专利名称：乌司他丁用于制备治疗类风湿性关节炎药物的用途及其药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及药物化学领域。具体而言，本发明涉及一种治疗类风湿性关节炎的药 物，特别涉及乌司他丁作为治疗类风湿性关节炎药物的一种应用。
背景技术：
类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一种以慢性对称性多关节炎及骨 和软骨破坏为主要临床表现的自身免疫性疾病。其最显著的病理特点是滑膜增生、炎性细 胞浸润、关节软骨及骨破坏、功能丧失甚至残疾，是严重威胁人类健康的疾病之一。在我国 RA的患病率为0. 5%左右，虽然低于欧美国家的 3%，但仍是造成我国人群丧失劳动 力和致残的主要疾病之一(每年有1500 2000万人致残)。迄今尚无特异有效的治疗方 法，传统治疗虽可暂时缓解RA患者的临床症状和改善关节功能，但不能阻止疾病的进展， 且临床不良反应非常严重。目前，对RA发病机制尚不清楚，但已经证实的是引起RA关节炎症及骨和软骨损伤 的原因主要是两方面的因素炎症反应和自身免疫。多数RA治疗都是以减轻关节的慢性炎 症、抑制依赖炎性细胞因子和趋化因子的多因子反应为目标。目前认为，较传统药物，抑制 炎性介质尤其是TNF-α分泌或阻断其受体结合的制剂更具特效。众多研究表明，TNF-α在 RA发病过程中具有重要的作用。TNF-α是一种重要的炎性细胞因子，可引起IL-I β、IL-6、 IL-8及白细胞抑制因子等其它炎性细胞因子释放的级联反应，促进中性粒细胞、成纤维细 胞及软骨细胞释放蛋白酶。所释放的这些蛋白酶，包括胶原酶及中性的金属蛋白酶等，可直 接参与RA的病理损伤。乌司他丁，又名人尿胰蛋白酶抑制剂(Human Urinary Trypsin Inhibitor,UTI, Urinastatin ；或Ulinastatin)，是从人体尿液中分离纯化的由143个氨基酸组成的酸性糖 蛋白，它不仅是一种广谱蛋白酶抑制剂，还有抗炎、抗肿瘤及免疫调节等多种作用，可以抑 制免疫细胞的活化增殖，调节细胞因子网络。既往的多项研究表明，乌司他丁可以抑制炎性 因子TNF-α等的释放，因此乌司他丁可以从多方面抑制RA的病理过程。
发明内容
本发明的目的是为治疗类风湿性关节炎提供一种高效、安全且副作用少的方法。本发明的乌司他丁对类风湿性关节炎有明显的治疗作用，一般以药物组合物的形 式使用，这种组合物含有治疗有效量的作为活性成分的乌司他丁和可药用辅料，主要剂型 包括冻干粉针剂和注射液剂，通常以静脉注射途径给药。经静脉注射给药的乌司他丁组合物，一般是固体的灭菌组合物形式。这些组合物 还可以含有添加剂，特别是甘露醇、右旋糖苷、水解明胶、柠檬酸钠、甘氨酸等。在使用时溶 解于灭菌注射用水或其它注射用灭菌介质中。经静脉注射给药的乌司他丁组合物也可以是水溶液形式，组合物还可以含有添加剂，特别是甘露醇、氯化钠、葡萄糖等。乌司他丁的剂量根据病情的严重程度、治疗时间而定，一般静脉注射给药量是每 天给药1-4次，每次给药10万 100单位/支(瓶)，优选20-60万单位。
具体实施例方式以下通过具体实施例对本发明作进一步说明。实施例1制备乌司他丁干粉针取过滤灭菌乌司他丁水溶液10000万单位，加20克甘露醇溶解，调节PH到中性， 加注射用水至2000毫升，加氯化钠调节等渗，无菌过滤，分装于1000个西林瓶中，无菌条件 下冷冻干燥，即得。实施例2制备乌司他丁注射液取过滤灭菌的乌司他丁水溶液10000万单位，调节PH到中性，加注射用水至2000 毫升，加氯化钠调节等渗，无菌过滤，分装1000个西林瓶中，即得。实施例3乌司他丁对类风湿关节炎大鼠的治疗作用第一部份胶原诱导型关节炎(CIA)动物模型的建立及评分将牛II型胶原(C II)溶于0. IM醋酸制成2mg/ml的溶液，与等体积的完全弗氏 佐剂混合，磁珠搅拌乳化，配成终浓度lmg/ml的乳剂。取0.5ml(含C II 0. 5mg)分别于 Wistar大鼠背部5个部位皮内注射，10天后同样剂量在大鼠尾根部皮内注射加强免疫一 次。观察大鼠关节炎的发病情况，并根据关节炎发病大鼠的腿部和趾尖部位的红肿程度，按 (0 4级)进行评分。0分无关节炎；1分有红色斑点或轻度肿胀；2分关节部位中度 肿胀；3分关节严重红肿；4分严重红肿，严重功能障碍，无法负重。每只爪的评分相加即 得到大鼠关节炎症的总评分。关节总评分大于1的大鼠为类风湿性关节炎模型建立成功。第二部分乌司他丁治疗CIA动物模型的实验研究首次免疫后21天，选取造模成功的大鼠模型72只，随机分为六组空白对照组、溶 剂对照组、甲氨蝶呤治疗组、乌司他丁治疗I组、乌司他丁治疗II组、乌司他丁治疗III组， 另外选用12只正常大鼠作为正常对照组。空白对照组不予治疗；溶剂对照组为等容积的含 有选自甘露醇、氯化钠或葡萄糖的添加剂组成的缓冲液，其成份比与乌司他丁注射液内添 加剂相同；甲氨蝶呤治疗组剂量1. 75mg/kg ；乌司他丁 I组剂量为30，000单位/kg，II组剂 量为80，000单位/kg，III组剂量为200，000单位/kg，均为每日一次，持续14天，给药途 径为腹腔注射。主要检测项目为一般情况观察，关节肿胀度测量，治疗结束后大鼠关节腔滑液及 血清TNF α、IL-I β水平检测，关节组织病理检查。结果1.各治疗组间一般情况的比较大鼠于初次免疫次日背部及尾根部开始出现轻度红肿，并逐渐加重，甚至破溃结 痂。10天内大鼠无任何关节炎症表现，再次免疫后，第13 15天起部分大鼠即出现关节红 肿，而后相继出现关节炎症状，并于15 20天基本全部发病。正常对照组大鼠无任何体征 改变。与正常大鼠比较，CIA组大鼠行动不便，后爪明显肿胀，关节呈屈曲状态，CIA大鼠前 爪、尾部关节无改变，未出现结节、红斑和关节强直。CIA大鼠造模后，平均体重减轻，后期可见毛发枯燥，大鼠踝关节和趾关节红肿，病变呈对称性，经过乌司他丁及MTX治疗的各组 大鼠总体状态较各对照组好，关节炎症状显著减轻。实验过程中发现MTX治疗组大鼠第7 天后毛色发黄，状态不佳，判定为MTX副作用的结果，而乌司他丁各剂量组未见此现象。2.对关节肿胀的影响在给药后不同时间点测定踝关节的周长，与正常对照组相比，相它各组关节明显 肿胀(*，P<0. 05)，不同治疗方案均可改善造模大鼠关节肿胀程度，而溶剂对照组对关节 肿胀程度没有改善。其中乌司他丁 II组和III组与空白对照组在第4天时出现显著性差 异(#P < 0. 05)，治疗第7天后各治疗组改变均明显(#P < 0. 05)，到14天时，MTX组，乌司 他丁 II组及III组基本恢复正常。关节肿胀程度，空白对照组>溶剂对照组>乌司他丁治 疗I组> MTX治疗组>乌司他丁治疗II组>乌司他丁治疗III组>正常对照组。表1各组大鼠关节肿胀的改变(mm)
权利要求
乌司他丁用于制备治疗类风湿性关节炎药物的用途，所述药物含有治疗有效量的乌司他丁以及药学上可接受的载体。
2.根据权利要求1的用途，其中所述药物的给药量是每天给药1-4次，每次给药10 万 100单位/支(瓶)，优选20-60万单位。
3.根据权利要求1的用途，其中所述药物为冻干粉针剂，载体可选用葡萄糖、氯化钠、 甘露醇、乳糖或水解明胶中的一种或其任意混合物。
4.据权利要求1的用途，其中所述药物为注射液，载体可选用注射用水、葡萄糖、氯化 钠或甘露醇的一种或其任意混合物。
5.根据权利要求3所述的用途，其中所述的药物还含有选自甘露醇、右旋糖苷、水解明 胶、柠檬酸钠或甘氨酸的添加剂。
6.根据权利要求4所述的用途，其中所述的药物还含有选自甘露醇、氯化钠或葡萄糖 的添加剂。
全文摘要
本发明涉及乌司他丁作为制备治疗类风湿性关节炎药物的一种应用。本发明涉及药物来源于人尿提纯的天然蛋白药物，质量稳定可靠，不良反应少，克服了传统药物治疗类风湿关节炎存在的副作用较多等缺点。通过对类风湿性关节炎动物模型的疗效对比研究，发现乌司他丁疗效优于氨甲蝶呤组，且副作用少。
文档编号A61P19/02GK101954072SQ201010299510
公开日2011年1月26日 申请日期2010年10月8日 优先权日2010年10月8日
发明者傅和亮, 华明娟, 吴蓉蓉, 邹春芽, 陈颖 申请人:广东天普生化医药股份有限公司