专利名称：一种促进伤口愈合的蜕皮甾酮乳膏的制备方法
技术领域：
本发明涉及药物新用途、新剂型的研发，具体涉及蜕皮甾酮在促进伤口愈合方面的作用的研究，及蜕 皮甾酮乳膏的制备方法、量效分析、及疗效观察。
2背景技术：
蜕皮甾酮(ecdysterone，B-ecdysone)属于昆虫生长代谢调节激素，该化合物可由鸭跖草科蓝耳草属植物 露水草Cynotis arach加idea C. B. Clarke等植物中提取制得。也是目前药用蜕皮甾酮的主要提取途径。
蜕皮甾酮的可用于(l)皮肤再生；(2)化妆品；(3)抗糖尿病；(4)治疗哮喘；(5)治疗痴呆等脑缺血性疾病；
(6)改善脑功能障碍所造成的记忆损伤。
蜕皮甾酮的药理作用机制有a〉蛋白同化作用；(2)抗氧化作用；(3)适应原样作用。
本发明的目的是在于提供蜕皮甾酮的的新用途，新剂型。即在促进伤口愈合中的应用，以及将其制备 成乳膏制剂后的量效学分析及疗效对比观察。
目前用于促进伤口愈合的外用药有(l)伤口愈合填充膏主要有填充伤口和防止感染的作用。(2)肤康 宁能够促进机体在伤口部位产生免疫细胞，有的因子能够"调配细胞"前往伤口处增援。(3)无推进剂喷 雾状皮肤贴剂组合物形成覆盖伤口的保护性薄膜，将生理活性成分或其前药运送至或穿透皮肤。(4)苯扎 氯铵贴主要作用为杀菌、止血、护创。(5)云南白药创可贴显著提高血小板聚集；对抗二甲苯所致小鼠 耳肿胀；促进成纤维细胞生长因子(bEGF)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。
以上药物的愈创机理也是创伤愈合的关键点(l)创面早期的止血处理；(2)创面早期的清洁处理；(3)创 面上皮细胞、内皮细胞、成纤维细胞等的快速增殖；(4)抗生素的使用，用于防止创面感染。
蜕皮甾酮乳膏的愈创机理为(l)早期的创面护理；(2)促进创面上皮细胞、内皮细胞、成纤维细胞等的 快速增殖；(3)早期抗炎作用；(4)早期创面消肿作用。
目前市场上的愈创药物中又以云南白药创可贴的愈创机理最全面，愈创效果相对较好。但其主要注重 早期创面止血作用，其他几个方面的作用相对较弱。而蜕皮甾酮的最重要作用是促进创面上皮细胞、内皮 细胞、成纤维细胞等的快速增殖，而这才是形成肉芽组织及创伤愈合的关键点。所以本发明主要目的是将 蜕皮甾酮制备成便携易带的乳膏制剂；并做量效学分析，找到最佳有效浓度；同时将最佳有效浓度的蜕皮 甾酮乳膏作为实验组，以云南白药创可贴作为对照组，观察在新西兰大白兔创伤动物模型中的促愈效果， 并作病理切片分析电镜及光镜下上皮细胞、内皮细胞、成纤维细胞等增殖情况，从而得出蛻皮甾酮乳膏的 愈创效果结论。
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发明内容
一种促进伤口愈合的蜕皮甾酮乳膏的制备方法，其特征在于按以下步骤进行
(1) 、配方包括如下组分-
油相单硬脂酸甘油酯35g ，硬脂酸130 150g ，白凡士70g ，氮酮20ml ,尼泊金乙酯lg。 水相纯化水560 580ml ,硼砂4g ,十二垸基硫酸钠4g ，三乙醇胺10 20ml ,甘油160ml ,尿囊素3g。 药相蜕皮甾酮25g溶于75。/。乙醇10ml中做成蜕皮甾酮溶液。
(2) 、方法按以下步骤进行
① 、将油相与水相分别水浴加热至9(TC,并水浴保温；
② 、将25g蜕皮甾酮溶解于75。/。乙醇10ml中做成药相；
③ 、在高剪切乳化机以2000-6000r.min'的转速搅拌下，将水浴溶解后的油相加入到水相中；
④ 、在搅拌3-10min后，待其完全乳化，撤离水浴保温，自然冷却；
、待膏体冷却到6(TC-5(TC时，将溶解好的药相，即含25g蜕皮甾酮的乙醇溶液加入到膏体中； 、以2000-6000r.min—i的转速剪切匀质10-30min后形成微乳，继续以中低速度搅拌，使膏体均匀脱 气，温度降至42'C-35'C时停止搅拌，自然冷却至室温，则可做成浓度为2.5%的蜕皮甾酮乳膏。 ⑦、最后制成的乳膏总量控制在1000g，可用纯化水加减做到。具体实施例方式
(1)、蜕皮甾酮乳膏的量效学分析分别做成0.625%、 1.25%、 2.5%、 5%四种不同浓度的蜕皮甾酮乳膏 实施例一 配方包括如下组分
油相单硬脂酸甘油酯35g ，硬脂酸130 150g ,白凡士70g ,氮酮20ml ，尼泊金乙酯lg。 水相纯化水560 580ml ，硼砂4g ，十二烷基硫酸钠4g ，三乙醇胺10 20ml ，甘油160ml ，尿囊素3g。 药相蜕皮甾酮6. 25g溶于75y。乙醇10ml中做成蜕皮甾酮溶液。 方法按以下步骤进行
① 、将油相与水相分别水浴加热至9(TC，并水浴保温；
② 、将6.25g蜕皮甾酮溶解于75%乙醇1 Oml中做成药相；
③ 、在高剪切乳化机以2000-6000r.min'的转速搅拌下，将水浴溶解后的油相加入到水相中；
④ 、在搅拌3-10min后，待其完全乳化，撤离水浴保温，自然冷却；
⑤ 、待膏体冷却到6(TC-50'C时，将溶解好的药相，即含6.25g蜕皮甾酮的乙醇溶液加入到膏体中； 、以2000-6000r.min—i的转速剪切匀质10-30min后形成微乳，继续以中低速度搅拌，使膏体均匀脱
气，温度降至42'C-35'C时停止搅拌，自然冷却至室温，则可做成浓度为0.625%蜕皮甾酮乳膏。 ⑦、最后制成的乳膏总量控制在1000g，可用纯化水加减做到。 实施例二 配方包括如下组分
油相单硬脂酸甘油酯35g ,硬脂酸130 150g ,白凡士70g ,氮酮20ml ,尼泊金乙酯lg。 水相纯化水560 580ml ，硼砂4g ,十二烷基硫酸钠4g ，三乙醇胺10 20ml ，甘油160ml ，尿囊素3g。 药相蜕皮甾酮12. 5g溶于75y。乙醇10rnl中做成蜕皮甾酮溶液。 方法按以下步骤进行
① 、将油相与水相分别水浴加热至9(TC，并水浴保温；
② 、将12.5g蜕皮甾酮溶解于75%乙醇1 Oml中做成药相；
③ 、在高剪切乳化机以2000-6000r.mirf'的转速搅拌下，将水浴溶解后的油相加入到水相中；
④ 、在搅拌3-10min后，待其完全乳化，撤离水浴保温，自然冷却；
⑤ 、待膏体冷却到6(TC-5(TC时，将溶解好的药相，即含12.5g蜕皮甾酮的乙醇溶液加入膏体中-，
⑥ 、以2000-6000r.min-'的转速剪切匀质10-30min后形成微乳，继续以中低速度搅拌，使膏体均匀脱
气，温度降至42'C-35'C时停止搅拌，自然冷却至室温，则可做成浓度为1.25%的蜕皮甾酮乳膏。
⑦ 、最后制成的乳膏总量控制在1000g,可用纯化水加减做到。 实施例三
配方包括如下组分
油相单硬脂酸甘油酯35g ,硬脂酸130 150g ,白凡士70g ，氮酮20ml ，尼泊金乙酯lg。 水相纯化水560 580ml ，硼砂4g ，十二烷基硫酸钠4g ，三乙醇胺10 20ml ，甘油160ml ,尿囊素3g。 药相蜕皮甾酮25g溶于75y。乙醇10ml中做成蜕皮甾酮溶液。 方法按以下步骤进行
① 、将油相与水相分别水浴加热至9(TC，并水浴保温；
② 、将25g蜕皮甾酮溶解于75%乙醇1 Oml中做成药相；
③ 、在高剪切乳化机以2000-6000r.min皿'的转速搅拌下，将水浴溶解后的油相加入到水相中； 、在搅拌3-10min后，待其完全乳化，撤离水浴保温，自然冷却；
⑤、待膏体冷却到6(TC-5(TC时，将溶解好的药相，即含25g蜕皮甾酮的乙醇溶液加入到膏体中； 、以2000-6000r.min"的转速剪切匀质10-30min后形成微乳，继续以中低速度搅拌，使膏体均匀脱 气，温度降至42'C-35'C时停止搅拌，自然冷却至室温，则可做成浓度为2.5%的蜕皮甾酮乳膏。 ⑦、最后制成的乳膏总量控制在1000g，可用纯化水加减做到。
实施例四
配方包括如下组分油相单硬脂酸甘油酯35g ,硬脂酸130 150g ,白凡士70g ，氮酮20ml ,尼泊金乙酯lg。 水相纯化水560 580tnl ,硼砂4g ，十二烷基硫酸钠4g ，三乙醇胺10 20ml ，甘油160ml ，尿囊素3g。 药相蜕皮甾酮50g溶于7596乙醇10ml中做成蜕皮甾酮溶液。 方法按以下步骤进行
① 、将油相与水相分别水浴加热至9(TC，并水浴保温；
② 、将50g蜕皮甾酮溶解于75%乙醇1 Om冲做成药相；
③ 、在高剪切乳化机以2000-6000r.min'的转速搅拌下，将水浴溶解后的油相加入到水相中； 、在搅拌3-10min后，待其完全乳化，撤离水浴保温，自然冷却；
⑤ 、待膏体冷却到60'C-5(TC时，将溶解好的药相，即含50g蜕皮甾酮的乙醇溶液加入到膏体中；
⑥ 、以2000-6000r.mirT'的转速剪切匀质10-30min后形成微乳，继续以中低速度搅拌，使膏体均匀、
脱气，温度降至42'C-35'C时停止搅拌，自然冷却至室温，则可做成浓度为5%的蜕皮甾酮乳膏。
⑦ 、最后制成的乳膏总量控制在1000g,可用纯化水加减做到。 通过以上实施例，分别做成浓度为0.625%、 1.25%、 2.5%、 5%的蜕皮甾酮乳膏。 动物模型制作将新西兰大白兔背部脱毛备皮，经兔耳缘静脉予以戊巴比妥钠麻醉(35mg/kg)，背部常
规消毒，在每只兔子背部的5个位置，都用外科方法减去5块直径1.5cm的圆形全层皮肤，深达肌膜，制 成全皮层缺损动物模型。
实验分组将9只兔子成功建立创伤缺损模型后，用生理盐水冲洗伤口，碘酒、酒精消毒，每只兔子 的第一个伤口设为空白对照，只涂抹乳膏基质；第二个伤口涂抹0.625%蜕皮甾酮乳膏；第三个伤口涂抹 1.25%蜕皮甾酮乳膏；第四个伤口涂抹2.5%蜕皮甾酮乳膏；第五个伤口涂抹5%蜕皮甾酮乳膏。每个伤口 一次涂抹的乳膏总量为0.5ml。所有伤口敷药后均用凡士林油纱敷盖，再用干纱布包扎。伤口每大盐水冲 洗、酒精消毒后各用原法处理换药。每只兔分笼饲养。
指标检测其中8只兔子分别T造模当天及建模后4、 8、 12天，以同定距离、固定焦距、固定像素 分别对各个创面进行数码拍照，以imagepro plus6.0软件处理照片，得出各个创面愈合过程中的面积，并 计算伤n愈合率伤口愈合率=(原始创面面积一未愈合创面面积)/原始创面面积；第9只兔子分别于创伤 组织局部取材，常规固定、包埋、切片经HE染色。
统计学方法应用SPSS13.0软件，进行配伍组设计资料的方差分析(two-way ANOVA)。
统计结果各处理因素组4天、8天、12天后伤口愈合率的比较见表1。
表l 各处理因素组4天、8天、12天后伤口愈合率的比较(5士力
组另u4天后伤口愈合率(°/0)8天后伤口愈合率(°/。)12天后伤口愈合率(°/。)
空白对照组817.8 士 2.422.6 士 3.6"
0.625%组813.2 士2.4 32.8 士 3.6"70.2 士3.3女女"
1.2500/0组8]4.3 士2.434,7士3.6"79.2 士 3.3女*
2.500%组822.7 士 2.455.4 士3.6**國隱盍赢參*92.3 士 3.3女ab"參
5.000%组823.6 士2.化34.0 士 3.6"69.0 士3.3女女"
F0.9550.2690.055
P0.0110.0000働
★P<0.05, a女P0.01,vs空白对照组屬P0.05,羅BPO.Q，vs0.625。/。蜕皮甾酮乳育组AP0.05,▲ ▲PO.0], vsl.25。/o蜕皮甾鹏乳膏组;
PO.05, "P0.01,vs2.5。/。蜕皮甾酮乳膏组,P《0.05,拳參PO.Ol， vs5。/。蜕皮甾酮乳膏组。
术后4天，五组愈合率比较，8只兔子之间无显著性差异(F<1),各处理因素组之间的比较有意义 (P<0.05)。其中除5%蜕皮甾酮乳膏组与0.625%蜕皮甾酮乳膏组之间差异有显著性意义(P<0.05)， 5%蜕 皮甾酮乳膏组伤口愈合较快以外，其他各组之间的差异无显著性意义(P>0.05)。
术后8天，五组愈合率比较，8只兔子之间差异无显著性意义(F〈)，各处理因素组之间的比较有意义 (PO.Ol)。其中2.5°/。蜕皮甾酮乳膏组与其余各组之间差异有显著性意义(PO.Ol)， 2.5%蜕皮甾酮乳膏组 较其余各组伤口愈合较快；除2.5%蜕皮甾酮乳膏组外，其余各组之间差异无显著性意义(P>0.05)。
术后12天，五组愈合率比较，8只兔子之间差异无显著性意义(FO,各处理因素组之间的比较有意义(PO.Ol)。其中空白对照组与其余各组之间差异有显著性意义(P<0.01)，空白对照组较其余各组伤口 愈合较慢。而2.5。/。蜕皮甾酮乳膏组与空白对照组、0.625%蜕皮甾酮乳膏组、5%蜕皮甾酮乳膏组之间差异 有显著性意义(PO.01), 2.5%蜕皮甾酮乳膏组伤口愈合较快；2.5%蜕皮甾酮乳膏组与1.25%蜕皮甾酮乳膏 组之间差异无显著性意义(P>0.05)。
各浓度蜕皮甾酮乳膏愈合率对比曲线图见"说明书附图"之图1。
肉眼观察
术后4天，各处理因素组创面均红肿、湿润，无明显脓液形成，无明显感染，伤口收縮不明显。
术后8天，空白对照组仍明显渗出，个别伤口出现溃疡，创面的收缩与蜕皮甾酮乳膏各浓度组相比有 差异。而2.5%蜕皮甾酮乳膏组伤口湿润、无感染，伤口表面及皮下组织收縮明显，愈合最快；
术后12天，蜕皮甾酮乳膏各浓度组伤口进一步收缩，创面干燥，表面结厚痂，创面愈合较快，创面 大部分已经愈合；尤其是2.5%蜕皮甾酮乳膏组已经接近完全愈合，创面基本消失。而正常对照组伤口面积 较术后8大有明显收縮，创面边缘结痂，但仍有很大面积没有愈合。
显微观察
术后4天，五组伤口均以渗出和充血为主，未见肉芽组织明显增生，五组比较无明显差异。
术后8天，空白对照组最主要特点是化脓明显伴溃疡形成，上皮增生不明显。各浓度蜕皮甾酮乳膏组 创面虽有渗出，但肉芽组织初步形成，少许炎性细胞浸润，胶原开始形成，上皮细胞少许增生。
术后12犬，空白对照组表皮仍有部分缺损，炎性细胞大量渗出，仅少许肉芽组织形成，上皮细胞少 量增生。各浓度蛻皮甾酮乳膏组有较多肉芽组织形成，真皮与表皮连接处少许炎性细胞浸润；胶原明显形 成，上皮细胞及纤维细胞增生明显。
讨论
蜕皮甾酮又名e-蜕皮激素，是一种土要从植物中提取的有效药物成分。蜕皮甾酮对于高等动物有较强 的生理活性。目前蜕皮甾酮主要应用丁(l)强壮剂(2)化妆品;(3航抑郁剂;(4)治疗糖尿病;(5)降血脂;(6) 抗心律失常；(7)抗肿瘤制剂；(8)消炎药等方面。本研究主要是考察蜕皮甾酮在制备成乳膏制剂后在促进创 伤愈合方面的功效。
在愈合过程中，通过观察伤口面积逐步收縮的情况，可以直接了解其愈合状况。如果伤口愈合较快， 则其伤口面积必然缩小较快。又因伤口愈合率=(原始创面面积一未愈合创面面积)/原始创面面积，所以， 伤口愈合快者，其伤口愈合率必然较大。本研究通过比较空白对照组(赋形剂组)及四种浓度的蜕皮甾酮 组伤口的愈合率，可以看出伤口愈合早期(4d),各组间差异不大，此时伤口主要处于炎症水肿期，创
面以充血渗出为主，各种组织细胞的增值只是在起始阶段，所以即使有外用药帮助，对伤口愈合速度影响
不大；而在伤口愈合中期(8d)，各种组织细胞处于快速增值阶段，这时外用药的促愈作用体现的比较明 显，可以看出2.5%蜕皮甾酮乳膏的伤口愈合明显快丁-其他各组；而随着愈合时间的延伸(12d),只涂抹乳 膏基质的空白对照组(赋形剂组)的劣势越来越明显，其伤口愈合明显慢于其他各组，相反，2.5%蜕皮甾 酮乳膏组的愈合速度还是明显优于其他各组，但领先1.25%蜕皮甾酮乳膏组的优势已没有原来那么大。通 过此研究可以看出蜕皮甾酮乳膏确实有促进创伤愈合的作用，且2.5%蜕皮甾酮乳膏在创伤动物模型实验 中促愈效果最好，为其最佳有效浓度。
伤口愈合是十分复杂的生物学过程，包括伤口早期止血、创面保护、炎症控制及多种组织细胞的增生， 新生血管的形成，肉芽组织的形成，创缘的爬行收縮等。肉芽组织在创伤修复过程中起抗感染及保护创面、 机化凝血块及坏死组织、填补伤口等作用，因此，有无健康肉芽组织生长及其生长速度是伤口愈合的关键。 而内皮细胞、上皮细胞及成纤维细胞等细胞的增值又是形成肉芽组织的关键。本实验中，通过病理切片观 察，空白对照组创面炎细胞大量渗出，肉芽组织形成及上皮细胞增生缓慢。而2.5。/。蜕皮甾酮乳膏组肉芽组 织生长速度最快，上皮细胞、内皮细胞和成纤维细胞的快速增值，使上皮爬行速度增快，新生的毛细血管 较多，胶原形成明显，创面于造模后12d基本愈合。这也说明了为什么蜕皮甾酮乳膏有促进伤口愈合的作 用。其药理作用机制可能是蜕皮甾酮本身有促进蛋白质合成及蛋白质同化作用，同时触发了细胞DWA的 合成。
(2)、最佳有效浓度的蜕皮甾酮乳膏(即2.5 %蜕皮甾酮乳膏)与空白对照(只涂抹乳膏基质的赋形剂组)、 云南白药创可贴的疗效对比观察。动物模型制作将新西兰大白兔背部脱毛备皮，经兔耳缘静脉予以戊巴比妥钠麻醉(35mg/kg)，背部常 规消毒，在每只兔子背部的3个位置，都用外科方法减去3块直径1.5cm的圆形全层皮肤，深达肌膜，制 成全皮层缺损动物模型的创面。
实验分组将9只兔子成功建立创伤缺损模型后，用生理盐水冲洗伤口，碘酒、酒精消毒，每只兔子 的第一个伤口设为空白对照，只涂抹乳膏基质；第二个伤口涂抹2.5%蜕皮甾酮乳膏笫三个伤口覆盖云南 白药创可贴。前两个伤口一次涂抹的乳膏总量为0.5ml，伤口敷药后均用凡士林油纱敷盖，再用干纱布包 扎。伤口每天盐水冲洗、酒精消毒后各用原法处理换药。每只兔分笼饲养。
指标检测同以上量效分析实验时的指标检测。
统计学方法应用SPSS13.0软件，进行配伍组设计资料的方差分析(two-way ANOVA)。 统计结果各处理因素组4天、8天、12天后伤口愈合率的比较见表2。
表2各处理因素组4天、8天、12天后伤口愈合率的比较(5士s)
组另l」4天后伤口愈合率(％)8天后伤口愈合率(％)12天后伤口愈合率(％)
空白对照组81 7 . 8 士 2 . 7 2 2.6士3.7"令令3 3.4 士 2.2
蜕皮甾酮组82 2 . 7 士 2 . 7 5 5 . 4 士 3 . 7 ★★
云南白药组83 3 . 5 士 2 . 7 ★6 6.0士3.7a8 7 . 7 士 2 . 2 ★★
F0.9870.2970.743
P0 . 0 [) 30.0000.000
★P<0.05, A女P0.01, vs空白对照组,"P0.01， vs2.5。/。蜕皮甾酮乳膏组令P0.05,争余P0.01, vs云南白药组。
术后4大，五组愈合率比较，8只兔子之间差异无显著性意义(F〈)，各处理因素组之间的比较有意义 (PO.01 )。其中2.5%蜕皮甾酮乳膏组与空白对照组之间差异无显著性意义(P>0.05);而云南白药创可 贴组与空白对照组组之间差异有显著性意义(P<0.01)，云南白药创可贴组愈合较快；2.5%蜕皮甾酮乳 膏组与云南白药创可贴组之间的差异有显著性意义(P<0.05)，云南白药创可贴组愈合较快。
术后8天，五组愈合率比较，8只兔子之间差异无显著性意义(FO，各处理因素组之间的比较有意义 (PO.01 )。其中2.5%蜕皮甾酮乳膏组与云南白药创可贴组之间差异无显著性意义(P>0.05);而云南白 药创可贴组与空白对照组组之间差异有显著性意义(P<0.01)，云南白药创可贴组愈合较快；2.5 %蜕皮 甾酮乳膏组与空白对照组之间的差异有显著性意义(PO.01 )， 2 . 5 %蜕皮甾酮乳膏组愈合较快。
术后12天，五组愈合率比较，8只兔子之间差异无显著性意义(FO，各处理因素组之间的比较有意 义(PO.0 1 )。其中2.5%蜕皮甾酮乳膏组与云南白药创可贴组之间差异无显著性意义(P>0.05);而云南 白药创可贴组与空白对照组组之间差异有显著性意义(P<0.01)，云南白药创可贴组愈合较快；2.5 %蜕 皮甾酮乳膏组与空A对照组之间的差异有显著性意义(P<0.01), 2 . 5 %蜕皮甾酮乳膏组愈合较快。
空白对照组、2.5%蛻皮甾酮乳膏组、云南白药创可贴组愈合率对比线性图表见"说明书附图"之图2。
肉眼观察
术后4天，各处理因素组创面均红肿、湿润，无明显脓液形成，无明显感染，伤口收縮不明显。 术后8天，空白对照组仍明显渗出，个别伤口出现溃疡，创面的收縮与蜕皮甾酮乳膏组及云南白药创 可贴组相比有差异。后两组伤口湿润、无感染，伤口表面及皮下组织收缩明显。
术后12天，蜕皮甾酮乳膏组及云南白药创可贴组伤口进一步收缩，创面干燥，表面结厚痂，创面愈 合较快，创面大部分己经愈合；尤其是2.5%蜕皮甾酮乳膏组已经接近完全愈合，创面基本消失。而正常对 照组伤口面积较术后8天有明显收縮，创面边缘结痂，但仍有很大面积没有愈合。
显微观察
术后4大，三组伤口均以渗出和充血为主，未见肉芽组织明显增生，三组比较无明显差异。 术后8天，空白对照组最主要特点是化脓明显伴溃疡形成，上皮增生不明显。蜕皮甾酮乳膏组创面虽 有渗岀，但肉芽组织初步形成，少许炎性细胞浸润，胶原开始形成，上皮细胞少许增生。云南白药创可贴 组创面干燥，肉芽组织初步形成，少许炎性细胞浸润，但胶原、内皮细胞及上皮细胞增生较少。
术后12天，空白对照组表皮仍有部分缺损，炎性细胞大量渗出，仅少许肉芽组织形成，上皮细胞少量增生。蜕皮甾酮乳膏组有较多肉芽组织形成，真皮与表皮连接处少许炎细胞浸润，胶原明显形成，上皮 细胞及纤维细胞增生明显。云南白药创可贴组创面干燥，肉芽组织形成，少许炎性细胞浸润，胶原、内皮 细胞及上皮细胞增生，但不如蜕皮甾酮乳膏组增生活跃。 讨论
本实验中，空白对照组伤口愈合率明显低于蜕皮甾酮乳膏组及云南白药组，且仅少许肉芽组织形成， 上皮细胞少量增生，增生速度很慢。而2.5%蜕皮甾酮乳膏组与云南白药创可贴组创面肉芽组织生长速度最 快，新生的毛细血.管较多，胶原形成明显，创面于术后12天基本愈合。云南白药创可贴组与2.5%蜕皮甾 酮乳膏组愈合效果相似。但显微观察显示，创伤早期，云南白药创可贴组的止血效果好于蜕皮甾酮软膏组， 所以早期云南白药创可贴促愈效果好于蜕皮甾酮乳膏；但是，中晚期蜕皮甾酮乳膏组的内皮细胞、上皮细 胞及胶原的数量多丁-云南白药创可贴组，所以蜕皮甾酮乳膏组在创伤愈合后期的平均伤口愈合率也稍大于 云南白药创可贴组。
总之，2.5%蜕皮甾酮乳膏及云南白药都有促进伤口愈合的作用，整体来说，两者疗效相似。但，创伤 早期，云南白药效果稍好于蜕皮甾酮乳膏；而创伤中晚期，蜕皮甾酮乳膏愈创效果稍好于云南白药。虽然 两者总体促愈效果相似，但作用机理不同导致了在创伤早、晚期的愈合效果稍有差异。
图1:为各浓度蜕皮甾酮乳膏组伤口愈合率的对比曲线图。可见所有蜕皮甾酮乳膏组伤口愈合率均好
于空白对照组，其中2.5%组伤口愈合率明显好于其他各组，是蜕皮甾酮乳膏的最佳有效浓度。
图2:为空白对照组、2.5%蜕皮甾酮乳膏组、云南白药创可贴组伤口愈合率的对比曲线图。可见蜕皮
甾酮乳膏组及云南白药创可贴组伤口愈合率均好于空白对照组，蜕皮甾酮乳膏组与云南白药创可贴组伤口 愈合率差别不大。
权利要求
1、一种蜕皮甾酮临床药理作用的新研究，即蜕皮甾酮在促进创伤愈合方面的新进展和新探索，主要包括以下几个方面(1)、蜕皮甾酮在促进皮肤挫裂伤愈合方面的应用；(2)、蜕皮甾酮在促进皮肤烫伤愈合方面的应用；(3)、蜕皮甾酮在促进手术切口愈合方面的应用；(4)、蜕皮甾酮在促进食管、胃肠道各种瘘口愈合方面的应用；(5)、蜕皮甾酮在支气管胸膜瘘愈合方面的应用。
2、 一种促进伤口愈合的蜕皮甾酮乳膏，其特征在于配方包括如下组分 油相单硬脂酸甘油酯35g ，硬脂酸130 150g ，白凡士70g ,氮酮20ml ，尼泊金乙酯lg。水相纯化水560 580ml ，硼砂4g ，十二垸基硫酸钠4g ，三乙醇胺10 20ml ，甘油160ml ,尿囊素3g。药相蜕皮甾酮25g溶于75。/。乙醇10ml中做成蜕皮甾酮溶液。最后制成的乳膏总量控制在1000g，可用纯化水加减做到。
3、 一种促进伤口愈合的蜕皮甾酮乳膏的制备方法，其特征在于按以下步骤进行(1) 、配方包括如下组分油相单硬脂酸甘油酯35g ,硬脂酸130 150g ，白凡士70g ，氮酮20ml ,尼泊金乙酯lg。 水相纯化水560 580ml ,硼砂4g ，十二烷基硫酸钠4g ，三乙醇胺10 20ml ，甘油160,nl ,尿囊素3g。 药相蜕皮甾酮25g溶于75。/。乙醇10ml中做成蜕皮甾酮溶液。(2) 、方法按以下步骤进行首先将油相与水相分别水浴加热至9(TC，并水浴保温；其后将25g蜕皮甾酮溶解于75n/。乙醇I0ml中 做成药相；然后在高剪切乳化机以2000-6000r.min'的转速搅拌下，将水浴溶解后的油相加入到水相中；在 搅拌3-10min后，待其完全乳化，撤离水浴保温，自然冷却；待膏体冷却到6(TC-50'C时，将溶解好的药相， 即含25g蜕皮甾酮的乙醇溶液加入到膏体中；以2000-6000r.min"的转速剪切匀质10-30min后形成微乳，继 续以中低速度搅拌，使膏体均匀脱气，温度降至42'C-35'C时停止搅拌，自然冷却至室温，则可做成浓度为 2.5%的蜕皮甾酮乳膏。最后制成的乳膏总量控制在1000g,可用纯化水加减做到。
全文摘要
本发明提供了一种能够促进伤口愈合的乳膏制剂的制备方法。其组分包括单硬脂酸甘油酯，硬脂酸，白凡士，氮酮，尼泊金乙酯，纯化水，硼砂，十二烷基硫酸钠，三乙醇胺，甘油，尿囊素，蜕皮甾酮，乙醇。其中主要药效部分为蜕皮甾酮，能够显著促进内皮细胞、上皮细胞及成纤维细胞增殖，其机制为蜕皮甾酮能促进蛋白质的合成及触发了细胞DNA的合成。本发明的乳膏制剂具有无过敏性、无刺激性、容易吸收、疗效显著、价格低廉、携带方便等优点。并通过实验证实确有促进伤口愈合之功效，与云南白药相仿，但疗效各有千秋。
文档编号A61P43/00GK101416969SQ200710030970
公开日2009年4月29日 申请日期2007年10月22日 优先权日2007年10月22日
发明者旭 吴, 张军花, 郑高云 申请人:吴 旭;郑高云;张军花