专利名称：抑制母乳喂养婴儿的新生儿高胆红素血症的制作方法
有关联邦资助研究/开发的声明有待确定。
背景技术：
本发明涉及降低血清胆红素和减少新生儿黄疸发病与严重性的方法。更具体的是，本发明涉及使用酪蛋白(或酪蛋白盐如酪蛋白酸钠)、乳清和/或某些水解酪蛋白制剂作为母乳喂养的补充剂而不妨碍母乳喂养。
儿科医师建议母乳喂养作为人类新生儿喂养最优选的方法。但是，母乳喂养一直与升高的新生儿黄疸水平有关。新生儿黄疸经常发生在婴儿出生后第一个月发生(特别是出生后第一周内)。
胆红素是某些化合物如血红蛋白分解代谢中形成的红色胆红素。由于人类婴儿血红细胞的数量较多，寿命较短，与成人相比，人类婴儿每单位体重胆红素生成较多。胆红素难溶于水，需要结合后排出体外。
胆红素与葡萄糖醛酸在肝细胞内质网内结合。结合在肠道内的胆红素可以作为细菌性或内源性组织β-葡萄糖醛酸酶的底物。β-葡萄糖醛酸酶水解胆红素葡萄糖醛酸的葡萄糖醛酸。由此产生的丧失结合的胆红素能更快地在肠道吸收。自由胆红素在肠道中的吸收导致一些新生儿的血清胆红素水平升高，这与婴儿黄疸有关。
有人提出在饮食中增加天冬氨酸和/或羟基丁二酸可能治疗新生儿黄疸。。因为它们能抑制β-葡萄糖醛酸酶。见我们实验室的PCT文献WO 01/13743。本文中参考的上述公开文献与其余公开文献都象在此处表明的作为参考文献。尽管母乳喂养婴儿的饮食中含有外源性天冬氨酸和/或羟基丁二酸可减少婴儿黄疸的发生，但仍需进一步改善对上述黄疸的抑制和治疗。
已知某些含有碳水化合物、脂肪、维生素、酪蛋白酸钠和/或酪蛋白水解物的复合婴儿配方会有较低的婴儿黄疸水平。见G.Gourley等，103胃肠病学(Gastroenterology)660-667(1992)；G.Gourley等，25 J.Ped.Gast.&Nutr.267-272(1997)；和G.Gourley儿科学进展(Advances in Pediatrics)173-229，第6章(1997)。但是，由于许多婴儿配方是作为母乳喂养的完全替代品来配制的，它们会影响婴儿对母乳的意愿。因此，当出现黄疸问题时，如果处方使用标准婴儿配方溶液，母亲很可能失去母乳喂养的种种益处。
虽然牛奶也含有酪蛋白和乳清并被用于喂养婴儿，但任何使用牛奶代替人类母乳喂养新生儿的努力都会为重新进行母乳喂养带来类似的不良影响。而且，还有许多与较小新生儿使用牛奶有关的顾虑。
所以，这就需要开发改良的婴儿补充剂以有效地预防和减少婴儿黄疸的严重性，且不会显著影响母乳喂养。
发明内容
本发明提供了对人类婴儿施用饮食补充剂的方法。在某一日对人类婴儿施用人类母乳，在同一日对人类婴儿施用补充剂，这种基本不含碳水化合物(最好也基本不含脂肪)的补充剂含有选自酪蛋白、酪蛋白盐、乳清和酪蛋白水解物的添加物。
优选的方式是施用时婴儿年龄小于1个月(小于2周更好)。补充剂可在婴儿表现出黄疸症状前使用(作为预防性的)，或者可以作为治疗来降低胆红素水平。最好的添加物是酪蛋白酸钠/乳清混合物。
另一方面，本发明提供了降低人类婴儿血清胆红素水平的方法。在某一日对人类婴儿施用人类母乳，在同一日对人类婴儿施用补充剂，该基本不含碳水化合物(最好也基本不含脂肪)的补充剂含有选自酪蛋白、酪蛋白盐、乳清和酪蛋白水解物的添加物。使用此方法可降低婴儿血清胆红素水平。
本发明的其他方式提供了单日用于母乳喂养婴儿的补充剂。该补充剂基本不含碳水化合物，体积小于50ml(优选少于30ml或更少)。该补充剂含有0.1gm到10gm选自酪蛋白、酪蛋白盐(如酪蛋白酸钠)、乳清和酪蛋白水解物的物质以及液体载体。所述液体载体可以是水，或含有适当离子如钾和钠的水溶液，或其他合适液体。
本发明的其他方式还提供了单日用于母乳喂养婴儿的补充剂。该补充剂是干燥的且基本不含碳水化合物，并含有0.1gm到10gm选自酪蛋白、酪蛋白盐、乳清和酪蛋白水解物的物质。所述补充剂的包装上有将至少部分药剂与母乳混合的说明。
本发明提供能有效地降低婴儿黄疸的发生和严重性(而剂量小到足以避免影响母乳喂养)的上述补充剂，能有助于降低血清胆红素水平的上述补充剂，和这些补充剂的使用方法。
通过下文的描述将显见本发明的这些优点和其他优点。以下的描述只是优选的实施方案。因此应将权利要求作为本发明的全部范围。
附图简述
图1反映了用4种不同测试方案获得的婴儿黄疸指数水平的统计学平均值。
图2反映了4个测试组的胆红素二葡萄糖醛酸排泄模型。
图3反映了4个测试组的胆红素单葡萄糖醛酸排泄模型。
图4反映了4个测试组的非结合胆红素排泄模型。
在图1-4中，实线是L-天冬氨酸组，短划线是酪蛋白/乳清混合物组，长划线是酪蛋白水解物组。
具体实施例方式
40名母乳喂养人类新生儿被分成4个实验组。一个实验组不用补充剂而只遵守普通的母乳喂养方案。第二个实验组接受每日6次补充剂，每剂有5ml水，含有0.3gm乳清和0.2gm酪蛋白酸钠。第三个实验组接受每日6次补充剂，每剂为5ml溶液，该溶液有3.6gm天冬氨酸，694mg氢氧化钠和226mg氢氧化钾加入100ml蒸馏水(pH约6.1)混合而成。
第四个实验组接受每日6次补充剂，每剂有5ml水，含有0.5gm的Nutramigen婴儿配方中的酪蛋白水解物部分。Nutramigen是获自Mead Johnson公司的商业化婴儿配方。Mead Johnson公司友好地向我们提供了上述配方(无碳水化合物、脂肪或维生素)中的酪蛋白水解物部分。他们使用众所周知的步骤从标准酪蛋白中获得酪蛋白水解物。
每个方案中婴儿黄疸水平每日用非侵入性的透皮装置测量，该装置为Hill-RomAir-Shields公司(Hatboro，宾夕法尼亚州)的Hill-Rom Air-Shields/Minolta黄疸测量器(Joundice Meter)102。给测量器应用皮肤反射原理，在皮肤上紧贴一个光探头，使用连续闪光同时发射；光线透照皮下组织并被反射回分光光度计单元。
在二波脉镜分离光线为蓝色和绿色成分后，光线的光密度由光电池测量。蓝光和绿光光密度的差别通过黄光强度的测量获得(对血红蛋白进行校正)。这种黄光强度在测量器上以数字显示，被称为“黄疸指数”。数字读数与由皮下胆红素传给皮肤的黄光之间有线形联系。典型的是指数越高，黄疸越高。
排出的胆红素衍生物用HPLC检测。关于这点，粪便排泄物按照G.Gourley等，99胃肠病学(Gastroenterology)1705-1909(1990)的描述准备并进行下列改变胆红素提取至上层有机层，该上层被移出与上层底部的蛋白质界面的三倍提取物相混合。蛋白质界面的提取物是通过移出界面，加入0.1ml二甲基甲酰胺，超声处理1分钟再离心(12,427xg，1分钟)而完成的。
产生的0.5ml混合物随后进行冷冻(零下20℃，15分钟)以沉淀残余蛋白质，离心(12,741xg，5分钟)，将澄清的有机提取物移入0.22微米尼龙微量离心滤器(MSI，Westboro，MA)，再离心(6,370xg，2分钟)，20μl提取物用反相高效液相色谱(HPLC)分析胆色素。
HPLC系统由Hewlett Packard(Brookfield，WI)的二极管线阵探测器(1090型)、化学工作站和泵组成，其工作方法的细节可见于前面描述的上述G.Gourley等人的文献。胆红素和结合胆红素的探测使用436nm，带宽4nm减去参考值554nm，带宽22nm。由于胆红素、胆红素二葡萄糖醛酸和胆红素单葡萄糖醛酸的克分子消退系数是基本相同的(一般见W.Spivak等，234 J.Biochem.101-109(1986))。胆红素的标准曲线可用香豆素6体内标准来测量所有三种胆色素。
由图1-4可见，三个非对照实验组显示出黄疸指数的明显下降和胆红素变异体排泄的明显增多。现在认为酪蛋白酸盐/乳清组的黄疸指数的改善最好，酪蛋白水解物组的改善其次。实验也进一步证实L-天冬氨酸降低人体黄疸水平，这些实验表明了支持L-天冬氨酸作用的酪蛋白水解物的其他方面。而且，酪蛋白化合物和乳清可降低黄疸的发生，尽管这些成分不含有明显数量的L-天冬氨酸。
特别惊讶的是使用极低水平的添加物就获得这些结果。由于这个原因，我们没发现这些添加物的使用对持续母乳喂养的影响。对一个典型的婴儿，建议每日给予30ml的液体，希望能把30ml分为6次使用以模仿典型的母乳喂养频率。然而，补充剂的每日剂量可以一次使用或2-5次增加使用(尽管这会轻微影响母乳喂养，其效果略差也是可以理解的)。
本发明并不限于上面描述的特定例子，还有在本发明范围内的其他改动。例如，干粉(无液体媒介)可直接混合于母乳。因此，权利要求应当被看作是用来判定发明的所有范围的。
工业应用本发明提供了用于婴儿补充物的化合物，以及施用这些化合物的方法。
权利要求
1.一种施用人类婴儿食品补充剂的方法，其特征在于，所述方法含有一日对人类婴儿施用人类母乳，施用的当日对人类婴儿施用补充剂，所述补充剂基本不含碳水化合物，含有选自酪蛋白、酪蛋白盐、乳清和酪蛋白水解物的添加物。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，施用时婴儿年龄小于1个月。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，施用前婴儿表现出黄疸症状。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，施用前婴儿未表现出黄疸症状。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，借此降低血清胆红素水平。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述添加物是酪蛋白酸钠。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述添加物是乳清。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述添加物是酪蛋白酸盐/乳清混合物。
9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述添加物是酪蛋白水解物。
10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，当日施用于婴儿的添加物少于10gm。
11.一种降低人类婴儿血清胆红素水平的方法，其特征在于，所述方法含有一日对人类婴儿施用人类母乳，施用的当日对人类婴儿施用补充剂，所述补充剂基本不含碳水化合物，含有选自酪蛋白、酪蛋白盐、乳清和酪蛋白水解物的添加物；以此降低婴儿血清胆红素水平。
12.单日用于母乳喂养婴儿的补充剂，其特征在于，所述补充剂基本不含碳水化合物且体积小于50ml，所述药剂含有0.1gm到10gm的选自酪蛋白、酪蛋白盐、乳清和酪蛋白水解物的物质；和液体载体。
13.如权利要求12所述的补充剂，其特征在于，所述补充剂的体积不大于30ml。
14.单日用于母乳喂养婴儿的补充剂，其特征在于，所述补充剂被干燥且基本不含碳水化合物，所述药剂含有0.1gm到10gm选自酪蛋白、酪蛋白盐、乳清和酪蛋白水解物的物质，其中，所述补充剂的包装上有将至少部分药剂与母乳混合的说明。
全文摘要
本发明公开了含有酪蛋白、酪蛋白盐、乳清和/或酪蛋白水解物的不含碳水化合物的婴儿补充剂，以及把它们用于母乳喂养婴儿的方法。所述补充剂设计用来抑制血清胆红素水平和减少新生儿黄疸的发病和严重性。这种补充剂的一种形式是与人类母乳混合后喂养新生儿。
文档编号A61K38/01GK1561231SQ02819065
公开日2005年1月5日 申请日期2002年8月9日 优先权日2001年9月28日
发明者G·R·格力, B·L·克里默 申请人:威斯康星校友研究基金会