专利名称：：无菌异种医用生物膜及其制备方法
技术领域：
：本发明属于医用辅料生物工程领域，特别是以异种动物皮替代异体人皮领域。
背景技术：
：应用异体皮作为生物辅料救治大面积烧烫伤创面的方法已有几十年历史。但治疗中存在排斥及黏附性差，生物相容性低等缺点。而且市场价格昂贵。且有国际人权之争议。另外使用时还需要多次换药(连同异体皮一起换掉)、削切痂，再做植皮手术。这样一来既增加患者的痛苦，又在患者自身的供皮区留下疤痕或色素沉着，也给患者带来沉重的经济负担。异种或异体生物膜自19世纪70年代末在外科医学领域已采用胎盘组织膜用于临床烧伤深n度、m度创面覆盖，或作为夕卜科植皮手术试用，但是效果不佳。另外，河北省邢台市在邯郸医院支持下用羊胎膜作为烧伤创面覆盖，或作为外科植皮手术用，效果也不理想。其主要原因是a、医用生物膜的选材必须适应人体皮肤组织的主要结构，当遭遇烧伤或烫伤时，首先是带有胶原蛋白的表皮组织细胞损伤，还有部分真皮层细胞也有损伤，需要及时抢救使之恢复活性；这就需要采用带有表皮胶原蛋白的生物膜及时覆盖受伤创面，加以适当的抗生素，防止创面感染，才能挽救，激活患者自身的皮肤组织，加速患者上皮细胞的复活和生长。异种羊胎生物膜和异种生物膜均不含表皮细胞胶原蛋白组织，或f含量甚微.-,透气相差，不利于引流；采用环氧乙垸灭菌，不但不能保鲜，而且灭菌不彻底，产品中有灭菌剂残留，临床中患者易感染。b、生物膜厚度过去为了贴服性好，追求生物膜越薄越好，达到0.20.3m加，一旦创面清创不彻底或局部细菌感染，生物膜2~3天就会融化成碎片，起不到保护创面的作用。应用异种动物皮经过科学处理后使皮膜达到无菌、无毒、无致敏、无皮内刺激状态，皮膜来源容易，价格便宜，同时又可达到既保护患者创面，又促进上皮细胞生长的作用。可以大大提高治疗效果。
发明内容本发明的目的在于提供一种无菌异种医用生物膜及其制备方法，通过选择与人体结构相似的异种生物皮，经加工后具有与人类患者有着良好相容性的生物特性。一种无菌异种医用生物膜，是经灭菌加工后的小猪皮，皮厚(X51.0mm，其特征在于，其表面分布若干裂口。所述的裂口呈U字形，U字形的圆弧形端断裂，U字形的上开口处连接不断。所述的裂口呈水平平行排列，或呈任何可以使裂口均匀分布的排列方式。所述的裂口深度(即U字形的高度〉和前、后、左、右间距均为0.5-1.0cm。裂口的平行行距为0.511;两个裂口的之间的间距为0.8cm;在36cr^面积中含有23~28个裂口。当应用于上下肢、前后胸平整创面，采用规则分布的无菌异种医用生物膜，便于医生操作包扎。对于不平整的异型部位创面则采用混合型开裂口以便于引流和包扎。临床中发现烧伤病人的皮肤恢复最快的部位常常位于植皮的边缘和透气性良好的部位，因此，原先的生物皮也曾采取打孔的办法增加透气性，但是，那样做会使生物皮出现多处缺损，使创面失去生物皮的保护，造成伤口暴露感染或因为得不到生物皮上的胶原蛋白的滋养而影响创面修复。本发明无菌异种医用生物膜具有裂口(U字形的，如同蛇鳞纹一样)，使皮膜与创面接触良好，比之原先打孔猪皮增加了通透性，使创面细胞生长供氧充足，同时有利于引流创面渗出液，清除表皮中的污物，便于自体皮细胞生长。本发明生物膜透气性大于打孔的生物皮；皮厚0.5~1.0111111，同时保持了创面被覆盖，有利于防止患者体内水分、电解质、蛋白质的流失。临床效果更佳。一种无菌异种医用生物膜的制备方法，本方法选择1个月至3个月小猪，经过选皮、去脂、去毛、裁剪、物理方法除菌、机切、拉尺、制成皮厚0.5~1.0111111的皮片，其特征在于,在生物膜上制出裂口，采用注射用水洗涤皮片后包装，灭菌。方法中所述的灭菌采用核反应堆电子加速器辐照，辐照时间为1分钟~5分钟；放射剂量为50~55KGY。制备过程中操作洁净伺温度25±2";制备好的皮片储存温度为-88士2t:。在此温度下存储36个月能够保质。与现有技术相比，本发明的有益效果是选择猪皮是与人体生物相容性最好的异lt皮源；厚度适宜，加有裂口的设计，使应用时复温快，使用方便。选用核反应堆电子加速器辐照比钴-60辐照时间短即可达到同样的灭菌效果，且对生物膜真皮细胞和成纤维组织没有破坏作用。图1是典型病例下肢烧伤创面图像；图2是典型病例下肢创面植膜后图像；图3是典型病例下肢创面生物膜脱落后图像。图4是术发明无菌异种医用生物膜上裂口的分布情况1;國5是本发明无菌异种医用生物膜上裂口的分布情况2;图6是本发明无菌异种医用生物膜上裂口的分布情况3。具体实施例方式选用优质防疫检疫的1~3个月的乳猪期白色白毛品种，宰杀后立即取背部全皮，将毛皮平整铺在已经消毒过的手术台上。采用刮刀削去脂肪杂质后全毛皮浸入福尔马林消毒液中，首次去除初始菌，10分l^后净水洗涤3遍，反铺于手术台上，采用刮刀60°角度刮掉表皮长短绒毛，按照小于鼓式M-350mm取皮机机切刀架长与宽各lcm裁剪成长方形即成备皮^备皮浸泡在生物洗涤剂(如采用西安开米股份有限公司出品的开米蔬東清洗剂)中20分钟去浮油再用活水冲洗5分钟甩干，使皮片含水量在25%左右，按照皮厚0.5~1.0mm千分表定格机切，操作中防止刀片损伤胶原蛋白层，及真皮层的基底膜。厚度达标下机，使用生物洗涤剂洗去机械上的油脂后，再用清水刷洗擦干。机切下台后进入无菌生产洁净室检测定尺，检查是否达到仅保存完整的表皮+真皮+基底膜的结构，用肉眼观察如未达标，将皮片表皮层平整贴到手术台板上用刮刀人工修正，刮去多余的脂肪层，直至达标后用模具和冲床在每一皮片上挤压出均匀分布的裂口，达到36cn^上分布23~28个裂O。裂口分布情况参见图4~图6。产品自检(自检项目包括物理指标鼓数及厚度)合格者包装入袋，热合封口，每袋都经过核反应堆电子加速器辐照，辐照时间为1分钟5分钟，放射剂量为50~55KGY。零下50°入库冷冻。依据:GB/T14233.2-2005(生物实验法)；GBA16886.4-2003(体外细胞毒性试验)；GB/T16886.10-2005(刺激-致敏试验)；GB/T16886.11-1997(全身毒性试验)GB/T4233.2-2005(无菌试验)；本产品物理性能、化学性能、生物性能经国家食品药品监督管理局质量检测中心检测，均符合标准。S卩本产品无毒、无菌、无刺激、无致敏、无病毒。自2008年初到2008年11月份，应用本发明无菌异种医用生物膜治疗90例患者共111个II度烧伤创面取得令人满意的效果，简要报告如下资料与方法1、病例选择本组患者共90例，男66例，女24例；其中12岁以下儿童32例；创面125呢TBSA，分为浅II度、深II度两部分，浅II度创面31例，女8例；深II度创面80例，女21例。采用自身对照法观察统一深度，面积相同的愈合时间。2、治疗方法(1)治疗组采用本发明无菌异种医用生物膜覆盖创面，膜内侧敷在创面上不留空隙，外用消毒纱布、棉垫加压包扎；如有渗出液渗出敷料，更换外层纱布、棉垫，如果发生生物膜被渗出液液化，则及时清除生物膜。(2)对照组采用辐照猪皮生物敷料替换本发明无菌异种医用生物膜覆盖创面，其它同上。3、观察指标及疗效判定采用茵际惯用的三度四分法区分创面，对照组与治疗组选用同一深度、部位相应、面积接近的创面，肉眼观察，以愈合时间为比较指标，治疗组比对照组愈合提前1天及1天以上为有效，愈合时间相同或更长为无效。4、统计方法愈合时间(天)采用T检验比较均值用X土S统计。结果显示i治疗组愈合时间较对照组明显提前(P<0.05~0.01,参见表l)，治疗组有效率达93.29%(参见表2)。未见患者有严重不适或过敏、中毒症状。表1无菌异种医用生物膜治疗烧伤创面的愈合时间比较(X±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注*与对照组1:匕较P<0.05;"与对照组比较P〈0.01.表2无菌异;冲医用生物膜治疗烧伤创面的疗效比较<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注平均有效率为93.29%。讨论传统的烧伤创面修复以抗感染，增强机体营养及保护创面为主，最终达到自然愈合，时间较长。本发明无菌异种医用生物媒洁白柔软且无毒、无菌、无剌激、无抗原性，皮膜制作裂口使得创面透气性好；采用电子加速器核技术进行快速辐贈、灭菌，消除了异种生物的排斥反应，促进上皮细胞组织增生，加速仓d面愈合，具有伤口愈合迅速，减少瘢痕的治疗功效。此次临床试验共治疗了lll个烧伤创面，特别是深II度烧伤创面疗效显著患者烧伤创面愈合时间短，减少了患者住院费用，针对大面积烧伤患者异体皮源缺乏，起到了替代异体皮的作用。不但休克期过渡平稳，全身毒血症反应轻，而且创面愈合快，疗程短，是当今治疗烧伤创面较理想的生物敷料。参见附图l，典型病例于某，女，33岁，重症，烧伤面积90%,入院前因创面处理不当，其下肢创面感染严重，经过切削痂后图像参见附图1。图像显示患者表皮已经被损坏。参见图2，典型病例于某下肢覆盖本发明无菌异种医用生物膜后图像。图像显示患者皮损部位被生物膜严密包裹。参见图3，典型病例下肢创面生物膜脱落后图像。图像显示患者下肢创面在覆盖本发明生物膜3周后自体皮长出，生物膜脱落，创面愈合的情况。权利要求1、一种无菌异种医用生物膜，是经灭菌加工后的小猪皮，皮厚0.5~1.0mm，其特征在于，表面分布若干裂口。2、根据权利要求l所述的无菌异种医用生物膜，其特征在于，所述的裂口呈U字形，U字形的圆弧形端断裂，U字形的上开口处连接不断。3、根据权利要求l所述的无菌异种医用生物膜，其特征在于，所述的裂口呈水平平行排列，或呈任何可以使裂口均匀分布的排列方式。4、根据权利要求l所述的无菌异种医用生物膜，其特征在于，所述的裂口深度和前、后、左、右间距均为0.51.0cm。5、根据权利要求l所述的无菌异种医用生物膜，其特征在于，所述的裂口的平行行距为0.5cm;两个裂口的之间的间距为0.8cm;在36or^面积中含有2328个裂口o6、一种无菌异种医用生物膜的制备方法，选甩猪皮，经过选皮、去脂、去毛、裁剪、物理方法除菌、机切、拉尺、制成皮厚0.5~1.011的皮片，其特征在于，在生物膜上制出裂口，采用注射用水洗涤皮片后包装，灭菌。7、根据权利要求6所述的无菌异种医用生物膜的制备方法，其特征在于，所述的灭菌采用核反应堆电子加速器辐照，辐照时间为1分钟5分钟；放射剂量为50~55KGY。全文摘要本发明属于医用辅料生物工程领域。一种无菌异种医用生物膜，是经灭菌加工后的小猪皮，皮厚0.5～1.0mm，其特征在于，表面分布若干裂口。与现有技术相比，本发明的有益效果是选择猪皮是与人体生物相容性最好的异种皮源；厚度适宜，加有裂口的设计，使应用时复温快，使用方便。选用核反应堆电子加速器辐照比钴-60辐照时间短即可达到同样的灭菌效果，且对生物膜真皮细胞和成纤维组织没有破坏作用。文档编号A61L2/08GK101548914SQ20091006794公开日2009年10月7日申请日期2009年2月26日优先权日2009年2月26日发明者冠陈申请人:冠陈