专利名称：一种牙基质海绵剂及其制备方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，涉及一种牙基质海绵剂及制备方法。该海绵剂能对牙基质很好的塑形，使牙基质更好地填充到骨缺损、骨不连、骨组织萎缩、骨折、骨愈合不良等病部位，并以有效剂量长时间持续地发挥其诱导骨生成、促进骨修复、促进伤口收敛的作用。
背景技术：
美国的Urist博士发现脱钙的骨基质能够诱导骨和软骨的形成，并在1965年创立了以骨质中BMP的骨组织形成诱导作用为核心的骨诱导修复理论。此后，国内外各学者针对骨修复理论进行了大量的研究，开发出一系列来源于生物体的成骨材料，主要有自体骨材料和冷冻异体骨。但自体骨的移植除了给患者带来二次创伤外，往往还会导致供骨区的功能缺失，另外利用自体骨治疗骨缺损不仅对较大范围的缺损治疗有局限性，同时还受到患者体质和年龄的限制；而冷冻异体骨虽然使用方便，但较容易引起排异反应从而导致治疗失败。随着对BMP研究的进展，发现BMP可以诱导异位成骨。学者尝试用基因工程等方法大量合成BMP并用于骨修复，发现其虽然有提高成骨的作用，但易于在体内扩散稀释和被蛋白酶降解，难以长期在体内发挥成骨作用，而需要有合适的载体控制缓释，才能使其更长时间的发挥作用。牙材料就是一种含有BMP和胶原蛋白的生物材料，我通过科学的方法适当的处理，得到了能够诱导骨生成、促进骨组织形成与修复一种新型的骨诱导材料。该材料对骨不连、骨组织萎缩吸收、骨折愈合不良及大面积的骨缺损等病症的治疗具有良好的效果。海绵剂作为药剂的一个剂型，在临床应用中越来越显现出了重要作用。海绵剂系由亲水胶体溶液经发泡、固化、冻干和灭菌而制成的一种海绵状固体制剂。海绵剂基质共分两类一是用蛋白质为原料制成的，如胶原海绵、明胶海绵；二是用淀粉为材料制成的淀粉海绵。淀粉海绵质地松脆易碎；而胶原海绵和明胶海绵质柔软，临床应用较多。海绵剂在临床上多用作外科辅助止血。由于海绵剂具有生物相容性好、无毒副作用，在体内可彻底降解等优点，而且蛋白胶原类海绵本身具有诱导成纤维细胞及上皮细胞再生，促进创面修复的功能，因此海绵剂，在组织再生修复中发挥了越来越重要的作用。本牙基质海绵剂具有海绵状结构且有吸水溶胀作用，可以提高牙基质在骨缺损局部的剂量并为细胞和新生组织的生长提供临时支架，更好地诱导细胞实现局部的定向分化和组织再生。
发明内容
本发明的目的之一是提出一种牙基质海绵剂，使牙基质填充到骨缺损、骨不连、骨组织萎缩、骨折、骨愈合不良等病部位，发挥其诱导骨生成、促进骨修复、促进伤口收敛的作用。本发明的目的之二是提出上述牙基质海绵剂的制备方法。
本发明的发明目的之一是通过选用一种牙基质海绵剂实现的。该海绵剂包括 80 99%所述海绵剂重量百分含量的的牙基质及1 20%胶原海绵，所述牙基质经醛类交联剂交联固定在胶原海绵基质上。所述牙基质为用废弃的哺乳动物原牙制备的骨基质材料，为采用以下方法制备的(1)用加热至40°C的50%次氯酸钠消毒液浸泡哺乳动物原牙原料并搅拌消化30 分钟，以去除软组织及消毒；(2)将已消毒的哺乳动物原牙原料经机械方法去除牙釉质、牙骨质及龋坏牙体等， 保留牙本质；(3)机械粉碎牙本质，使之成为10-100目的颗粒；(4)将粉碎后的颗粒状牙本质按步骤(1)再次去除其软组织及消毒；(5)放入5倍体积的1 1氯仿甲醛中浸泡30分钟；(6)清洁流水漂洗4小时后放入5倍体积的0. 6 0. 65M HCl中浸泡18 M小时；(7)无菌去离子水反复漂洗漂洗后获得牙基质。所述胶原蛋白为市售医用胶原蛋白。所述醛类为甲醛或多聚甲醛本发明的发明目的之二是通过以下技术方案实现的，一种制备上述牙基质海绵剂的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤(1)将胶原蛋白溶于0. 乙酸溶液中，制成0. 1 3%胶原蛋白溶液，于 0. 2 2mM磷酸盐缓冲液(pH7. 4 8. 0)中透析至中性；(2)在上述胶原蛋白溶液中，加入牙基质，搅拌均勻；(3)边搅拌边加入一定量4% 6%的甲醛溶液，搅拌至产生大量均勻细致的气泡为止；(4)于-80 -20°C冷冻2 5天，冻干得到海绵状材料；(5)切割，真空包装，灭菌、灭病毒，制得牙基质海绵剂成品。本发明巧妙地利用醛类交联将牙基质交联固定在胶原海绵基质上，利用胶原海绵基质网状结构，吸水膨胀且可生物降解的特性，增强哺乳动物原牙基质的可塑性，增加牙基质在骨组织损伤局部的剂量并为细胞和新生组织的生长提供临时支撑，更好地诱导细胞实现局部的定向分化和组织再生。本发明所述的牙基质海绵剂具有以下优势1、该海绵剂是由牙基质和胶原蛋白共同作用与受损部位，牙基质有促进成骨细胞和软骨细胞分化的功能，胶原蛋白能诱导成纤维细胞和上皮细胞的再生，这样牙基质和胶原蛋白联合作用，能更快的修复受损部位。2、应用于骨组织损伤时，海绵基质与组织液或血液接触并吸附组织液或血液，迅速黏附在损伤组织上，使牙基质相对局限于受损部位，有效提高损伤局部骨基质剂量。3、牙基质经交联固定在海绵基质的纤维网状结构表面和其中，使该海绵网状结构类似于一支架和贮药库，最大限度的将哺乳动物原牙基质材料固定于骨组织损伤局部。4、牙基质本身具有缓释功能，经交联固定在胶原海绵网状结构中后，将进一步形成二级缓释，随着海绵基质材料被机体降解而逐步缓慢释放一些牙基质，能更小范围，更长时间维持有效牙基质剂量。5、该海绵剂设计了多个系列不同牙基质和胶原蛋白比例的剂型，更精细地调控牙基质的缓释，使牙基质海绵释放能够跟组织修复更加协调，牙基质的剂量能够更准确地适配骨的受损程度。6、该海绵剂生物相容性好，无毒副作用，在体内可彻底降解，并且降解材料可被组织吸收利用，同时海绵基质本身具有的促创伤愈合和组织修复作用也有利于损伤组织的修
Μ. ο7、该制剂拆开包装即可使用，方便临床应用；该制剂生产工艺简单，原材料来源丰
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具体实施例方式实施例1 牙基质的制备(1)用加热至40°C的50%次氯酸钠消毒液浸泡哺乳动物原牙原料并搅拌消化30 分钟，以去除软组织及消毒；(2)将已消毒的哺乳动物原牙原料经机械方法去除牙釉质、牙骨质等，保留牙本质；(3)机械粉碎牙本质，使之成为10-100目的颗粒；(4)将粉碎后的颗粒状牙本质按步骤(1)再次去除其软组织及消毒；(5)放入5倍体积的1 1氯仿甲醛中浸泡30分钟；(6)清洁流水漂洗4小时后放入5倍体积的0. 6M HCl中浸泡18小时；(7)无菌去离子水反复漂洗漂洗后获得牙基质。实施例2 牙基质的制备(1)用加热至40°C的50%次氯酸钠消毒液浸泡哺乳动物原牙原料并搅拌消化45 分钟，以去除软组织及消毒；(2)将已消毒的哺乳动物原牙原料经机械方法去除牙釉质、牙骨质及龋坏牙体等， 保留牙本质；(3)机械粉碎牙本质，使之成为10-100目的颗粒；(4)将粉碎后的颗粒状牙本质按步骤(1)再次去除其软组织及消毒；(5)放入5倍体积的1 1氯仿甲醛中浸泡30分钟；(6)清洁流水漂洗4小时后放入5倍体积的0. 6M HCl中浸泡M小时；(7)无菌去离子水反复漂洗漂洗后获得牙基质。实施例3 牙基质的制备(1)用加热至40°C的50%次氯酸钠消毒液浸泡哺乳动物原牙原料并搅拌消化45 分钟，以去除软组织及消毒；(2)将已消毒的哺乳动物原牙原料经机械方法去除牙釉质、牙骨质及龋坏牙体等， 保留牙本质；(3)机械粉碎牙本质，使之成为10-100目的颗粒；(4)将粉碎后的颗粒状牙本质按步骤(1)再次去除其软组织及消毒；(5)放入5倍体积的1 1氯仿甲醛中浸泡30分钟；
(6)清洁流水漂洗4小时后放入5倍体积的0. 65M HCl中浸泡M小时；(7)无菌去离子水反复漂洗漂洗后获得牙基质。实施例4 牙基质海绵剂的制备(1)将胶原蛋白溶于0. 乙酸溶液中，制成0. 1 3%胶原蛋白溶液，于 0. 2 2mM磷酸盐缓冲液(pH7. 4 8. 0)中透析至中性；(2)在上述胶原蛋白溶液中，加入牙基质，搅拌均勻；(3)边搅拌边加入一定量4% 6%的甲醛溶液，搅拌至产生大量均勻细致的气泡为止；(4)于_80°C冷冻2天，冻干得到海绵状材料；(5)切割，真空包装，灭菌、灭病毒，制得牙基质海绵剂成品。实施例5 牙基质海绵剂的制备(1)将胶原蛋白溶于0. 乙酸溶液中，制成0. 1 3%胶原蛋白溶液，于 0. 2 2mM磷酸盐缓冲液(pH7. 4 8. 0)中透析至中性；(2)在上述胶原蛋白溶液中，加入牙基质，搅拌均勻；(3)边搅拌边加入一定量4% 6%的甲醛溶液，搅拌至产生大量均勻细致的气泡为止；(4)于-20°C冷冻5天，冻干得到海绵状材料；(5)切割，真空包装，灭菌、灭病毒，制得牙基质海绵剂成品。
权利要求
1.一种牙基质海绵剂，其特征在于，该海绵剂包括80 99%所述海绵剂重量百分含量的的牙基质，所述牙基质交联固定在胶原海绵基质上。
2.如权利要求1所述一种牙基质海绵剂，其特征在于，所述牙基质为用哺乳动物牙制备的牙基质材料。
3.如权利要求1所述一种牙基质海绵剂，其特征在于，所述牙基质颗粒的目数为 10-100 目。
4.如权利要求1所述一种牙基质海绵剂，其特征在于，所述胶原海绵基质中含有1 8%所述海绵剂重量百分含量的胶原蛋白，所述胶原海绵基质中所含牙基质的目数为10-30 目。
5.如权利要求1所述一种牙基质海绵剂，其特征在于，所述胶原海绵基质中含有1 8%所述海绵剂重量百分含量的胶原蛋白，所述胶原海绵基质中所含牙基质的目数为30-60 目。
6.如权利要求1所述一种牙基质海绵剂，其特征在于，所述胶原海绵基质中含有 1 8%所述海绵剂重量百分含量的胶原蛋白，所述胶原海绵基质中所含牙基质的目数为 60-100 目。
7.如权利要求1所述一种牙基质海绵剂，其特征在于，所述胶原海绵基质中含有5 15%所述海绵剂重量百分含量的胶原蛋白；所述胶原海绵基质中所含牙基质的目数为 10-30 目。
8.如权利要求1所述一种牙基质海绵剂，其特征在于，所述胶原海绵基质中含有5 15%所述海绵剂重量百分含量的胶原蛋白；所述胶原海绵基质中所含牙基质的目数为 30-60 目。
9.如权利要求1所述一种牙基质海绵剂，其特征在于，所述胶原海绵基质中含有5 15%所述海绵剂重量百分含量的胶原蛋白；所述胶原海绵基质中所含牙基质的目数为 60-100 目。
10.如权利要求1所述一种牙基质海绵剂，其特征在于，所述胶原海绵基质中含有胶原蛋白10 20% ；所述胶原海绵基质中所含牙基质的目数为10-30目。
11.如权利要求1所述一种牙基质海绵剂，其特征在于，所述胶原海绵基质中含有胶原蛋白10 20% ；所述胶原海绵基质中所含牙基质的目数为30-60目。
12.如权利要求1所述一种牙基质海绵剂，其特征在于，所述胶原海绵基质中含有胶原蛋白10 20% ；所述胶原海绵基质中所含牙基质的目数为60-100目。
13.如权利要求1所述一种牙基质海绵剂，其特征在于，所述牙基质海绵中含有一种或多种促骨生长因子。
14.一种牙基质海绵剂，其制备方法为将胶原蛋白溶于0. 1 % 1 %的乙酸中，制成1 % 20 %的胶原蛋白溶液，加入80 % 99%的牙基质材料，搅拌均勻，然后搅拌的同时加入4% 6%的甲醛或多聚甲醛溶液，当产生大量均勻细致的气泡是，于_80°C _20°C冻干，切割、真空包装、灭菌，制的牙基质材料海绵剂成品。
15.如权利要求14所述胶原蛋白，其特征在于，所用胶原蛋白为市售医用胶原蛋白。
16.如权利要求14所述醛类交联剂为甲醛或多聚甲醛。
全文摘要
本发明属于医药技术领域，涉及一种牙基质海绵剂及其制备方法。该海绵剂包括80～99％重量百分含量的牙基质和1～20％胶原海绵基质，所述牙骨基质按照不同的含量比例经交联固定在胶原海绵上。该海绵剂能使骨基质填充到骨缺损、骨不连、骨组织萎缩、骨折、骨愈合不良等病部位，从而发挥其诱导骨生成、促进骨修复、促进伤口收敛的作用。
文档编号A61K38/39GK102309523SQ20111012945
公开日2012年1月11日 申请日期2011年5月18日 优先权日2011年5月18日
发明者李佳楠 申请人:深圳市光明创博生物制品发展有限公司