再采用γ-射线或EO气体灭菌法，对其组合物进行灭菌。
添加除紫杉醇之外的抗癌剂的情况下，如果添加的抗癌剂是水溶性的，可以使其溶解在水性造影剂中后以所述组成范围内的量添加。如果添加的抗癌剂是脂溶性的，可以使其溶解在油性造影剂中后以所述组成范围内的量添加。
这样，制成的本发明的紫杉醇/油性造影剂/水性造影剂的混合组合物用于动脉化疗栓塞术时，通过涡动处理进行乳化后使用。涡动处理后，所述乳剂在室温经30天以上未发生相分离而稳定存在。
动脉化疗栓塞术的手术最多需要3～5小时。所以手术期间，本发明的乳剂稳定存在，即使进入到肿瘤内后，也可以持续地释放抗癌剂。这一点，与以往通过泵送法形成乳剂后几分钟内就发生相分离的多柔必星/超液化碘油/碘必乐制剂相比，本发明的乳剂的稳定性得到明显改善。
本发明的紫杉醇/油性造影剂/水性造影剂的混合组合物也可以通过溶有紫杉醇的油相和溶有附加的抗癌剂的水相形成的两相混合物的形式提供。另外，本发明的紫杉醇/油性造影剂/水性造影剂的制剂还可作为通过向紫杉醇/油性造影剂/水性造影剂的混合组合物施加物理力而混合均匀的油包水型(w/o)乳剂的形式提供。本发明的乳剂经乳化后，至少2个月未发生相分离而稳定存在。
另外，对于本发明的紫杉醇/油性造影剂/水性造影剂乳剂的施用量和施用方法，医生可根据患者的年齢、性别、体重、症状严重程度等患者的个体差进行适当的调整。通常，按照原有的紫杉醇/油性造影剂/水性造影剂那样，动脉化疗栓塞术可以每1～4个月进行一次，并可重复实施。将2～15ml所述制剂经实体瘤的营养动脉注入，例如就肝癌而言是经肝动脉注入。
以下根据实施例对本发明进行更详细的说明。但是，下述的实施例仅供理解本发明，而本发明不受这些实施例中的条件、原料或装置所限定。
实施例实施例1.超液化碘油/碘必乐/紫杉醇乳剂的制造使用800μl的超液化碘油(Lipiodol Ultra-fluid，Laboratoire Guerbet，法国，含碘量为38重量％)作为油性造影剂。向所述超液化碘油中添加8mg的紫杉醇(韩国三养-真耐克斯公司(Samyang Genex，Korea))，装入试管(带有安全栓的微量试管，聚乙烯制，1.5ml，德国Eppendorf AG)，在室温搅拌溶解。为了迅速溶解将其加热到40℃。向该油性混合物中添加200μl的碘必乐(Bracco s.p.a.Italy)。作为对照混合物，使用0.8ml的紫杉醇和0.2ml的碘必乐的混合物。这两种混合物制成后的照片示于图1(上行)。使用涡动搅拌器，以最大设定值(120V，0.65A，60Hz)对各混合物涡动处理10分钟。涡动结束时，超液化碘油/碘必乐/紫杉醇制剂未发生相分离而形成乳剂，而在超液化碘油/碘必乐组合物中则观察到相分离(中行)。涡动结束3小时后，超液化碘油/碘必乐/紫杉醇组合物的乳剂稳定，而超液化碘油/碘必乐组合物中则几乎完全相分离(下行)。制造的超液化碘油/碘必乐/紫杉醇组合物，在显微镜下仅能观察到小水滴(100～500nm)。由于未观察到紫杉醇的沉淀，因而可以确认紫杉醇完全溶解在超液化碘油/碘必乐/紫杉醇制剂中，并有助于增加该制剂的稳定性。
实施例2.超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/多柔比星乳剂的制造使用800μl的超液化碘油(Lipiodol Ultra-fluid，Laboratoire Guerbet，法国，含碘量为38重量％)作为油性造影剂。向所述超液化碘油中添加8mg的紫杉醇(韩国三养-真耐克斯公司(Samyang Genex，Korea))，装入试管(带有安全栓的微量试管，聚乙烯制，1.5ml，德国Eppendorf AG)，在室温搅拌溶解。为了迅速溶解，用槽式超声波仪进行超声处理。向该油性混合物中添加200μl的含有4mg多柔比星(希格码化学公司)的碘必乐(Bracco s.p.a.Italy)。作为对照混合物，使用由0.8ml的紫杉醇和0.2ml的含有4mg多柔比星的碘必乐组成的混合物。这两种混合物制成后的照片示于图2(上行)。使用涡动搅拌器，以最大设定值(120V，0.65A，60Hz)对各混合物涡动处理10分钟。涡动结束时，超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/多柔比星制剂未发生相分离而形成乳剂，而超液化碘油/碘必乐/多柔比星组合物中则观察到相分离(中行)。涡动结束3小时后，超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/多柔比星组合物中的乳剂仍然稳定，而超液化碘油/碘必乐/多柔比星组合物则几乎完全相分离(下行)。制造的超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/多柔比星组合物，在显微镜下仅能观察到小水滴(100～500nm)。由于未观察到紫杉醇的沉淀，因而可以确认紫杉醇完全溶解在超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/多柔比星制剂中，并有助于增加该制剂的稳定性。
实施例3.超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/卡铂组合物的制造除使用4mg的卡铂代替多柔比星之外，如实施例2那样制造组合物和对照组。这两种混合物制成后的照片示于图3(上行)。使用涡动搅拌器，以最大设定值(120R，0.65A，60Hz)对各混合物涡动处理10分钟。涡动结束时，超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/卡铂制剂未发生相分离而形成乳剂，而超液化碘油/碘必乐/卡铂组合物中则观察到相分离(中行)。涡动结束3小时后，超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/卡铂组合物的乳剂稳定，而超液化碘油/碘必乐/卡铂组合物则几乎完全相分离(下行)。制造的超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/卡铂组合物，在显微镜下仅能观察到小水滴(400～600nm)。由于未观察到紫杉醇的沉淀，因而可以确认紫杉醇完全溶解在超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/卡铂制剂中，并有助于增加该制剂的稳定性。
实施例4.超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/顺铂组合物的制造除使用4mg的顺铂代替多柔比星之外，如实施例2那样制造组合物和对照组。这两种混合物制成后的照片示于图4(上行)。使用涡动搅拌器，以最大设定值(120V，0.65A，60Hz)对各混合物涡动处理10分钟。涡动结束时，超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/顺铂制剂未发生相分离而形成乳剂，而超液化碘油/碘必乐/顺铂组合物中则观察到相分离(中行)。涡动结束3小时后，超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/顺铂组合物的乳剂稳定，而超液化碘油/碘必乐/顺铂组合物则几乎完全相分离(下行)。制造的超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/顺铂组合物，在显微镜下仅能观察到小水滴(500～900nm)。由于未观察到紫杉醇的沉淀，因而可以确认紫杉醇完全溶解在超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/顺铂制剂中，并有助于增加该制剂的稳定性。
实施例5.紫杉醇存在时超液化碘油/碘必乐乳剂的粒度将实施例1～4制造的各油包水型乳剂用大豆油稀释100倍后，采用Malvem Zetasizer方法(QELS方法)测定各乳剂内水滴的粒度。介质的折射率和粘度定为作为主成分的三油酸甘油酯的值，即分别为1.84(Handbook of Chemistry and Physics，第23版，CRC Press)和69.3cSt/s(Chung等，J.Cont.Rel.(2001)71339-350)，此时，乳剂颗粒的折射率和粘度分别定为1.84和0.97cSt/s。测定涡动结束时和涡动结束3小时后的粒度，其结果示于图5。对于制剂内无紫杉醇而存在卡铂或顺铂的情况，在涡动结束时乳剂虽然比较稳定，但是涡动结束3小时后，粒度增大到5μm或5μm以上，发生相分离。由于观察到所制得的无紫杉醇的乳剂颗粒发生聚集，所以可以确认该乳剂极不稳定。相反，当存在紫杉醇时，即使在涡动结束3小时后，乳剂粒度也未增加，由此可知该乳剂极为稳定。
实施例6.使用超液化碘油/碘必乐乳剂的多柔比星体外溶出实验分别取200μl实施例2中制成的超液化碘油/碘必乐/多柔比星和超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/多柔比星乳剂，装入透析袋中，并将两端密封。将所述透析袋浸在10ml的磷酸缓冲盐水中。在37℃在振摇水槽中进行溶出实验。用紫外线(UV)/可见光分光光度计，测定溶出的多柔比星浓度。其结果示于图6。与无紫杉醇的乳剂相比，含有紫杉醇的乳剂中多柔比星的溶出速率较慢。140小时后，观察到大于30％的多柔比星仍然存留在乳剂中，因此可以确认紫杉醇使乳剂的稳定性增加，具有降低多柔比星溶出速度的作用。
实施例7.超液化碘油/碘美普尔/紫杉醇组合物的制造除使用0.2ml的碘美普尔(lomeron300注射剂，韩国一星新药)代替碘必乐之外，如实施例1那样制造组合物和对照组。制造的超液化碘油/碘美普尔/紫杉醇组合物，在显微镜下仅能观察到小水滴(100～500nm)。由于未观察到紫杉醇的沉淀，因而可以确认紫杉醇完全溶解在超液化碘油/碘美普尔/紫杉醇制剂中。
实施例8.超液化碘油/碘普胺/紫杉醇组合物的制造除使用0.2ml的碘普胺(Ultravist 370注射剂，韩国赛菱(セ—リング)株式会社)代替碘必乐之外，如实施例1那样制造组合物和对照组。制造的超液化碘油/碘普胺/紫杉醇组合物，在显微镜下仅能观察到小水滴(100～500nm)。由于未观察到紫杉醇的沉淀，因而可以确认紫杉醇完全溶解在超液化碘油/碘普胺/紫杉醇制剂中。
实施例9.超液化碘油/碘克沙醇/紫杉醇组合物的制造除使用0.2ml的碘克沙醇(Visipaque 320mg/ml，Nycomed IrelandLtd.)代替碘必乐之外，如实施例1那样制造组合物和对照组。制造的超液化碘油/碘克沙醇/紫杉醇组合物，在显微镜下仅能观察到小水滴(100～500nm)。由于未观察到紫杉醇的沉淀，因而可以确认紫杉醇完全溶解在超液化碘油/碘克沙醇/紫杉醇制剂中。
实施例10.乙碘油/碘必乐/紫杉醇组合物的制造除使用0.8ml的乙碘油(Savage Laboratories，Melville，NY)代替超液化碘油之外，如实施例1那样制造组合物和对照组。制造的乙碘油/碘必乐/紫杉醇组合物，在显微镜下仅能观察到小水滴(100～500nm)。由于未观察到紫杉醇的沉淀，因而可以确认紫杉醇完全溶解在乙碘油/碘必乐/紫杉醇制剂中。
实施例11.超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/HCO 60组合物的制造除使用0.2ml的含有0.002mg HCO 60(氢化蓖麻籽油)的碘必乐代替碘必乐之外，如实施例1那样制造组合物和对照组。制造的超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/HCO 60组合物，在显微镜下仅能观察到小水滴(100～500nm)。由于未观察到紫杉醇的沉淀，因而可以确认紫杉醇完全溶解在超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/HCO 60制剂中。
实施例12.超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/吐温20(Tween20)组合物的制造除使用0.2ml的含有10mg吐温20(希格码)的碘必乐代替碘必乐之外，如实施例1那样制造组合物和对照组。制造的超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/吐温20组合物，在显微镜下仅能观察到小水滴(100～500nm)。由于未观察到紫杉醇的沉淀，因而可以确认紫杉醇完全溶解在超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/吐温20制剂中。
实施例13.超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/卵磷脂酰胆碱组合物的制造除使用0.2ml的含有10mg卵磷脂酰胆碱(希格码)的碘必乐代替碘必乐之外，如实施例1那样制造组合物和对照组。制造的超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/卵磷脂酰胆碱组合物，在显微镜下仅能观察到小水滴(100～500nm)。由于未观察到紫杉醇的沉淀，因而可以确认紫杉醇完全溶解在超液化碘油/碘必乐/紫杉醇/卵磷脂酰胆碱制剂中。
本发明的紫杉醇/油性造影剂/水性造影剂的混合组合物是用溶有紫杉醇的油相和单独的水相或者额外溶有抗癌剂的水相组成的。本发明的紫杉醇/油性造影剂/水性造影剂的混合组合物通过如涡动处理等物理力，使油相和水相混合均匀，从而可以制成作为油包水型(w/o)乳剂的制剂。本发明的混合组合物可作为溶有紫杉醇的、稳定的油包水型乳剂而得到，因此，可以通过除以往的静脉给药途径之外的其他途径给药。与以往的超液化碘油/碘必乐/多柔比星制剂相比，本发明的紫杉醇/油性造影剂/水性造影剂的混合组合物和乳剂的物理稳定性得到明显改善。另外，本发明的紫杉醇/油性造影剂/水性造影剂的混合组合物和乳化制剂还可以同时溶有其他抗癌剂。因此，本发明的紫杉醇/油性造影剂/水性造影剂制剂作为一种新型制剂，克服了以往的超液化碘油/碘必乐/多柔比星制剂中存在的稳定性问题。同时，对以静脉给药为主作为注射剂使用的紫杉醇，本发明提供了新的给药途径，即通过动脉化疗栓塞术来进行给药。
权利要求
1.用来制备化疗栓塞用乳剂的混合组合物，其包含50％～98.9％体积比的油性造影剂和0.1％～50％体积比的水性造影剂，所述油性造影剂溶有0.01％～1％重量体积比的紫杉醇。
2.溶有紫杉醇的化疗栓塞用油包水型乳剂组合物，该组合物包含50％～98.9％体积比的油性造影剂和0.1％～50％体积比的水性造影剂，所述油性造影剂溶有0.01％～1％重量体积比的紫杉醇。
3.如权利要求1或2所述的组合物，其中，所述油性造影剂是含碘量为30重量％～50重量％的碘化油，该碘化油选自由碘化罂粟种子油和碘化大豆油构成的组，所述的碘化罂粟种子油包括超液化碘油和乙碘油。
4.如权利要求3所述的组合物，其中，所述油性造影剂中的含碘量为35重量％～48重量％。
5.如权利要求1或2所述的组合物，其中，所述水性造影剂选自由甲泛葡胺、泛影酸盐、碘克沙酸盐、碘喷托、碘帕醇、碘美普尔、碘曲仑、碘海醇、碘佛醇、碘昔兰、碘普胺、碘克沙醇和碘比醇构成的组。
6.如权利要求4所述的组合物，其中，所述水性造影剂选自由甲泛葡胺、泛影酸盐、碘克沙酸盐、碘喷托、碘帕醇、碘美普尔、碘曲仑、碘海醇、碘佛醇、碘昔兰、碘普胺、碘克沙醇和碘比醇构成的组。
7.如权利要求4所述的组合物，其中，所述水性造影剂是碘帕醇。
8.如权利要求1或2所述的组合物，其中，所述的组合物还含有0.0001重量％～20重量％的乳化剂。
9.如权利要求8所述的组合物，其中，所述乳化剂选自由磷脂、非离子性表面活性剂、阴离子性表面活性剂、阳离子性表面活性剂和胆汁盐构成的组。
10.如权利要求9所述的组合物，其中，所述磷脂选自由磷脂酰胆碱及其衍生物、磷脂酰乙醇胺及其衍生物、磷脂酰丝氨酸及其衍生物和磷脂上共价键合了亲水性聚合物的聚合物类脂质构成的组。
11.如权利要求9所述的组合物，其中，所述非离子性表面活性剂选自由泊洛沙姆、氢化蓖麻籽油、山梨坦酯、聚氧乙烯山梨聚糖脂肪酸酯和聚氧乙烯醚构成的组。
12.如权利要求9所述的组合物，其中，所述阴离子表面活性剂选自由磷脂酰丝氨酸及其衍生物、磷脂酸及其衍生物和十二烷基磺酸钠构成的组。
13.如权利要求9所述的组合物，其中，所述阳离子表面活性剂选自由1，2-二油酰基-3-三甲基铵-丙烷、二甲基双十八烷基铵溴、N-[1-(1，2-二油酰氧基)丙基]-N，N，N-三甲基铵氯、1，2-二油酰基-3-乙基磷脂酰胆碱和3β-[N-[(N’，N’-二甲氨基)乙烷]氨基甲酰基]胆甾醇构成的组。
14.如权利要求9所述的组合物，其中，所述胆汁盐选自由胆酸及其盐和衍生物、去氧胆酸及其盐和衍生物、鹅胆酸及其盐和衍生物、熊去氧胆酸及其盐和衍生物或石胆酸及其盐衍生物构成的组。
15.如权利要求8所述的组合物，其中，所述油性造影剂是碘化罂粟种子油，而且所述水性造影剂是碘帕醇。
16.如权利要求1或2所述的组合物，其中，所述组合物含有的附加的抗癌剂，选自由多柔比星/阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡铂、顺铂、卡莫司汀、达卡巴嗪、依托泊苷、长春瑞滨、托泊替康、伊立替康、雌莫司汀构成的组。
17.如权利要求16所述的组合物，所述组合物用于通过动脉化疗栓塞术治疗肝癌。
18.如权利要求7所述的组合物，其中，所述组合物含有的附加的抗癌剂，选自由多柔比星/阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡铂、顺铂、卡莫司汀、达卡巴嗪、依托泊苷、长春瑞滨、托泊替康、伊立替康或雌莫司汀构成的组。
19.如权利要求18所述的组合物，其中，所述组合物用于通过动脉化疗栓塞术治疗肝癌。
20.如权利要求8所述的组合物，其中，所述组合物用于通过动脉化疗栓塞术治疗肝癌。
21.如权利要求8所述的组合物，其中，所述组合物含有的附加的抗癌剂，选自由多柔比星/阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡铂、顺铂、卡莫司汀、达卡巴嗪、依托泊苷、长春瑞滨、托泊替康、伊立替康或雌莫司汀构成的组。
22.如权利要求21所述的组合物，其中，所述组合物用于通过动脉化疗栓塞术治疗肝癌。
23.溶有紫杉醇的化疗栓塞用混合组合物的制造方法，该方法包含如下步骤1)向油性造影剂中，添加0.01％～1％(重量体积比)的紫杉醇，使其溶解的步骤；2)添加0.1％～50％(体积比)的水性造影剂的步骤。
24.油包水型紫杉醇乳液组合物的制造方法，该方法包含如下步骤1)向油性造影剂中，添加0.01％～1％(重量体积比)的紫杉醇，使其溶解的步骤；2)添加0.1％～50％(体积比)的水性造影剂的步骤和3)施加物理力，混合所述油性造影剂相和水性造影剂相，使其成为均质的步骤。
25.如权利要求23或24所述的方法，其中，所述油性造影剂是含碘量为30重量％～50重量％的碘化油，该碘化油选自碘化罂粟种子油和碘化大豆油构成的组，所述碘化罂粟种子油包括超液化碘油和乙碘油。
26.如权利要求25所述的方法，其中，所述油性造影剂中的含碘量为35重量％～48重量％。
27.如权利要求26所述的方法，其中，所述碘化油是碘化罂粟种子油。
28.如权利要求23或24所述的方法，其中，所述水性造影剂选自由甲泛葡胺、泛影酸盐、碘克沙酸盐、碘喷托、碘帕醇、碘美普尔、碘曲仑、碘海醇、碘佛醇、碘昔兰、碘普胺、碘克沙醇和碘比醇构成的组。
29.如权利要求27所述的方法，其中，所述水性造影剂选自由甲泛葡胺、泛影酸盐、碘克沙酸盐、碘喷托、碘帕醇、碘美普尔、碘曲仑、碘海醇、碘佛醇、碘昔兰、碘普胺、碘克沙醇和碘比醇构成的组。
30.如权利要求27所述的方法，其中，所述水性造影剂是碘帕醇。
31.如权利要求29所述的方法，其中，所述水性造影剂是碘帕醇。
32.如权利要求23或24所述的方法，其中，所述的方法还包括在无菌条件下将已灭菌的油性造影剂与紫杉醇混合的步骤或用EO气体或γ-射线将制成后的混合物灭菌的步骤。
33.如权利要求23或24所述的方法，其中，所述的方法包括另外添加0.0001重量％～20重量％的乳化剂的步骤。
34.如权利要求34所述的方法，其中，所述乳化剂选自由磷脂、非离子性表面活性剂、阴离子性表面活性剂、阳离子性表面活性剂和胆汁盐构成的组。
35.如权利要求34所述的方法，其中，所述磷脂选自由磷脂酰胆碱及其衍生物、磷脂酰乙醇胺及其衍生物、磷脂酰丝氨酸及其衍生物和磷脂上共价键键合了亲水性聚合物的聚合物类脂质构成的组。
36.如权利要求34所述的方法，其中，所述非离子性表面活性剂选自由泊洛沙姆、氢化蓖麻籽油、山梨坦酯、聚氧乙烯山梨聚糖脂肪酸酯和聚氧乙烯醚构成的组。
37.如权利要求34所述的方法，其中，所述阴离子表面活性剂选自由磷脂酰丝氨酸及其衍生物、磷脂酸及其衍生物和十二烷基磺酸钠构成的组。
38.如权利要求34所述的方法，其中，所述阳离子表面活性剂选自由1，2-二油酰基-3-三甲基铵-丙烷、二甲基双十八烷基铵溴、N-[1-(1，2-二油酰氧基)丙基]-N，N，N-三甲基铵氯、1，2-二油酰基-3-乙基磷脂酰胆碱和3β-[N-[(N’，N’-二甲氨基)乙烷]氨基甲酰基]胆甾醇构成的组。
39.如权利要求34所述的方法，其中，所述胆汁盐选自由胆酸及其盐和衍生物、去氧胆酸及其盐和衍生物、鹅胆酸及其盐和衍生物、熊去氧胆酸及其盐和衍生物或石胆酸及其盐和衍生物构成的组。
40.如权利要求23或24所述的方法，其中，所述的方法还包括使附加的抗癌剂溶解在所述水性造影剂中的步骤，所述的抗癌剂选自由多柔比星、5-氟尿嘧啶、卡铂、顺铂、卡莫司汀、达卡巴嗪、依托泊苷、长春瑞滨、托泊替康、伊立替康、雌莫司汀构成的组。
41.如权利要求33所述的方法，其中，所述的方法还包括使附加的抗癌剂溶解在所述水性造影剂中的步骤，所述的抗癌剂选自由多柔比星、5-氟尿嘧啶、卡铂、顺铂、卡莫司汀、达卡巴嗪、依托泊苷、长春瑞滨、托泊替康、伊立替康和雌莫司汀构成的组。
全文摘要
本发明涉及化疗栓塞用的紫杉醇混合组合物、油包水型乳液制剂及它们的制造方法。本发明的乳液制剂可以额外含有其他的水溶性或脂溶性药剂，所以能够容易地制得抗癌剂的复合制剂。
文档编号A61K47/16GK1547469SQ01823631
公开日2004年11月17日 申请日期2001年9月26日 优先权日2001年9月13日
发明者郑蕙婵, 郑曙荣, 权翊赞, 朴在亨, 郑镇旭, 金盈万, 李仁铉 申请人:韩国科学技术研究院, 大化制药株式会社