治疗肩周炎的中药组合物和质量控制方法

专利名称：：治疗肩周炎的中药组合物和质量控制方法
技术领域：
：本发明涉及以中药材为原料的药物组合物，具体是一种治疗肩周炎的中药组合物及其质量控制方法。
背景技术：
：肩周炎是肩关节周围肌肉、肌腱、滑囊和关节囊等软组织的慢性无菌性炎症。炎症导致关节内外粘连，从而影响肩关节的活动。其病变特点是疼痛广泛、功能受限广泛、压痛广泛。肩周炎的全称是肩关节周围炎，本病好发于50岁左右的人，中医认为，肩周炎乃风寒湿邪侵袭肩周筋脉所引起的慢性疾病。内因营卫虚弱，筋骨衰颓，外邪乘虚而入，伤及肩周筋脉，致使气血不通而痛。若过力劳伤，血瘀气滞均可导致肩痛凝滞，肩痛日久，则筋脉失'养，而见肩部肌肉萎陷，关节僵硬。在中国药品监督管理局颁布的新药转正标准中药第23册(国家标准WS3-314(Z-046)-99(Z))中公开了一种祛痹舒肩丸的处方及其制备工艺，处方为桂枝450g、羌活450g、黄芪675g、骨碎补450g、淫羊藿675g、威灵仙675g、秦艽450g、当归450g、三七135g、黄精675g、巴戟天270g、延胡索(醋制)315g、夏天无180g、地龙675g，制备工艺如下羌活、夏天无、桂枝、秦艽、威灵仙照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法(中国药典2005年版一部附录)，用75%乙醇渗漉，收集漉液，回收乙醇，浓縮，制成干膏粉，备用。地龙加75%乙醇浸渍二次，每次72小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓縮至相对密度为1.30(25X:)的稠膏，备用。黄精、骨碎补、淫羊藿、黄芪、当.归、巴戟天加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至相对i度为1.25(25。C)的稠膏，加乙醇使含醇量为75%，静置48小时，滤过，滤液回收乙醇，浓縮，制成干膏粉，备用。三七、延胡索粉碎成细粉，过筛,备用。取上述干膏粉和、三七、延胡索细粉，混匀，再加入稠膏，制丸，干燥，打光，制成1000g,即得。标准规定了lg产品中含延胡索乙素不低于0.10mg。祛痹舒肩丸为浓縮小丸，由于处方中延胡索(醋制)以药材细粉直接入药，工艺相对落后，使制剂一次服用剂量过大，每次要服用7.5g，每天二次，一天服用15g，降低了患者的依从性，为了减少服用剂量和提高药品的质量，有必要改进原有的制备方法，制备一种新的治疗肩周炎的中药制剂。国家标准WS3-314(Z-046)-99(Z)还公开了测定祛痹舒肩丸产品中延胡索乙素含量的方法是一种薄层扫描法。薄层扫描法测定偏差较大是本领域公认的常识，因此有必要寻找新的测定产品中含有延胡索乙素的方法。
发明内容本发明的目的是克服原有祛痹舒肩丸用量过大，服用不便的缺点，达到降低服用量，提高产品的质量，增加疗效的目的；本发明的另一目的是提供测定产品中延胡索乙素含量的方法，来有效地控制产品的质量。本发明采用如下技术方案来实现的称取下列重量份的中药材桂枝450份羌活450份黄芪675份骨碎补450份淫羊藿675份威灵仙675份秦艽450份醋制延胡索315份当归450份黄精675份巴戟天270份夏天无180份地龙675份三七135份其中羌活、夏天无、桂枝、秦艽、威灵仙用75%乙醇采用渗漉法制得干膏粉1，具体方法同祛痹舒肩丸的制备方法；地龙用75%乙醇采用浸渍法制得稠膏2，具体方法同祛痹舒肩丸的制备方法；黄精、骨碎补、淫羊藿、黄芪、当归、巴戟天采用水提醇沉法制得干膏粉3，具体方法同祛痹舒肩丸的制备方法；三七粉碎成细粉，全部通过80目筛，得三七细粉；醋制延胡索采用水提乙醇沉淀法或用体积浓度为6585%的乙醇回流提取法或用体积浓度为6585°/。的乙醇渗漉法提取，浓縮制得稠膏4，取上述干膏粉l、稠膏2、干膏粉3、三七细粉、稠膏4混合得中药组合物，lg中药组合物干品中含延胡索乙素0.130.22mg。中药组合物可添加或不添加药学上允许的常规辅料，如崩解剂、润滑剂、黏合剂等用常规的中药制剂工艺制备成任何一种常用的中药口服剂型，如丸剂、胶襄剂、片剂、散剂、颗粒剂等。醋制延胡索的水提醇沉法及乙醇回流提取法均采用中药提取的常规法，在此不予叙述，本发明优选采用乙醇渗漉法提取，具体是取醋制延胡索粉碎成全部通过816目(粒径2363"m991um)的粗粉，用体积浓度为6585%乙醇浸泡6小时以上后开始渗漉，乙醇用量为醋制延胡索重量的610倍，渗漉速度为26ml/min，收集渗漉液，回收乙醇，并浓縮至40。C时温度测定相对密度为1.201.40的稠膏4。醋制延胡索的渗漉法提取工艺条件是通过下面的正交试验来确定的。取延胡索粉末，每份400g，精密称量，共9份，用选定浓度的乙醇润湿2h后装柱,浸泡6h,用选定的各条件试验收集渗漉液，漉液回收乙醇后、浓縮、干燥得固形物，采用下面的高效液相色谱法测定固形物中延胡索乙素的含量，计算延胡索乙素转移率。结果见表l、表2。表l、渗漉法提取延胡索乙素正交试验方案和结果序号粉末粗细(目)乙醇浓度(％)乙醇倍数渗漉速度(ml/min)延胡索乙素转移率(%)延胡索乙素含量(％)固形物得率(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>表2、渗漉法提取正交试验方差分析<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>结果表明，醋制延胡索粉碎成全部通过8、12、16目的粗粉，用体积浓度为65%、75%、85%乙醇浸泡6小时以上后开始渗漉，乙醇用量为醋制延胡索重量的6、8、10倍，渗漉速度为2、4、6ml/niiri均能有效地提取延胡索乙素，但各因素对延胡索乙素提取效果的影响程度是不同的，以乙醇浓度>乙醇倍数>粉末粗细>渗漉速度，即乙醇浓度对提取效果的影响最大，其次是乙醇用量，再次是粉末粗细和渗漉速度。各因素对提取固形物提取率的影响程度为乙醇浓度>渗漉速度>乙醇倍数>粉末粗细。以延胡索乙素转移率为主要指标，综合考虑固形物提取率的影响，用延胡索通过8目(筛孔内径2363um)的粗粉，IO倍量的75%乙醇以4ml/min的速度渗漉为最佳提取方案。取延胡索药材测定，延胡索乙素转移率可达94.2%,而固形物量5.8%，可认为延胡索乙素已基本提尽。说明本工艺是可行的，并具有简便、实用、经济科学的特点。以下通过药效试验来说明本发明所提供的治疗肩周炎的中药组合物的有一、抗炎实验(一)对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀的影响i目的比较大鼠连续口服本发明的中药组合物与原祛痹舒肩丸对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀的影响，来评价其抗炎作用。2材料2.1试药祛痹舒肩丸按国家标准WS3-314(Z-046)>99(Z)规定的处方及其制备工艺制备，30g/瓶，批号20080201。试验组药采用下面实施例1的产品。2.2动物SD大鼠60只，SPF级，体重180220g，雄性。试验前在温度24-26°C，湿度60-70%下适应性饲养3天。3方法将实验大鼠随机分为6组，每组10只。正常对照组给予等体积生理盐水；醋酸泼尼松组给予醋酸泼尼松10mg/kg;祛痹舒肩丸组2.8g/kg;试验组小剂量组0.35g/kg、中剂量组0.7g/kg、大剂量组1.4g/kg;药物用生理盐水稀释，给药容量均为0.2mL/10g体重。连续灌胃给药7天，末次给药后30min，用游标卡尺测定每只大鼠右足足趾厚度后，于每只大鼠右足足趾皮下注入1%角叉菜胶混悬液O.lmL致炎。致炎后每膈1小时各测一次足趾肿胀度，连续6次，记录结果。按下式计算肿胀率肿胀率-(致炎后足趾厚度一致炎前足趾厚度)/致炎前足趾厚度X100X。实验数据采用spssl3.0软件ANOVA程序，组间比较进行单因素方差分析。4结果如表3所示，试验组大、中、小剂量组与对照组比较，致炎后2h、3h肿胀率明显减轻(PO.01或0.05)，作用与祛痹舒肩丸相似。醋酸泼尼松组与对照组比较，致炎后2h、3h、4h肿胀率明显减轻(P<0.01或0.05)。_表3中药组合物对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀率的影响(S")_<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注与对照组比较*P<0.05;**P<0.015结论本发明的组合物降低角叉菜胶致大鼠足趾肿胀率的作用与原祛痹舒肩丸类似，但剂量明显减少，仅为原祛痹舒肩丸的l/8l/2。本实验表明大鼠连续灌胃给药后23h，可明显降低角叉菜胶致大鼠足趾肿胀率。(二)对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响1目的比较小鼠连续口服本发明的中药组合物与原祛痹舒肩丸，对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响，来评价其抗炎作用。2材料2.1试药试验组采用实施例1的样品；祛痹舒肩丸按国家标准规定的处方及其制备工艺制备，30g/瓶，批号20080201。2.2动物MH小鼠60只，SPF级，体重1822g，雌雄各半，试验前在温度24-26°C，湿度60-70%下适应性饲养3天。3方法将实验小鼠随机分为正常对照组、阿司匹林组、祛痹舒肩丸组、试验组小、中、大剂量组，每组10只。正常对照组给予等量生理盐水；阿司匹林组给予阿司匹林0.4g/kg;祛痹舒肩丸组4g/kg;试验组小剂量组0.5g/kg、中剂量组lg/kg、大剂量组2g/kg;药物用生理盐水稀释，给药容量均为0.2mL/10g体重。连续灌胃给药7天；各组末次给药后lh，将O.lmL二甲苯涂于小鼠右耳耳廓两面致炎，左耳不涂为对照，致炎后lh处死小鼠，沿耳廓基线剪下两耳，于同一部位用直径7mm的打孔器打下左右耳片，称重，以左右耳片重量之差作为肿胀度，计算肿胀抑制百分率。抑制率(％)=(l-给药组两耳片重量差/对照组两耳片重量差)X100%。实验数据采用spssl3.0软件ANOVA程序，组间比较进行单因素方差分析。4结果如表4所示，试验组大、中、小剂量组与对照组比较，可明显抑制小鼠耳廓肿胀(P〈0.01)。阿司匹林组与对照组比较，也可明显抑制小鼠耳廓肿胀(PO.01)。表4中药组合物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(；化)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注与对照组比较*P<0.05:"PO.Ol本发明中药组合物可明显抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀，作用优于原祛痹舒肩丸，且剂量也可明显降低。本实验表明小鼠连续灌胃祛痹舒肩制剂后，可明显抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀，具有抗炎作用。二、镇痛实验(一)对醋酸致小鼠扭体反应的影响1目的比较小鼠连续口服本发明的中药组合物与原祛痹舒肩丸后，对醋酸致小鼠扭体反应的影响，来评价镇痛作用。2材料2.1试药试验组采用下面实施例1的样品；祛痹舒肩丸按国家标准规定的处方及其制备工艺制备，30g/瓶，批号20080201。2.2动物NIH小鼠60只，SPF级，体重1822g，雌雄各半，试验前在温度24-26°C，湿度60-70%下适应性饲养3天。3方法将实验小鼠随机分为6组，每组10只。正常对照组给予等量生理盐水；阿司匹林组给予阿司匹林0.4g/kg;祛痹舒肩丸组4g/kg;试验组小剂量组0.5g/kg、中剂量组1g/kg、大剂量组2g/kg;药物用生理盐水稀释，给药容量均为0.2mL/10g体重；连续灌胃给药7天。各组末次给药后lh,分别腹腔注射0.8%冰醋酸0.1mL/10g体重，以诱发扭体反应(伸展后肢，腹部收縮内凹，同时躯体扭曲)，计算注射醋酸后15min内每只小鼠的扭体反应次数，按下式计算抑制率抑制率(％)=(l-给药组扭体反应次粉对照组扭体反应次数)X100%。实验数据采用spssl3.0软件ANOVA程序，组间比较进行单因素方差分析。4结果如表5所示，试验组小剂量组与对照组比较，可明显减少醋酸致小鼠扭体反应的次数(P<0.05)。阿司匹林组与对照组比较，也可明显减少醋酸致小鼠扭体反应的次数(PO.Ol)。表5中药组合物对醋酸致小鼠扭体反应的影响(lis)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注与对照组比较*P<0.05;"PO,Ol5结论试验组小剂量组可明显减少醋酸致小鼠扭体反应的次数，具有一定的镇痛作用作用优于旧制剂祛痹舒肩丸，且剂量也可明显降低。(二)对热板致小鼠痛闺的影响1目的比较小鼠连续口服本发明的中药组合物与原祛痹舒肩丸后，对热板致小鼠痛阈变化的影响来评价镇痛作用。2材料2.1试验组采用下面实施例1的样品；祛痹舒肩丸按国家标准规定的处方及其制备工艺制备，30g/瓶，批号20080201。2.2动物NIH小鼠60只，SPF级，体重1822g，雌性，试验前在温度24-26°C，湿度60-70%下适应性饲养3天。3方法给药前将雌性小鼠放于(55±0.5)'。热板仪上，以鼠舔后足作为痛反应指标，选用潜伏期530s小鼠60只。将实验小鼠随机分为6组，每组10只。正常对照组给予等量生理盐水；阿司匹林组给予阿司匹林0.4g/kg;祛痹舒肩丸组4g/kg;试验组小剂量组0.5g/kg、中剂量组lg/kg、大剂量组2g/kg;药物用生理盐水稀释，给药容量均为0.2mL/10g体重；连续灌胃给药7天。末次给药前及给药15，30,60，90，120min分别测定各鼠痛反应的潜伏期(痛阈)。实验数据采用spssl3.0软件ANOVA程序，组间比较进行单因素方差分析。4结果iw衣o/71/J、，lA祖^tLT丌U里^i5^乂口min巧/vj""aiuL仪，n力业处"Pi'j、epwffl阈值(P<0.05)。阿司匹林组药后60min与对照组比较，也可明显延长小鼠痛阈值(P<0.05)。_表6中药组合物对热板致小鼠痛阈的影响(7")_组别w给药前给药后ss15min30min60min90min120min对照组1012.9±3.514.2±3.110.8±3.212.6±1.812.6±4.912.4±6.0阿司匹林组1014.2±2.413.1±4.311.0±2.719.4±5.6*10.0±5.315.3±5.2祛痹舒肩丸组1016.1±4.818.4±10.214.3±6.915.9±8.118.0±10.819.0±11.2试小1013.3±3.112.0±5.212.2±4.114.5±7.014.9±10.020.4±11.8验中1014.5±3.011.5±4.811.6±3.420.2±6."16,4±6.017.7±13.5组大1016.4±4.713.0±3.313.4±3.719.0±2.716.2±4.917.7±6.2注与对照组比较*P<0.05本实验表明小鼠连续灌胃本产品，在给药后60min中剂量组可明显延长小鼠痛阈值，具有一定的镇痛作用。大剂量组药后60min也可延长小鼠痛阈值，但无统计意义。试验组作用稍优于原祛痹舒肩丸，且剂量也可明显降低。结论通过上述的抗炎、镇痛作用4项实验证明本发明所提供的治疗肩周炎的中药组合物具有一定的抗炎、镇痛作用，效果优于原祛痹舒肩丸，且剂量可降低，仅为原制剂的1/81/2，降低服用剂量而提高了疗效，达到了预期的研究目的。为实施本发明的另一目的，所采用的技术方案是建立HPLC法控制本发明所提供的治疗肩周炎的中药组合物质量的方法，具体是用高效液相色谱法测定中药组合物中延胡索乙素的含量，具体按如下步骤进行A.色谱条件色谱柱为ds柱，流动相是PH值为4.0的乙腈0.1。/。磷酸溶液体积比为20:80的溶液，流速为l.Omlmin"，检测波长为280nm，柱温为室温；B.对照品溶液的制备精密称取延胡索乙素对照品，用甲醇溶解配制成0.2000mgml"浓度，为照品溶液；C.供试品溶液的制备精密称取中药组合物2.5g，置具塞锥形瓶中，加浓氨试液甲醇体积比为l:20的溶液50inl，超声IO分钟以上，放冷，摇匀，滤过，残渣用甲醇洗涤3次，每次10ml，合并滤液和洗液，低温蒸干，残渣加水lOml使溶解，加浓氨试液调pH值至1112，用乙醚萃取3次，每次10ml，合并乙醚液，低温蒸干，残渣加甲醇使溶解，定容至10ml，用微孔滤膜过滤，取续滤液，即得供试品溶液；D.分别取对照品溶液与供试品溶液各以20uL进样，理论塔板数按延胡索乙素峰计算应不低于3000，用外标法定量计算lg中药组合物干品中含延胡索乙素该方法灵敏度高，重现性好，结果准确可靠，可作为有效控制质量的方法。下面通过具体试验例证明HPLC法测定产品中延胡索乙素含量的有益效果。图1为制备本发明的中药组合物的工艺流程图下面结合实施例和附图进一步阐述本发明的技术方案具体实施例方式实施例1制备治疗肩周炎的中药组合物如图1所示，称取桂枝4.5Kg、羌活4.5Kg、黄芪6.75Kg、骨碎补4.5Kg、淫羊藿6.75Kg、威灵仙6.75Kg、秦艽4.5Kg、当归4.5Kg、三七1.35Kg、黄精6.75Kg、巴戟天2.7Kg、醋制延胡索3.15Kg、夏天无1.8Kg、地龙6.75Kg取羌活、夏天无、桂枝、秦艽、威灵仙用75。/。乙醇220L渗漉，漉液回收乙醇，减压浓縮至40'C时测定的相对密度L30的稠膏，真空干燥，粉碎过80目筛，得千膏粉l，称重得1945g;取地龙，粉碎成8目粗粉，装入浸渍容器，浸渍2次，每次加275%乙醇浸渍48小时，过滤，合并滤液，减压回收乙醇，浓縮成稠膏2，相对密度1.32(25'C下测)，稠膏称重386g,稠膏水分16.6。/。，折合含固形物322g;取黄精、骨碎补、淫羊藿、黄芪、当归、巴戟天加水煎煮二次，每次加水250L煎煮2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至相对密度为1.25的稠膏(25'C下测)，加乙醇使含醇量为75%，静置48小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩，真空干燥，粉碎过80目筛，得干膏粉3，称重得1908g;取三七粉碎成细粉，过80目筛，得三七细粉备用，称重得1350g;取延胡索，粉碎成全部通过8目筛的粗粉，混合均匀，先用75Q/。乙醇3L湿润，装入渗漉筒，密闭浸渍12小时，用75。/。乙醇35L渗漉，渗漉速度为4ml/min，回收乙醇，漉液浓縮至40'C时测定的相对密度1.30的稠膏4备用，稠膏4称重242g,稠膏水分22.0%，折合干品为189g。将上述干膏粉l、稠膏2、干膏粉3、三七细粉、稠膏4混合得组合物，干燥干品共计5714g，用高效液相色谱法测定lg中药组合物干品中含延胡索乙素0.176mg,具体测定方法见实施例9。实施例2制备治疗肩周炎的中药组合物称取桂枝4.5Kg、羌活4.5Kg、黄芪6.75Kg、骨碎补4.5Kg、淫羊藿6.75Kg、威灵仙6.75Kg、秦艽4.5Kg、当归4.5Kg、三七1.35Kg、黄精6.75Kg、巴戟天2.7Kg、醋制延胡索3.15Kg、夏天无1.8Kg、地龙6.75Kg干膏粉l、稠膏2、干膏粉3、三七细粉同实施例l;取延胡索，用水煎煮二次，每次加水32L煎煮2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至40。C时测定的相对密度1.25稠膏，称重450g，加95%的乙醇1700ml使含醇量为75%，静置24小时，过滤，减压回收乙醇，滤液浓縮至40'C时测定的相对密度L30稠膏4，稠膏称重343g，稠膏水分22.0in/。，折合含固形物268g。将上述干膏粉1、稠膏2、干膏粉3、三七细粉、稠膏4混合得中药组合物干品共计5793g，测定lg中药组合物干品中含延胡索乙素0.13mg。实施例3制备治疗肩周炎的中药组合物称取桂枝4.5Kg、羌活4.5Kg、黄芪6.75Kg、骨碎补4.5Kg、淫羊藿6.75Kg、威灵仙6.75Kg、秦艽4.5Kg、当归4.5Kg、三七1.35Kg、黄精6.75Kg、巴戟天2.7Kg、醋制延胡索3.15Kg、夏天无1.8Kg、地龙6.75Kg干膏粉l、稠膏2、干膏粉3、三七细粉同实施例l;取延胡索，加75%的乙醇回流提取二次，每次20L2小时，合并醇提液，滤过，回收乙醇，滤液浓縮至40'C时测定的相对密度为1.30的稠膏4备用，稠膏称重295g，稠膏水分21.0%，折合含固形物233g。上述干膏粉1、稠膏2、干膏粉3、三七细粉、稠膏4混合得中药组合物干品共计5758，测定的lg中药组合物干品中含延胡索乙素0.14mg。分装为散剂，每袋3g，口服每次3g，每天3次。实施例4制备治疗肩周炎的中药组合物称取桂枝4.5Kg、羌活4.5Kg、黄芪6.75Kg、骨碎补4.5Kg、淫羊藿6.75Kg、威灵仙6.75Kg、秦艽4.5Kg、当归4.5Kg、三七1.35Kg、黄精6.75Kg、巴戟天2.7Kg、醋制延胡索3.15Kg、夏天无1.8Kg、地龙6.75Kg干膏粉l、稠膏2、干膏粉3、三七细粉同实施例l;取延胡索，粉碎成全部通过8目筛的粗粉，混合均匀，先用75n/。乙醇3L湿润，装入渗漉筒，密闭浸渍12小时，用75。/。乙醇35L渗漉，渗漉速度为4ml/min，回收乙醇，漉液浓縮至4(TC时测定的相对密度1.30的稠膏4备用，稠膏4称重250g，稠膏水分23.6%，折合千品为193g。将上述干膏粉l、稠膏2、干膏粉3、三七细粉、稠膏4混合得组合物，干燥干品共计5718g，用高效液相色谱法测定lg中药组合物干品中含延胡索乙素0.22mg。实施例5制备用于治疗肩周炎的丸剂称取桂枝4.5Kg、羌活4.5Kg、黄芪6.75Kg、骨碎补4.5Kg、淫羊藿6.75Kg、威灵仙6.75Kg、秦艽4.5Kg、当归4.5Kg、三七1.35Kg、黄精6.75Kg、巴戟天2.7Kg、醋制延胡索3.15Kg、夏天无1.8Kg、地龙6.75Kg干膏粉l、稠膏2、干膏粉3、三七细粉同实施例l;取延胡索，粉碎过8目筛，混合均匀，先用75n/。乙醇3L湿润，装入渗漉筒,密闭浸渍6小时，用65。/。乙醇35L渗漉，渗漉速度为4ml/min，回收乙醇，漉液浓縮至40'C时测定的相对密度1.30稠膏4备用，稠膏称重240g，稠膏水分20.0%，折合含固形物192g。将上述干膏粉l、稠膏2、干膏粉3、三七细粉、稠膏4混合，加入淀粉200g在捏合机中混合制成丸块，用中药小丸机制成丸粒，取炼蜜200g作黏合剂补丸，8(TC干燥，选丸，打光，得中药浓縮丸干品共计6000g，高效液相色谱法测定lg中药浓縮丸干品中含延胡索乙素0.22mg。分装为每瓶3g，口服每次l瓶，每天3次。实施例6制备用于治疗肩周炎的片剂干膏粉l、稠膏2、干膏粉3、三七细粉同实施例l;取延胡索，粉碎过8目筛，混合均匀，先用85。/。乙醇3L湿润，装入渗漉筒，密闭浸渍12小时，共用85。/。乙醇35L渗漉，渗漉速度为2ml/min，回收乙醇，漉液浓縮至40'C时测定的相对密度1.30稠膏4备用，稠膏称重245g，稠膏水分18.3%，折合含固形物200g。将上述干膏粉l、稠膏2、干膏粉3、三七细粉、稠膏4混合，加入淀粉300g，制成颗粒，8(TC干燥，整粒，加入硬脂酸镁6g，滑石粉18g混合均匀，高效液相色谱法测定lg颗粒干品中含延胡索乙素0.176mg，压片，素片每片重0.34g，得中药半浸膏片共计17000片，测定的每片中含延胡索乙素0.06mg，包衣，即得。临床剂量为口服每次8片，每天三次。实施例7制备用于治疗肩周炎的胶囊剂干膏粉l、稠膏2、干膏粉3、三七细粉同实施例l称取桂枝4.5Kg、羌活4.5Kg、黄芪6.75Kg、骨碎补4.5Kg、淫羊藿6.75Kg、威灵仙6.75Kg、秦充4.5Kg、当归4.5Kg、三七1.35Kg、黄精6.75Kg、巴戟天2.7Kg、醋制延胡索3.15Kg、夏天无1.8Kg、地龙6.75Kg取延胡索，粉碎过8目筛，混合均匀，先用75。/。乙醇3L湿润，装入渗漉筒,密闭浸渍12小时，用75。/。乙醇35L渗漉，渗漉速度为6ml/min，回收乙醇，漉液浓縮至40'C时测定的相对密度1.30稠膏4备用，稠膏称重246g，稠膏水分23.0°/。，折合含固形物190g。将上述干膏粉l、稠膏2、干膏粉3、三七细粉、稠膏4混合，加入淀粉300g，混合均匀，制成颗粒，8(TC干燥，整粒，得颗粒重6000g，高效液相色谱法测定lg颗粒干品中含延胡索乙素0.20mg,所制得颗粒经检査合格后，用全自动胶囊填充机填充，得18000粒硬胶囊(每粒填充药物0.32)g，测定的每粒囊中含延胡索乙素0.07mg，临床剂量为口服每次8粒，每天三次。实施例8制备用于治疗肩周炎的颗粒剂称取桂枝4.5Kg、羌活4.5Kg、黄芪6.75Kg、骨碎补4.5Kg、淫羊藿6.75Kg、威灵仙6.75Kg、秦艽4.5Kg、当归4.5Kg、三七1.35Kg、黄精6.75Kg、巴戟天2.7Kg、醋制延胡索3.15Kg、夏天无1.8Kg、地龙6.75Kg干膏粉l、稠膏2、干膏粉3、三七细粉同实施例l;取延胡索，粉碎过8目筛，混合均匀，先用75。/。乙醇3L湿润，装入渗漉筒，密闭浸渍12小时，用75。/。乙醇35L渗漉，渗漉速度为4ml/min，回收乙醇，漉液浓縮至40'C时测定的相对密度1.30稠膏4备用。稠膏称重250g，稠膏水分23.0%，折合含固形物193g。将上述干膏粉l、稠膏2、干膏粉3、三七细粉、稠膏4混合，加入淀粉300g，混合均匀，制成颗粒，8(TC干燥，整粒，得干颗粒6000g，高效液相色谱法测定lg颗粒干品中含延胡索乙素0.17mg，包装。分装为每袋3g，口服每次1袋，每天3次。实施例9高效液相测定实施例1的产品中的延胡索乙素的含量1、测定A、色谱条件色谱柱为DikmaDiamonsilC18柱(4.6mmX250纖，5um)，C18保护柱。流动相是用三乙胺调节PH至4.0的乙腈0.1%磷酸溶液体积比为20:80的溶液，流速为1.0ml*min-l，检测波长为280nm，柱温为室温。B、对照品溶液的制备精密称取干燥的延胡索乙素对照品10.00mg，置50mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得0.2000rngml-l对照品溶液。C、供试品溶液的制备取中药组合物，研细，精密称取粉末2.58，置具塞锥形瓶中，加浓氨试液甲醇体积比为120溶液50ml，超声10分钟，放冷，摇匀，滤过，残渣用甲醇洗涤3次，每次10ml，合并滤液和洗液，低温蒸干，残渣加水10ml使溶解，加浓氨试液调pH为11.5，用乙醚萃取3次，每次10ml，合并乙醚液，低温蒸干，残渣加甲醇使溶解，定容至10ml，用0.45um的微孔滤膜过滤，取续滤液，即得供试品溶液。阴性供试液的制备按中药组合物的处方组成除去延胡索后，根据样品制备工艺制备阴性对照，按供试品溶液的制备方法制成不含延胡索的阴性对照溶液。以上三种溶液进样量各为20"1，理论塔板数按延胡索乙素峰计算应不低于3000。测定，记录色谱图。用外标法定量计算得lg中药组合物干品中含延胡索乙素为0.176mg。从记录的色谱图可见供试品色谱图中与对照品色谱图中相应位置上有一相同保留时间的色谱峰，延胡索乙素峰与其他组分峰分离度良好，阴性对照无干扰。2.标准曲线及线性关系考察上述色谱条件下，精密吸取上述对照品溶液0.2，0.4，0.5，0.8，1.0，1,2，1.6，2.0ml，分别置10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，混匀，分别进样20"L。以对照品峰面积积分值Y(mAUmin)对进样量X(Ug)进行线性回归，得回归方程Y=15.727X-0.393，相关系数为r=0.9998(n=8)。可见延胡索乙素在(0.08000.8000)ug范围内线性关系良好。3.精密度试验分别吸取同一对照品溶液，连续进样6次，每次20ul。所测得延胡索乙素峰面积积分值的RSD为1.63%(n=6)，表明精密度良好。4.重复性试验取同批样品，平行操作制备成6份供试品溶液后按样品测定项下方法测定，平均含量为0.1462mgg-l，RSD为2.2%(n-6)，表明重复性良好。5.稳定性试验取同一供试品溶液，分别于制备后0，1，2，4，8h重复进样，测得延胡索乙素峰面积积分值的RSD为2.49%(n=5)，表明供试品溶液8h内稳定。6.加样回收率试验取上述己知含量的样品，共6份，精密称定，每份精密加入一定量的对照品，并测定。结果见表。回收率測定结果(n=6)样品中含量加入量实测总回收率平均回收率RSD(yg)量"g)(%)(%)(%)0.36570.10000.462997.20.36190.10000.459897.90.36210.37040.20000.20000.55850.564298.296.998.71.90.36850.40000.7713100.70.36030.40000.7664101.5从该试验证明用HPLC法测定产品中延胡索乙素的含量，经方法学研究表明此方法具有样品预处理简单，回收率好，重现性好，稳定性好及专属性强等优点，作为祛痹舒肩丸质量标准检测方法，能够更有效地控制该制剂的质量。权利要求1、一种治疗肩周炎的中药组合物，由下述中药材制成桂枝450份羌活450份黄芪675份骨碎补450份淫羊藿675份威灵仙675份秦艽450份醋制延胡索315份当归450份黄精675份巴戟天270份夏天无180份地龙675份三七135份其中羌活、夏天无、桂枝、秦艽、威灵仙用75％乙醇采用渗漉法制得干膏粉(1)，地龙用75％乙醇采用浸渍法制得稠膏(2)，黄精、骨碎补、淫羊藿、黄芪、当归、巴戟天采用水提醇沉法制得干膏粉(3)，三七粉碎成细粉，全部通过80目筛，得三七细粉，其特征在于醋制延胡索采用水提醇沉法或用体积浓度为65～85％的乙醇回流提取法或用体积浓度为65～85％的乙醇渗漉法提取，浓缩制得稠膏(4)，上述干膏粉(1)、稠膏(2)、干膏粉(3)、三七细粉、稠膏(4)混合得中药组合物，1g中药组合物干品中含延胡索乙素0.13～0.22mg。2、根据权利要求l所述的中药组合物，其特征在于所述的醋制延胡索的乙醇渗漉法提取，具体是取醋制延胡索粉碎成全部通过816目的粗粉，用体积浓度为6585%乙醇浸泡6小时以上后开始渗漉，乙醇用量为醋制延胡索重量的610倍，渗漉速度为26ml/min，收集渗漉液，回收乙醇，并浓縮至40'C时测定的相对密度为1.20-1.40的稠膏(4)。3、根据权利要求l所述的中药组合物，其特征在于中药组合物可添加或不添加药学上允许的常规辅料，用常规的中药制剂工艺制备成常用的中药口服剂型。4、根据权利要求3所述的中药组合物，其特征在于中药口服剂型是丸剂、胶囊剂、片剂、散剂、颗粒剂中的任何一种。5、一种如权利要求1所述的治疗肩周炎的中药组合物的质量控制方法，其特征在于用高效液相色谱法测定中药组合物中延胡索乙素的含量，具体按如下步骤进行A.色谱条件色谱柱为U柱，流动相是PH值为4.0的乙腈0.1%磷酸溶液体积比为20:80的溶液，流速为1.Oml'min—1,检测波长为280nm，柱温为室温；B.对照品溶液的制备精密称取延胡索乙素对照品，用甲醇溶解配制成0.2000mg'mr浓度，为对照品溶液；C.供试品溶液的制备精密称取中药组合物2.5g，置具塞锥形瓶中，加浓氨试液甲醇体积比为1:20的溶液50ml，超声10分钟以上，放冷，摇匀，滤过，残渣用甲醇洗涤3次，每次10ml，合并滤液和洗液，低温蒸干，残渣加水10ml使溶解，加浓氨试液调pH值至1112，用乙醚萃取3次，每次10ml，合并乙醚液，低温蒸干，残渣加甲醇使溶解，定容至10ml，用微孔滤膜过滤，取续滤液，即得供试品溶液；D.分别取对照品溶液与供试品溶液各以20uL进样,理论塔板数按延胡索乙素峰计算应不低于3000，用外标法定量计算lg中药组合物干品中含延胡索乙素全文摘要治疗肩周炎的中药组合物和质量控制方法，涉及以中药材为原料的药物组合物及质量控制方法。它是由原祛痹舒肩丸处方药制成。羌活、夏天无、桂枝、秦艽、威灵仙用渗漉法制干膏粉1；地龙用浸渍法制得稠膏2；黄精、骨碎补、淫羊藿、黄芪、当归、巴戟天用用水提醇沉法得干膏粉3；三七粉碎成细粉；醋制延胡索采用水提醇沉法或乙醇回流法或用乙醇渗漉法得稠膏4与干膏粉1、稠膏2、干膏粉3、三七细粉混合即得，用高效液相色谱法测定1g中药组合物中含延胡索乙素0.13～0.22mg。本产品抗炎、镇痛效果优于原祛痹舒肩丸，且服用量可降低，为原产品的1/8～1/2；高效液相色谱法测定产品中含延胡索乙素的方法灵敏度高，重现性好，结果准确可靠。文档编号A61K36/88GK101380419SQ20081019915公开日2009年3月11日申请日期2008年10月16日优先权日2008年10月16日发明者姚丽梅,庄义修,李亚萍,杜淑清,强申申请人:广东食品药品职业学院