一种治疗急性痛风性关节炎的药物的制作方法
【专利摘要】本发明属于药品及其制备【技术领域】，涉及一种治疗急性痛风性关节炎的药物，药物组份的重量百分比为：白藜芦醇90～95%；藻酸钠3～5%；淀粉2～3%；将上述三种原料混合均匀按常规的公知工艺方法制成片状或粉状产品，再加工成形即可；其组份简单，加工成本低，疗效明显，安全可靠。
【专利说明】一种治疗急性痛风性关节炎的药物
【技术领域】:
[0001]本发明属于药品及其制备【技术领域】，涉及一种以白藜芦醇为主要原料治疗急性痛风性关节炎的药物 。
【背景技术】:
[0002]痛风(GOUT)是一种与遗传有关的长期嘌呤代谢障碍或尿酸排泄障碍，导致血尿酸持续增高和尿酸盐结晶沉积，引起组织损伤的一组临床综合征。痛风病临床特点是高尿酸血症，以及由此引起的痛风性急性关节炎反复发作、痛风石沉积、痛风石慢性关节炎和关节畸形，常累及肾脏引起慢性间质性肾炎和尿酸肾结石形成。随着人们生活方式的改变，痛风患病率有明显上升趋势，痛风在我国发病率不断上升，南方和沿海经济发达地区发病率尤高，因此越来越受到医学界的重视。痛风不仅能引起关节肿胀，而且可诱发和加重脂代谢紊乱、糖尿病及心血管疾病等，增加心脑血管疾病、代谢综合征及肾脏疾病病人的病死率。因此，痛风已成为严重威胁人类健康的常见病、多发病。目前，秋水仙碱是临床常用治疗痛风的药物，但其副作用(如恶心、呕吐、水样腹泻、肝细胞损伤、骨髓抑制、脱发和肾衰竭等)使临床应用受到一定限制。非甾体抗炎药、肾上腺糖皮质激素及别嘌呤醇等的副反应也较为明显，如可引起发热、过敏性皮疹、腹痛、腹泻、白细胞及血小板减少，甚而肝肾功能损害等。而对高尿酸血症和痛风采取中西医结合治疗可使我国传统医学和西方先进医疗技术互为补充，达到标本兼治的目的越来越受到人们的重视。现有技术的中药治疗痛风主要分为内服和外敷，内服药物大多以虎杖、牛膝、防风、土茯苓、苍术、羌活等为主要通过祛风除湿治疗痛风；外敷药物大多以黄柏、生大黄、生半夏、乳香、没药等为主组方通过清热解毒、活血化瘀达到治疗痛风的目的。但大多研究集中在抗炎、镇痛、对急性痛风动物模型的治疗作用等方面，深入的分子学和机制研究较少，故急需疗效确切、作用机制明确、安全性高的药物应用于临床。在已公开的文献中有记载，已研究发现白藜芦醇具有抗氧化、抗菌消炎、抗血小板聚集，诱导细胞凋亡、抗肿瘤等活性，但其在急性痛风性关节炎中的应用还未见报道。
【发明内容】
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[0003]本发明的目的在于克服现有技术存在的缺点，寻求设计提供一种治疗急性痛风性关节炎的新药物，该组合药物以白藜芦醇为核心原料，辅助其他成份组合混合药物，具有治疗痛风的作用，可抑制局部滑膜组织炎症浸润和增生，抑制关节液及血清中IL-1 β、CCR5、CXCLlO的分泌，减少关节滑膜中NF-κ B ρ65的表达，从而达到治疗急性痛风性关节炎的效
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[0004]为了实现上述目的，本发明涉及的药物组份的重量百分比为:白藜芦醇90~95% ；藻酸钠3~5% ;淀粉2~3% ;将上述三种原料混合均匀按常规的公知工艺方法制成片状或粉状产品，再加工成形即可。
[0005]本发明与现有技术相比，选用白藜芦醇为主要原料，辅料可减少副作用，制成治疗痛风性关节炎的药物，其组份简单，加工成本低，疗效明显，安全可靠。
【专利附图】
【附图说明】:
[0006]图1为本发明对各组大鼠关节滑膜HE染色图片，其中，A为空白对照组，B为阴性对照组，C为秋水仙碱组，D为白藜芦醇低剂量组，E为白藜芦醇中剂量组，F为白藜芦醇高剂量组。
[0007]图2为本发明对各组大鼠血清中IL-1 β水平示意图。 [0008]图3为本发明对各组大鼠血清中CCR5水平示意图。
[0009]图4为本发明对各组大鼠血清中CXCLlO水平示意图。
[0010]图5为本发明对各组大鼠关节液中IL-1 β、CCR5水平示意图。
[0011]图6为本发明对各组大鼠关节液中CXCLlO水平示意图。
[0012]图7为本发明对各组大鼠关节肿胀度变化趋势示意图。
[0013]图8为本发明对各组大鼠关节滑膜NF-K B p65的表达示意图。
【具体实施方式】:
[0014]下面通过实施例并结合附图作进一步说明。
[0015]实施例1:
[0016]本实施例涉及的药物组份及各组份的重量百分比为:白藜芦醇90~95% ;藻酸钠3~5% ;淀粉2~3% ;将上述三种原料混合均匀按常规的工艺技术制成片状或粉状产品，再加工成形即可。
[0017]本实施例为急性痛风性关节炎的治疗提供了一种新药物，并证实白藜芦醇的一种新用途，动物实验中白藜芦醇低剂量组的剂量为250mg/kg，白藜芦醇中剂量组的剂量为500mg/kg,白藜芦醇高剂量组的剂量为1000mg/kg
[0018]实施例2:
[0019]本实施例使用实施例1的药物对治疗痛风性关节炎进行实验:
[0020](I)、实验分组与给药:60只大鼠随机分为6组，每组10只，常规饲养一周，灌胃前称取体质量，按体质量确定给药剂量空白对照组、阴性对照组生理盐水灌胃，秋水仙碱组秋水仙碱Img.kg—1.cT1，白藜芦醇高、中、低剂量组分别为白藜芦醇1000、500、250mg.kg-1.cf1 ；
[0021](2)、尿酸钠溶液的制备:取194ml蒸馏水加6mlNa0H(lN)，煮沸后加Ig尿酸，用IN HCL调pH至7.2，搅拌冷却，储存于4°C冰箱中24h，去上清液，用滤纸过滤沉淀物，将沉淀物自然干燥即可得到尿酸钠结晶，用孔径250um的金属网筛过筛；实验前尿酸钠结晶180°C 3h，然后用体积分数95%乙醇洗涤，2000r/min离心15min3次，室温自然干燥，取250mg尿酸钠晶体加9ml生理盐水，Iml吐温80,加热搅拌,配成10ml25mg/ml尿酸钠溶液；
[0022](3)、造模方法:灌胃第4天(造模前)再次称取体质量，灌胃后Ih用缚线法测取右侧踝关节周径(取均值)，然后制备急性痛风性关节炎模型。阴性对照组、秋水仙碱组和白藜芦醇低、中、高剂量组大鼠均用75%酒精消毒右侧踝关节，麻醉后用6号注射针在受试大鼠右侧踝关节背侧从45度方向插入胫骨肌腱内侧，将质量浓度为25mg/ml (0.05ml)的尿酸钠溶液注入踝关节腔，伸曲、旋转运动lOmin，空白对照组大鼠关节腔注射0.05ml生理盐水；
[0023](4)、观察指标及检测指标:先观察大鼠活动、进食、精神情况，其关节肿胀度:用缚线法测定造模前及造模后0、l、2、3、4、5、6、24、48、72h右侧踝关节同一部位周径(取均值)，计算关节肿胀度，关节肿胀度=(测试时间点周径一初始周径)/初始周径；再检测指标，血清中IL-β、CCR5、CXC L10水平:造模后2、9、24、48、72h内眦取血，静置4h后，3000r/min离心15min离心后，取上清液双夹心酶免法检测IL-β、CCR5、CXCLlO ;关节液中IL-1 β、CCR5、CXCLlO水平:造模72h后，麻醉状态下，用500ul的无菌生理盐水冲洗大鼠右侧踝关节腔，收集冲洗液，3000r/min离心15min离心后，取上清液双夹心酶免法检测IL-β、CCR5、CXCLlO ；NF- κ B p65表达:冰浴中匀浆关节滑膜组织，提取蛋白，并以BCA法测定白蛋白浓度。进行12%SDS-PAGE电泳后转至PVDF膜上，用5%脱脂奶粉封闭2h，然后与相应抗体NF-kB p65和β -actin孵育，4°C过夜，次日PBST、PBS洗膜后与相应二抗孵育Ih，电化学发光试剂(ECL)显影,应用Quantity One软件分析目标蛋白与内参β-actin蛋白灰度值，计算相对灰度值，进行组间比较；然后进行病理切片，踝关节滑膜病理切片:造模72h后，麻醉大鼠，取右侧踝关节滑膜，置于10%中性福尔马林溶液固定，5%的硝酸脱钙，常规脱水，透明、包埋、切片和苏木素-伊红染色，光镜下观察局部病理组织学变化。
[0024]实施例3:
[0025]本实施例对药物治疗痛风性关节炎的结果进行分析:
[0026](I)、大鼠一般情况，60只大鼠均进入结果分析，无脱失，造模后，大鼠右侧踝关节明显肿胀伴随红、热表现，有的甚至将肿胀的关节抬离地面，大鼠烦躁不安，进食进水次数减少，在48、72h时上述症状逐渐减轻，造模后大鼠体重有所下降，但各组之间差异比较无统计学意义，
[0027](2)、各组大鼠关节肿胀度变化见表1和图7，造模后2h造模关节出现红、肿、热等表现，大鼠活动减少，有的大鼠右足不敢接触地面，造模后肿胀度随时间逐渐增长，以阴性对照组最明显，空白对照组肿胀度变化较缓慢，且恢复较快，造模24h后，秋水仙碱组、白藜芦醇低、中、高剂量组关节肿胀度明显低于阴性对照组(P < 0.05)，造模72h后，各组关节肿胀度明显降低，且各组间的差异没有统计学意义；
[0028](3)、各组大鼠血清IL-1 β、CCR5、CXCLlO水平见表2、3、4和图2、3、4，与阴性对照组比较，秋水仙碱组、白藜芦醇低、中、高剂量组2h、9h血清IL-Ιβ的含量明显下降(P
<0.05)，在秋水仙碱组、白藜芦醇高剂量组24h、48h血清中CCR5的含量显著低于阴性对照组(P<0.05)，72h后各组无明显差异，与阴性对照组比较，秋水仙碱组、白藜芦醇中、高剂量组24h、48h、72h血清CXCLlO水平明显降低；
[0029](4)、各组大鼠关节液IL-1 β、CCR5、CXCLlO水平见表5、6和图5、6，与阴性对照组相比，秋水仙碱组、白藜芦醇中、高剂量组关节液中IL-1 β、CCR5、CXCLlO水平明显下降(P
<0.05)；
[0030](5)、ffestern-blot检测结果见表7和图8,实验结果显示急性痛风性关节炎发病过程中关节滑膜NF- κ B p65蛋白表达明显增加，白藜芦醇可抑制关节滑膜NF- κ B ρ65的表达且抑制作用具有剂量依赖性；
[0031](6)、白藜芦醇对急性痛风性关节炎大鼠关节滑膜组织病理学的改变(HE染色，200倍镜下，见图1)，阴性对照组关节滑膜病理切片显示大量炎性细胞浸润，秋水仙碱组、白藜芦醇低、中、高剂量组炎症细胞浸润减少，其中以白藜芦醇高剂量组最显著。
[0032]表1:各组大鼠关节肿胀度变化(X土s，n=6)
[0033] [0034]
【权利要求】
1.一种治疗急性痛风性关节炎的药物，其特征在于药物组份的重量百分比为:白藜芦醇90~95% ;藻酸钠3~5% ;淀粉2~3% ;将上述三种原料混合均匀按常规的公知工艺方法制成片状或粉状产品， 再加工成形即可。
【文档编号】A61P19/02GK103536584SQ201310483325
【公开日】2014年1月29日 申请日期:2013年10月16日 优先权日:2013年10月16日
【发明者】王颜刚, 王鹏 申请人:青岛大学医学院附属医院