一种皮肤抗敏保湿剂的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种皮肤抗敏保湿剂。本发明的透明质酸收率高、透光率好，蛋白质含量低，葡萄糖醛酸含量高，易溶解，保湿效果好，制备的抗敏皮肤保湿剂对皮肤的渗透性好，在迅速有效的滋润干燥皮肤的同时具有很强的抗敏效果，安全无毒副作用。
【专利说明】
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物多糖提取及应用【技术领域】，特别是涉及一种皮肤抗敏保湿剂。 一种皮肤抗敏保湿剂
【背景技术】
[0002] 日常生活中，人们经常遇到由于环境或气候原因因此的皮肤干燥情况。皮肤干燥 的原因主要有两个：一是气候干燥，相对湿度低；二是皮肤正常的吸水作用和屏障功能爱 到损害。引起后者的因素有皮肤的老化、环境和化学品的伤害、皮肤的病变以及干性皮肤的 属性。为皮肤提供保湿是护肤化妆品的主要用途，但是对于皮肤比较敏感的人群来说，化妆 品的使用会带来更多的皮肤问题，过敏是其中最常见的问题。
[0003] 过敏性皮炎是由于接触过敏性抗原引起的皮肤过敏反应，它主要是由IgE介导的 I型变态反应。凡对特异性抗原有遗传上或体质上易感的人，在接触这种抗原时，可导致速 发型或迟发型过敏性皮炎，主要是指人体接触到某些过敏源而引起皮肤红肿、发痒、风团、 脱皮等皮肤病症。对于易过敏又需要使用化妆品进行皮肤保湿的人群，研发一种安全的抗 过敏的保湿剂是必要的。
[0004] 透明质酸，简称为HA，是由葡萄糖醛酸和乙酰氨基葡萄糖通过β-(1 - 3)和 β-α- 4)糖苷键连接而成的酸性粘多糖。其具有高保湿性、粘弹性和生物相容性等优良 性质，尤其是具有独特的保湿性能，目前已经被广泛应用于医药、日化、食品等领域，是国内 外生物化工界热点产品之一。
[0005] 国内目前有十几家透明质酸的生产厂家，且这些企业大多数是用动物组织提取 法。但由于原料有限，且原料中Η Α的含量低，同时Η Α又还与硫酸软骨素等粘多糖共存于 生物组织中，致使其收率低、提纯难、成本过高、产品质量差，且难以应用于大规模生产。随 着Η A需求量的不断增大，迫切要求生产大量的高质量Η A，动物组织提取法己不能适应 这种要求。目前还有微生物发酵法生产透明质酸采用的工艺发酵周期长、产物相对分子量 低、产品透光率差、蛋白质含量高、葡萄糖醛酸含量低。有的透明质酸的形态为纤维状，不易 溶解。很难达到应用于化妆品领域的标准。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的就是针对上述存在的缺陷而提供一种皮肤抗敏保湿剂。本发明的透 明质酸收率高、透光率好，蛋白质含量低，葡萄糖醛酸含量高，易溶解，保湿效果好，制备的 抗敏皮肤保湿剂对皮肤的渗透性好，在迅速有效的滋润干燥皮肤的同时具有很强的抗敏效 果，安全无毒副作用。
[0007] 本发明的一种皮肤抗敏保湿剂技术方案为，该保湿剂含有透明质酸和中药提取 物，所述透明质酸采用兽疫链球菌zooe/7i￡/6?icw5〇AWA008发酵制备，兽疫 链球菌(SirepiococciAs zooepiofeffiiciAsOAWAOOS在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微 生物中心保藏，保藏编号是：CGMCCNo. 9111，保藏日期是2014年04月29日。
[0008] 目前该兽疫链球菌在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，地 址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101,其保藏编号是：CGMCCNo. 9111，菌种 的拉丁文名称是SirepiococciAs 参据的微生物(株）：AWA008,保藏日期是 2014年04月29日。
[0009] 本发明所述的兽疫链球菌菌株特征：呈球形或卵圆形，呈链状排列，有荚膜，无芽 孢，无鞭毛，革兰氏染色阳性。
[0010] 所述的中药提取物由以下中药制备而成：艾草，黄芪，白术，马齿苋，甘菊，黄芩，黄 柏，甘草。
[0011] 所述的中药提取物由按重量比的以下中药制备而成：艾草8-10份，黄芪10-12份， 白术3-5份，马齿苋3-5份，甘菊5-10份，黄芩5-10份，黄柏3-5份，甘草4-8份。
[0012] 优选的，所述的中药提取物由按重量比的以下中药制备而成：艾草10份，黄芪12 份，白术4份，马齿苋3份，甘菊8份，黄芩6份，黄柏4份，甘草8份。
[0013] 所述的中药提取物的制备步骤为：分别按重量称取中药粉碎，以水-乙醇为提取 溶剂，加热回流提取三次，每次两小时，合并提取液，弃去药渣，提取液经浓缩回收乙醇，蒸 发水分采用喷雾干燥后得到中药提取物。
[0014] 所述的一种皮肤抗敏保湿剂，含有按重量比的以下成分：透明质酸0.5-2%，中药 提取物0. 3-2%，丙二醇1-3%，1，3- 丁二醇1-2%，甘油1-3%，邻苯二甲基二丁酯1-2%，羧甲基 纤维素钠〇. 5-1%，余量为去离子水。
[0015] 所述的一种皮肤抗敏保湿剂，进一步的，含有按重量比的以下成分：透明质酸 1-1. 5%，中药提取物1-2%，丙二醇2-3%，1，3- 丁二醇1-1. 5%，甘油1. 5-2%，邻苯二甲基二丁 酯1-1. 5%，羧甲基纤维素钠0. 6-1%，余量为去离子水。
[0016] 所述的一种皮肤抗敏保湿剂，优选的，含有按重量比的以下成分：透明质酸1. 2%， 中药提取物1. 5%，丙二醇2%，1，3-丁二醇1%，甘油1. 8%，邻苯二甲基二丁酯1. 3%，羧甲基纤 维素钠〇. 8%，余量为去离子水。
[0017] 所述透明质酸采用兽疫链球菌发酵制备包括以下步骤： (1) 摇瓶种子液培养：将斜面菌种接种于装有灭菌培养液的1L锥形瓶中，37°C培养 12-16小时，镜检观察菌体生长良好，无杂菌污染，即可接种于种子罐中； (2) 菌种扩配：将培养液加入到种子罐中，进行蒸汽灭菌后，设定温度36. 3°C、pH6. 86， 按无菌要求在种子罐里加入菌种，维持罐压〇. 〇5MPa，培养12-16小时，镜检观察菌体生长 良好，无杂菌污染，即可接种于发酵罐中； (3) 发酵：将一半发酵培养液加入到发酵罐中，进行蒸汽灭菌后，设定温度36. 3°C、 pH6. 86,维持罐压0.05MP，将种子罐的培养基全部压入到发酵罐中，记录pH值，在pH下降时 加入另一半发酵培养液，保持各项指标，发酵液pH每分钟下降幅度小于0. 01时结束发酵， 检测发酵液粘度，将发酵液压入沉淀罐中； (4) 前沉淀：向沉淀罐里在搅拌情况下缓缓地加入95%的酒精，至产生雪花状沉淀，控 制在47-50度(折至20°C时的酒精度)，收集沉淀物； (5) 溶解：用氯化钠溶液将沉淀物溶解，调节pH至9. 3-9. 5,加入EDTA、活性炭、珍珠岩， 搅拌均匀； (6) 过滤：将溶解后的料液压入1#大板框过滤一遍后，过滤液调pH9. 3-9. 5。再加入白 硅藻土和珍珠岩后，搅拌均匀后，压入2#大板框过滤第二遍。二遍过滤液中加入硅藻土，搅 拌均匀后，料液通过不锈钢板打循环澄清后，过滤第三遍，澄清度在99. 5%以上，然后过滤 液通过聚丙烯滤芯过滤至洁净间沉淀罐； (7) 后沉淀：料液调pH至7. 0-7. 3,搅拌下缓缓地加入95%酒精至沉淀产生，控制酒精 度数47-50度即可。静止20-40分钟后将上清液打入废酒精罐； (8) 脱水离心：用75%-80%的pH值在7. 0-7. 3之间的酒精脱水6-7次，然后再用90% 的酒精脱水2-3次，脱水后酒精度数到90%以上，静止1小时左右，打走上清液，取样测pH 值，并控制在7. 0-7. 3之间。搅拌15-20分钟后离心； (9) 干燥：将离心好的物料放入干燥罐，设定温度30°C，抽真空干燥3小时后，每小时升 温5°C，设温60°C时停止，检测水分，水分小于7%后出罐。
[0018] 步骤（1)、（2)、（3)中的培养液包括按重量百分比的葡萄糖3-5%、酵母粉1. 5-2%、 七水硫酸镁1-2%、四水硫酸锰0. 01-0. 1%、磷酸二氢钾0. 1-0. 5%、磷酸氢二钠0. 5-0. 8%、碳 酸钙0. 1-1%、氯化锌0. 05-0. 1%，余量为水。
[0019] 步骤②氯化钠溶液浓度为1-5%。
[0020] 步骤②中，加入EDTA、活性炭、珍珠岩质量比为，1: 10-15: 20-30。
[0021] 优选的，加入EDTA、活性炭、珍珠岩质量比为，1:11: 25。
[0022] 步骤③中，白硅藻土和珍珠岩的质量比为1:1-10。
[0023] 优选的，白硅藻土和珍珠岩的质量比为1:1. 5。
[0024] 步骤（6)中过滤液通过0. 22微米聚丙烯滤芯过滤至洁净间沉淀罐。
[0025] 本发明的有益效果为：本发明的抗敏皮肤保湿剂对皮肤的渗透性好，能够迅速有 效的滋润干燥皮肤，不粘腻。本发明中含有的天透明质酸保持水分的能力强。具有高度生 物兼容性，与其他成分配合，具有保湿、柔肤、抗皱、增白、清爽的功效。本发明中的中药提取 物相互配合，具有明显的抗敏、保湿、抗氧化、美白、抗衰老的作用。其中的艾草、黄芩、黄柏、 甘草提取物都具有很好的抗敏作用。
[0026] 本发明产品手感特别滑爽能快速渗透进入皮肤组织，使皮肤具有光泽和清爽湿润 效果。皮肤的渗透快速，赋予皮肤滋润感。本发明产品能迅速改善肌肤的水分保持力，激发 细胞的活力，具有保持肌肤滋润，光滑，防止皮肤干燥和发暗的效果。
[0027] 本发明采用复合诱变技术筛选出透明质酸产率高的菌种，结合发酵技术，透明质 酸产品产出率高，可达7_9g/L。发酵得到的透明质酸易于分离纯化，生产周期短。采用添加 活性炭、珍珠岩、白硅藻土、EDTA结合大板框过滤技术去除透明质酸中的杂质，添加剂常见 易得，操作相对简单，杂质含量更低。使用75-80%酒精对物料进行了 6-7次脱水，90%酒精 对物料进行2-3次脱水。这样逐步脱水不但减少了透明质酸中的水分，易于干燥，而且洗去 了物料中残留的少量杂质，蛋白质含量更低，产品纯度高。使用酒精多次脱水达到90%以上 时后，可得粉末状无定型沉淀，干燥后产品溶解性好，堆积密度适中。透明质酸产品质量符 合化妆品领域的标准。
[0028]
【具体实施方式】： 为了更好地理解本发明，下面用具体实例来详细说明本发明的技术方案，但是本发明 并不局限于此。
[0029] 实施例1 本发明的一种皮肤抗敏保湿剂技术方案为，一种兽疫链球菌(SirepiococciAs zooepiofeffiiciAs) AWA008,其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，其保 藏编号是：CGMCCNo. 9111，保藏日期是2014年04月29日。
[0030] 目前该兽疫链球菌在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，地 址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101，其保藏编号是：CGMCCNo. 9111，菌种 的拉丁文名称是SirepiococciAs 参据的微生物(株）：AWA008,保藏日期是 2014年04月29日。
[0031] 本发明所述的兽疫链球菌菌株特征：呈球形或卵圆形，呈链状排列，有荚膜，无芽 孢，无鞭毛，革兰氏染色阳性。
[0032] 所述的兽疫链球菌制备透明质酸的生产工艺，包括以下步骤： (1) 摇瓶种子液培养：将斜面菌种接种于装有灭菌培养液的1L锥形瓶中，37°C培养 12-16小时，镜检观察菌体生长良好，无杂菌污染，即可接种于种子罐中； (2) 菌种扩配：将培养液加入到种子罐中，进行蒸汽灭菌后，设定温度36. 3°C、pH6. 86， 按无菌要求在种子罐里加入菌种，维持罐压〇. 〇5MPa，培养12-16小时，镜检观察菌体生长 良好，无杂菌污染，即可接种于发酵罐中； (3) 发酵：将一半发酵培养液加入到发酵罐中，进行蒸汽灭菌后，设定温度36. 3°C、 pH6. 86,维持罐压0.05MP，将种子罐的培养基全部压入到发酵罐中，记录pH值，在pH下降时 加入另一半发酵培养液，保持各项指标，发酵液pH每分钟下降幅度小于0. 01时结束发酵， 检测发酵液粘度，将发酵液压入沉淀罐中； (4) 前沉淀：向沉淀罐里在搅拌情况下缓缓地加入95%的酒精，至产生雪花状沉淀，控 制在47-50度(折至20°C时的酒精度)，收集沉淀物； (5) 溶解：用氯化钠溶液将沉淀物溶解，调节pH至9. 3-9. 5,加入EDTA、活性炭、珍珠岩， 搅拌均匀； (6) 过滤：将溶解后的料液压入1#大板框过滤一遍后，过滤液调pH9. 3-9. 5。再加入白 硅藻土和珍珠岩后，搅拌均匀后，压入2#大板框过滤第二遍。二遍过滤液中加入硅藻土，搅 拌均匀后，料液通过不锈钢板打循环澄清后，过滤第三遍，澄清度在99. 5%以上，然后过滤 液通过聚丙烯滤芯过滤至洁净间沉淀罐； (7) 后沉淀：料液调pH至7. 0-7. 3,搅拌下缓缓地加入95%酒精至沉淀产生，控制酒精 度数47-50度即可。静止20-40分钟后将上清液打入废酒精罐； (8) 脱水离心：用75%-80%的pH值在7. 0-7. 3之间的酒精脱水6-7次，然后再用90% 的酒精脱水2-3次，脱水后酒精度数到90%以上，静止1小时左右，打走上清液，取样测pH 值，并控制在7. 0-7. 3之间。搅拌15-20分钟后离心； (9) 干燥：将离心好的物料放入干燥罐，设定温度30°C，抽真空干燥3小时后，每小时升 温5°C，设温60°C时停止，检测水分，水分小于7%后出罐。
[0033] 步骤（1)、（2)、（3)中的培养液包括按重量百分比的葡萄糖3%、酵母粉1.5%、七 水硫酸镁1%、四水硫酸锰〇. 05%、磷酸二氢钾0. 3%、磷酸氢二钠0. 8%、碳酸钙0. 2%、氯化锌 0.08%，余量为水。
[0034] 步骤（5)氯化钠溶液浓度为3%。
[0035] 步骤（5)中，加入EDTA、活性炭、珍珠岩质量比为，1:11: 25。
[0036] 步骤（6)中，白硅藻土和珍珠岩的质量比为1:1. 5。
[0037] 步骤（6)中过滤液通过0. 22微米聚丙烯滤芯过滤至洁净间沉淀罐。
[0038] 1.本发明采用复合诱变技术筛选出透明质酸产率高的菌种，结合发酵技术，透明 质酸产品产率达9g/L。发酵得到的透明质酸易于分离纯化，生产周期短。
[0039] 2.本发明采用添加活性炭、珍珠岩、白硅藻土、EDTA结合大板框过滤技术去除透 明质酸中的杂质，添加剂常见易得，操作相对简单，杂质含量更低（蛋白质< 〇. 1%、重金属 < 20ppm、砷盐< 2ppm)。
[0040] 3.本发明使用75-80%酒精对物料进行了 6-7次脱水，90%酒精对物料进行2-3次 脱水。这样逐步脱水不但减少了透明质酸中的水分，易于干燥，而且洗去了物料中残留的少 量杂质，蛋白质含量更低，产品纯度高，能达到99. 0%以上。
[0041] 4.本发明使用酒精多次脱水达到90%以上时后，可得粉末状无定型沉淀，干燥后 产品溶解性好，溶解速度快，降解慢，堆积密度适中（堆积密度0. 4?0. 6g/ml)。
[0042] 5.本发明生产工艺简单，原辅料常见易得，生产易于控制，杂质含量更低，适合工 业化大规模生产，收率高，并且大大降低了生产成本。
[0043] 实施例2 本发明的一种皮肤抗敏保湿剂，含有透明质酸和中药提取物，所述透明质酸采用兽疫 链球菌(Sire/? iococcws zooepiofeffiiciAs ) AWA008 发酵制备，兽疫链球菌（Sire/? iococcws zooepiofeffiiciAsOAWAOOS在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号 是：CGMCCNo. 9111，保藏日期是2014年04月29日。
[0044] 所述的中药提取物由按重量比的以下中药制备而成：艾草10份，黄芪12份，白术 4份，马齿苋3份，甘菊8份，黄芩6份，黄柏4份，甘草8份。
[0045] 所述的中药提取物的制备步骤为：分别按重量称取中药粉碎，以水-乙醇为提取 溶剂，加热回流提取三次，每次两小时，合并提取液，弃去药渣，提取液经浓缩回收乙醇，蒸 发水分采用喷雾干燥后得到中药提取物。
[0046] -种皮肤抗敏保湿剂，含有按重量比的以下成分：透明质酸1.2%，中药提取物 1. 5%，丙二醇2%，1，3- 丁二醇1%，甘油1. 8%，邻苯二甲基二丁酯1. 3%，羧甲基纤维素钠 0. 8%，余量为去尚子水。
[0047] 本发明的抗敏皮肤保湿剂对皮肤的渗透性好，能够迅速有效的滋润干燥皮肤，不 粘腻。本发明中含有的天透明质酸保持水分的能力强。具有高度生物兼容性，与其他成分 配合，具有保湿、柔肤、抗皱、增白、清爽的功效。本发明中的中药提取物相互配合，具有明显 的抗敏、保湿、抗氧化、美白、抗衰老的作用。其中的艾草、黄芩、黄柏、甘草提取物都具有很 好的抗敏作用。
[0048] 本发明产品手感特别滑爽能快速渗透进入皮肤组织，使皮肤具有光泽和清爽湿润 效果。皮肤的渗透快速，赋予皮肤滋润感。本发明产品能迅速改善肌肤的水分保持力，激发 细胞的活力，具有保持肌肤滋润，光滑，防止皮肤干燥和发暗的效果。
[0049] 实施例3 本发明的一种皮肤抗敏保湿剂含有透明质酸和中药提取物，所述透明质酸采用兽疫 链球菌（SirepiococciAs zooepiofeffiiciAs) AWA008 发酵制备，兽疫链球菌（SirepiococciAs zooepiofeffiiciAsOAWAOOS在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号 是：CGMCCNo. 9111，保藏日期是2014年04月29日。
【权利要求】
1. 一种皮肤抗敏保湿剂，其特征在于，该保湿剂含有透明质酸和中药提取物，所述透 明质酸采用兽疫链球菌(5^-印zooepiofeffiiciAs ) AWA008发酵制备，兽疫链球菌 (SirepiococciAs zooepiofeffiiciAs) AWA008 保藏编号是：CGMCCNo. 9111，保藏日期是 2014 年 04月29日。
2. 根据权利要求1所述的一种皮肤抗敏保湿剂，其特征在于，所述的中药提取物由以 下中药制备而成：艾草，黄芪，白术，马齿苋，甘菊，黄芩，黄柏，甘草。
3. 根据权利要求2所述的一种皮肤抗敏保湿剂，其特征在于，所述的中药提取物由按 重量比的以下中药制备而成：艾草8-10份，黄芪10-12份，白术3-5份，马齿苋3-5份，甘菊 5-10份，黄芩5-10份，黄柏3-5份，甘草4-8份。
4. 根据权利要求2所述的一种皮肤抗敏保湿剂，其特征在于，所述的中药提取物由按 重量比的以下中药制备而成：艾草10份，黄芪12份，白术4份，马齿苋3份，甘菊8份，黄芩 6份，黄柏4份，甘草8份。
5. 根据权利要求2所述的一种皮肤抗敏保湿剂，其特征在于，所述的中药提取物的制 备步骤为：分别按重量称取中药粉碎，以水-乙醇为提取溶剂，加热回流提取三次，每次两 小时，合并提取液，弃去药渣，提取液经浓缩回收乙醇，蒸发水分采用喷雾干燥后得到中药 提取物。
6. 根据权利要求1所述的一种皮肤抗敏保湿剂，其特征在于，含有按重量比的以下成 分：透明质酸〇. 5-2%，中药提取物0. 3-2%，丙二醇1-3%，1，3- 丁二醇1-2%，甘油1-3%，邻苯 二甲基二丁酯1-2%，羧甲基纤维素钠0. 5-1%，余量为去离子水。
7. 根据权利要求1所述的一种皮肤抗敏保湿剂，其特征在于，含有按重量比的以下成 分：透明质酸1-1. 5%，中药提取物1-2%，丙二醇2-3%，1，3-丁二醇1-1. 5%，甘油1. 5-2%，邻 苯二甲基二丁酯1-1. 5%，羧甲基纤维素钠0. 6-1%，余量为去离子水。
8. 根据权利要求1所述的一种皮肤抗敏保湿剂，其特征在于，含有按重量比的以下成 分：透明质酸1. 2%，中药提取物1. 5%，丙二醇2%，1，3- 丁二醇1%，甘油1. 8%，邻苯二甲基二 丁酯1. 3%，羧甲基纤维素钠0. 8%，余量为去离子水。
【文档编号】A61P37/08GK104055702SQ201410257045
【公开日】2014年9月24日 申请日期:2014年6月11日 优先权日:2014年6月11日
【发明者】韩秀云 申请人:滨州安华生物工程有限公司