专利名称：一种从丹参醇沉沉淀物中提取丹参总酚酸的方法
技术领域：
本发明属于医药领域，特别涉及一种从丹参醇沉沉淀物中提取丹参总酚酸的方 法。
背景技术：
丹参注射液主要用于治疗心绞痛、急性心肌梗塞和脑缺氧，还可用于血栓闭塞性 脉管炎、硬皮病、视网膜中央动脉栓塞、神经性耳聋、白噻氏综合征、结节性红斑脑血栓形成 的后遗症等。丹参注射剂的主要有效成分是丹参中的酚酸类成分，如丹参素、原儿茶醛、迷 迭香酸、咖啡酸、丹酚酸A和丹酚酸B等。药理研究表明，丹参中的酚酸类成分普遍具有抗 氧化活性。丹参注射液主要生产步骤由提取、醇沉、水沉等数个工艺组成。醇沉是中药注射 剂生产过程中应用十分广泛的除杂步骤，具有很强的除杂能力。乙醇沉淀不仅可去除蛋白 质、多糖等大分子化合物，也可部分去除小分子糖类、盐类、鞣质和色素等。对于丹参注射液 而言，醇沉是紧接于丹参注射液提取工艺之后的除杂步骤，是该注射剂主要的除杂工艺，除 杂量大，对于终产品质量具有重要的影响。为了保证除杂效果，生产中采用了两次醇沉的办 法，由于存在沉淀的包裹和吸附作用，两次醇沉中酚酸类成分都会有明显损失，如果能够将 酚酸类成分从沉淀中提取出来，就可以提高丹参药材的利用率，节约宝贵的草药资源。目前 文献中还没有从丹参醇沉的沉淀中回收丹参总酚酸的方法。
发明内容
本发明针对丹参醇沉过程中大量酚酸类成分损失于沉淀的现状，提供一种从丹参 醇沉沉淀物中提取丹参总酚酸的方法。本发明通过如下步骤实现1.取醇沉沉淀物进行干燥，得到干燥的沉淀物固体；2.粉碎沉淀物固体得到沉淀物颗粒；3.将沉淀物颗粒过筛并选取3 160目之间的颗粒装填于层析柱中；4.用洗脱剂浸泡并洗脱层析柱中的颗粒；5.收集洗脱液，回收溶剂并干燥得到丹参总酚酸。本发明具体涉及的丹参醇沉沉淀物既包括丹参注射液或其它丹参制剂生产中的 第一次醇沉产生的沉淀物，也包括丹参注射液或其它丹参制剂生产中的第二次醇沉产生的 沉淀物。采用冷冻干燥、减压干燥或微波干燥方法干燥醇沉沉淀物得到干燥的沉淀物固 体。沉淀物固体粉碎后过筛，选择粒径在3 160目之间的颗粒装填于层析柱中。然后用 洗脱剂浸泡沉淀，浸泡时间在0. 5 72h之间。浸泡之后开始洗脱，洗脱时洗脱剂的流速为 0. 05B 5BV/h(柱床体积/小时)。收集洗脱液，减压回收溶剂至近干，冷冻、减压或微波 干燥就可以得到丹参总酚酸。干燥时温度不超过100°c。最终得到的丹参总酚酸的纯度按
3质量分数计在80 99%之间。本发明具体涉及的用于浸泡和洗脱的洗脱剂中含有乙醇、水和氯化氢。当从丹参 第一次醇沉的沉淀中提取总酚酸时，洗脱剂中乙醇含量(以质量分数计)在75 99. 4%之 间，水的含量(以质量分数计)在0.5 24. 9%之间，氯化氢的含量(以质量分数计)在 0. 1 5%之间。当从丹参第二次醇沉的沉淀中提取总酚酸时，洗脱剂中乙醇含量(以质量 分数计)在85.0 99.0%之间，水的含量(以质量分数计)在0.5 14.9%之间，氯化氢 含量(以质量分数计)在0.1 5%之间。本发明的优势在于可以从丹参醇沉的沉淀物中回收纯度较高的丹参酚酸，更充分 地利用丹参药材资源。本发明方法简单易控，所用的洗脱剂价格低廉，因此非常适合在工业 生产中推广应用。
具体实施例方式本发明结合实施例作进一步的说明。实施例1 取丹参第一次醇沉的沉淀若干，50°C减压干燥后得红褐色的沉淀物固体。将沉淀 物固体敲碎后过筛，取3目筛和160目筛之间的颗粒装填于层析柱中。将无水乙醇和浓盐酸按一定比例混合得到洗脱剂，其中乙醇含量(以质量分数 计)为90. 6 %。水含量(以质量分数计)为6. 2 %，氯化氢含量(以质量分数计)为3. 2 %， 用洗脱剂浸泡沉淀12h后开始洗脱，洗脱液的流速为0. 09BV/h。收集洗脱液，并将洗脱液减 压浓缩回收溶剂至近干，40°C减压干燥12h，即得丹参总酚酸。经测定，制得的丹参总酚酸纯 度为91. 3%。实施例2:取丹参第一次醇沉的沉淀若干，微波干燥得红褐色的沉淀物固体。将沉淀物固体 粉碎后过筛，取3目筛和160目筛之间的颗粒装填于层析柱中。将无水乙醇、水和浓盐酸按一定比例混合得到洗脱剂，其中乙醇含量(以质量分 数计)为99.4%。水含量(以质量分数计)为0.5%，氯化氢含量(以质量分数计)为 0. 1%，用洗脱剂浸泡沉淀12h后开始洗脱，洗脱液的流速为5BV/h。收集洗脱液，并将洗脱 液减压浓缩回收溶剂至近干，微波干燥即得丹参总酚酸。经测定，制得的丹参总酚酸纯度为 80. 3%。实施例3 取丹参第一次醇沉的沉淀若干，冷冻干燥36h后取出红褐色的沉淀物固体。将沉 淀物固体敲碎后过筛，取3目筛和160目筛之间的颗粒装填于层析柱中。将无水乙醇、水和浓盐酸按一定比例混合得到洗脱剂，其中乙醇含量(以质量分 数计)为75 %。水含量(以质量分数计)为24. 9 %，氯化氢含量(以质量分数计)为0. 1 %， 用洗脱剂浸泡沉淀0. 5h后开始洗脱，洗脱液的流速为0. 05BV/h。收集洗脱液，并将洗脱液 减压浓缩回收溶剂至近干，冷冻干燥30h即得丹参总酚酸。经测定，制得的丹参总酚酸纯度 为 88. 4%。实施例4 取丹参第一次醇沉的沉淀若干，冷冻干燥后从冷冻干燥机中取出红褐色的干燥沉淀物固体。将沉淀物固体敲碎后过筛，取3目筛和160目筛之间的颗粒装填于层析柱中。将无水乙醇、水和浓盐酸按一定比例混合得到洗脱剂，其中乙醇含量(以质量分 数计)为95%。水含量(以质量分数计)为4%，氯化氢含量(以质量分数计)为1%，用 洗脱剂浸泡沉淀12h后开始洗脱，洗脱液的流速为lBV/h。收集洗脱液，并将洗脱液减压 浓缩回收溶剂至近干，冷冻干燥30h即得丹参总酚酸。经测定，制得的丹参总酚酸纯度为 95. 7%。实施例5 取丹参第一次醇沉的沉淀若干，冷冻干燥后从冷冻干燥机中取出红褐色的干燥沉 淀物固体。将沉淀物固体敲碎后过筛，取3目筛和160目筛之间的颗粒装填于层析柱中。将无水乙醇、水和浓盐酸按一定比例混合得到洗脱剂，其中乙醇含量(以质量分 数计)为85%。水含量(以质量分数计)为10%，氯化氢含量(以质量分数计)为5%’ 用洗脱剂浸泡沉淀12h后开始洗脱，洗脱液的流速为lBV/h。收集洗脱液，并将洗脱液减压 浓缩回收溶剂至近干，冷冻干燥30h即得丹参总酚酸。经测定，制得的丹参总酚酸纯度为 90. 1%。实施例6:取丹参第二次醇沉的沉淀若干，50°C减压干燥后得红褐色的干燥沉淀物固体。将 沉淀物固体敲碎后过筛，取3目筛和160目筛之间的颗粒装填于层析柱中。将无水乙醇和浓盐酸按一定比例混合得到洗脱剂，其中乙醇含量(以质量分数 计)为90. 6 %。水含量(以质量分数计)为6. 2 %，氯化氢含量(以质量分数计)为3. 2 %， 用洗脱剂浸泡沉淀6h后开始洗脱，洗脱液的流速为3BV/h。收集洗脱液，并将洗脱液减压浓 缩回收溶剂至近干，60°C减压干燥12h即得丹参总酚酸。经测定，制得的丹参总酚酸纯度为 88. 5%。实施例7 取丹参第二次醇沉的沉淀若干，100°C减压干燥6h后得红褐色的干燥沉淀物固 体。将沉淀物固体敲碎后过筛，取3目筛和160目筛之间的颗粒装填于层析柱中。将无水乙醇、水和浓盐酸按一定比例混合得到洗脱剂，其中乙醇含量(以质量分 数计)为99.4%。水含量(以质量分数计)为0.5%，氯化氢含量(以质量分数计)为 0.1%,用洗脱剂浸泡沉淀72h后开始洗脱，洗脱液的流速为5BV/h。收集洗脱液，并将洗脱 液减压浓缩回收溶剂至近干，100°C减压干燥6h即得丹参总酚酸。经测定，制得的丹参总酚 酸纯度为82. 1%。实施例8 取丹参第二次醇沉的沉淀若干，冷冻干燥36h后从冷冻干燥机中取出红褐色的干 燥沉淀物固体。将沉淀物固体敲碎后过筛，取3目筛和160目筛之间的颗粒装填于层析柱 中。将无水乙醇、水和浓盐酸按一定比例混合得到洗脱剂，其中乙醇含量(以质量分 数计)为85 %。水含量(以质量分数计)为14. 9 %，氯化氢含量(以质量分数计)为0. 1 %， 用洗脱剂浸泡沉淀0. 5h后开始洗脱，洗脱液的流速为0. 05BV/h。收集洗脱液，并将洗脱液 减压浓缩回收溶剂至近干，冷冻干燥30h即得丹参总酚酸。经测定，制得的丹参总酚酸纯度 为 86. 8%。
5
实施例9 取丹参第二次醇沉的沉淀若干，冷冻干燥42h后从冷冻干燥机中取出红褐色的干 燥沉淀物固体。将沉淀物固体敲碎后过筛，取3目筛和160目筛之间的颗粒装填于层析柱 中。将无水乙醇、水和浓盐酸按一定比例混合得到洗脱剂，其中乙醇含量(以质量分 数计)为87%。水含量(以质量分数计)为8%，氯化氢含量(以质量分数计)为5%，用 洗脱剂浸泡沉淀12h后开始洗脱，洗脱液的流速为2. 3BV/h。收集洗脱液，并将洗脱液减压 浓缩回收溶剂至近干，冷冻干燥30h即得丹参总酚酸。经测定，制得的丹参总酚酸纯度为 93. 2%。实施例10 取丹参第二次醇沉的沉淀若干，冷冻干燥35h后从冷冻干燥机中取出红褐色的干 燥沉淀物固体。将沉淀物固体敲碎后过筛，取3目筛和160目筛之间的颗粒装填于层析柱 中。将无水乙醇、水和浓盐酸按一定比例混合得到洗脱剂，其中乙醇含量(以质量分 数计)为99.4%。水含量(以质量分数计)为0.5%，氯化氢含量(以质量分数计)为 0. 1%，用洗脱剂浸泡沉淀24h后开始洗脱，洗脱液的流速为0. 15BV/h。收集洗脱液，并将洗 脱液减压浓缩回收溶剂至近干，冷冻干燥30h即得丹参总酚酸。经测定，制得的丹参总酚酸 纯度为99.0%。
权利要求
一种从丹参醇沉沉淀物中提取丹参酚酸的方法，其特征在于，通过以下步骤实现(1)取醇沉沉淀物进行干燥，得到干燥的沉淀物固体；(2)粉碎沉淀物固体得到沉淀物颗粒；(3)将沉淀物颗粒过筛并选取3～160目之间的颗粒装填于层析柱中；(4)用洗脱剂浸泡0.5～72小时后用洗脱剂以0.05～5柱床体积/小时的流速对层析柱中的颗粒进行洗脱；(5)收集洗脱液，回收溶剂并干燥，即得到丹参总酚酸。
2.如权利要求1所述的一种从丹参醇沉沉淀物中提取丹参酚酸的方法，其特征在于， 步骤(1)所述的醇沉沉淀物，既包括丹参注射液或其它丹参制剂生产中的第一次醇沉产生 的沉淀物，也包括丹参注射液或其它丹参制剂生产中的第二次醇沉产生的沉淀物。
3.如权利要求1所述的一种从丹参醇沉沉淀物中提取丹参酚酸的方法，其特征在于， 步骤(1)干燥沉淀物时采用冷冻干燥、减压干燥或微波干燥，干燥时温度不超过100°c。
4.如权利要求1所述的一种从丹参醇沉沉淀物中提取丹参酚酸的方法，其特征在于， 步骤(4)所述的洗脱剂组成为乙醇、水和氯化氢，当处理丹参第一次醇沉的沉淀物时，洗 脱剂中以质量分数计的乙醇含量为75 99. 4%，以质量分数计的水含量为0. 5 24. 9%， 以质量分数计的氯化氢含量为0. 1 5% ；当处理丹参第二次醇沉的沉淀物时，洗脱剂中以 质量分数计的乙醇含量为85 99. 4%，以质量分数计的水含量为0. 5 14. 9%，以质量分 数计的氯化氢含量为0. 1 5%。
5.如权利要求1所述的一种从丹参醇沉沉淀物中提取丹参酚酸的方法，其特征在于， 步骤(5)制得的丹参总酚酸的纯度按质量分数计为80. 0 99. 0%。
全文摘要
本发明提供一种从丹参醇沉沉淀物中提取丹参酚酸的方法，采用渗漉工艺从干燥的丹参醇沉沉淀物中回收丹参总酚酸。该方法首先要干燥丹参醇沉得到的沉淀物，然后粉碎干沉淀物得到不规则的颗粒，再将颗粒过筛，选择大小合适的颗粒装填于层析柱中。配制一定组成的洗脱剂，用洗脱剂浸泡层析柱中的沉淀一段时间后，再以一定流速进行渗漉，收集渗漉液并且干燥就可以得到丹参总酚酸。该方法过程简单易控，洗脱剂成本低廉，回收得到的丹参酚酸纯度较高，非常适合从丹参醇沉的沉淀物中回收丹参总酚酸，提高丹参药材的利用率。
文档编号A61P9/10GK101947254SQ20101026262
公开日2011年1月19日 申请日期2010年8月20日 优先权日2010年8月20日
发明者瞿海斌, 程翼宇, 龚行楚 申请人:浙江大学;正大青春宝药业有限公司