(2e, 6e)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基)-6-(4-氯苯基亚甲基)环己酮及其衍生物的新应用
【专利摘要】本发明属于制药技术领域，具体涉及(2E,6E)?2?(3,5?二甲氧基苯基亚甲基)?6?(4?氯苯基亚甲基)环己酮及其衍生物的新应用。本发明所述(2E,6E)?2?(3,5?二甲氧基苯基亚甲基)?6?(4?氯苯基亚甲基)环己酮及其衍生物在中高剂量时可显著降低急性痛风关节炎大鼠踝关节肿胀度和血清尿酸水平，同时具有很好的NLRP3和TLR4双重抑制活性，效果高于阳性对照地塞米松，可用于制备治疗高尿酸血症或急性痛风关节炎的药物，副作用小，安全性高。
【专利说明】
(2E, 6E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基)-6-(4-氯苯基亚甲 基)环己酮及其衍生物的新应用
技术领域
[0001] 本发明属于制药技术领域，具体涉及姜黄素 α、β-不饱和环酮衍生物（（2E，6E)-2- (3,5_二甲氧基苯基亚甲基)-6-(4-氯苯基亚甲基)环己酮及其衍生物）的新应用，尤其是其 制备治疗尚尿酸血症及急性痛风性关节炎药物方面的应用。
【背景技术】
[0002] 高尿酸血症是尿酸合成增加或尿酸排泄减少引起的一种严重危害人类健康的常 见代谢性疾病。近年研究发现，血尿酸升高是肾脏病发生的独立危险因素，并可能是肾脏病 的致病因素。而痛风是一种单钠尿酸盐(monosodium urate，MSU)沉积所致的晶体相关性关 节病，与嘌呤代谢紊乱及(或)尿酸排泄减少所致的高尿酸血症直接相关，属于代谢性风湿 病范畴，主要表现为反复发作的急、慢性痛风性关节炎、痛风石、尿酸结石、尿酸性肾病等。 而急性痛风性关节炎是痛风的最常见首发症状。随着当今社会老龄化及饮食结构的变化， 急性痛风性关节炎的发明率有明显上升趋势。由于痛风性关节炎的反复发作特点，尤其是 急性期所致的关节疼痛及关节破坏，不但给患者带来了很大的痛苦及行动障碍，并且医疗 费用也花费不菲。因此，高尿酸血症及急性痛风性关节炎的防治已成为亟待研究和解决的 公共健康问题。
[0003]在围绕缓解高尿酸血症的药物治疗方面，主要是一些促尿酸排泄药如苯溴马隆、 丙磺酸等，和抑尿酸生成药如别嘌呤醇、非布索坦等。然而这些药物不仅具有较严重的副作 用，且对痛风的急性发作无治疗效果。2015年12月FDA刚批准了痛风治疗新药Zurampic，虽 然其与黄嘌呤氧化酶抑制剂联用可以很好地控制血清尿酸的含量，但其同样存在肾和心血 管方面的安全隐患。在抗炎治疗药物方面，临床上常用西药如秋水仙碱、非留体抗炎药及糖 皮质激素等可用于缓解急性痛风性关节炎，但此类药物用量较大，副作用较多，很多患者 不能耐受。新兴的白介素 -l(IL-l)受体阻断剂Rilonacept、抗IL-Ιβ单克隆抗体 Canakinumab等，虽然能明显缓解对常规抗炎止痛治疗无效或不能耐受的痛风患者的关节 症状，但其研发成本昂贵，给药方式局限，且存在严重的安全性问题。
【发明内容】
[0004] 有鉴于此，本发明的目的在于针对现有技术存在的问题，提供姜黄素 α、β_不饱和 环酮衍生物，即（2Ε，6Ε)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基)-6-(4-氯苯基亚甲基)环己酮及其 衍生物在制备治疗高尿酸败血症及急性痛风性关节炎药物方面的应用。
[0005] 在急性痛风关节炎的发病过程中，关节内尿酸浓度过饱和形成结晶MSU，作为异物 进而触发机体固有免疫反应，使得免疫系统过度反应，导致关节及其周围组织的急性炎症 反应。在这一过程中，N0D样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体和Toll样受体4(TLR4)作为模式识 别受体(PRR)，发挥了关键作用。急性痛风性关节炎患者外周血单个核细胞NLRP3和TLR4的 表达水平显著升高，证明NLRP3炎症小体和TLR4介导的信号通路参与了痛风免疫炎症反应 调节，造成NLRP3炎症小体和TLR4信号通路的激活，从而引起IL-Ιβ和TNF-α等炎症因子的水 平升高，因此，NLRP3和TLR4可作为治疗急性痛风性关节炎药物研发的关键靶标。
[0006]
【申请人】基于姜黄素本身的多种生物活性，在前期研究中设计并合成了一系列姜黄 素 α、β-不饱和环酮衍生物，其中一些化合物表现出了很好的抗肿瘤活性及防治心脑血管疾 病活性（Yun-Yun Xu，Yi Cao,Hailkuo Ma,Huan-Qiu Li*Gui-zhen Ao,Design,synthesis and molecular docking of alpha&beta-unsaturated cyclohexanone analogous of curcumin as potent EGFR inhibitors with antiproliferativeactivity.Bioorg Med Chem 2013,21,388-394;申请号为201210351375.3,发明名称为"E-2-(3,5-二甲氧基苯亚 基)_环戊酮在制备治疗脑血管疾病的药物中的应用"的中国专利申请）。进一步
【申请人】通过 药理活性筛选，发现了姜黄素 α、β_不饱和环酮衍生物中一系列具有很好降尿酸活性及治 疗急性痛风性关节炎的化合物，可以作为治疗高尿酸败血症及急性痛风性关节炎药物。
[0007] 因此本发明提供了式1或式2所示化合物在降低尿酸活性中的应用，
[0010] 其中 R为 3-ClPh、2-ClPh、2-BrPh、3-BrPh、4-BrPh、4-ClPh、3-0CH3Ph、3,4-di0HPh、 4-OHPh、4-N( CH3) 2Ph、4-0CH3Ph 或 4-S〇2CH3Ph。[0011] 本发明还提供了式1或式2所示化合物在制备治疗高尿酸血症的药物中的应用，
[0008]
[0009]
[0014] 其中 R为 3-ClPh、2-ClPh、2-BrPh、3-BrPh、4-BrPh、4-ClPh、3-0CH3Ph、3,4-di0HPh、 4-OHPh、4-N( CH3) 2Ph、4-0CH3Ph 或 4-S〇2CH3Ph。[0015] 本发明还提供了式1或式2所示化合物在制备治疗急性痛风性关节炎的药物中的 应用，
[0012] 1
[0016]
[0017]
[0018] 其中 R为 3-ClPh、2-ClPh、2-BrPh、3-BrPh、4-BrPh、4-ClPh、3-0CH3Ph、3,4-di0HPh、 4-OHPh、4-N( CH3) 2Ph、4-0CH3Ph 或 4-S〇2CH3Ph。
[0019] 本发明还提供了一种药物制剂，包括治疗有效量的本发明所述式1或式2所示化合 物和药学上可接受的辅料。本领域技术人员可将所述式1或式2所示化合物直接或间接加入 制备不同剂型时所需的药学上可接受的各种常用辅料，如填充剂、崩解剂、润滑剂、粘合剂 等，以常规药物制剂方法，制成常用制剂如片剂、胶囊剂、注射液、口服液、颗粒剂、丸剂、散 剂和滴丸剂等。其中，填充剂如淀粉，乳糖，蔗糖，葡萄糖，甘露醇和硅酸;崩解剂如琼脂，碳 酸钙，土豆淀粉或木薯淀粉，海藻酸，某些硅酸盐和碳酸钠，低取代羟丙基纤维素;润滑剂如 滑石粉，硬脂酸钙，硬脂酸镁，固体聚乙二醇，月桂硫酸钠;粘合剂如羧甲基纤维素，藻酸盐， 明胶，聚乙烯吡咯酮，鹿糖和阿拉伯胶。
[0020] 在一些实施方案中，本发明所述药物制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂或注射液。
[0021] 与现有技术相比，本发明所述式1或式2所示（2E，6E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲 基)-6-(4-氯苯基亚甲基）环己酮及其衍生物在中高剂量时可显著降低急性痛风关节炎大 鼠踝关节肿胀度和血清尿酸水平，同时具有很好的NLRP3和TLR4双重抑制活性，效果高于阳 性对照地塞米松，可用于制备治疗高尿酸血症或急性痛风关节炎的药物，副作用小，安全性 尚。
【附图说明】
[0022] 为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现 有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
[0023] 图1(2Ε，6Ε)-2-(3，5_二甲氧基苯基亚甲基)-6-(4-氯苯基亚甲基)环己酮及其衍 生物合成反应的反应式。
【具体实施方式】
[0024] 下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述， 显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的 实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都 属于本发明保护的范围。
[0025] 为了进一步理解本发明，下面结合具体实施例对本发明进行详细阐述。
[0026] 实施例1、Ε-2-(3,5-二氧基苯甲撑基）-环己酮（Ia)和E-2-(3,5-二氧基苯甲撑 基)-环戊酮（lb)的合成：
[0027] 将环己酮或环戊酮(0· llmol)，吗啉（10.4g，0.12mol)加至20mL苯中，装上分水器， 回流共沸直至无水生成为止，减压蒸去苯和吗啉，得到烯胺。将烯胺(6.54g，0.043mol)和3， 5-二甲氧基苯甲醛(5.40g，0.033mol)加至20mL苯中，装上分水器，回流共沸，直至无水生成 为止，共8h，冷却至室温，搅拌下缓慢加入6mg/L盐酸，室温下搅拌2h，分出苯层，水层用苯层 萃取，合并苯层，无水硫酸钠干燥，浓缩，石油醚和乙醇重结晶得黄色针状晶体(13或1〇。 [0028] 将IaSlb(1.22mmol)和表1所示的各种R基团取代的苯甲醛（1.22mmol)加入到10mL 10%的NaOH乙醇溶液中，室温搅拌30min后反应完毕，加入50mL水，乙酸乙酯萃取（20mLX 3)，无水硫酸钠干燥后蒸去溶剂，柱层析[石油醚：乙酸乙酯= 15: l(v:v)]得目标化合物I。 具体反应式如图1。
[0029] 表1各R基团及合成的化合物对照表
[0030]
[0031] 实施例2、（2E，6E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基）-6-(3-氯苯基亚甲基）环己酮 (12) 的合成
[0032]合成方法参见实施例1。
[0033] Mp :107.5~108.4tC.1H-NMR(400MHz，CDCl3)，S(pp m):7.72(s，lH，=CH)，7.70(s， 1H，=CH)，7.43(s，lH，ArH) ,7.30~7.36(m，3H，ArH)，6.61((1,2H，J = 2.1Hz，ArH)，6.47(t， lH，J = 2.1Hz，ArH)，3.82(s，6H，-0CH3)，2.88~2.95(m，4H，-CH2)，1.81(quint，2H，J = 6.5Hz,-CH2).
[0034] 13C-NMR(400MHz，CDC13)，δ(ρρπ〇 : 190·257，160·841，137·985，137·876，137·577， 137.541,136.631,135.558,134.564,130.172,129.936,128.795,108.625,101.106, 55.707,28.762,28.684,23.117.
[0035] HR-MS: Calcd.For C22H21CIO3[M+H]+: 369.1252,Found :369.1257.
[0036] 实施例3、（2E，6E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基）-6-(2-氯苯基亚甲基）环己酮 (13) 的合成
[0037]合成方法参见实施例1。
[0038] Mp:104.0~104.7tC.1H-NMR(400MHz，CDCl3)，S(pp m):7.88(s，lH，=CH)，7.74(s， lH，=CH)，7.43~7.45(m，lH，ArH)，7.32~7.34(m，lH，ArH)，7.27~7.30(m，2H，ArH)，6.61 (d,2H,J = 2.0Hz,ArH) ,6.47(t,lH,J = 2.1Hz,ArH) ,3.82(s,6H,-OCHs) ,2.94(t,2H,J = 5.6Hz,-CH2),2.76(t,2H ,J = 5.5Hz,-CH2),1.77(quint,2H ,J = 6.2Hz,-CH2).
[0039] 13C-NMR(400MHz，CDCh)，δ (ppm): 190 · 280，160 · 837，138 · 169，137 · 948，137 · 752， 136.739,135.260,134.694,133.913,130.818,130.009,129.827,126.555,108.627， 101.090,55.706,28.983,28.483,23.363.
[0040] HR-MS: Calcd.For C22H21CIO3[M+H]+: 369.1252,Found :369.1251.
[0041 ] 实施例4、（2E，6E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基）-6-(2-溴苯基亚甲基）环己酮 (15) 的合成
[0042] 合成方法参见实施例1。
[0043] Mp :111.7~lW.Sr^H-NMRGOOMHz.CDChhSCppnOUSCsJH，：^)，？·？.。， lH，=CH)，7.63(d，lH，J = 7.9Hz，ArH)，7.28~7.35(m，2H，ArH)，7.17~7.21(m，lH，ArH)， 6.60(d,2H ,J=1.9Hz,ArH) ,6.47(t, 1H ,J= 1.9Hz ,ArH), 3.82(s ,6H,-〇CH3), 2.93(t, 2H ,J = 5.6Hz,-CH2),2.74(t,2H ,J = 5.3Hz,-CH2),1.77(quint,2H ,J = 6.5Hz,-CH2).
[0044] 13C-匪R(400MHz，CDCh)，δ (ppm): 190 · 273，160 · 844，137 · 958，137 · 894，137 · 796, 136.730,136.559,136.196,133.208,130.848,129.961,127.178,125.408,108.638， 101.102,55.720,28.996,28.381,23.362.
[0045] HR-MS: Cal cd. For C22H2iBr03 [M+H]+: 413.0747, Found :413.0765.
[0046] 实施例5、（2E，6E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基）-6-(3-溴苯基亚甲基）环己酮 (16) 的合成
[0047] 合成方法参见实施例1。
[0048] Μρ:111·9~112.7tC.1H-NMR(400MHz，CDCl3)，S(pp m):7.72(s，lH，=CH)，7.69(s， 1H,=CH) ,7.59(s,lH,ArH) ,7.46(d, 1H ,J = 7.7Hz ,ArH), 7.36(d, 1H ,J = 7.6Hz ,ArH), 7.28 (d,lH,J = 7.9Hz,ArH),6.60(s,2H,ArH),6.47(s,lH,ArH),3.82(s,6H,-0CH3) ,2.91(m, 4H，-CH2)，1 · 79 (quint, 2H, J = 6 · 3Hz , -CH2) ·
[0049] 13C-匪R(400MHz，CDC13)，δ(ρρπ〇 : 190·151，160·825，138·269，137·846，137·558， 136.593,135.402,133.047,131.667,130.167,129.157,122.721,108.617,101.105, 55.676,28.728,28.622,23.097.
[0050] HR-MS: Cal cd. For C22H2iBr03 [M+H]+: 413.0747, Found :413.0747.
[0051 ] 实施例6、（2E，6E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基）-6-(4-溴苯基亚甲基）环己酮 (17) 的合成
[0052] 合成方法参见实施例1。
[0053] Mp:126.4~128.6tC.1H-NMR(400MHz，CDCl3)，S(pp m):7.71(s，lH，=CH)，7.70(s， 1H,=CH) ,7.53(d,2H ,J = 8.3Hz,ArH) ,7.32(d,2H ,J = 8.3Hz,ArH) ,6.60(d, 2H ,J= 1.8Hz , ArH) ,6.47(s,lH,ArH) ,3.82(s,6H,-0CH3) ,2.93(t,2H,J = 5.4Hz,-CH2) ,2.88(t,2H,J = 5 · 4Hz, -CH2)，1 · 79 (quint, 2H, J = 6 · 4Hz , -CH2) ·
[0054] 13C-匪R(400MHz，CDCh)，δ (ppm): 190 · 323，160 · 845，137 · 912，137 · 454，136 · 967， 136.685,135.922,135.069,132.115,131.905,123.159,108.617,101.084,55.718, 28.755,23.137.
[0055] HR-MS: Calcd.For C22H2iBr03[M+H]+: 413.0747,Found :413.0761.
[0056] 实施例7、（2E，6E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基）-6-(4-氯苯基亚甲基）环己酮 (19)的合成
[0057]合成方法参见实施例1。
[0058] Mp:124.4~124.8tC.1H-NMR(400MHz，CDCl3)，S(pp m):7.72(s，lH，=CH)，7.71(s， 1H，=CH) ,7.36~7.41 (m，4H，ArH)，6.60((1,2H，J = 2. lHz，ArH)，6.47(t，lH，J = 2· 1Hz ArH) ,3.82(s,6H,-0CH3) ,2.93(t,2H,J = 5.6Hz,-CH2) ,2.87(t,2H,J = 5.5Hz,-CH2) ,1.79 (quint,2H,J = 6.5Hz,-CH2).
[0059] 13C-NMR(400MHz，CDC13)，δ(ρρπ〇 : 190·341，160·852，137·923，137·417，136·847， 136.702,135.900,134.816,134.636,131.895,128.949,108.613,101.074,55.713, 28.752,23.144.
[0060] HR-MS: Cal cd. For C22H21CIO3 [M+H]+: 369.1252, Found :369.1269.
[0061 ] 实施例8、（2E，6E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基)-6-(3-甲氧基苯基亚甲基)环己 酮（In)的合成
[0062]合成方法参见实施例1。
[0063] Μρ:92·0 ~92.6tC.1H-NMR(400MHz，CDCl3)，S(pp m):7.76(s，lH，=CH)，7.71(s，lH， = CH),7.32(t,lH,J = 7.9Hz,ArH),7.06(d,lH,J = 7.7Hz,ArH) ,7.00(s,lH,ArH) ,6.90(d, 1H ,J = 8.2Hz,ArH) ,6.60(d, 2H ,J= 1.6Hz ,ArH) ,6.50(s, ΙΗ,ΑγΗ) ,3.84(s,3H,-CH3) ,3.82 (s,6H,-0CH3),2.90(t,4H ,J = 5.2Hz,-CH2),1.80(quint,2H ,J = 6.4Hz,-CH2).
[0064] 13C-NMR(400MHz，CDCh)，δ (ppm): 190 · 429，160 · 792，159 · 652，137 · 955，137 · 471， 137.107,136.832,136.619,129.600,123.085,116.005,114.455,108.548,100.994， 55.630,55.507,28.755,28.728,23.156.
[0065] HR-MS: Calcd.For C23H24〇4[M+H] +: 365.1747,Found: 365.1747.
[0066] 实施例9、（2E，6E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基)-6-(3,4-二羟基苯基亚甲基)环 己酮（Il2)的合成
[0067] 将Ia(300mg，1 · 22mmol)和3，4_二羟基苯甲酸（168mg，1 · 22mmol)加入到lOmL乙醇 中，加入203yL浓盐酸（2.43mmol)，室温搅拌30min后反应完毕，加入50mL水，乙酸乙酯萃取 (20mLX3)，无水硫酸钠干燥后蒸去溶剂，柱层析[石油醚：乙酸乙酯= 15: l(v:v)]得淡黄色 针状结晶32〇11^，产率78.7%。
[0068] MpdST.e - lSS.Tr^H-NMRGOOMHz.CDChhSCppnOuWsJH，：^)，？·？！。， 1H,=CH) ,7.19(s, ΙΗ,ΑγΗ) ,7.04(d, lH ,J = 8.3Ηζ ,ArH), 6.93(d, lH ,J = 8.2Ηζ ,ArH) ,6.60 (s，2H，ArH)，6.47(d，lH，J=1.6Hz，ArH)，3.82(d，6H，J=1.6Hz，-0CH3) ,2.86~2.94(m， 4H，-CH2)，1 · 79 (quint，2H，J = 5 · 7Hz，-CH2) ·
[0069] 13C-NMR(400MHz，CDCl3)，S(ppm) :189.808,160.872,147.521,145.617,137.848， 137.753,137.630,135.768,133.608,127.474,124.263,118.335,116.360,108.601， 101.240,55.840,28.557,28.367,22.934.
[0070] HR-MS: Cal cd. For C22H22O5 [M+H]+: 367.1540, Found :367.1541.
[0071] 实施例10、（2E，6E)-2-(3，5-二甲氧基苯基亚甲基）-6-(4-苯基亚甲基）环己酮 (Il4)的合成
[0072] 合成方法参见Ii2的合成。
[0073] Mp:155.0~155.6tC.1H-NMR(400MHz，CDCl3)，S(pp m):7.76(s，lH，=CH)，7.72(s， 1H,=CH) ,7.39(d,2H ,J = 8.3Hz,ArH) ,6.90(d, 2H ,J = 8.4Hz ,ArH), 6.59(s, 2H,ArH) ,6.46 (s，lH，ArH)，6.27(s，lH，-OH)，3.81(s，6H，-0CH3)，2.89~2.91(m，4H，-CH2)，1.77~1.80(m， 2H,-CH2).
[0074] 13C-匪R(400MHz，CDC13)，δ(ρρπ〇 : 191·373，160·838，157·381，138·314，138·045, 137.259,137.102,134.065,133.039,128.507,115.982,108.648,101.149,55.748， 28.860,28.718,23.219.
[0075] HR-MS:Calcd.For C22H22〇4[M+H] + :351.1591，Found:351.1590.
[0076] 实施例11、（2E，6E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基)-6-(4-二甲氨基苯基亚甲基） 环己酮（115)的合成
[0077]合成方法参见实施例1。
[0078] Mp:109.6~110.3tC.1H-NMR(400MHz，CDCl3)，S(pp m):7.78(s，lH，=CH)，7.70(s， 1H,=CH) ,7.46(d,2H ,J = 8.8Hz,ArH) ,6.72(d, 2H ,J = 8.8Hz ,ArH) ,6.60(d, 2H ,J = 2.0Hz , ArH),6.44(s,lH,ArH),3.81(s,6H,-0CH3),3.03(s,6H,-NCH3),2.95(t,2H,J=6.3Hz,- CH2),2.90(t,2H ,J = 5.6Hz),1.80(quint,2H ,J = 6.2Hz,-CH2).
[0079] 13C-NMR(400MHz，CDC13)，δ(ρρπ〇 : 190·267，160·794，150·851，138·751，138·411， 137.439,135.885,133.004,131.900,124.155,111.895,108.468,100.776,55.675， 40.389,29.099,28.733,23.333.
[0080] HR-MS: Calcd.For C24H27NO3[M+H]+: 378.2064,Found :378.2060.
[0081 ] 实施例12、（2E，6E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基)-6-(4-甲氧基苯基亚甲基)环 己酮（Il7)的合成
[0082]合成方法参见实施例1。
[0083] Mp:97.7~98.rC.1H-NMR(400MHz，CDCl3)，S(ppm) :7.77(s，lH，=CH)，7.71(s，lH， = CH) ,7.46(d,2H,J = 8.7Hz,ArH) ,6.94(d,2H,J = 8.7Hz,ArH) ,6.60(d,2H,J=l ,9Hz, ArH),6.46(s,lH,ArH),3.85(s,3H,-CH3),3.82(s,6H,-0CH3),2.92(t,4H,J = 5.9Hz,-CH2), 1.80(quint,2H ,J = 6.4Hz,-CH2).
[0084] 13C-匪R(400MHz,CDC13)，δ(ρρπ〇 : 190·280,160·745,160·225,138·045,137·273, 136.970,136.560,134.257,132.562,128.771，114.127,108.460,100.849,55.573， 28.774,28.657,23.150.
[0085] HR-MS: Calcd.For C23H24〇4[M+H] +: 365.1747,Found: 365.1747.
[0086] 实施例13、（2E，6E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基)-6-(4-甲砜基苯基亚甲基)环 己酮（Il9)的合成
[0087]合成方法参见实施例1。
[0088] Mp:162.0~163.5tC.1H-NMR(400MHz，CDCl3)，S(pp m):7.79(d，2H，J = 8.2Hz，ArH)， 7.76(s,lH,=CH),7.73(s,lH,=CH) ,7.61(d,2H ,J = 8.2Hz,ArH) ,6.61 (s , 2H, ArH) ,6.48 (s,lH,ArH),3.82(s,6H,-〇CH3),3.09(s,3H,S〇2CH3),2.95(t,2H ,J = 5.1Hz,-CH2),2.89(t, 2H ,J = 5.3Hz,-CH2),1.80(quint,2H ,J = 5.6Hz,-CH2).
[0089] 13C-匪R(400MHz，CDC13)，δ(ρρπ〇 : 189·744，160·713，141·522，139·929，139·108， 137.843,137.523,136.255,134.311,130.899,127.501,108.540,101.071,55.543， 44.536,28.541,28.499,22.860.
[0090] HR-MS: Ca 1 cd.For C23H24O5S[M+H]+: 413.1417,Found: 413.1396.
[0091] 实施例14、（2E，5E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基)-5-(3-氯苯基亚甲基)环戊酮 (122) 的合成
[0092]合成方法参见实施例1。
[0093] Μρ:145·8~147.6Γ ,Η-匪R(400MHz，CDC13)，δ(ρρπ〇 :7.90(s，lH，=CH)，7.56~ 7.58(m，lH，ArH)，7.53(s，lH，=CH)，7.45~7.47(m，lH，ArH)，7.29~7.32(m，2H，ArH)，6.73 (d，2H，J = 1.7Hz，ArH)，6.51(s，lH，ArH)，3.83(s，6H，-0CH3)，3.00~3.10(m，4H，-CH2)·
[0094] 13C-匪R(400MHz，CDCI3)，δ (ppm): 196·050，161·048，139·710，137·664，136·288， 134.494,134.061,130.403,130.333,130.290,129.769,126.898,108.956,101.960， 55.654,26.900,26.564.
[0095] HR-MS: Calcd.For C21H19CIO3[M+H] +: 355.1095,Found: 355.1089.
[0096] 实施例15、（2E，5E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基)-5-(2-氯苯基亚甲基)环戊酮 (123) 的合成
[0097]合成方法参见实施例1。
[0098] MpzieSj-ieS.gr^H-NMRGOOMHz.CDChhSCppnOuKsJH，：^)，？』？^ lH，J = 6.7Hz，ArH) ,7.53(s，lH，=CH)，7.46((1, lH，J = 7.6Hz，ArH) ,7.30~7.32(m，2H， ArH)，6.74(s，2H，ArH)，6.51(s，lH，ArH)，3.83(s，6H，-0CH3)，3.01~3.11(m，4H，-CH2)·
[0099] 13C-匪R(400MHz，CDC13)，δ(ρρπ〇 : 196·121，161·080，139·751，137·709，136·326， 134.542,134.119,130.431,130.377,130.320,129.863,126.914,108.987,101.982， 55.705,26.956,26.613.
[0100] HR-MS: Calcd.For C21H19CIO3[M+H] +: 355.1095,Found: 355.1086.
[0101] 实施例16、（2E，5E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基)-5-(2-溴苯基亚甲基)环戊酮 (125) 的合成
[0102] 合成方法参见实施例1。
[0103] Mp:159.0~leO.Sr^H-NMRGOOMHz.CDCh)，δ(ρρπ〇 :7.81 (s，lH，=CH)，7.59(t， lH，J = 7.7Hz，ArH)，7.53(s，lH，=CH) ,7.34~7.39(m，lH，ArH)，7.21(t，lH，J = 7.6Hz， ArH) ,7.14(t,lH,J = 9.6Hz,ArH),6.75(d,2H,J=1. ΙΗζ,ΑγΗ) ,6.51(s,lH,ArH) ,3.84(s, 6H，-0CH3)，3.04~3.13(m，4H，-CH2).
[0104] 13C-匪R(400MHz，CDC13)，δ(ρρπ〇 :196.063,161.071,139.772,137.720,137.691， 135.811,134.545,133.653,132.434,130.562,130.394,127.520,126.720,108.976， 101.979,55.703,26.957,26.473.
[0105] HR-MS: Calcd·For C2iHi9Br〇3[M+H] +: 399 · 0590，Found: 399 · 0584·
[0106] 实施例17、（2E，5E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基)-5-(3-溴苯基亚甲基)环戊酮 (126) 的合成
[0107] 合成方法参见实施例1。
[0108] Μρ:141·8~142.7Γ ,Η-匪R(400MHz，CDC13)，δ(ρρπ〇 :7.73(s，lH，=CH)，7.50~ 7.53(m,4H,ArH,=CH) ,7.32(t,lH,J = 7.7Hz,ArH) ,6.75(d,2H,J=1.7Hz,ArH) ,6.52(s, lH，ArH)，3.84(s，6H，-0CH3)，3.11~3.13(m，4H，-CH2)·
[0109] 13C-NMR(400MHz，CDC13)，δ(ρρπ〇 : 196·237，161·097，138·830，138·117，137·668， 137.584,134.639,133.345,132.418,132.305,130.519,129.558,123.137,109.041， 102.069,55.700,26.755,26.693.
[0110] HR-MS: Calcd ·For C2iHi9Br〇3[M+H] +: 399 · 0590，Found: 399 · 0573 ·
[0111] 实施例18、（2E，5E)-2-(3，5-二甲氧基苯基亚甲基)-5-(4-溴苯基亚甲基)环戊酮 (127)的合成
[0112] 合成方法参见实施例1。
[0113] Μρ:182·0 ~183.3°C.1H-NMR(400MHz，CDCl3)，S(ppm):7.57(d，2H，J = 8.4Hz，ArH)， 7.52(s,2H,=CH),7.45(d,2H J = 8.4Hz,ArH),6.74(s,2H,ArH),6.51(s,lH,ArH),3.84(s, 6H，-0CH3)，3.04~3.14(m，4H，-CH2).
[0114] 13C-匪R(400MHz，CDC13)，δ(ρρπ〇 :196.373,161.116,138.169,137.733,134.952， 134.503,132.803,132.335,132.318,124.064,109.053,102.019,55.736,26.775.
[0115] HR-MS: Calcd.For C2iHi9Br03[M+H]+: 399.0590,Found: 399.0588.
[0116] 实施例19、（ 2E，5E)-2-(3，5-二甲氧基苯基亚甲基)-5-(4-氯苯基亚甲基)环戊酮 (129)的合成
[0117]合成方法参见实施例1。
[0118] Mp :178.5~ngjr^H-NMRGOOMHz.CDChhSCppnOUSCsJH，：^)，？』〗^ 2H ,J = 8.2Hz,ArH), 7.51 (s,lH,=CH) ,7.41 (d,2H,J = 8.4Hz,ArH) ,6.74(d, 2H ,J= 1.6Hz , ArH)，6.51(s，lH，ArH)，3.84(s，6H，-0CH3)，3.05~3.14(m，4H，-CH2)·
[0119] 13C-匪R(400MHz，CDC13)，δ(ρρπ〇 :196.362,161.115,137.996,137.749,135.650， 134.542,134.454,132.750,132.135,129.352,109.048,102.006,55.734,26.790,26.753.
[0120] HR-MS: Calcd.For C21H19CIO3[M+H] +: 355.1095,Found:355.1081.
[0121] 实施例20、（2E，5E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基)-5-(3-甲氧基苯基亚甲基)环 戊酮(131)的合成
[0122] 合成方法参见实施例1。
[0123] Mp:125.0~126.2tC.1H-NMR(400MHz，CDCl3)，S(pp m):7.56(s，lH，=CH)，7.52(s， 1H,=CH) ,7.36(t,lH,J = 7.8Hz,ArH) ,7.20(d,lH,J = 7.7Hz,ArH),7.12(s,lH,ArH),6.94 (dd,lHJ=1.8Hz,8.3Hz,ArH),6.75(d,2H,J=1.8Hz,ArH),6.51(s,lH,ArH),3.85(s,3H,- OCH3) ,3.83(s,6H,-0CH3) ,3.11(s,4H,-CH2).
[0124] 13C-匪R(400MHz，CDCh)，δ (ppm): 196 · 505，161 · 073，159 · 964，137 · 969，137 · 809, 137.769,137.358,134.151,134.101,129.992,123.588,116.266,115.380,108.979， 101.927,55.690,55.570,26.798.
[0125] HR-MS:Calcd.For C22H22〇4[M+H] + :351.1591,Found:351.1578.
[0126] 实施例21、（2E，5E)-2-(3，5-二甲氧基苯基亚甲基）-5-(4-苯基亚甲基）环戊酮 (134)的合成
[0127] 合成方法参见h2的合成。
[0128] Mp:253.4~255.3tC.1H-Mffi(400MHz，d6-DMS0)，S(pp m):10.10(s，lH，-OH)，7.52 (d,2H J = 8.3Hz,ArH),7.36(s,lH,=CH),7.30(s,lH,=CH),6.86(d,2H, J = 8.3Hz ,ArH), 6.80(s，2H，ArH)，6.55(s，lH，ArH)，3.76(s，6H，-0CH3)，2.94~3.10(m，4H，-CH2)·
[0129] 13C-匪R(400MHz，CDCh)，δ (ppm): 195 · 023，160 · 557，159 · 245，138 · 635，137 · 340， 134.084,133.392,132.957,131.854,126.519,115.998,108.393,101.552,55.361， 55.281,25.966.
[0130] HR-MS: Calcd.For C2iH2〇〇4[M+H] + : 337.1434,Found: 337.1452.
[0131] 实施例22、（2E，5E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基)-5-(4-二甲氨基苯基亚甲基） 环戊酮（135)的合成
[0132] 合成方法参见实施例1。
[0133] Mp:194.4~196.4tC.1H-NMR(400MHz，CDCl3)，S(pp m):7.58(s，lH，=CH)，7.53(d， 2H ,J = 8.9Hz,ArH),7.46(s,lH,=CH) ,6.75(d, 2H ,J = 2.1Hz ,ArH) ,6.73(d, 2H ,J = 9.1Hz , ArH)，6.49(t，lH，J = 2.1Hz，ArH)，3.83(s，6H，-0CH3) ,3.07~3.10(m，4H，-CH2)，3.05(s, 6H,-CH3).
[0134] 13C-NMR(400MHz，CDCl3)，S(ppm) :196.318,161.069,151.343,139.173,138.343， 135.583,133.223,132.644,132.564,124.053,112.171,108.834,101.583,55.731， 40.402,26.938,26.896.
[0135] HR-MS: Calcd.For C23H26NO3[M+H] +: 364.1907,Found: 364.1906.
[0136] 实施例23、（2E，5E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基)-5-(4-甲氧基苯基亚甲基)环 戊酮(137)的合成
[0137] 合成方法参见实施例1。
[0138] Mp:138.9~140.0°C.1H-MMR(400MHz，CDCl3)，S(ppm) :7.55~7.58(m，3H，=CH， ArH),7.49(s,lH,=CH),6.97(d,2H ,J = 8.6Hz,ArH) ,6.75(d, 2H ,J= 1.7Hz ,ArH) ,6.50(s, lH，ArH)，3.86(s，3H，-0CH3)，3.83(s，6H，-0CH3)，3.06~3.10(m，4H，-CH2)·
[0139] 13C-匪R(400MHz，CDC13)，δ(ρρπ〇 :196.433,161.030,160.921,138.324,137.951， 135.142,134.163,133.504,132.896,128.834,114.582,108.891，101.747,55.663， 26.773,26.705.
[0140] HR-MS:Calcd.For C22H22〇4[M+H] + :351.1591,Found:351.1578.
[0141] 实施例24、（2E，5E)-2-(3,5-二甲氧基苯基亚甲基)-5-(4-甲砜基苯基亚甲基)环 戊酮(139)的合成
[0142] 合成方法参见实施例1。
[0143] Mp^H-NMRHOOMHz.CDChhSbpnO-H-NMRGOOMHz.CDChhSbpmhS.OSCdJHJ = 8.3Hz,ArH),7.75(d,2H,J = 8.4Hz,ArH) ,7.58(s,lH,=CH) ,7.56(s,lH,=CH) ,6.75(d, 2H，J = 2.0Hz，ArH)，6.53(t，lH，J = 2.0Hz，ArH)，3.84(s，6H，-0CH3) ,3.14~3.16(m，4H，_ CH2)，3.09(s，3H，-S〇2CH3).
[0144] 13C-NMR(400MHz，CDCh)，δ (ppm): 161 · 186，141 · 402，141 · 069，140 · 606，137 · 534， 137.265，135.393，131.394，131.334，128.090，109.184，102.235，55.780，44.805，26.886， 26.791.
[0145] HR-MS: Calcd.For C22H32O5S[M+H]+ :399.1261,Found :399.1262.
[0146] 试验例1、化合物的降尿酸活性测试
[0147] 建立高尿酸血症小鼠模型，灌胃给予受试化合物，通过检测血清尿酸水平和24小 时尿酸排泄量，对化合物的降尿酸活性进行筛选，获得高活性降尿酸化合物。雄性清洁级昆 明小鼠，体重20±2g，自由水食，每天12h照明，环境温度为25±2°C。小鼠随机分为若干组， 每组12只，分别为正常对照组(生理盐水10ml/kg)、模型对照组(OX 250mg/kg)、受试化合物 组(OX 250mg/kg+受试化合物）、阳性药对照组(OX 250mg/kg+别嘌呤醇10mg/kg)。每天于9: 00(am)分别灌胃给予模型对照组及各给药组氧嗪酸钾，lh后各药物组分别灌胃给药，正常 对照组和模型对照组灌胃给予等量生理盐水，给药周期为7天。最后一次给药lh后，小鼠腹 腔注射10 %水合氯醛麻醉后采集血样，按试剂盒方法测定血清尿酸水平，结果表2所示。结 果表明氧嗪酸钾注射可造成大鼠血清尿酸水平升高，与正常对照组比较，有显著性差异，提 示造模成功。
[0148] 表2受试化合物的对大鼠血清尿酸水平的影响（剂量:50mg/kg)
[0149]
[0150]
[0151] 表2结果可见，给予本发明所述受试化合物后，大鼠血清尿酸水平低于模型对照 组，表明本发明所示化合物具有很好的降低高尿酸血症大鼠尿酸水平的活性。
[0152] 试验例2、化合物对急性痛风关节炎大鼠踝关节肿胀度的影响(单位:cm)
[0153] 为了进一步研究评价化合物对急性痛风性关节炎的治疗效果，选取了降尿酸活性 筛选中活性较好的化合物19和活性中等的化合物123进行急性痛风关节炎大鼠踝关节肿胀 度的影响活性实验。
[0154] 选用雄性清洁级SD大鼠，体重200±20g，自由水食，每天12h照明，环境温度为25土 2°C。采用一次性关节腔注射MSU诱导痛风性关节炎模型，正常对照组采用等量的生理盐水 注射入关节腔，造模动物分为4组，每组8只，模型对照组(MSU 0.2mL+生理盐水）、化合物19 和123低剂量组(MSU0 · 2mL+化合物10mg/kg)、中剂量组(MSU 0 · 2mL+化合物20mg/kg)、高剂 量组(MSU 0·2mL+先导化合物40mg/kg)、阳性药对照组(MSU 0·2mL+地塞米松5mg/kg)给药5 天，观察造模前及治疗期各组受试大鼠步态及关节容积的变化，检测关节炎症指数，结果见 表3〇
[0155] 表3化合物19对急性痛风关节炎大鼠踝关节肿胀度的影响(:??8 )
[0156]
L0157」注：###P〈0 · 001与正常对照组比较;T〈0 · 05，#P〈0 · 01，#*P〈0 · 001与模型对照组 比较
[0158] 如表3所示，MSU注射之后，大鼠踝关节肿胀度显著增加，在2~24h达到高峰，化合 物19和123的干预可以使肿胀度出现不同程度下降，其中中高剂量的化合物对于肿胀度的 降低作用均达到了显著性差异，表明本发明受试化合物具有很好的治疗急性痛风性关节炎 作用。
[0159] 试验例3、化合物NLRP3及TLR4抑制活性测试
[0160] 取前期筛选活性较好的本发明部分受试化合物13、14、19、119和123进行NLRP3和 TLR4抑制活性筛选，THP-1细胞系培养于含10%胎牛血清和1%抗生素的RPMI1640培养基 中，放置于37°(：、5^^02的培养箱中培养。采用80碰的佛波酯诱导1'冊-1细胞分化，1811后贴 壁细胞即为诱导分化的巨噬细胞。贴壁后换含2%胎牛血清的培养基，模型组和各给药组培 养基中加入终浓度为80mg/dl的MSU培养细胞24h后，将细胞进行分组:正常对照组、模型对 照组、候选化合物低剂量组(5μΜ)、候选化合物中剂量组（10μΜ)、候选化合物高剂量组(20μ M)、NLRP3抑制剂格列苯脲组（10μΜ)、TLR4抑制剂瑞沙托维组（10μΜ)，向培养基中加入上述 终浓度的药物，继续培养24h后，Western Blot法检测细胞胞浆蛋白匀浆中NLRP3、TLR4和 pro-IL-Ιβ的蛋白表达;计算化合物对NLRP3和TLR4和pro-IL-Ιβ蛋白表达的抑制率，结果见 表4。
[0161 ] 表4受试化合物的NLRP3及TLR4抑制活性
[0162]
[0163] 表4结果表明受试化合物显示了很好的NLRP3和TLR4双重抑制活性并能抑制细胞 炎症因子IL-Ιβ和TNF-α的分泌，活性最好的化合物19在高剂量组(20μΜ)对NLRP3和TLR4的 抑制率分别为123%和110.4%，与NLRP3阳性对照格列苯脲（118.5% )和TLR4抑制剂瑞沙托 维（98.4%)相当甚至表现更好，提示化合物可能通过抑制NLRP3和TLR4作用来降低大鼠尿 酸水平和急性痛风性关节肿胀度。
【主权项】
1. 式1或式2所示化合物在降低尿酸活性中的应用，其中 R为 3-C1 曲、2-ClPh、2-化曲、3-B巧h、4-化曲、4-ClPh、3-0C 曲化、3,4-扣0册}1、4- OHPh、4-N(邸3) 2化、4-0C 出化或 4-S02C 出化。2. 式1或式2所示化合物在制备治疗高尿酸血症的药物中的应用，其中 R为 3-C1 曲、2-ClPh、2-化曲、3-B巧h、4-化曲、4-ClPh、3-0C 曲化、3,4-扣0册}1、4- OHPh、4-N(邸3) 2化、4-0C 出化或 4-S02C 出化。3. 式1或式2所示化合物在制备治疗急性痛风性关节炎的药物中的应用，其中 R为 3-C1 曲、2-ClPh、2-化曲、3-B巧h、4-化曲、4-ClPh、3-0C 曲化、3,4-扣0册}1、4- OHPh、4-N(邸3) 2化、4-0C 出化或 4-S02C 出化。4. 一种药物制剂，其特征在于，包括治疗有效量的式1或式2所示化合物，其中 R为 3-Cl 曲、2-ClPh、2-化曲、3-B巧h、4-化曲、4-ClPh、3-OC 曲化、3,4-扣0册}1、4- OHPh、4-N(邸3) 2化、4-OC 出化或 4-S02C 出化。5.根据权利要求4所述药物制剂，其为片剂、胶囊剂、颗粒剂或注射液。
【文档编号】A61P19/06GK105837425SQ201610330631
【公开日】2016年8月10日
【申请日】2016年5月18日
【发明人】李环球, 敖桂珍, 万茜雯, 顾陈成
【申请人】苏州大学