调经祛斑片的质量控制方法

专利名称：调经祛斑片的质量控制方法
调经祛斑片的质量控制方法 发明领域
本发明涉及一种中药制剂的质量控制方法，具体涉及调经祛斑片的质量控制方法。
背景技术：
调经祛斑片为调经祛斑胶囊改剂型而来，处方收载于《中成药地方标准上升国家标准》 (外科妇科分册)582页，标准代号为WS-10710 (ZD-0710) -2002，具有养血调经，祛瘀 消斑的功效，用于营血不足，气滞血瘀所致的月经过多，黄褐斑。其处方为黄芪80g、菟 丝子40g、墨旱莲50g、女贞子40g、枸杞子40g、当归40g、白芍50g、何首乌40g、地黄50g、 熟地黄60g、桃仁30g、柴胡30g、阿胶12g、手参40g、红花10g;片剂制法为以上十五味 药材，取女贞子、枸杞子、当归、白芍、柴胡、阿胶、于参、红花粉碎成细粉，其余菟丝子 等七味药材加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至相对密度为1. 30 1.35(50'C)的稠膏，加入上述细粉，烘干，加入磷酸氢钙等辅料适量，混匀，制粒，干燥， 压片，包薄膜衣，即得。粉碎，制成颗粒，装入胶囊，即得。
原调经祛斑胶囊标准中存在女贞子薄层鉴别中供试品色谱分离度差；枸杞子薄层鉴别中 使用了三氯甲烷，毒性较大；方中鉴别的药味较少；含量测定方法中供试液制备时难以滤过 等问题，需要对质控方法进行全面地优化及补充。调经祛斑片提取工艺与胶囊一致，但制剂 工艺和辅料不同，需制定确实可行的质量控制方法以保证产品质量和临床疗效。

发明内容
本发明目的在于提供一种调经祛斑片的质量控制方法，进而保证产品质量和临床疗效。 本发明解决了现有调经祛斑制剂质量控制方法中存在的不足，女贞子薄层鉴别中更换了
展开剂，改善了薄层分离效果；枸杞子薄层鉴别中使用了低毒性的溶剂替代了毒性较大三氯
甲烷；增加了柴胡及白芍的薄层色谱鉴别；解决了含量测定方法中供试液制备时难以滤过等
问题，使制剂质量得到很好地控制。
调经祛斑片质量控制方法包括以下全部或部分内容薄层鉴别女贞子；薄层鉴别枸杞子；
薄层鉴别当归；薄层鉴别白芍；薄层鉴别柴胡；测定本品中芍药苷的含量。
调经祛斑片质量控制方法包括以下步骤中的一^l或多种 (1)薄层鉴别女贞子取本品适量，除去薄膜衣，研细，加乙醇加热回流，放冷，滤过，滤液浓縮至2ml，作为供试品溶液。另取女贞子对照药材适量，同法制成对照药材溶液。再 取齐墩果酸对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国 药典相应附录)试验，吸取上述三种溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G 薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸适当比例为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇 溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上， 显相同颜色的斑点。
(2) 薄层鉴别枸杞子取本品适量，除去薄膜衣，研细，加水加热煮沸，放冷，滤过， 滤液用乙酸乙酯振摇提取，乙酸乙酯液浓縮至lml，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材适 量，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述两种溶液， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸适当比 例为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材 色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(3) 薄层鉴别当归取本品适量，除去薄膜衣，研细，加乙醚超声处理，滤过，滤液挥 干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取当归对照药材适量，同法制成对照药材 溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一以羧甲基纤 维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(60 90°C)-乙酸乙酯(17:2)为展开剂，展 开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位 置上，显相同颜色的荧光斑点。
(4) 薄层鉴别白芍取本品适量，除去薄膜衣，研细，加甲醇超声处理，滤过，滤液蒸干， 残渣加正丁醇饱和的水溶解，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取，分取正丁醇液， 蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每lml含 2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取供试品溶液及对 照品溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲垸-乙酸乙 酯-甲醇-甲酸适当比例为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点 显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(5) 薄层鉴别柴胡取本品适量，除去薄膜衣，研细，加甲醇适量，超声处理，滤过， 滤液蒸干，残渣加正丁醇饱和的水溶解，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取，分取 正丁醇液，用氨试液适量洗涤，弃去氨洗液，再用正丁醇饱和的水适量洗涤，弃去水洗液， 分取正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取柴胡对照药材适量， 加甲醇超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加水饱和的正丁醇使溶解，用氨试液洗涤，弃去氨 洗液，分取正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水适当比例为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨 基苯甲醛的40%硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的 位置上，显相同颜色的斑点；置紫外光灯(365nm)下检视，显相同颜色的荧光斑点。
(6)测定本品中芍药苷的含量 照高效液相色谱法(中国药典相应附录)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八院基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(25:75)为流 动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷计算应不低于2000。
对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，用稀乙醇制成每lml含0. lmg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取本品，除去薄膜衣，精密称定，研细，取适量，精密称定，置具 塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用稀 乙醇补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得。
调经祛斑片的质量控制方法包括以下步骤中的一种或多种
(1) 薄层鉴别女贞子取本品5 30片，除去薄膜衣，研细，加乙醇10 50ml，加热 回流10 60分钟，放冷，滤过，滤液浓縮至2ml，作为供试品溶液。另取女贞子对照药材0.2 lg，同法制成对照药材溶液。再取齐墩果酸对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为 对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述三种溶液各2 10ul，分别点 于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15 25:5 10:0.2~0.8)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，100。C 12(TC加热至斑 点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的 斑点。
(2) 薄层鉴别枸杞子取本品5 30片，除去薄膜衣，研细，加水50 200ml,加热煮 沸10 60分钟，放冷，滤过，滤液用乙酸乙酯振摇提取1 3次，每次10 50ml，合并乙酸 乙酯液，浓縮至lml，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材0.5 2g，同法制成对照药材溶 液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述两种溶液各2 10nl，分别点于同一 以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15 25:5 10:0.2 0.8) 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色 谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(3) 薄层鉴别当归取本品5 30片，除去薄膜衣，研细，加乙醚20 100ml,超声处理10 60分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取当归对照 药材0.5 2g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述两 种溶液各2 10"1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚 (60 9(TC)-乙酸乙酯(17:2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯G65nm)下检 视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(4) 薄层鉴别白芍取本品5 30片，除去薄膜衣，研细，加甲醇20 100ml，超声处理 10 60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加正丁醇饱和的水10 50ml分次溶解，置分液漏斗中， 用水饱和的正丁醇振摇提取1 3次，每次10 50ml，分取正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇lml 使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照 品溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取供试品溶液及对照品溶液2 10ul，分 别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲垸-乙酸乙酯-甲醇-甲酸
(35 45 : 3 7 : 8 12 : 0.1 0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液， 100'C 120'C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同 颜色的斑点。
(5) 薄层鉴别柴胡取本品10 50片，除去薄膜衣，研细，力卩甲醇20 100ml，超声处 理10 60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加正丁醇饱和的水10 50ml分次溶解，置分液漏斗 中，用水饱和的正丁醇振摇提取1 3次，每次10~50ml，分取正丁醇液，用氨试液10 100ml 洗涤，弃去氨洗液，再用正丁醇饱和的水10 100ml洗涤，弃去水洗液，分取正丁醇液，蒸 干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取柴胡对照药材0.2 2g,加甲醇10 50ml， 超声处理10 60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水饱和的正丁醇10 50ml使溶解，用氨试 液10 50ml洗涤，弃去氨洗液，分取正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为对照药 材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述两种溶液2 10ul，分别点于同一 以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲垸-甲醇-水(25 35 : 8 12 : 0.5 1.5)为展幵剂，展幵，取出，晾干，喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，加热至斑点 显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置紫外光 灯(365nm)下检视，显相同颜色的荧光斑点。
(6)测定本品中芍药苷的含量 照高效液相色谱法(中国药典相应附录)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(25:75)为流 动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷计算应不低于2000。
对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，用稀乙醇制成每lml含0. lmg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取本品，除去薄膜衣，精密称定，研细，取适量，精密称定，置具 塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用稀 乙醇补足减失的重量，摇匀，离心5 30分钟，取上清液，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5 20ul，注入液相色谱仪，测定， 即得。
具体实施例方式
本发明的质量控制方法是经过大量的筛选得到的最佳方案，下面的实验例用于进一步说 明本发明的技术方案和技术效果。
实验例1 :为女贞子及其特征成分齐墩果酸的薄层色谱鉴别
本发明优选了展开剂。还考察了以下展开系统①环己垸-丙酮-乙酸乙酯(5:2:l)②环己烷 -丙酮-乙酸乙酯-甲醇(5:2:l:0.5)③甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20:4:0.5),试验结果表明展开系统①② 无法将供试品和药材各成分分离，而展开系统③亦可达到分离效果。
按实施例1女贞子薄层鉴别方法以调经祛斑片试验，结果供试品色谱中，在与对照药材 色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点。本方法薄层色谱分离效果好，斑点 清晰、圆整，比移值适中，重现性和专属性好，阴性对照无干扰。 实验例2:为枸杞子的薄层色谱鉴别
曾对以下提取纯化方法进行了对比试验①取本品16片，除去薄膜衣，研细，加水50ml， 加热煮沸15分钟，放冷，滤过，滤液用乙酸乙酯15ml振摇提取，提取液浓縮至lml，作为供 试品溶液。(原质量标准的提取方法)②取本品16片，除去薄膜衣，研细，加水50ml，加热 煮沸15分钟，放冷，滤过，滤液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次15ml，提取液浓縮至lml， 作为供试品溶液。③取本品16片，除去薄膜衣，研细，加水100ml，加热煮沸15分钟，放冷， 滤过，滤液用乙酸乙酯15ml振摇提取，提取液浓縮至lml，作为供试品溶液。 取本品16 片，除去薄膜衣，研细，加乙酸乙酯20ml，加热回流30分钟，滤过，滤液浓縮至lml，作为 供试品溶液。⑤取本品16片，除去薄膜衣，研细，加乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加水溶解，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次15ml，提取液浓縮至lml，作为 供试品溶液。试验结果表明提取纯化方法①和②样品很难滤过，用乙酸乙酯提取时特别容易 乳化，斑点很弱。提取纯化方法③斑点较弱。提取纯化方法④和⑤杂质斑点较多。
本发明优选了展开剂。对展开系统做了对比①乙酸乙酯-三氯甲烷-甲酸(3:2:l)②乙酸乙酯-三氯甲烷-甲酸(3:2:0.3)③石油醚(60 90°C)-乙酸乙酯(17:3)。试验结果表明展开系统①、②比移值较大，展开系统③比移值较小。按实施例1枸杞子薄层鉴别方法以调经祛斑片试验，结果供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点。本方法薄层色谱分离效果好，斑点清晰、圆整，比移值适中，重现性和专属性好，阴性对照无干扰。实验例3:为当归的薄层色谱鉴别考察了展开系统石油醚(60 9(TC)-乙酸乙酯(17:3)，结果比移值太大。按实施例1当归薄层鉴别方法以调经祛斑片试验，结果供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光主斑点。本方法薄层色谱分离效果好，斑点清晰、圆整，比移值适中，重现性和专属性好，阴性对照无干扰。 实验例4:为白芍特征成分芍药苷的薄层色谱特征鉴别对以下提取纯化方法进行了对比试验①取本品5片，除去薄膜衣，研细，加乙醇30ml， 加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。②取本品20 片，除去薄膜衣，研细，加甲醇40ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水2ml使 溶解，加于DIOI型大孔吸附树脂柱(内径1.0cm,柱髙15cm)，用水洗脱至洗脱液无色，弃 去水洗液，再用40%乙醇50ml洗脱，收集40%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解， 作为供试品溶液。(D取本品10片，除去薄膜衣，研细，加甲醇30ml，超声处理20分钟，滤 过，滤液蒸干，残渣加水20m使溶解，置分液漏斗中，用乙醚振摇提取2次，每次2(tol，弃 去乙醚液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱 和的水洗涤2次，每次20ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，加中性氧 化铝lg (100 200目)，拌匀，蒸干，加于中性氧化铝柱(100 200目，3g，内径1.0cm干 法装柱)上，用80%甲醇30ml洗脱，收集洗脱液，蒸千，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试 品溶液。结果方法①②供试品色谱中，杂质较多，斑点不够清晰；方法③供试品色谱中，斑 点清晰圆整，但提取步骤多，不便操作，故不采用。按实施例1白芍薄层鉴别方法以调经祛斑片试验，结果供试品色谱中，在与对照品色谱 相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点。本方法薄层色谱分离效果好，斑点清晰圆整，重现性和 专属性好，阴性无干扰。 实验例5:为柴胡的薄层色谱特征鉴别对以下提取纯化方法进行了对比试验①取本品30片，除去薄膜衣，研细，加甲醇50ml， 超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加正丁醇饱和的水30ml分次溶解，置分液漏斗中， 用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，分取10ml正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。②取本品20片，除去薄膜衣，研细，加甲醇40ml， 超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水5ml使溶解，滤过，滤液加于D101型大孔吸 附树脂柱(内径1.0cm,柱高18cm)上，用水30mi洗脱，弃去水洗液，再用乙醇30ml洗脱， 收集乙醇洗脱液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液；③取本品10片，除去薄 膜衣，研细，加甲醇30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，置 分液漏斗中，用乙醚振摇提取2次，每次20ml，弃去乙醚液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇 提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20ml，弃去水液， 正丁醇液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，加中性氧化铝lg U00 200目)，拌匀，蒸干，加 于中性氧化铝柱Q00 200目，3g，内径1.0cm干法装柱)上，用80°/。甲醇30ml洗脱，收集 洗脱液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液；④取本品15片，除去薄膜衣，研 细，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸千，残渣加2%氢氧化钠溶液20ml使溶解， 放冷，用正丁醇20ml振摇提取，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品 溶液；⑤取本品20片，除去薄膜衣，研细，加甲醇40ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸 干，残渣加水2tnl使溶解，加于DIOI型大孔吸附树脂柱(内径I.0cm，柱高15cm)，用水洗 脱至洗脱液无色，弃去水洗液，再用40%乙醇5(kl洗脱，弃去4W。乙醇洗脱液，继用70%乙醇 70ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水饱和的正丁醇20ml使溶解，用氨试液10ml洗涤， 弃去氨试液，分取正丁醇液，蒸千，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。结果方法①② ③供试品色谱中，背景较深，阴性有杂质斑点干扰，试用多种展开系统，分离效果均不好； 方法④特征斑点不够清晰；方法⑤供试品色谱中，斑点清晰圆整，效果较好，但提取步骤烦 琐，故不采用。按实施例1柴胡薄层鉴别方法以调经祛斑片试验，结果，日光下检视，供试品色谱中， 在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的红色斑点；置紫外光灯(365nm)下检视，供试品 色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点。本方法薄层色谱分离效果 好，斑点清晰、圆整，重现性和专属性好，阴性对照无千扰。实验例6:芍药苷含量测定研究 1对照品及样品溶液的制备对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品10.05mg，置10ml量瓶中，加稀乙醇溶解并 稀释至刻度，摇匀，精密量取lml置10ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，即得(每lml含 芍药苷100.5ug)。供试品溶液的制备取本品，除去薄膜衣，精密称定，研细，取约1.5g，精密称定，置 具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理(功率260W,频率50Hz)30分钟，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，离心10分钟(3000转/分钟)， 取上清液，滤过，取续滤液，即得。阴性样品溶液的制备阴性样品溶液是按处方比例称取除白芍外的药味，按制法制成白 芍阴性制剂，再取此阴性制剂按上述"供试品溶液的制备"方法制备不含白芍的阴性样品溶 液。试验中考察了超声处理的时间(IO分、20分、30分、40分)，结果表明超声处理30分 钟即可提取完全。超声提取后的溶液难以滤过，经离心后易滤，降低了操作难度，縮短了试验周期。 2色谱条件与系统适用性试验仪器日本岛津LC-10Avp高效液相色谱仪；检测器日本岛津SPD-10Atvp紫外检测器； 色谱柱十八烷基硅垸键合硅胶色谱柱(岛津VP-ODS柱，4.6X150mm)，保护柱YWG C18 10 X4.6咖；威玛龙色谱工作站；流动相甲醇_水(25:75)为流动相；流速1. Oml/min,柱 温室温。检测波长为230nm。分别吸取芍药苷对照品溶液、供试品溶液及不含白芍的阴性样品溶液各lOwl，注入液 相色谱仪，测定。此条件下芍药苷与其它组分达到基线分离，分离度R>1.5。理论板数按芍 药苷峰计算大于2000，芍药苷保留时间约为16分钟。阴性样品溶液色谱在相应位置无吸收峰，可见阴性无干扰。 3波长选择精密称取芍药苷对照品10.05mg，置10ml量瓶中，加稀乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀， 精密量取0.2ml置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用紫外分光光度仪扫描，结果芍药苷 在229nm处有最大吸收，参考药典及原剂型标准选择230nm为测定波长。 4对照品纯度检查精密称取芍药苷对照品10. 05mg，置10ml量瓶中，加稀乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀， 按上述色谱条件，进样10yl，测定，用峰面积归一化法计算，含量为99.27%，符合含量测定要 求，计算时按100%计算。5方法学验证精密度试验计算得芍药苷峰面积平均值为1181505，相对标准偏差为0.24%，表明精 密度较好；线性关系考察以峰面积积分值A对芍药苷进样量C(Ug)进行回归分析，得回归 方程A =1. 16X106C+1. 14X104, r=0.9999。线性范围为0. 201 4, 02 u g，并且直线通过原 点，可用单点外标法进行测定和计算；稳定性试验计算得日内峰面积平均值为956424，相对 标准偏差为0.89%，三日间峰面积平均值为953734,相对标准偏差为1.13%，表明供试品 溶液在72h内稳定；重复性试验计算得芍药苷的含量为1.084 mg/片，相对标准偏差为1. 44%，表明方法重复性较好；加样回收率试验计算得平均回收率为99.81%，相对标准偏差为 1.74%，表明方法回收率较好。以上方法学验证表明，该方法准确，专属性、重复性好，符合含量测定要求。具体实施例如下实施例1调经祛斑片质量控制方法(1)取本品16片，除去薄膜衣，研细，加乙醇20ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液浓縮至2ml，作为供试品溶液。另取女贞子对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。再取齐墩果酸对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20:7:0.5)为展开齐lJ，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在ll(TC加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2) 取本品16片，除去薄膜衣，研细，加水100ml，加热煮沸15分钟，放冷，滤过，滤 液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次15ml，合并乙酸乙酯液，浓縮至lml，作为供试品溶液。 另取枸杞子对照药材lg，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附 录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G 薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20:7:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm) 下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(3) 取本品16片，除去薄膜衣，研细，加乙醚40ml，超声处理15分钟，滤过，滤液挥 干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取当归对照药材lg，同法制成对照药材溶 液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点 于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(60 90。C)-乙酸乙酯(17 : 2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照 药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(4) 取本品30片，除去薄膜衣，研细，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干， 残渣加正丁醇饱和的水30ml分次溶解，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每 次20ml，合并正丁醇液，分取10ml正丁醇液，余液留用，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解， 作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照品溶液。 照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液3 ul、对照品溶液5 ul， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40 :5: io : 0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，105'C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(5)取鉴别(5)项下留用的正丁醇液，用氨试液30ml洗涤，弃去氨洗液，再用正丁醇 饱和的水30ml洗涤，弃去水洗液，分取正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试 品溶液。另取柴胡对照药材0.5g，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣 加水饱和的正丁醇20ml使溶解，用氨试液10ml洗涤，弃去氨洗液，分取正丁醇液，蒸干， 残渣加乙醇lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B) 试验，吸取上述两种溶液各5 8ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层 板上，以三氯甲烷-甲醇-水(30: 10: 1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨基 苯甲醛的40%硫酸溶液，105'C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应 的位置上，显相同颜色的斑点；置紫外光灯G65nm)下检视，显相同颜色的荧光斑点。 (6)测定本品中的芍药苷的含量照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(25:75)为 流动相；检测波长为230run。理论板数按芍药苷计算应不低于2000。对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，用稀乙醇制成每ltnl含0. lmg的溶液， 即得。供试品溶液的制备取本品，除去薄膜衣，精密称定，研细，取约1.5g，精密称定，置 具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理(功率260W,频率50Hz) 30分钟，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，离心10分钟(3000转/分钟)， 取上清液，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10 Ul，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每片含白芍以芍药苷(C23H280 )计，不得少于0.60mg。 实施例2调经祛斑片质量控制方法(1)薄层鉴别女贞子取本品30片，除去薄膜衣，研细，加乙醇50ml，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液浓縮至2ml，作为供试品溶液。另取女贞子对照药材lg，同法制成对照药材溶液。再取齐墩果酸对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各2nl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(25:5:0.8)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，12(TC加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2) 薄层鉴别枸杞子取本品30片，除去薄膜衣，研细，加水200ral，加热煮沸60分钟， 放冷，滤过，滤液用乙酸乙酯振摇提取3次，每次50ml，合并乙酸乙酯液，浓縮至lml，作 为供试品溶液。另取枸杞子对照药材2g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典 2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2 u 1,分别点于同一以羧甲基纤维素钠 为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(25:5:0.8)为展开剂，展开，取出，晾干， 置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的 荧光斑点。(3) 薄层鉴别当归取本品30片，除去薄膜衣，研细，加乙醚100ml，超声处理60分 钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取当归对照药材2g，同 法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种 溶液各2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(60 90°C)-乙酸乙酯(17:2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供 试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(4) 薄层鉴别白芍取本品30片，除去薄膜衣，研细，加甲醇100ml，超声处理60分钟， 滤过，滤液蒸干，残渣加正丁醇饱和的水50ml分次溶解，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇 振摇提取3次，每次50ml，分取正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。 另取芍药苷对照品，加乙醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国 药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液及对照品溶液2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(45:3: 12 : o.i)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，120"C加热至斑点显色清晰。供试 品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(5) 薄层鉴别柴胡取本品50片，除去薄膜衣，研细，加甲醇100ml，超声处理60分钟， 滤过，滤液蒸干，残渣加正丁醇饱和的水50ml分次溶解，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇 振摇提取3次，每次50ml，分取正丁醇液，用氨试液100ml洗涤，弃去氨洗液，再用正丁醇 饱和的水100ml洗涤，弃去水洗液，分取正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供 试品溶液。另取柴胡对照药材2g，加甲醇50ml，超声处理60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣 加水饱和的正丁醇50ml使溶解，用氨试液50ml洗涤，弃去氨洗液，分取正丁醇液，蒸干， 残渣加乙醇lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B) 试验，吸取上述两种溶液2iil，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上， 以三氯甲垸-甲醇-水(35 : 8 : 1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上， 显相同颜色的斑点；置紫外光灯G65nm)下检视，显相同颜色的荧光斑点。(6)测定本品中芍药苷的含量 照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(25:75)为流 动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷计算应不低于2000。对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，用稀乙醇制成每lml含0. lmg的溶液， 即得。供试品溶液的制备取本品，除去薄膜衣，精密称定，研细，取适量，精密称定，置具 塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用稀 乙醇补足减失的重量，摇匀，离心30分钟，取上清液，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20ul，注入液相色谱仪，测定即得。 实施例3调经祛斑片质量控制方法(1)薄层鉴别女贞子取本品5片，除去薄膜衣，研细，加乙醇10ml，加热回流10分 钟，放冷，滤过，滤液浓縮至2ml，作为供试品溶液。另取女贞子对照药材0，2g，同法制成对 照药材溶液。再取齐墩果酸对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照 薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各lOlU，分别点于 同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15: 10:0.2)为展开 剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，IOO'C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中， 在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2) 薄层鉴别枸杞子取本品5片，除去薄膜衣，研细，加水50ml，加热煮沸10分钟， 放冷，滤过，滤液用乙酸乙酯10ml振摇提取，乙酸乙酯液浓縮至lml，作为供试品溶液。另 取枸杞子对照药材0.5，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录 VI B)试验，吸取上述两种溶液各10 ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G 薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15: 10:0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm) 下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(3) 薄层鉴别当归取本品5片，除去薄膜衣，研细，加乙醚20ml，超声处理10分钟， 滤过，滤液挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取当归对照药材0.5g，同法 制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶 液各10w，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(60 90 °C)-乙酸乙酯(17:2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(4) 薄层鉴别白芍取本品5片，除去薄膜衣，研细，加甲醇20ml，超声处理10分钟， 滤过，滤液蒸干，残渣加正丁醇饱和的水10ml分次溶解，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇 10ml振摇提取，分取正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药 苷对照品，加乙醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005 年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液及对照品溶液lOul,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶g薄层板上，以三氯甲垸-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(35:7:8: 0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，IOO'C加热至斑点显色清晰。供试品色谱 中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(5) 薄层鉴别柴胡取本品10片，除去薄膜衣，研细，加甲醇20ml，超声处理10分钟， 滤过，滤液蒸干，残渣加正丁醇饱和的水10ml分次溶解，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇 10ml振摇提取，分取正丁醇液，用氨试液10ml洗涤，弃去氨洗液，再用正丁醇饱和的水10ml 洗涤，弃去水洗液，分取正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取 柴胡对照药材0.2g，加甲醇10ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水饱和的正 丁醇10ml使溶解，用氨试液10ml洗涤，弃去氨洗液，分取正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇lml 使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上 述两种溶液10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷 -甲醇-水(25: 12:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫 酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜 色的斑点；置紫外光灯G65mn)下检视，显相同颜色的荧光斑点。(6)测定本品中芍药苷的含量 照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八垸基硅院键合硅胶为填充剂；甲醇-水(25:75)为流 动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷计算应不低于2000。对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，用稀乙醇制成每lml含0. lmg的溶液， 即得。供试品溶液的制备取本品，除去薄膜衣，精密称定，研细，取适量，精密称定，置具 塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用稀 乙醇补足减失的重量，摇匀，离心5分钟，取上清液，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5yl，注入液相色谱仪，测定，即得。
权利要求
1.一种调经祛斑片的质量控制方法，其特征在于，该方法包括以下全部或部分内容薄层鉴别女贞子；薄层鉴别枸杞子；薄层鉴别当归；薄层鉴别白芍；薄层鉴别柴胡；测定本品中芍药苷的含量。
2. 如权利要求1所述的质量控制方法，其特征在于，包括以下步骤中的一个或多个(l)薄层鉴别女贞子取本品适量，除去薄膜衣，研细，加乙醇加热回流，放冷，滤过，滤液浓縮至2ml，作为供试品溶液。另取女贞子对照药材适量，同法制成对照药材溶液。再 取齐墩果酸对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法C中国 药典相应附录)试验，吸取上述三种溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G 薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸适当比例为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇 溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上， 显相同颜色的斑点。(2) 薄层鉴别枸杞子取本品适量，除去薄膜衣，研细，加水加热煮沸，放冷，滤过， 滤液用乙酸乙酯振摇提取，乙酸乙酯液浓縮至lml，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材适 量，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述两种溶液， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸适当比 例为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材 色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(3) 薄层鉴别当归取本品适量，除去薄膜衣，研细，加乙醚超声处理，滤过，滤液挥 干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取当归对照药材适量，同法制成对照药材 溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一以羧甲基纤 维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(60 9(TC)-乙酸乙酯(17:2)为展开剂，展 开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位 置上，显相同颜色的荧光斑点。(4) 薄层鉴别白芍取本品适量，除去薄膜衣，研细，加甲醇超声处理，滤过，滤液蒸干， 残渣加正丁醇饱和的水溶解，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取，分取正丁醇液， 蒸千，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每lml含 2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取供试品溶液及对 照品溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙 酯-甲醇-甲酸适当比例为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点 显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(5) 薄层鉴别柴胡取本品适量，除去薄膜衣，研细，加甲醇适量，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加正丁醇饱和的水溶解，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取，分取 正丁醇液，用氨试液适量洗涤，弃去氨洗液，再用正丁醇饱和的水适量洗涤，弃去水洗液， 分取正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取柴胡对照药材适量， 加甲醇超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加水饱和的正丁醇使溶解，用氨试液洗涤，弃去氨 洗液，分取正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中 国药典相应附录)试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水适当比例为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨 基苯甲醛的40%硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的 位置上，显相同颜色的斑点；置紫外光灯(365nm)下检视，显相同颜色的荧光斑点。(6)测定本品中芍药苷的含量.-照高效液相色谱法(中国药典相应附录)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(25:75)为流 动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷计算应不低于2000。对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，用稀乙醇制成每lml含0. lmg的溶液， 即得。供试品溶液的制备取本品，除去薄膜衣，精密称定，研细，取适量，精密称定，置具 塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用稀 乙醇补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得。
3.如权利要求1所述的质量控制方法，其特征在于，包括以下步骤中的一个或多个(1)薄层鉴别女贞子取本品5 30片，除去薄膜衣，研细，加乙醇10 50ml，加热回流10 60分钟，放冷，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。另取女贞子对照药材0.2 lg，同法制成对照药材溶液。再取齐墩果酸对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述三种溶液各2 10nl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15 25:5 10:0,2 0.8)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，10(TC 12(TC加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2)薄层鉴别枸杞子取本品5 30片，除去薄膜衣，研细，加水50 200ml,加热煮 沸10 60分钟，放冷，滤过，滤液用乙酸乙酯振摇提取1 3次，每次10 50ml，合并乙酸 乙酯液，浓缩至lml,作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材0.5 2g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述两种溶液各2 10yl,分别点于同一 以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15 25:5 10:0.2 0.8) 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色 谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(3) 薄层鉴别当归取本品5 30片，除去薄膜衣，研细，加乙醚20 100ml，超声处 理10 60分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取当归对照 药材0.5 2g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述两 种溶液各2 10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(60 90°C)-乙酸乙酯(17:2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检 视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(4) 薄层鉴别白芍取本品5 30片，除去薄膜衣，研细，加甲醇20 100ml，超声处理 10~60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加正丁醇饱和的水10 50ml分次溶解，置分液漏斗中， 用水饱和的正丁醇振摇提取1 3次，每次10 50ml，分取正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇lml 使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照 品溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取供试品溶液及对照品溶液2 10ul，分 别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(35 45 : 3 7 : 8 12 : 0.1 0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液， 100'C 120'C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同 颜色的斑点。(5) 薄层鉴别柴胡取本品10 50片，除去薄膜衣，研细，加甲醇20 100ml，超声处 理10 60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加正丁醇饱和的水10 50ml分次溶解，置分液漏斗 中，用水饱和的正丁醇振摇提取1 3次，每次10 50ml，分取正丁醇液，用氨试液10 100ml 洗涤，弃去氨洗液，再用正丁醇饱和的水10 100ml洗涤，弃去水洗液，分取正丁醇液，蒸 干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取柴胡对照药材0.2 2g，加甲醇10 50ml， 超声处理10 60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水饱和的正丁醇10 50ml使溶解，用氨试 液10 50ml洗涤，弃去氨洗液，分取正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为对照药 材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述两种溶液2 10"1，分别点于同一 以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(25 35 : 8 12 : 0.5 1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2°/。对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，加热至斑点 显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置紫外光 灯(365nm)下检视，显相同颜色的荧光斑点。(6)测定本品中芍药苷的含量 照高效液相色谱法(中国药典相应附录)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(25:75)为流 动相；检测波长为230mn。理论板数按芍药苷计算应不低于2000。对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，用稀乙醇制成每lml含0. lmg的溶液， 即得。供试品溶液的制备取本品，除去薄膜衣，精密称定，研细，取适量，精密称定，置具 塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用稀 乙醇补足减失的重量，摇匀，离心5 30分钟，取上清液，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5 20ul，注入液相色谱仪，测定， 即得。
全文摘要
本发明公开了一种中药制剂调经祛斑片的质量控制方法，所述质量控制方法包括以下步骤采用薄层色谱法鉴别女贞子、枸杞子、当归、白芍及柴胡，采用高效液相色谱法测定制剂中芍药苷的含量。该质量控制方法确实可行，可保证产品质量和临床疗效。
文档编号A61P15/00GK101574477SQ200910114069
公开日2009年11月11日 申请日期2009年5月18日 优先权日2009年5月18日
发明者伟 吴, 唐弟光, 梁山丹, 梁月钊, 莫少红, 蒙华英, 阮碧芳, 陈晓军 申请人:唐弟光