专利名称：清肺止咳胶囊的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种蒙药，具体说涉及一种清肺止咳胶囊。
背景技术：
咳嗽是呼吸系统受到刺激时产生的一种防御性反射活动。咳嗽能帮助清除气管内痰液与异物，可保持呼吸顺畅，有利于身体健康，一般不需要服用止咳药；强烈而频繁的咳嗽，则是由一定的病因引起的，病情加重还可能引起并发症，需要在针对病因治疗的同时，使用止咳药。
发明内容
本发明人经过反复研究，根据蒙医理论和经验，并通过动物和临床试验的反复验证，找到具有更好疗效的治疗咳嗽的蒙药口服药，从而完成了本发明。
本发明的目的就是提供一种清肺止咳疗效显著的清肺止咳胶囊。
清肺止咳胶囊是由北沙参、诃子、川楝紫、栀子、紫草茸、紫草、茜草七味药材组成的制剂，其功能为清肺热，止咳，祛痰，疗效确切。根据蒙医理论及经验对处方分析如下方中北沙参为清肺热之主药，以味甘、微苦、性凉、柔，有清肺热、止咳锁脉，愈伤之功能，用于肺热咳嗽，气喘，胸闷，慢性气管炎，感冒咳嗽等。诃子、栀子、川楝子为性凉，有清热凉血，分离恶血与良血混浊的功能。用于新久血热，因血目赤，恶血与良血混浊、瘟疫，讧热，希日热。紫草、紫草茸、茜草为性凉，清肺热、凉血、止咳之功能。用于肺热咳嗽，咳痰。
本发明药物组分的用量也是经过发明人进行大量摸索总结得出的，各组分用量在下述重量份范围内都具有较好疗效北沙参550--650份、诃子80--120份、川楝紫50--80份、栀子80--120份、紫草茸80--120份、紫草80--120份、茜草80--120份。
优选为北沙参600份、诃子100份、川楝紫60份、栀子100份、紫草茸100份、紫草100份、茜草100份。
本发明药物制成胶囊口服。
对三批胶囊进行了高温、高湿、光照、暴露于自然光、37-40℃和相对湿度75％条件下进行了考察，在规定的时间里定期取样，对本品的性状、鉴别、水分、崩解时限、含量测定和微生物限度进行检查。通过三批产品的初步稳定性考察结果表明，高温实验结果出现囊壳变脆破裂；高湿实验结果出现囊壳变软，内容物结块；37--40℃和相对湿度75％条件下，各项指标均符合有关规定，可暂时有效期为二年。室温条件下的长期稳定性试验继续进行，有效期的确定最后以留样观察为准。
本发明药物为性凉，有清肺热止咳之功能。临床上用于肺热，胸闷，感冒咳嗽，咳血咳黄痰，肺热性刺痛，肺脓症及急慢性气管炎，久咳不愈症。
具体实施例方式
以下通过试验例来进一步阐述本发明所述药物的有益效果。这些试验例包括了本发明药物的药效学试验、病理、毒理试验和临床疗效等。
清肺止咳胶囊的药效学研究通过动物试验来验证清肺止咳胶囊的镇咳、祛痰、抗炎、免疫等作用。
受试药物清肺止咳胶囊.43g/粒(囊内粉末相当于生药2.58g/g)，囊内装粉棕色粉末。
配制方法将清肺止咳胶囊每次试验前分别用0.5％CMC配制成所需浓度。
动物Wistar-Imamichi大鼠，清洁级(二级)；昆明种小鼠，清洁级(二级)，均购自内蒙古大学试验动物研究中心。
仪器JSC-B型超声波雾化治疗仪(鞍山电子医疗仪器厂)。
方法与结果如下1、镇咳试验小鼠50只，雌雄各半，体重18-20g，随机分5组，每组10只，禁食12hr，各组分别灌喂清肺止咳胶囊0.32、0.65、1.3g/kg(约相当于生药0.8、1.7、3.4g/kg)，对照组给予等容积溶媒0.5％CMC，各组给药容积均为25ml/kg。给药1小时后，将小鼠分别置于1000ml溶剂的玻璃钟罩内，将经超声波雾化的浓氨水喷入钟罩内共5秒钟，喷雾开始后立即观察各小鼠的咳嗽潜伏期及2分钟内咳嗽次数，并计算咳嗽抑制率。结果见表1.1咳嗽潜伏期指氨水喷雾开始至出现咳嗽所需时间。
咳嗽抑制率(％)＝[(对照组咳嗽次数-试验组咳嗽次数)÷对照组咳嗽次数]×100％表1.1
注与对照组比*P＜0.05**P＜0.01；小鼠50只，雌雄各半，体重18-20g，随机分5组，每组10只，各组分别灌喂清肺止咳胶囊0.32、0.65、1.3g/kg(约相当于生药0.8、1.7、3.4g/kg)，对照组给予等容积溶媒0.5％CMC，各组给药容积均为25ml/kg。每日给药一次，给药3天，末次给药1小时后，将小鼠分别置于500ml容积的广口瓶内，注入5mlSO2，60秒后取出，观察各小鼠的咳嗽潜伏期(由注入SO2开始至发生咳嗽所需的时间为潜伏期)及2分钟内咳嗽次数，并计算咳嗽抑制率。结果见表1.2咳嗽抑制率(％)＝[(对照组咳嗽次数-试验组咳嗽次数)÷对照组咳嗽次数]×100％表1.2
结果表明中、高剂量组对SO2所致小鼠咳嗽可明显减少2分钟内咳嗽次数，并可使咳嗽潜伏期明显延长。
2、祛痰试验小鼠50只，雌雄各半，体重18-20g，随机分5组，每组10只，禁食12hr，各组分别灌喂清肺止咳胶囊0.32、0.65、1.3g/kg(约相当于生药0.8、1.7、3.4g/kg)，对照组给予等容积溶媒0.5％CMC，各组给药容积均为25ml/kg。末次给药30分钟后，腹腔注射5％酚红生理盐水溶液，剂量为500mg/kg，30分钟后处死小鼠，分离气管，取5mm长气管段，置含有1ml生理盐水的离心管中，超声振荡3分钟，离心(3000r/min)5分钟，将上清液移至另外小试管中，加入1mol/L的NaOH溶液0.1ml，使溶液成碱性，用分光光度计测酚红的吸收值(A)，测定波长为546nm，将A值代入酚红标准曲线方程，求出酚红含量，进行组间t检验，并求得酚红含量增加率。
酚红增加率＝[(给药组酚红含量-对照组酚红含量)/对照组酚红含量]×100％祛痰作用见表2.1表2.1
注与对照组比*P＜0.05**P＜0.01大鼠50只，雌雄各半，体重180-210g，随机分5组，每组10只，各组分别灌胃清肺止咳胶囊0.23、0.45、0.90g/kg(约相当于生药0.6、1.2、2.4g/kg)，对照组给予等容积溶媒0.5％CMC，各组给药容积均为10ml/kg。每日给药一次，给药3天。末次给药1小时后，乌拉坦1g/kg腹腔注射麻醉后，仰位固定。分离气管，在甲状腺软骨下缘正中两软骨之间用尖锐的注射针头扎一小孔，插入毛细玻管一根，使毛细玻管刚好接触气管底部表面，以毛细玻管吸取痰液，痰液长度作为评价药物的化痰效果。观察记录2小时各鼠分泌量，结果见表2.2。
表2.2
注与对照组比*P＜0.05**P＜0.01结果证明清肺止咳胶囊能明显增加大鼠排痰量。此外还可明显延长小鼠咳嗽潜伏期，减少其咳嗽次数。
结论清肺止咳胶囊具有镇咳、祛痰作用。
3、抗炎试验小鼠耳二甲苯致炎法小鼠50只，雄性，体重19-22g，随机分5组，每组10只，各组按表3所示剂量灌喂给药，每日一次，次日给药45分钟后，以二甲苯棉球接触各小鼠右耳5秒钟，15分钟后拉颈处死，剪小双耳，以打孔器将双耳同部位等面积切下，称重，求出耳肿胀率(肿胀率＝[(致炎耳重-非致炎耳重)/非致炎耳重]×100％)，比较各给药组和对照组肿胀度得差异，结果见表3表3
注同前；3组比5组；P＞0.05结果表明有明显的抗炎作用。
大鼠棉球肉芽肿增生的影响选用体重150g左右的雄性大鼠50只，在乙醚浅麻醉无菌条件下做腹部切口，将已称重的20mg灭菌棉球(每个棉球再加氨苄青霉素1mg/0.1ml，50℃烘箱烤干后)植入大鼠两侧腹股沟皮下。术后随机分5组，每组10只，分别给予0.5％CMC、受试药物，手术当天开始给药，1次/日，连续7天，第八天将大鼠断头处死，剥离并取出棉球肉芽组织，于80℃烘箱内干燥2h后称重，减去原棉球重量，即为肉芽肿净重。比较各组肉芽肿重量，并计算抑制率(抑制率＝[(实验组肉芽肿净重-空白组肉芽肿净重)/空白组肉芽肿净重]×100％)，结果见表4表4
注同前；2组比5组；P＞0.05
结果表明有明显抑制大鼠棉球肉芽肿增生的作用。
4、对小鼠溶血素抗体生成的影响小鼠50只，雄性，体重18-22g，随机分5组，每组10只，每鼠腹腔注射5％生理盐水鸡红细胞混悬液0.2毫升进行免疫，同时各组按表4所示剂量灌喂给药，每日一次，给药6次，末日给药后1.5小时，断头取血，离心，取血清用生理盐水稀释100倍，取稀释血清1毫升，与5％鸡红细胞混悬液0.5毫升混合，并于每管中加入1∶10稀释过的豚鼠血清0.5毫升，随即移入37℃恒温培养箱中，保温30分钟，孵毕即放入冰浴以终止反应，用2000r/min，离心10分钟，取上清液于721分光光度计540nm处比色，测定光密度(OD)，另设不加血清的空白对照，取其上清液为比色时调“0”的基准，以光密度(OD)读数作为判定血清溶血素的指标，比较各组的差异，结果见表5表5
注同前；2组比5组；P＞0.05结果表明能使小鼠的体液免疫功能提高。
5、体内抑菌试验将大肠杆菌(4.0×109/ml)的菌液用生理盐水以10倍顺利稀释后，各浓度菌液1ml，加5％胃膜素9ml，做成均匀的菌悬液，将不同浓度菌悬液注入小鼠，8只/组，0.5ml/只，观察其死亡情况，找出最小致死量(MLD)即感染后引起小鼠80％--100％死亡的菌悬液浓度。
取小鼠100只，雌雄各半，体重18-20g，随机分5组，每组20只，分别灌胃清肺止咳胶囊0.8、1.7、3.4g/kg，对照组给予等容积溶媒0.5％CMC，每日一次，给药2天。第三天，将预试选定MLD的大肠杆菌(4.0×106)悬液感染各组小鼠，每鼠ip0.5ml，感染后即刻各组再给药一次，观察7天，计算各组小鼠死亡数，做统计学处理，结果见表7表7
结果表明，对大肠杆菌感染小鼠均未见明显的抗感染作用。
试验结论综上结果表明清肺止咳胶囊具有镇咳、祛痰、抗炎、增强机体免疫功能等功效。对大肠杆菌感染小鼠未见明显的抗感染作用。
急性毒性试验小鼠一日内连续灌胃3次，每次间隔6小时，饲养观察1周，行为正常，无一死亡；本试验测出清肺止咳胶囊内容物小鼠最大耐受量为21.0g/kg/d(约等于生药54.2g/kg)存活小鼠解剖未发现异常。表明清肺止咳胶囊口服给药无毒或低毒药物。
受试药物清肺止咳胶囊0.43g/粒(囊内粉末相当于生药2.58g/g)，囊内装红棕色粉末。
配制方法试验前用0.5％CMC作溶媒混悬清肺止咳胶囊内容物，配成浓度为0.175g/ml(相当于生药0.45g/ml)的混悬药液，供灌胃使用。
动物昆明种小白鼠，6周龄。
实验方法灌胃给药最大耐受性测定小白鼠20只，雌雄各半，体重19-22g，给药前禁食12小时，每次以40ml/kg的清肺止咳胶囊混悬液(等于清肺止咳胶囊内容物7.0g/kg，约等于生药18.06g/kg)灌胃给药，1日内共给药3次，每次间隔6小时。
给药后开始观察小鼠的皮肤、眼、毛、活动、摄食、呼吸变化等表现，存活小鼠1周后处死并尸检。
结果给药后上述观察指标均无异常反应，饲养观察1周，无一死亡(见表8)。
表8
本实验测出小鼠的最大耐受量为21.0g/kg，(清肺止咳胶囊内容物)存活小鼠解剖未发现异常。
结论综合上述结果认为清肺止咳胶囊口服给药为无毒或低毒药物，可供临床使用，从小鼠耐受倍数来看，成人日服9粒(3.87g/天)，则相当于成人日服用量的325.6倍。
附耐受倍数＝(小鼠耐受量/小鼠平均体重)÷(成人治疗用药量/成人平均体重)灌胃给药相当于成人口服日用量的耐受倍数(0.175×0.8×3÷20)÷(0.43×3×3÷60000)＝325.6[试验例3]长期毒性试验受试药物清肺止咳胶囊0.43g/粒(囊内粉末相当于生药2.58g/g)，囊内装红棕色粉末。
动物和饲养8周龄的Wister-Imamichi大鼠60只，雌雄各半，购自内蒙古大学实验动物研究中心。大鼠分笼饲养(每笼5只)，饲养标准块料和自来水，动物房室温18-22℃。饲料由内蒙古大学实验动物中心供应。
实验方法饲养观察一周后，大鼠按体重性别随机均分3组，每组雌雄大鼠各10只，分别灌胃给予0.5％CMC-Na(与给药组同体积)、清肺止咳胶囊3.2、5.8g/kg/d(分别相当于生药8.26、15.0g/kg)每天给药1次，每周给药7天，连续给药13周，每周按动物体重调整一次给药量。于末次给药后和停药两周后，各处死1/2动物，观察各项指标。两个用药量分别是临床一日用药剂量(3.87g/60kg)的50、90倍。
仪器生化测定采用意大利产BT-2245“ARCO”型全自动生化分析仪；红、白细胞记数采用XQ-2型血球记数仪(南京无线电元件六厂生产)；血红蛋白定量采用TU-1221型紫外分光光度计。
观察指标一般情况逐日观察动物毛色、行为、呼吸、进食、活动、粪便及中毒和死亡情况，每周固定时间测量记录体重一次。
血液学指标末次给药后之大鼠，禁食12小时，复称体重，颈动脉取血。取少量血，作血红细胞计数(RBC)、血红蛋白定量(Hb)、白细胞总数(WBC)和分类(DC)、血小板计数(BPC)及凝血时间(Coag time玻片法)、剩余血留作血液生化指标测定。
血液生化指标取上述剩余血的血清测定天门冬氨酸氨基转换酶(AST，苹果酸脱氢酶动力学法)、丙氨酸氨基转换酶(ALT，乳酸脱氢酶动力学法)、碱性磷酸酶(ALP，磷酸对硝基酚基质动力学法)、尿素氮(BUN，尿素酶法)、肌酐(Crea，苦味酸法)、总蛋白(TP，biuret法)、血糖(GLU，GOP-PAP法)、总胆固醇(T-CHO，CHPD-PAP法)、总胆红素(BIL，重氮法)。
病理检查上述处死的动物，迅速作病理检查。
系统尸解解剖所有大鼠，肉眼观察心、肝、脾、肺、肾、胃、肾上腺、小肠、结肠、前列腺、胸腺、膀胱、子宫、卵巢、睾丸和附睾、胸骨等，并对心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、子宫、卵巢、睾丸、前列腺等11种脏器进行称重，以脏器重量与体重之比(脏器重量/体重×100％)计算脏器系数。
组织学检查以10％福尔马林固定各鼠的心、肝、脾、肺、肾、肾上腺，石蜡包埋，切片，HE染色，光学显微镜下进行病理检查并摄片。
余1/2大鼠继续饲养2周后再活杀鼠，检查上述各项指标，以期了解毒性反应的可逆程度和可能出现的迟发性毒性。
试验结果一般表现外观、行为观察给药期间和停药后，各组大鼠的毛色、行为、呼吸、食欲、粪便等均未发现异常，毛色光泽、贴身，尿淡黄，颗粒状粪便而无稀便。
体重变化2个用药组大鼠体重与空白对照组比较均无显著差别(见表9)。
实验结果表明，清肺止咳胶囊对大鼠体重增长无明显影响。
血液学检查口服清肺止咳胶囊13周及停药2周后，大鼠血常规RBC、Hb、WBC、BPC、Coag time及白细胞分类等指标，各给药组与空白对照组比较，均无明显差异(组间t检查)。结果表明，口服清肺止咳胶囊13周，对大鼠血液学指标无影响。各给药组及停药2周后各组进行组间t检验，均无统计学上的差异(见表10)。
血液生化指标口服13周清肺止咳胶囊及停药2周后对大鼠血清BUN、Crea、ALT、ALP、AST、TP、BIL、T-CHO及GLU的影响见表11，从表中可见，口服不同计量药物的大鼠的上述各项生化指标，均在正常范围内，组间t检验，无显著性差异，说明长期口服清肺止咳胶囊对肝功能、肾功能及TP、BIL、T-CHO、GLU等平均不产生影响(个别数字虽有波动，但均在正常范围之内)病理学检查系统尸解清肺止咳胶囊2个给药组及空白对照组动物的心、肝、脾、肺、胃、肾、肾上腺、小肠、结肠、前列腺、胸腺、膀胱、子宫、卵巢、睾丸和附睾、胸骨等，形态、大小、颜色未发现肉眼可见变化。停药2周后也未发现动物病理变化。
脏器系数药物服用13周后和停药2周后各组大鼠的心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、卵巢、子宫、睾丸前列腺等11种重要器官的脏器系数，各组间t检查结果，心、肝、脾、肺、肾、肾上腺均无统计学差异，见表12。
空白组与大剂量组动物的心、肝、脾、肺、肾、肾上腺等组织作病理检查，未发现药源性的病理变化。空白组与大剂量组各器官的病理切片基本结构未见异常改变，个别大鼠肺脏肺泡壁、心肌间、肾上腺等脏器的毛细血管扩张充盈，但空白组与给药组之间无明显差异。经分析，肺泡壁等器官的毛细血管扩张充盈，可能与动物处死前挣扎，或颈动脉取血造成心衰有关。其他心、肝、脾、肺、肾、肾上腺等各种器官细胞形态、结构均未见异常。
试验结论长期毒性试验表明清肺止咳胶囊的毒性较小，试验条件下，未发现明显毒性，说明该药在临床使用剂量条件下是安全的。
清肺止咳胶囊长期毒性试验病理解剖血观察报告检查标本为大白鼠的心脏、肝脏、脾脏、肾脏、及肾上腺共六种，每个器官分二组(空白、高剂量组)，每组又分为灌胃13周后及停药2周后二小组，每小组各10张切片，即每各器官分胃四各小组共40张切片(空白灌胃13周后10张)观察结果报告如下1、肝脏四个小组观察所见基本一致。可见肝小叶结构，肝细胞界限清楚，多边形有的为圆形，胞浆疏松，胞浆内可见粉染颗粒，小叶周边带，肝细胞内颗粒较密集。个别肝细胞有轻微细胞浊肿或空泡样变，各组之间无明显差异。
2、心脏四个小组观察所见基本一致，心肌纤维走向正常，心肌细胞横纹清楚，间质略充血，心内膜及心外膜光滑无炎症。
3、脾脏四个小组观察所见基本一致。脾脏红、白髓结构正常，脾小体、脾小梁结果清楚，红髓内可见大量红细胞，少量巨噬细胞，淋巴细胞及多核巨细胞。未见其它明显异常改变。
4、肺脏四个小组观察所见基本一致。肺泡，细支气管等结构正常，肺泡腔大小不等，但肺泡内无渗出物，支气管通畅无炎症，未见明显异常差异。个别肺组织切片局部非泡壁毛细血管扩张充血，各组之间无明显差异。
5、肾脏四个小组观察所见基本一致。肾小球及肾小管均未见明显异常改变。肾小球大小一致，近侧曲管胞浆粉染，无颗粒，细胞核大小一致排列整齐，个别肾组织细胞有轻微浊肿，各组之间无明显差异。
6、肾上腺四各小组观察所见基本一致。肾上腺皮、髓结构正常，均未见明显异常改变。
从以上各器官观察所见，均未见实质细胞有变形、坏死等肿毒性改变，空白对照组与大剂量组之间观察所见基本一致。经分析，我们认为，肝、肾组织部分细胞浊肿可能为动物处死后，标本取材不及时或取材过大，未能及时固定，细胞缺氧所至，肺泡壁毛细血管扩张充血，可能与动物殊死前挣扎有关，而与服用药物无关。
所有实验动物上述器官未发现有因该药引起的特异性病变。
以下通过实施例来进一步阐述本发明药物。
一种清肺止咳胶囊，由北沙参600g、诃子100g、川楝紫60g、栀子100g、紫草茸100g、紫草100g、茜草100g组成。
一种清肺止咳胶囊，由北沙参550g、诃子80g、川楝紫50g、栀子80g、紫草茸80g、紫草80g、茜草80g组成。
一种清肺止咳胶囊，由北沙参650g、诃子120g、川楝紫80g、栀子120g、紫草茸120g、紫草120g、茜草120g组成。
表9对大鼠体重(g)的影响
注*P＜0.05；**P＜0.01(n＝10，第14周起n＝5)
表10对大鼠血液学指标的影响
注*P＜0.05；**P＜0.01
表11对大鼠血液生化水平的影响
注*P＜0.05；**P＜0.01
表12对大鼠主要脏器重量系数(g/100g体重)的影响(X±SD)
注*P＜0.05；**P＜0.0权利要求
1.一种清肺止咳胶囊，其特征在于由下列重量份的原料药制成北沙参550-650份、诃子80--120份、川楝紫50--80份、栀子80--120份、紫草茸80--120份、紫草80--120份、茜草80--120份组成。
2.根据权利要求1所述的清肺止咳胶囊，其特征在于其中各原料药的用量为北沙参600份、诃子100份、川楝紫60份、栀子100份、紫草茸100份、紫草100份、茜草100份。
全文摘要
本发明公开了一种清肺止咳胶囊，其特征在于由下列重量份的原料药制成北沙参550－650份、诃子80－120份、川楝紫50－80份、栀子80－120份、紫草茸80－120份、紫草80－120份、茜草80－120份组成。本发明药物为性凉，有清肺热止咳之功能。临床上用于肺热，胸闷，感冒咳嗽，咳血咳黄痰，肺热性刺痛，肺脓症及急慢性气管炎，久咳不愈症。
文档编号A61P11/00GK1985912SQ20061004785
公开日2007年6月27日 申请日期2006年9月20日 优先权日2006年9月20日
发明者佘广宇 申请人:佘广宇