专利名称：咖啡废渣提取物在药物制备中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及从咖啡废渣中提取分离一种含三萜类成分的提取物及其在制备药物方面的应用，属药学领域。
背景技术：
速溶咖啡厂在生产速溶咖啡的同时，产生了大量的咖啡废渣，这些废渣大多按垃圾处理。据美国农业部统计，全球每年有大约70亿千克的咖啡产出，这些咖啡经食用或提取过后，产生的咖啡废渣量极其可观。随着环保和低碳逐渐成为世界主流观念，咖啡渣的废物利用研究获得了较大的进展，如日本和美国的科学家利用咖啡废渣提炼生物柴油；另有文献报道咖啡渣提取物具有抗氧化作用及可从咖啡废渣中提取糖类物质，然而从咖啡废渣中制备提取物用于抗炎，目前尚未见报道。研究表明，许多三萜类化合物具有明显的抗炎作用，而咖啡废渣中就含有大量三萜类物质。 本发明的目的就是要提供一种咖啡废渣提取物，其含有三萜类物质，具有显著的抗炎作用，可用于药物制备方面的应用。
发明内容
本发明所述的咖啡废渣提取物，经过试验筛选出最佳提取方法，经薄层色谱显示其三萜类成分含量较高。在获得该提取物后，经海南医学院海南省热带药用植物研究与开发重点实验室对其进行了急性毒性试验与抗炎药效学试验。一、咖啡废渣提取物的制备咖啡废渣提取物用以下方法制备而成取一定质量的咖啡废渣，加入一定量的乙醇回流提取，收集提取液并浓缩成浸膏状，得到咖啡渣提取物。该咖啡废渣提取物经显色反应检识和薄层鉴别显示含有三萜类成分。显色反应取提取物少量于试管内，用醋酐溶解，进行醋酐-浓硫酸显色反应，结果溶液最终呈红色。薄层色谱鉴别展开剂石油醚-丙酮(4 1)，结果可见光下无斑点，喷10%硫酸乙醇溶液显色，可见光下观察到有四个斑点出现。薄层色谱鉴别结果表明提取物中含有三萜类成分。本发明咖啡废渣提取物的制备方法最好是取一定质量的咖啡废渣，加入I 20倍量的乙醇回流提取I 3次，收集合并提取液并浓缩成浸膏状，得到咖啡渣提取物。制备咖啡废渣提取物方法中乙醇浓度优选50 % 95%，最好是用95 %的乙醇；乙醇用量优选5 10倍量，最好为8倍量；提取时间最好为3小时；提取次数最好为2次。二、急性毒性试验1.试验材料SPF级昆明种小鼠，雌雄各半，体重18 22g ;小鼠灌胃器；吐温-802.试验方法与结果
取咖啡废渣提取物，以吐温-80为助溶剂，加水配成最大浓度混悬液(O. 43g -πιΓ1)。预试验取昆明种小鼠，雌雄各半，随机分为3组，每组4只，禁食不禁水12h后，在一天内分别按8. 60g ·1^、12. 70g*kg-\l7. 20g · kg—1灌胃给予咖啡废渣提取物(每次灌胃体积O. 2ml/10g, I天内最多给药2次)，给药后观察小鼠生存状态，连续观察7天。结果见表I。预实验结果无法找出其100%致死剂量，正式试验欲找出其最大耐受量。正式试验取昆明种小鼠，雌雄各半，随机分为3组，每组20只，禁食不禁水12h后，给药组分别灌胃给予咖啡废渣提取物8. 60g kg'lO. 75g kg—1，对照组灌胃给予1%吐温-80水溶液。观察自主活动变化，连续观察14天。结果见下表2.表I急性毒性预试验结果 组别剂量/gkg4 动物数死亡动物数给药前体重/g 给药7天后存活鼠体重/g
一8.604O18.93±0.8925.46±0.82
二12.704I19.24±1. 3123.08±0.24
三_17. 20_4_3_18. 77±0. 57_22. 18±0. PO_表2急性毒性正式试验结果
组另I]_剂量/g.kg·1动物数死亡动物数给药前体重/g 给药14天后存活鼠体重/g
给药一组 8.6020 O 18.73±1.3927.76±3. 12
给药二组 10.7520 2 19. 16±1.4426.99±2.74
对照组等体积吐温-80水溶液 20_O_19. 01 土1. 97_29. 19±3. 46小鼠给药后自主活动减少，偶有狂躁不安，给药2天后，所有小鼠自主活动恢复正
堂
巾O以上试验结果表明，咖啡废渣提取物毒性较低，其小鼠的最大耐受量为8. 60g · kg-1。三、抗炎药效学试验1.抑制二甲苯致小鼠耳肿胀试验。取咖啡废渣提取物，以吐温-80为助溶剂，加水配成不同浓度混悬液，取18 22g昆明种白鼠50只，雌雄各半，每组10只，随机分为咖啡废渣提取物高、中、低剂量组、阿司匹林组、空白组共5组。每组分别灌胃给予相应药物，每天一次，连续给药7天。第7天给药Ih后，将二甲苯20 μ L均匀涂于小白鼠左耳两面，右耳作为对照，至炎30min后，处死小鼠，沿耳廓线剪下两耳，用直径为8_打孔器取左右耳片，随即用电子天平称重，以两耳重量之差为肿胀度。采用t检验法比较各给药组与对照组空白组差异。结果见表3.肿胀率=(左耳质量-右耳质量)/右耳质量X 100%。2.抑制醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加试验取18 22g昆明种小鼠50只，雌雄各半，每组10只，随机分为咖啡废渣提取物高、中、低剂量组、阿司匹林组、空白组共5组。每组分别灌胃给予相应药物，每天一次，连续给药7天。第7天给药Ih后，每只小鼠尾静脉注射O. 5%伊文思蓝生理盐水溶液O. lml/10g(体重)，随即腹腔注射O. 6 %冰醋酸O. 2ml/只，15min后断头处死小鼠，剪开小鼠腹部，用6ml生理盐水洗涤腹腔，用吸管吸取腹腔洗出液约5ml，3000r ^mirT1离心lOmin，取上清液上紫外分光光度计测定590nm处吸光度值(Abs)。采用t检验法比较各给药组与对照组空白组差异。结果见表4.表3咖啡废渣提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀的作用
权利要求
1.一种咖啡废渣提取物，其特征在于含有三萜类成分，经动物实验证实具有抗炎作用。
2.如权利要求1中所述的提取物，其制备方法为取一定质量的咖啡废渣，加入I 20倍量的乙醇回流提取I 3次，收集合并提取液并浓缩成浸膏状。
3.如权利要求2中所述的提取物，其制备方法中乙醇浓度为50% 95%，乙醇量为5 10倍量。
4.如权利要求2中所述的提取物，其制备方法中乙醇浓度为95%，乙醇量为8倍量，提取时间为2小时,提取次数为2次。
5.将权利要求1所述的咖啡废渣提取物，配伍其他药物并添加相关辅料，制成临床上可接受的各种剂型的药物。
6.如权利要求5所述的含有咖啡废渣提取物的药物，其剂型为片剂、颗粒剂、胶囊剂。
全文摘要
咖啡废渣提取物在药物制备中的应用。本发明涉及从咖啡废渣中得到的一种提取物及其在药物制备中的应用，属于药学领域。薄层鉴别显示该提取物主要含三萜类物质，该提取物对醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增加具有抑制作用，能减少二甲苯诱导的小鼠耳肿胀率，显示其具有一定的抗炎作用。本发明废物利用，将咖啡废渣提取物应用于药物制备。
文档编号A61K36/74GK102988533SQ20111028319
公开日2013年3月27日 申请日期2011年9月14日 优先权日2011年9月14日
发明者张俊清, 廖小平, 谭银丰, 苏文琴 申请人:海南医学院