专利名称：含有作为活性成分的ena活性矿物源a活化水的用于防止肝损伤或改善肝功能的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种抗氧化、抗衰老并且具有肝功能改善活性的含有ENA活性矿物源 A(ΕΝΑ actimineral resource Α)活化水的组合物。更具体地，本发明涉及含有作为活性成分ENA活性矿物源A活化水的药物组合物、保健食品或保健补充物，由于其对血清中维生素C的减少具有抑制活性从而能够防止衰老，或由于其对肝细胞的损伤、细胞凋亡、或坏死具有抑制活性从而能够防止肝损伤或改善肝功能。
背景技术：
正在经历快速发展的人类处于各种各样的外部压力之中。压力是不可避免的并且对人体的一般的衰老过程产生影响。衰老不是疾病，而是一种不可避免的自然生理现象。人类对于长寿的内在需要导致对抑制衰老进行了大量研究。而且，说人们正在承受越来越大的压力一点也不为过。随着最近追求健康的趋势，人们越来越关注生命质量的改善，大量的研究集中于具有抗衰老活性的抗氧化物质。衰老标记蛋白(SMP 30)是一种质量为34kDa的衰老标记蛋白，其首次发现于大鼠肝脏中，并且有报道称其随着衰老的发生迅速减少数量。这种减少行为被已知是与由于衰老在雄性大鼠体内的雄性激素产生减少有关(Fujita T. , Biochem Biophys Res Commun. 1999 Jan 8 ；254(1) :1_4， Mori T et al. ， Pathology International 2004 ；54 ； 167-1737)。人们发现SMP 30能够防止细胞的细胞凋亡和坏死，并由此抑制物理性衰老。SMP 30的主要机制如下。SMP 30作为与维生素C的合成有关的葡萄糖酸内酯酶并从而在体内维生素C的生物合成中起重要作用。SMP 30维持胞内和胞外钙离子的体内稳态，其是一种信号分子，能够在细胞的细胞凋亡和坏死中起到重要作用。另外，SMP 30本身起到抗氧化蛋白的作用，其破坏对身体造成伤害的活性氧和自由基从而防止物理性衰老以及细胞的细胞凋亡和坏死。因此，已知与具有正常SMP 30蛋白的动物相比，SMP 30蛋白缺乏会导致维生素C缺乏并加速动物的衰老。越来越庞大的老年人群导致与长寿相关的产业迅速发展，包括健康补充品、激素制剂、抗氧化药物、以及老年人的生活和功能辅助手段。约90%的各种现代疾病都被发现由活性氧引起。在这种情况下，由于各种活动(例如皮肤护理和抑制绝经后机能紊乱并抗衰老)而进行胎盘素注射目前引起了很多关注，并且发现胎盘素表现出除去活性氧的活性并且因此能够有助于90%的现代疾病的治疗。因此，已知胎盘素几乎能够治疗由自发性神经控制活性、内分泌控制活性和免疫复苏活性引起的所有疾病。然而，对胎盘素的各种成分的作用还没有进行研究，而且与药物不同，食品的成分和作用不标注在食品上，这是因为这种标注不是法律上强制规定的。不存在理论支持实际上表现出抗衰老效果的抗衰老激素和这些激素的应用因此不被推荐的断言。韩国专利第10-0463825号披露了一种用于制备ENA活性矿物源A活化水的方法
3以及利用其防止和减轻骨质疏松症的组合物。作为一种天然物质，ENA活性矿物源A对于物理性衰老的防止或抑制活性目前为止还是未知的，其能够抑制肝细胞损伤并抑制血清维生素C的减少，从而抑制哺乳动物的衰老。
发明内容
因此，基于上述问题提出了本发明，本发明的一个目的是提供一种含有ENA活性矿物源A活化水作为活性成分的药物组合物和保健食品或健康补充品，其中该作为活性成分的ENA活性矿物源A活化水由于对血清维生素C减少具有抑制活性而防止衰老，或由于对肝细胞的损伤、细胞凋亡或坏死具有抑制活性而防止肝脏损伤或改善肝功能。根据本发明，上述和其他目的能够通过提供一种含有ENA活性矿物源A活化水作为有效成分的药物组合物和保健食品或健康补充品来实现，该作为活性成分的ENA活性矿物源A活化水由于对血清维生素C减少具有抑制活性而防止衰老，或由于对肝细胞的损伤、 细胞凋亡或坏死具有抑制活性而防止肝脏损伤或改善肝功能。ENA活性矿物源A活化水抑制体内血清维生素C的减少，从而抑制衰老和防止肝细胞的损伤、细胞凋亡或坏死。ENA活性矿物源A活化水抑制肝细胞的损伤、细胞凋亡或坏死，从而防止肝损伤或改善肝功能。
具体实施例方式以下，将具体描述本发明。根据本发明，提供了一种碱性水溶液，提供通过纯化天然可食用藻类制备的作为主要成分的天然矿物质，该天然可食用藻类，即紫菜(海苔)、琼脂(石花菜)、海藓(真江蓠(Gracilaria verrucosa))、海索面(Nemalion vermiculare)、娱虫公藻(Grateloupia filicina)、线形杉藻(Gigartina tenella)、海水藻(或三叉仙菜，Ceramium kondoi)、红藻淀粉、和墨鱼骨(金乌贼(Si^pia esculenta)).通过韩国专利第463，825号披露的方法获得的物质被称为“ΕΝΑ活性矿物源A活化水”，并且其是参照以下的方法制备的。如在此所使用的，术语“天然可食用的藻类”是指100 %可食用的蔬菜红藻，其含有藻红蛋白以及叶绿素并且因此呈红色或紫罗兰色。这种藻类通常具有多细胞线形或叶子形状，其通常在海洋中被发现并且包括紫菜、琼脂(石花菜)、布海苔(鹿角海萝(Gloiopeltis tenax))等。另外，墨鱼骨是通过干燥由墨鱼的中心收集得到的白骨而制备的。利用红藻或可食用的墨鱼制备矿物质是这样进行的彻底清洗红藻或可食用墨鱼，对它们进行充分干燥，接着以1，000°C至2000°C煅烧一小时。在通过煅烧细菌和杂质完全烧尽并由此被除去后，只剩下矿物质、无机物质。将矿物质完全冷却至环境温度，然后利用研磨器将其微粉化。然后，将该含有经煅烧的墨鱼骨和红藻的微粉矿物质溶解于水中。优选地，通过在 80°C至100°C利用扬水泵以IOrpm或更高的落差破碎该矿物质溶液一小时或更长的时间来制备离子溶液。沉淀并过滤这样获得的离子溶液。更具体地，将该离子溶液静置15至35 小时以使矿物质淤渣自然沉淀，而仅所得的清澈上层清液通过过滤器进行过滤，从而制得碱性矿物质活化水。
证实了 ENA活性矿物源A活化水对存活率和体重变化、动物骨骼变化和物理转化的差异的影响。更具体地，例如，持续18周以0%、5%和10%的不同浓度向给予了维生素 C的18周龄的SMP 30敲除小鼠，以及向未给予维生素C的26周龄和46周龄的SMP 30敲除小鼠给予ENA活性矿物源A活化水，通过肉眼观察到的变化以及测试周期上的体重以及存活率的变化被监测，在测试周期之后对所有的受试动物进行尸体剖检。结果是，对于给予了维生素C的组，能够观察到在给予了 ENA活性矿物源A活化水、测试矿物质的组与未服务ENA活性矿物源A活化水的组之间没有体重差异和存活率差异(参见图1)。另一方面，对于未服用维生素C的组之间在体重和存活率变化上的差异，给予ENA 活性矿物源A活化水的组相应于ENA活性矿物源A活化水的水平表现出体重显著快速下降低于平均体重，并且存活率为0%。也就是说，在相应于不同浓度的ENA活性矿物源A活化水的组之间存在明显差异(参见图2至图4)。另外，作为通过X-射线辐照证实自然发生的衰老现象对动物骨骼变化和物理转化的影响的测试结果，所有给予维生素C的组未患上坏血病性成骨病症，而所有未给予维生素C的组患有坏血病性成骨病症(参见图5)。证实了不论ENA活性矿物源A活化水是否能够抑制体内血清的维生素C的下降， 进而抑制衰老和肝细胞的损伤、细胞凋亡或坏死。首先，仅在给予了维生素C的组中观察到作为证实ENA活性矿物源A活化水对血清维生素C的影响的实验结果，而仅在未给予维生素C的组中未观察到维生素C。更具体地，对于给予了维生素C的组，给予了 ENA活性矿物源A活化水的组，与仅给予赋形剂的对照组相比统计学上表现出显著更高的血清中总维生素C水平。另外，能够从示出减少的维生素C与氧化的维生素C之比的图表中看出，与赋形剂对照组相比，给予了 ENA活性矿物源 A活化水的组表现出减少的维生素C与氧化的维生素C之比根据活化水的浓度增加。这种行为表明，ENA活性矿物源A活化水由于其具有抗衰老功能而抑制活体中的维生素C氧化， 从而防止衰老(参见图6和图7)。同时，ENA活性矿物源A活化水抑制肝细胞的损伤、细胞凋亡或坏死并由此防止肝损伤或改善肝功能。更具体地，例如，在各种几周龄的雄性SMP-30敲除小鼠衰老模型中，对于给予维生素C的组和未给予维生素C的组，观察到在衰老进行的18周的试验期间相应地给予ENA活性矿物源A活化水的肝脏中的组的病理学变化。通过观察肝细胞的细胞凋亡和损坏以及利用获自小鼠肝脏的肝组织片段观察抗活化蛋白的表达来研究这样的病理学变化。结果，对于所有给予了维生素C的组而言，未观察到病理学异常，并且未观察到它们之间的差异。另外，能够确认在正常肝细胞的细胞质中几乎没有观察到TUNEL-阳性细胞和糖原。然而，在所有未给予维生素C的组中，多度增生的肝脏星形细胞和肝细胞表现出高于正常水平的空泡形成并且观察到TUNEL-阳性细胞。此外，给予了 ENA活性矿物源A活化水的组在肝细胞的细胞质中表现出明显增加的糖原水平。这种结果表明，ENA活性矿物源A活化水抑制了由于衰老引起的肝细胞的细胞凋亡和损坏并保持正常肝功能，从而保持肝脏细胞质中的正常糖原水平并由此表现出优异的浓度依赖性肝细胞保护效应(参见图8至图13)。ENA活性矿物源A活化水抑制过氧化物歧化酶(一种衰老指示剂)。更具体地，作为证实这种指示剂对代表性抗衰老蛋白、Cu、Zn-SOD的影响的测试结果，Cu, Zn-SOD的表达随着小鼠年龄的增长而增加。对于46周龄组，以5%的浓度给予ENA活性矿物源A活化水的组与赋形剂对照组相比，表现出肝脏中的Cu、Zn-SOD的表达减少，并且该减少的表达取决于活化水的浓度(参见图15)。基于药物组合物的总重量，作为活性成分的ENA活性矿物源A活化水以0. 001至 15重量百分比的量存在，并且优选地，以0. 01至10重量百分比的量存在。药物组合物的每日剂量可根据个体差异(例如年龄和损伤的严重程度、或配方、 或体型)来适当地控制。对于成人，该药物组合物以0.01 to IOOOmg的有效量每日给予两次，并且其可被制成胶囊、片剂、咀嚼片、粉剂、干糖浆、颗粒剂、软胶囊、丸剂、饮料或舌下片剂。该药物组合物可进一步含有防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化促进剂、药用佐剂(如盐或缓冲剂以控制渗透压)以及其他治疗有效性物质。该药物组合物可通过常规方法配制为各种口服或肠胃外给药。用于口服给药的制剂的示例包括片剂、丸剂、硬胶囊和软胶囊、液体、混悬剂、乳剂、糖浆和颗粒剂等。除了活性成分之外，这些配方还可以含有稀释剂，如乳糖、葡萄糖、 蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素和甘氨酸，以及润滑剂，例如二氧化硅、滑石粉、硬脂酸盐、硬脂酸镁、硬脂酸钙和聚乙二醇。如果需要，片剂可以含有粘结剂(如硅酸镁铝(magnesium aluminum silicate)、淀粉糊剂、明胶、黄蓍树胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和聚乙烯吡咯烷酮)，以及药物添加剂，包括分解剂(如淀粉、琼脂、藻酸盐或藻酸钠，吸附剂，着色剂， 风味剂或甜味剂)。片剂可通过常规方法制备，例如混合、造粒或包衣。另外，优选的肠胃外配方是用于注射的配方，即，等渗水溶液或混悬液。然而，应该理解，活性成分的实际剂型可以由各种因素来确定，例如症状的严重程度、所选择的给药途径、以及受治疗者的年龄、性别、体重和健康状况。本领域技术人员将容易地确定和指定药物组合物的有益于皮肤的适当剂量。根据本发明的剂量的每日剂量可以根据不同因素而变化，例如受治疗者的疾病进展、疾病发作时间、年龄、健康状况和并发症。按体重比组成的组合物可以以每天一次或两次(以单独的剂量)的1至500mg/kg，优选30至200mg/kg的剂量给予。该剂量不用于限制本发明的范围。根据本发明，提供了一种含有ENA活性矿物源A活化水和营养学可接受的添加剂的保健功能性食品。该保健功能性食品是含有作为有效成分的ENA活性矿物源A活化水的片剂、胶囊剂、丸剂或液体。该保健食品组合物含有基于组合物的总重量0. 001至10重量百分比。该保健食品可利用常规的成分被配制成饮料、焦糖、巧克力和减肥棒、或零食，其中常规成分例如葡萄糖、柠檬酸、液态低聚糖、玉米糖浆、大豆卵磷脂、黄油、氢化植物油、脱脂乳、糖、人造黄油、食用盐、淀粉、小麦粉、淀粉糖浆、麦芽糖、碳酸氢钠和糖酯。如前文所述，ENA活性矿物源A活化水抑制与衰老相关的现象，例如体重减轻、死亡率、临床症状、肝细胞的细胞凋亡和损伤以及使血清中维生素C减少，从而其是一种有效抑制或防止哺乳动物体内衰老的天然物质。ENA活性矿物源A活化水是一种能够根本上保护肝细胞并因此抑制肝细胞的损伤、细胞凋亡或坏死，并且能够防止肝损伤或改善肝功能而不会伤害其他器官的天然物质。尽管为了示例性的目的披露了本发明的优选实施方式，但本领域技术人员将理解，在不背离由所附权利要求限定的本发明的范围和精神的情况下，可以对本发明进行各种修改、增加和替换。
通过以下结合附图进行的详细描述，能够更加清楚地理解本发明的上述和其他目的、特征以及其他优点，其中图1是比较在给予根据本发明的ENA活性矿物源A活化水之后在完整测试期间动物组之间各周平均体重变化值的图表；图2是示出了在给予根据本发明的ENA活性矿物源A活化水之后，18周内各组18 周龄小鼠的平均存活率的图表；图3是示出了在给予根据本发明的ENA活性矿物源A活化水之后，18周内各组26 周龄小鼠的平均存活率的图表；图4是示出了在给予根据本发明的ENA活性矿物源A活化水之后，18周内各组48 周龄小鼠的平均存活率的图表；图5是示出了 ENA活性矿物源A活化水对SMP 30毁坏小鼠的成骨性病症的影响的X-射线图像；图6是示出了在给予根据本发明的ENA活性矿物源A活化水之后，在第18周进行尸体剖检的小鼠体内的总维生素C比率的图表；图7是示出了在给予根据本发明的ENA活性矿物源A活化水之后，在第18周进行尸体剖检的小鼠体内的减少维生素C/氧化维生素C之比；图8示出了在给予本发明的ENA活性矿物源A活化水并进行尸体剖检之后，相对于ENA活性矿物源A活化水的HE-阳性细胞的病理学分析结果；图9示出了 ENA活性矿物源A活化水对HE-阳性细胞数目的影响的比较结果；图10示出了在给予本发明的ENA活性矿物源A活化水并进行尸体剖检之后，相对于ENA活性矿物源A活化水的PAS-阳性细胞的病理学分析结果；图11示出了 ENA活性矿物源A活化水对PAS-阳性细胞数目的影响的比较结果；图12示出了在给予根据本发明的ENA活性矿物源A活化水并进行尸体剖检之后， ENA活性矿物源A活化水对染色的TUNEL-阳性细胞数目的影响的比较结果；图13示出了 ENA活性矿物源A活化水对TUNEL-阳性细胞数目的影响的比较结果；图14示出了证实在给予根据本发明的ENA活性矿物源A活化水之后，ENA活性矿物源A活化水对肝脏中SMP 30表达的影响的病理学分析结果；以及图15示出了利用免疫印迹法证实的ENA活性矿物源A活化水对Cu、Zn-SOD表达的影响的比较结果。实施例[制备例1] ENA活性矿物源A活化水的制备 彻底清洗墨鱼骨和红藻，干燥并且然后进行粉碎以获得粉状的墨鱼骨和红藻。将这些粉状物质于iioo°c加热煅烧一小时。使经煅烧的墨鱼骨和红藻完全冷却至环境温度， 然后利用研磨器进行微粉化。本文中所使用的红藻是等量的紫菜(甘紫菜)、琼脂(石花
7菜)、海藓(真江蓠)、海索面、蜈蚣藻、线性杉藻、海水藻和红藻淀粉的混合物。边搅拌边将1. 5kg经煅烧的墨鱼骨微粉和4kg经煅烧的红藻微粉溶解于500L水中。得到的溶液于90°C利用扬水泵以IOrpm或更高的落差破碎该矿物质溶液两小时来制备离子溶液。由此获得的离子溶液静置15至35小时以使矿物质淤渣自然沉淀，而仅对所得的清澈上层清液通过过滤器进行过滤，从而制得碱性矿物质活化水。由此获得的矿物质活化水被称为“ΕΝΑ活性矿物源A活化水”并且下表1中示出了矿物成分的测定结果表 1ENA活性矿物源A活化水的成分测定
权利要求
1.一种药物组合物，其包含作为活性成分的碱性水溶液，由于对血清中维生素C减少的抑制活性，而防止衰老，或由于对肝细胞的损伤、细胞凋亡或坏死的抑制活性，而防止肝损伤或改善肝功能，其中所述碱性水溶液按照以下步骤制备将选自墨鱼骨(金乌贼)、紫菜(海苔)、琼脂(石花菜)、海藓(真江蓠)、海索面、蜈蚣藻、线性杉藻、海水藻、和红藻淀粉中的一种或多种碾压粉末化；以1，000°C至2，000°C加热煅烧粉末物质；使所述物质冷却并微粉化，然后将微粉物质加入到80°C至100°C的水中；利用扬水泵以IOrpm或更高的落差破碎所得到的混合物以制备离子溶液；以及过滤所述离子溶液以获得碱性水溶液。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述ENA活性矿物源A活化水以基于所述药物组合物总重量0. 001至15重量百分比的量存在。
3.根据权利要求2所述的药物组合物，该药物组合物由于对血清中维生素C减少的抑制活性，而防止衰老，或由于对肝细胞的损伤、细胞凋亡或坏死的抑制活性，而防止肝损伤或改善肝功能，其中，所述药物组合物被配制成胶囊、片剂、咀嚼片、粉剂、干糖浆、颗粒剂、 软胶囊、丸剂、饮料或舌下片剂。
4.一种保健食品或健康补充品，其包含作为活性成分的碱性水溶液，由于对血清中维生素C减少的抑制活性，而防止衰老，或由于对肝细胞的损伤、细胞凋亡或坏死的抑制活性，而防止肝损伤或改善肝功能，其中所述碱性水溶液是按照以下步骤制备的将选自墨鱼骨(金乌贼)、紫菜(海苔)、琼脂(石花菜)、海藓(真江蓠)、海索面、蜈蚣藻、线性杉藻、海水藻、和红藻淀粉中的一种或多种碾压粉末化；在于1，000°C至2，000°C加热下煅烧粉末物质；使所述物质冷却并微粉化，然后将所述微粉物质加入到80°C至100°C的水中；利用扬水泵以IOrpm或更高的落差破碎所得到的混合物以制备离子溶液；以及过滤所述离子溶液以获得碱性水溶液。
5.根据权利要求4所述的保健食品或健康补充品，其中，所述保健食品或所述健康补充品被配制成饮料、焦糖、巧克力、减肥棒或零食。
全文摘要
本发明披露了一种具有抗氧化、抗衰老和提高肝功能活性的组合物，其含有ENA活性矿物源A活化水。更具体地，本发明披露了一种含有作为活性成分的由墨鱼骨和红藻粉制备的碱性ENA活性矿物源A活化水的保健食品或健康补充品，由于对血清中维生素C减少的抑制活性，而防止衰老，或由于对肝细胞的损伤、细胞凋亡或坏死的抑制活性，而防止肝损伤或改善肝功能。该组合物抑制体内血清维生素C的减少，从而抑制衰老并防止肝细胞的损伤、细胞凋亡或坏死，并且从根本上保护肝细胞以抑制由肝脏中的衰老引起的肝细胞的损伤、细胞凋亡或坏死并改善肝功能。
文档编号A61K35/60GK102170889SQ200980136798
公开日2011年8月31日 申请日期2009年9月17日 优先权日2008年9月18日
发明者化成龙, 朴真圭, 郑圭植, 韩正伦 申请人:化成龙