专利名称：一种奥硝唑与氯化钠组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及的制备方法其工艺条件的优选原则是 1、pH值选择 在同一温度下将含有0.5％ONZ和0.85％NaCl混和液的pH值调至3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0，分别灌装于100ml输液瓶中，高温灭菌考察奥硝唑、pH及2-甲基-5-硝基咪唑的变化，结果见表1。
表1中的i、“+”表示增加，“-”表示减少。
ii、ONZ％灭菌前以100％计。
由以上表1可以看出，在pH4.5的环境下，奥硝唑氯化钠注射液较稳定。
2、活性炭用量及操作条件的选择 将处方量的奥硝唑、氯化钠用约800ml的注射用水溶解后稀释至处方量，按以下方案进行考察，检测其脱色前后的色泽、pH、ONZ％及细菌内毒素。
以下表2是考察脱色条件的因素及水平，其中，A活性炭用量(g/100ml)B脱色时间(min)C脱色温度(℃)DpH值。
A B C D 10.0520253.5 20.1030504.5 30.2040755.5 40.30- - - 以上表2检测结果表明，试制样品的色泽均浅于黄绿色2#标准比色液，pH值的变化均小于0.40个pH单位，奥硝唑的含量及细菌内毒素见表3，由表可知，加入0.05g/100ml活性炭搅拌脱色20min后，其吸附量已趋于饱和，且细菌内毒素符合要求，故将脱色条件确定为活性炭用量0.05g/100ml，脱色时间20-30min，Ph在4.5附近。
表3脱色方案及结果
本发明的样品试制 按制备工艺以处方5倍量投料试制三批样品，检测结果见表4 表4样品检测结果
以上表4中的“-”表示符合要求。
本发明涉及的制剂的稳定性影响因素考察 1、强光照射试验将三批样品置于光橱中10天，使其表面光照强度达4500±500Lx，于试验的第5天、第10天取样分析，并同0时分析结果比较，其检测项目及结果见表5-6 表5-6光照试验数据
奥硝唑氯化钠注射液光照降解产物有三种，其一为2-甲基-5-硝基咪唑，且其含量远高于另两个未知峰。上述光照试验表明随光照时间的延长，2-甲基-5-硝基咪唑含量在升高，故本品在存放时需避光。
2、高温试验将样品分别置于已恒温至60℃和40℃的恒温箱中10天，于试验的第5天、第10天后取样分析，并与0时分析结果比较，考察结果见表5、表6。
表5 40℃试验数据
表6 60℃试验数据
试验结果表明，本品在40℃试验期间相对稳定，而在60℃高温条件下稳定性差，降解产物2-甲基-5-硝基咪唑增长较快，故应避免在60℃以上高温环境中存放。
3、低温试验将三批试制样品置于已恒温至(4±2)℃的电冰箱中10天，于试验的第5天、第10天后取样分析，并与0天时分析结果比较，考察结果见表7。
表7低温试验数据
试验结果表明，本品在低温环境中稳定，各项指标变化很小，试验期间也未见固体物析出，故可存放在低温环境中。
本发明涉及的制剂的放大试验 按处方量200倍投料，依制备工艺试制三批样品(20090404-20090406)，检验结果见表8 表8放大试验结果
试验结果表明，该处方及工艺较稳定，依此用符合原申报原料药质量标准的连续三批原料药进行试制，所制产品符合注射液的质量要求。故原申报奥硝唑原料药质量标准可满足注射用药要求。
本发明涉及的药物的药效试验结果 1、最低抑菌浓度 A.用奥硝唑和甲硝唑(二倍稀释法)在试管中对阴道滴虫和溶组织阿米巴原虫进行药效试验，最低抑菌浓度数据如下(括弧中数字为95％可信限)
注*于37℃经48小时试验所得数值，为三次试验的几何平均值； **37℃24小时所得试验数据。
B.用奥硝唑和甲硝唑于试管中所做的抗菌效果试验表明奥硝唑和甲硝唑的最低抑菌浓度等于最低控制浓度(试验数据是37℃24小时试验结果)。
C.用甲硝唑(M)、奥硝唑(O)、替硝唑(T)对114种厌氧菌株进行了最小抑菌浓度(MTC)和最小杀菌浓度试验。
对于厌氧菌，奥硝唑和替硝唑的抑菌杀菌能力高于甲硝唑。奥硝唑抑菌浓度为3.1μg/ml，杀菌浓度为6.3μg/ml。
2、动物体内抗微生物药效试验结果 A.用奥硝唑和甲硝唑对小鼠毛滴虫病试验的药效研究。半数与 90％有效剂量比较(ED50与ED90)，一剂量口服用药重复四次试验(mg/kg)，(括弧中数字为95％可信限)。
试验A在CPCM介质中 试验B在毛滴虫介质CM161中 B.用奥硝唑和甲硝唑对Gold仓鼠的Leber阿米巴虫病进行试验的药效研究。ED50与ED90值，一次剂量口服用药重复五次试验(mg/kg)，(括弧中数字为95％可信限)。
C.用奥硝唑和甲硝唑对大鼠Blinddarm阿米巴虫病进行试验的药效研究，一次剂量口服用药重复三次试验(mg/kg)，(括弧中数字为95％可信限)。
D.小鼠气性坏疽病试验，一次剂量口服用药重复三次试验(mg/kg)，(括弧中数字为95％可信限)。
从ED50值尤其是ED90值可以看出奥硝唑药效优于甲硝唑。
本发明涉及的制剂的一次剂量静脉注射的药代动力学研究 静脉注射(一次剂量1000mg)后血浆中奥硝唑浓度水平和药代动力学参数 测量值或参数平均值±标准偏差 范围 最大值(15分钟)水平(mg/l) 24±5.2 33.3-18.2 最终测量值(24小时)水平(mg/l) 6.3±1.4 7.7-3.2 消除相半衰期(tl/2β)h14.1±2.719.8-10.2 消除率(CL)(ml/min) 47±2.7 66-34 表观分布容积(V1(l/kg)0.9±0.131.05-0.59 本发明涉及的制剂的临床疗效比较 (A)总体临床疗效比较， 各医院抗厌氧菌感染受试组间和对照组间临床疗效如表9，经Ridit分析，无显著性差异(P＞0.05)。受试组和对照组之间临床疗效经Ridit分析，亦无显著性差异(P＞0.05)。
表9各临床中心药物抗厌氧菌临床疗效比较
其中，总有效率＝(痊愈+显效)的百分率； Ridit检验各临床中心间比较P＞0.05；组间比较P＞0.05 (B)各科临床疗效比较 受试组与对照组抗厌氧菌疗效经Ridit统计学检验，两组无显著性差异(P＞0.05)。受试组与对照组抗厌氧菌痊愈率分别为89.2％和92.3％，抗厌氧菌总有效率分别为100％和98.5％，经X2检验均无显著性差异(P＞0.05)，见表10。
表10外科及妇科临床疗效比较
经X2检验*P＜0.05；**P＜0.01 (C)细菌学疗效比较 两组厌氧菌阳性病例共106例，细菌阳性率为80％(104/130)。厌氧菌清除情况见下表。受试组治疗前厌氧菌阳性病例为57例，厌氧菌阳性率为87.7％(57/65)，治疗后厌氧菌阴转病例为57例，厌氧菌阴转率为100％(57/57)。对照组治前厌氧菌阳性病例为49例，厌氧菌阳性率为75.3％(49/65)，治后厌氧菌阴转病例为49例，厌氧菌阴转率为100％(49/49)。两组厌氧菌清除率(均为100％)比较无显著性差异(P＝1)，表明两药的细菌学疗效相当。
厌氧菌消除情况比较
经X2检验，P＞0.05 (D)、药物MIC测定 将各参试单位高层半固体保存的菌种转种至分离培养基，按常规作厌氧培养，获得纯菌种。采用琼脂二倍稀释法测定MIC，范围为0.1ug-100ug/ml。共分离测定了107株厌氧菌，奥硝唑MIC范围为≤0.1-25ug/ml，MIC50 0.4ug/ml，MIC90 3.2ug/ml，见下表11。奥硝唑MIC测定值与文献报道的奥硝唑MIC相近。参考资料显示替硝唑MIC与奥硝唑差异很小[6]，与本次临床试验细菌学疗效结果相一致。
表11细菌种类(株数)及奥硝唑MIC范围
注10株以上者均统计了MIC50和MIC90，因株数较少，仅供参考； 本发明涉及的药品的安全性研究 1、毒理学研究 (1).急性毒性试验 经西安医科大学药学院药理研究室用本发明自制的奥硝唑对昆明种小白鼠做了急性毒性试验，LD50(mg/kg)测定结果为灌胃1645±147；腹腔注射1027±170；第四军医大学临床药理临床药学研究中心用其最大浓度(1.5％)和最大容积(30ml/kg)对昆明种小白鼠经尾静脉给药，结果无一死亡，小鼠尾静脉注射的最大给药量为450mg/kg(30ml/kg)。
(2).长期毒性试验 大鼠400mg/kg/day连续给药二年对大鼠的寿命无影响，没有引起严重的功能和形态的损害。
狗70-100mg/kg/day连续给药一年具有较好的耐受性，高剂量250mg/kg/day连续给药导致神经中毒症状(从第17天开始出现共济失调，冷淡、中等程度的震颤和流涎、体重开始减少)，这是硝基咪唑衍生物的共性，但奥硝唑引起的神经中毒症状出现的晚，甲硝唑250mg/kg/day连续对狗给药则在第5天就出现神经中毒症状。
(3).经第四军医大学临床药理临床药学研究中心试验，本发明试制的奥硝唑氯化钠注射液无致敏性、无血管刺激性、无溶血作用。
(4).致突变试验 奥硝唑对各种菌株具有致突变性，但用人的淋巴细胞或小鼠试验(微核试验，显性致死试验)证明奥硝唑对哺乳动物的染色体没有影响，没有致突变性。
(5).致畸试验 对大鼠、小鼠、兔高剂量给药胎中仔儿和产期仔儿对奥硝唑的耐受性相当好，尤其是没有发现致畸性。
(6).致癌试验 奥硝唑对大鼠400mg/kg/day长达两年的研究证明奥硝唑无致癌作用。
2、人体安全试验 ①对人体，每天口服1.5g奥硝唑连服5天，耐受性非常好，没有发现服用该药对造血、肝、肾功能造成影响，心电图和脑电图没有显示任何明显改变。
②对73名患者一次口服1.5g奥硝唑引起的轻度副作用如下疲倦28.77％、眩晕47.95％、口苦4.11％、恶心2.74％，其它症状(呕吐、腹泻、便秘、口渴、出汗、发痒)6.85％，无副作用9.59％。每次0.5g，每日二次口服用药对2085名患者研究发现256例有副作用(占12.2％)，其中头晕4.7％，胃肠不适2.8％，无一例有危险性。
权利要求
1.一种奥硝唑与氯化钠组合物，其特征在于，其制剂处方量奥硝唑5.0g，氯化钠8.5g，盐酸适量，注射用水加至1000ml。
2.一种奥硝唑与氯化钠组合物的制备方法，其特征在于，取奥硝唑和氯化钠溶于1000ml注射用水中，按配液量加入针用活性炭(0.05g/100ml)，于25-50℃以内搅拌脱色20-30min，静置15min，过滤，加盐酸调pH至4.5取样测定pH值及含量，符合要求后经垂熔漏斗及微孔滤膜精滤，再经澄明度检验合格后灌封，高温灭菌即可。
全文摘要
本发明涉及一种奥硝唑与氯化钠组合物，其制剂处方量奥硝唑5.0g，氯化钠8.5g，盐酸适量，注射用水加至1000ml。其组合物的制备方法是取奥硝唑和氯化钠溶于1000ml注射用水中，按配液量加入针用活性炭(0.05g/100ml)，于25-50℃以内搅拌脱色20-30min，静置15min，过滤，加盐酸调pH至4.5，取样测定pH值及含量，符合要求后经垂熔漏斗及微孔滤膜精滤，再经澄明度检验合格后灌封，高温灭菌即可。
文档编号A61P33/02GK101816650SQ201010177459
公开日2010年9月1日 申请日期2010年5月20日 优先权日2010年5月20日
发明者郑方晔, 刘护鱼, 周小园, 於长权 申请人:西安万隆制药有限责任公司