专利名称：防治高血压、冠心病的天然营养剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种防治高血压、冠心病的天然营养剂，尤其涉及一种从牛奶旦白中制备多种活性多肽天然营养制剂的方法，该天然营养剂可以有效地预防和治疗高血压、冠心病。
发明技术背景高血压、冠心病是目前人类的头号杀手，是全球最常见的疾病之一，据统计，在50岁以上中老年人群中高血压、冠心病发病率高达20％以上，而且正向年轻化发展，愈来愈多的人在30～40岁就开始出现高血压、冠心病的症状和体征，这与现代生活方式有很大关系。
医学界把高血压分为原发性高血压(即高血压病)和继发性高血压(即症状性高血压)两大类。继发性高血压是指由于某些疾病引起的高血压，高血压仅仅是这种疾病的症状之一。原发性高血压是常见病、多发病，其发病机理至今为止尚未完全探明，可能与压力、肥胖、吸烟、高血脂、运动减少、高脂肪饮食、遗传等因素有关。临床上以动脉血压升高为主要特征，随着病情加重，常常使心、脑、肾等脏器受累，发生功能性或器质性改变，如高血压性心脏病、心力衰竭、脑血管意外，肾功能衰竭等，是影响人类健康的最大元凶之一。
目前有多种降低血压的药物用于控制和降低血压，包括利尿剂、β-受体阻滞剂、钙拮抗剂、血管紧张素转换酶抑制剂和血管紧张素II拮抗剂等五大类，这些药物虽能有效降低血压，但是，长期服用都有各种副作用，其中某些副作用还很严重，而且有些药物价格昂贵，很多病人不能长期坚持服用，据统计，很大一部份病人，约40％的高血压病人其血压未能得到良好控制。高血压病人盼望使用既能有效降低血压，又不引发任何毒付作用的天然药物来控制血压。
高血压患者常常伴有高血脂、高胆固醇血症、动脉硬化和冠心病等多种心血管系统疾病，这些疾病之间相互影响，互为因果，最终并发心肌梗塞或心力衰竭而丧失生命。
对于上述类型的病人，在治疗原发性高血压的同时，必须降低患者的血脂、血胆固醇，防止血小板凝聚和血栓形成，防止动脉粥样硬化的发生，才能延缓冠心病的发生，阻止冠心病发展。
国外多项研究证实，牛奶旦白(包括酪旦白和乳清旦白)经旦白分解酶水解形成的多肽中含有多种生物活性多肽，具有抑制血管紧张素转换酶(ACE)作用，从而有效降低血压；具有对抗血小板凝集、抗凝血作用，从而延缓或防止血管硬化和血管内粥样硬化形成；具有内啡肽的作用，能够镇静、帮助睡眠，并通过抑制食欲减少胃肠道运动等，有助于控制饮食和减肥；具有降低血液中胆固醇、改善人体脂质代谢的作用。
通过抑制血管紧张素转换酶而具有抗高血压和延缓血管硬化的多肽是α-酪旦白f23～34，23～27，193～199和β-酪旦白f177～183，乳清旦白中β-乳球旦白的Tyr-Leu多肽和β-乳球旦白f142～148，以及乳肽中VAF，LLF，SPYL，Ala-Arg-Ala-Lys，Leu-Lys-Are-Phe等多肽。具有抗凝作用，防止血管硬化和阻滞血管粥样硬化斑和血栓形成的多肽是K-酪旦白f101～116。具有内啡肽作用的多肽是Tyr-Gly-Gly-Phe，Tyr-X-Phe，Tyr-X1-X2-Phe，β-酪旦白f60～70，α-乳球旦白f50～53，β-乳球旦白f102～105。
美国专利(4,358,465)公开的技术中介绍了从酪旦白中通过旦白分解酶制备磷酸多肽钙的方法及其用于补钙制剂中，未提及治疗高血压和冠心病的方法。
中国专利(98114267.2)公开的技术中介绍了从乳旦白中用乳酸杆菌方法制备活性多肽，但也未提及对高血压和冠心病的应用。
本必明所要解决的技术问题是，通过旦白分解酶对牛奶旦白的水解过程，制备多种具有生物活性的多肽，有效地应用于预防和治疗高血压病、冠心病。
发明内容
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案，其特征是，应用旦白分解酶在适宜的温度和酸碱度下对牛奶旦白进行充分的旦白水解，制备多种具有生物活性作用的活性多肽，通过分子量为10,000～20,000D的超微滤膜去除未水解的大分子旦白，干燥成粉或浓缩为浓缩液，添加在食品中或制备成药物用于预防和治疗高血压和冠心病。
本发明的技术特征是，制备本发明营养剂的原料是牛奶旦白，包括酪旦白、β-乳球旦白、α-乳白旦白等牛奶中的旦白，可以采用牛奶、牛初乳等液体牛奶原料，也可以采用酪旦白粉、乳浆旦白粉或乳浆旦白浓缩粉等旦白干粉作为原料。如果选用旦白干粉作为原料，酪旦白可以选用酸酪旦白或无脂肪乳固体(NFDM)，乳清旦白可以选用干酪制造过程中得到的乳清，尤其是甜乳清制备的干粉或者是经超滤得到的旦白浓缩物，乳清旦白还可以选用经离子交换或电透析而脱矿物质的乳清旦白。
本发明的技术特征是，如果本发明采用牛奶或牛初乳作为原料，需要以离心方式脱脂，同时采用超滤设备以分子量为30,000～40,000D的超滤膜去除矿物质、乳糖等小分子物质，并浓缩旦白质至10～60克旦白/升，最好是40～60克旦白/升浓度；如果以旦白干粉或旦白液体浓缩液作为原料，旦白可稀释或复原成约10～60克旦白/升，最好是40～60克旦白/升的溶液，其中酪旦白与乳清旦白比例为9∶2～2∶8，最好是8∶2～6∶4。
本发明的技术特征是，采用胰旦白酶和胰凝乳旦白酶的混合物作为旦白分解酶，该混合物中胰旦白酶活性为800～1800USP单位/毫克，最好是等于或大于1800USP单位/毫克，胰凝乳旦白酶的活性为150～350USP单位/毫克，最好是等于或大于350USP单位/毫克，胰旦白酶与胰凝乳旦白酶之比为1～18，最好是4～6，酶混合物与水解旦白总量的重量百分比为0.2～1.4％，最好是0.6～0.8％(重量百分比)。
本发明的技术特征是，旦白水解的程序及方法是，旦白溶液调节PH至6.5～6.8，加热至75℃～85℃约10～30分钟进行预热，使白旦白(BSA)和免疫球旦白(Ig)变性，降温至30℃～50℃后缓慢加入胰旦白酶和胰凝乳旦白酶的混合物，通过高压短时间的充分均质，使酪旦白和乳清旦白充分分散于溶液中，达到充分与胰旦白酶和胰凝乳旦白酶接触，从而使酶解反应进行得更加完全彻底，均质工作压力为8～15Mpa，酶解温度30℃～50℃，酶解时间持续4～8小时，酶解时PH值应维持在6.5～8范围内，在酶解过程结束时，应该通过灭活酶活性来进行酶失活的步骤，可以通过热处理来使酶失活，加热温度至85℃～95℃维持10～15分钟，使酶失活。
本发明的技术特征是，完成旦白酶解过程的旦白水解液被泵入超滤设备，采用分子量5,000～15,000D的超滤膜去除未完全水解的大分子旦白，收集超滤上清液，采用喷雾干燥、真空干燥或冷冻干燥的方式干燥成粉，或用分子量为1,000的超滤膜浓缩至起始容积20％～30％的浓缩液备用。
本发明的技术特征是，本发明方法制备的多种生物活性肽含有抑制血管紧张素转换酶(ACE)的多肽、阻止血小板凝聚抗凝血多肽、内啡肽样作用多肽、降低胆固醇调节脂质反应多肽，这些生物活性物质能有效降低血糖，降低血压，降低血脂和血胆固醇，控制或减轻体重，预防和延缓血栓形成和血管粥样硬化发生。适用于原发性高血压和/或伴有冠心病的患者使用，用于治疗高血压病和冠心病，也适合于有功能性高血压，或有冠心病易患因素的人群服用，用于预防或延缓高血压病和冠心病的发生。
本发明的技术特征是，本发明方法制备的营养剂，主要以口服形式施用，可以直接用干粉冲水服用或制备成口服液服用，也可以食品添加剂形式添加在各类食品内服用，还可以与各种医药等级辅料混合制备成片剂、胶囊剂、冲剂、颗粒剂、散剂、乳剂、软胶囊等形式服用。
本发明的有益效果是，与现有技术相比，应用天然营养剂有效预防和治疗高血压、冠心病，长期服用无毒付作用，在降低血压的同时，降低血脂，降低血胆固醇，对抗血小板凝聚，防止动脉硬化，从而延缓或阻止冠心病加重。
具体实施例方式
实施例1以牛奶为原料制备防治高血压、冠心病的营养剂收集新鲜牛奶200升，以离心方式脱脂，脱脂牛奶输入交错切面流体超滤装置，以分子量为40,000D的超滤膜分离小分子量物质，并浓缩旦白质至50克/升，泵抽旦白溶液至反应锅，加温至85℃维持10分钟使免疫球旦白变性，冷却至50℃，加入胰旦白酶和胰凝乳旦白酶混合物，其量相当于水解旦白量的0.8％(重量百分比)(其中胰旦白酶∶胰凝乳旦白酶＝5∶1，胰旦白酶活性等于或大于1800USP单位/毫克，胰凝乳旦白酶活性等于或大于350USP单位/毫克)，调整PH至6.8，维持温度在50℃，持续6小时，高压均质，均质工作压力为10MPa，酶解过程结束，加温至95℃维持10分钟使酶灭活，用真空泵抽旦白水解液进入交错切面流体超滤装置，采用分子量为10,000D的超滤膜分离未水解的大分子旦白质，收集超滤上清液，送入喷雾塔，在80℃温度下喷雾干燥成粉，内含丰富的多种降低，抗血小板凝聚，降低血胆固醇的活性多肽。
实施例2以酪旦白粉和乳清旦白粉为原料制备防治高血压、冠心病的营养剂取酪旦白粉60公斤，乳清浓缩旦白粉40公斤，加蒸馏水，加温至50℃，调配成6％的旦白溶液，调PH值至7.0，旦白溶解后加温至80℃预热15分钟灭活免疫球旦白，混合物冷却至50℃时，加胰旦白酶和胰凝乳旦白酶混合物，相当于旦白重量0.8％(其中胰旦白酶∶胰凝乳旦白酶＝6∶1，胰旦白酶活性等天或大于1000USP单位/毫克，胰凝乳旦白酶活性等天或大于200USP单位/毫克)，水解温度维持45℃持续8小时，高压均质，均质工作压力为12Mpa，使旦白与酶充分接触，酶解过程结束，向水解产物内注入130℃蒸汽维持45秒钟，杀灭细菌同时灭活酶活性，将水解液泵入交错切面流体超滤分离装置，用分子量为10,000D的超滤膜去除未水解的大分子旦白质，喷雾干燥制备干粉。
实施例3测量活性多肽分子量取实施例1制备的活性多肽粉末，用尺寸筛层析方法(SEC)，测定活性多肽分子量分布，在TSK G-2000SWXL柱中按分子尺寸将多肽分开，用UV检测器测出214nm的吸收性，并将其与已知分子量的多肽曲线比较。
摩尔质量 ％分子量分布(g/mlo)MM＞5000 7.8％
5000＞MM＞3000 13.7％3000＞MM＞2000 14.6％2000＞MM＞1000 25.8％1000＞MM＞500 18.9％MM＞500 19.2％实施例4临床验证随机选择24名高血压患者，年令从60～75岁，每天服用实施例2制备的营养剂3g，持续三个月，患者血压平均降低结果为收缩压平均下降12mmHg，舒张压平均下降8mmHg。
权利要求
1.本发明涉及一种防治高血压、冠心病的天然营养剂，尤其涉及一种从牛奶旦白中制备多种活性多肽天然营养制剂的方法，该天然营养剂可以有效地预防和治疗高血压、冠心病，其特征是，应用旦白分解酶在适宜的温度和酸碱度下对牛奶旦白进行充分的旦白水解，制备多种具有生物活性作用的活性多肽，通过分子量为10,000～20,000D的超微滤膜去除未水解的大分子旦白，干燥成粉或浓缩为浓缩液，添加在食品中或制备成药物用于预防和治疗高血压和冠心病。
2.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，制备本发明营养剂的原料是牛奶旦白，包括酪旦白、β-乳球旦白、α-乳白旦白等牛奶中的旦白，可以采用牛奶、牛初乳等液体牛奶原料，也可以采用酪旦白粉、乳浆旦白粉或乳浆旦白浓缩粉等旦白干粉作为原料，如果选用旦白干粉作为原料，酪旦白可以选用酸酪旦白或无脂肪乳固体(NFDM)，乳清旦白可以选用干酪制造过程中得到的乳清，尤其是甜乳清制备的干粉或者是经超滤得到的旦白浓缩物，乳清旦白还可以选用经离子交换或电透析而脱矿物质的乳清旦白。
3.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，如果本发明采用牛奶或牛初乳作为原料，需要以离心方式脱脂，同时采用超滤设备以分子量为30,000～40,000D的超滤膜去除矿物质、乳糖等小分子物质，并浓缩旦白质至10～60克旦白/升，最好是40～60克旦白/升浓度；如果以旦白干粉或旦白液体浓缩液作为原料，旦白可稀释或复原成约10～60克旦白/升，最好是40～60克旦白/升的溶液，其中酪旦白与乳清旦白比例为9∶2～2∶8，最好是8∶2～6∶4。
4.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，采用胰旦白酶和胰凝乳旦白酶的混合物作为旦白分解酶，该混合物中胰旦白酶活性为800～1800USP单位/毫克，最好是等于或大于1800USP单位/毫克，胰凝乳旦白酶的活性为150～350USP单位/毫克，最好是等于或大于350USP单位/毫克，胰旦白酶与胰凝乳旦白酶之比为1～18，最好是4～6，酶混合物与水解旦白总量的重量百分比为0.2～1.4％，最好是0.6～0.8％(重量百分比)。
5.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，旦白水解的程序及方法是，旦白溶液调节PH至6.5～6.8，加热至75℃～85℃约10～30分钟进行预热，使白旦白(BSA)和免疫球旦白(Ig)变性，降温至30℃～50℃后缓慢加入胰旦白酶和胰凝乳旦白酶的混合物，通过高压短时间的充分均质，使酪旦白和乳清旦白充分分散于溶液中，达到充分与胰旦白酶和胰凝乳旦白酶接触，从而使酶解反应进行得更加完全彻底，均质工作压力为8～15Mpa，酶解温度30℃～50℃，酶解时间持续4～8小时，酶解时PH值应维持在6.5～8范围内，在酶解过程结束时，应该通过灭活酶活性来进行酶失活的步骤，可以通过热处理来使酶失活，加热温度至85℃～95℃维持10～15分钟，使酶失活。
6.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，完成旦白酶解过程的旦白水解液被泵入超滤设备，采用分子量5,000～15,000D的超滤膜去除未完全水解的大分子旦白，收集超滤上清液，采用喷雾干燥、真空干燥或冷冻干燥的方式干燥成粉，或用分子量为1,000的超滤膜浓缩至起始容积20％～30％的浓缩液备用。
7.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，本发明方法制备的多种生物活性肽含有抑制血管紧张素转换酶(ACE)的多肽、阻止血小板凝聚抗凝血多肽、内啡肽样作用多肽、降低胆固醇调节脂质反应多肽，这些生物活性物质能有效降低血糖，降低血压，降低血脂和血胆固醇，控制或减轻体重，预防和延缓血栓形成和血管粥样硬化发生，适用于原发性高血压和/或伴有冠心病的患者使用，用于治疗高血压病和冠心病，也适合于有功能性高血压，或有冠心病易患因素的人群服用，用于预防或延缓高血压病和冠心病的发生。
8.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，本发明方法制备的营养剂，主要以口服形式施用，可以直接用干粉冲水服用或制备成口服液服用，也可以食品添加剂形式添加在各类食品内服用，还可以与各种医药等级辅料混合制备成片剂、胶囊剂、冲剂、颗粒剂、散剂、乳剂、软胶囊等形式服用。
全文摘要
本发明涉及一种防治高血压、冠心病的天然营养剂，尤其涉及一种从牛奶蛋白中制备多种活性多肽天然营养制剂的方法，该天然营养剂可以有效地预防和治疗高血压、冠心病，其特征是，应用蛋白分解酶在适宜的温度和酸碱度下对牛奶蛋白进行充分的蛋白水解，制备多种具有生物活性作用的活性多肽，通过分子量为10,000～20,000D的超微滤膜去除未水解的大分子蛋白，干燥成粉或浓缩为浓缩液，添加在食品中或制备成药物用于预防和治疗高血压和冠心病。
文档编号A61P9/00GK1557473SQ20041001611
公开日2004年12月29日 申请日期2004年2月4日 优先权日2004年2月4日
发明者高春平 申请人:高春平