一种复方聚维酮碘消毒液及其制备方法
【专利摘要】本发明提供了一种复方聚维酮碘消毒液，每1000ml消毒液中含有如下用量的原料：聚维酮碘10～100g，美洲大蠊提取物以总氨基酸计在0.8g以上，碘酸钾适量，余量为水。本发明还提供了消毒液的制备方法。本发明将美洲大蠊醇提物与聚维酮碘联合使用，不仅具有良好的杀菌作用，并且还能够促进肉芽组织生长、抗炎及消除炎性水肿，二者组成复方聚维酮碘消毒液制剂，可用于各种创伤的消毒及治疗；另外，本发明研究发现，聚维酮碘中加入美洲大蠊提取物后，明显增加了聚维酮碘的稳定性，为产品质量提供了保障。
【专利说明】一种复方聚维酮碘消毒液及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种复方聚维酮碘消毒液及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 美洲大蠊（PeriplanetaAmericana)属昆虫纲，蜚蠊目，蜚蠊科，"蟑螂，，为其俗名， 首见于《本草纲目拾遗》，也称其为石姜、滑虫，在地球上已经生存了 3· 5亿年，是世界上生 命力最强、最古老、至今繁衍最成功的昆虫类群之一。美洲大蠊药用主癥瘕、破积聚,通利血 脉，外用可敛疮、拔毒、化腐、生肌，现代研究表明其还具有良好的抗菌作用。
[0003] 康复新液主要成分为美洲大蠊干燥虫体的乙醇提取物，功能通利血脉，养阴生肌， 现代医学认为康复新液具有促进肉芽组织生长、抗炎及消除炎性水肿、提高机体免疫功能、 抑制胃酸分泌等药理作用，临床用于十二指肠溃疡，胃溃疡，烧烫伤等的治疗。
[0004] 聚维酮碘（PVP-I)是碘与表面活性剂聚乙烯吡咯烷酮（PVP)及增溶剂形成的新型 消毒剂，广泛应用于临床，杀菌谱广，对革兰阳性菌、革兰阴性菌、病毒、芽孢、真菌、原虫等 都有强而迅速的杀灭作用。近年来有文献报道碘伏可能引起女性医护人员甲状腺疾病发 病率上升，可能与碘的易挥发性有关，有研究表明碘伏的稳定性易受温度影响，也有文献表 明，但有效碘浓度较高时（>1000μ g/υ时，对细胞增殖有抑制作用，因此开展新型聚维酮 碘复方消毒产品的研究工作，研发出质量好、性能稳定的产品，具有重要的意义。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种复方聚维酮碘消毒液。
[0006] 本发明提供了一种复方聚维酮碘消毒液，每1000ml消毒液中含有如下用量的原 料：
[0007] 聚维酮碘10?100g，美洲大蠊提取物以总氨基酸计在〇· 8g以上（例如0. 8? 0. 9g)，碘酸钾适量，余量为水。
[0008] 进一步地，聚维酮碘的含量为25?100g。
[0009] 更进一步地，聚维酮碘的含量为50?100g。
[0010] 目前在聚维酮碘溶液制剂中，碘酸钾一直作为稳定剂存在于溶液中，它有助于增 加聚维酮碘溶液的稳定性。因此，碘酸钾的用量可以参考已知聚维酮碘溶液制剂中的用量。 例如，本发明中每1000ml消毒液中碘酸钾的含量为1?5g。
[0011] 其中，消毒液中还含有如下辅料：防腐剂或/和助溶剂。
[0012] 进一步地，所述防腐剂为苯甲酸钠或/和山梨酸钾；所述助溶剂为甘油或/和吐 温。
[0013] 其中，所述美洲大蠊提取物为去油脂的美洲大蠊提取物。
[0014] 进一步地，所述去油脂的美洲大蠊提取物的制备方法为：去美洲大蠊，乙醇提取 后，去除油脂，即得。
[0015] 更进一步地，制备方法的具体操作如下：
[0016]、取美洲大蠊，粉碎，用80%?90% v/v乙醇提取，醇提液回收乙醇并浓缩后，加水， 加热搅拌，静置，冷却，待油脂充分上浮，取下清液，过滤，滤液浓缩或干燥后，得美洲大蠊提 取物。
[0017]具体地，美洲大蠊提取物的制备方法如下：
[0018]取美洲大蠊，粉碎，用80%?90%的乙醇提取，第一次加7倍量乙醇回流提取 2小 时，^二次加5倍量乙醇回流提取丨· 5小时，第三次加3倍量乙醇回流提取1小时，合并提 取液，静置Sh以上，滤过，滤液回收乙醇并浓缩成稠膏（相对密度约丨· 3〇 (85Γ ))，加入2〇 倍浸膏量的纯水，加热搅拌，静置，冷却，使油脂充分上浮，取下清液，过滤，滤液浓缩成稠膏 (相对密度约1. 30 (85°C ))，得美洲大蠊提取物。
[0019]本发明还提供了上述复方聚维酮碘消毒液的制备方法，它包括如下操作步骤： [0020] (1)按配比称取原料；
[0021] (2)取去油脂的美洲大蠊提取物、聚维酮碘和碘酸钾，加水溶解后，加入常规辅料， 混匀，滤过，灭菌，即得消毒液。
[0022]本发明将美洲大蠊醇提物与聚维酮碘联合使用，不仅具有良好的杀菌作用，并且 还能够促进肉芽组织生长、抗炎及消除炎性水肿，二者组成复方聚维酮碘消毒液制剂，可用 于各种创伤的消毒及治疗；另外，本发明研究发现，聚维酮碘中加入美洲大蠊提取物后，明 显增加了聚维酮碘的稳定性，为产品质量提供了保障。
【具体实施方式】
[0023] 实施例1
[0024] 处方
[0025]聚维酮碘（PVP-I) 50g美洲大蠊醇提物（以总氨基酸计）不少于0· 8g甘油150ml 山梨酸2g苯甲酸钠3. 5g碘酸钾2g
[0026] 制备成 1000ml
[0027] 制法
[0028]取PVP-I 5〇g，美洲大蠊提取物（以总氨基酸计）不少于0· Sg，加入80%所需量 的纯水、甘油150ml、碘酸钾2g、苯甲酸钠3. 5g及山梨酸2g，加热溶解，滤过，滤液加水至 1000ml，搅匀，灭菌，滤过，灌装，即得。
[0029]该复方聚维酮碘消毒液含聚维酮碘以有效碘浓度计为5%，含美洲大蠊提取物每 1000ml 不少于 0. 8g。
[0030] 实施例2
[0031] 处方
[0032] 聚维酮碘（PVP-1) 25g美洲大蠊醇提物（以总氨基酸计）不少于〇· 8g甘油150ml 吐温-801ml碘酸钾2g山梨酸3g
[0033] 制备成 l〇〇〇ml
[0034] 制法
[0035]取？￥?-125§，美洲大蠊提取物（以总氨基酸计）不少于〇.骀，加入80%所需量 的纯水、甘油l5〇ml、碘酸钾2g、山梨酸3g及吐温-801ml，加热溶解，滤过，滤液加水至 1000ml，搅勻，灭菌，滤过，灌装，即得。
[0036] 该复方聚维酮碘消毒液含聚维酮碘以有效碘浓度计为2· 5%，含美洲大蠊提取物 每1000ml不少于0. 8g。
[0037] 实施例3
[0038] 处方
[0039] 聚维酮碘（PVP-1) 10g美洲大蠊醇提物（以总氨基酸计）〇. 8?〇.呢吐温_805ml 碘酸钾2g
[0040] 制备成 1000ml
[0041] 制法
[0042] 取PVP-Il〇g，美洲大蠊提取物（以总氨基酸计）〇· 85g，加入80%所需量的纯水、吐 温805ml及碘酸钾2g,加热溶解，滤过，滤液加水至l〇〇〇 ml，搅匀，灭菌，滤过，灌装，即得。
[0043] 该复方聚维酮碘消毒液含聚维酮碘以有效碘浓度计为1 %，含美洲大蠊提取物每 1000ml 为 0· 8 ?0. 9g。
[0044] 实施例4
[0045] 处方
[0046] 聚维酮碘（PVP-I) 75g美洲大蠊醇提物（以总氨基酸计）不少于〇·如甘油150ml 吐温803ml山梨酸2g碘酸钾2g
[0047] 制备成 1000ml
[0048] 制法
[0049] 取？￥?-175§，美洲大蠊提取物（以总氨基酸计）不少于0.哋，加入8〇%所需量的 纯水、甘油150ml、吐温803ml、碘酸钾2g及山梨酸2g，加热溶解，滤过，滤液加水至l〇〇〇ml， 搅匀，灭菌，滤过，灌装，即得。
[0050] 该复方聚维酮碘消毒液含聚维酮碘以有效碘浓度计为7· 5%，含美洲大蠊提取物 每1000ml不少于0. 8g。
[0051] 实施例5
[0052] 处方
[0053] 聚维酮碘（PVP-I) 100g美洲大蠊醇提物（以总氨基酸计）不少于〇· 8g吐温803ml 碘酸钾2g
[0054] 制备成 1000ml
[0055] 制法
[0056] 取？￥?-110(^，美洲大蠊提取物（以总氨基酸计）不少于〇.8心加入80%所需量的 纯水、吐温 8〇3ml及碘酸钾2g，加热溶解，滤过，滤液加水至l〇00ml，搅匀，灭菌，滤过，灌装， 即得。
[0057] 该复方聚维酮碘消毒液含聚维酮碘以有效碘浓度计为10%，含美洲大蠊提取物每 1000ml 不少于 0. 8g。
[0058] 实施例6
[0059] 处方
[0060]聚维酮碘（PVP-I) l〇g美洲大蠊醇提物（以总氨基酸计）不少于〇· 8g乙醇750ml 山梨酸2g碘酸钾2g
[0061] 制备成 1000ml
[0062] 制法
[0063] SPVP-Il〇g，美洲大蠊提取物（以总難酸计）不少:于〇·8g，加入80%所需量的 纯水、乙醇75〇ml、碘酸钾2g及山梨酸2g，加热溶解，滤过，滤液加水至 1000m1，搅匀，灭菌， 滤过，灌装，即得。 〇八
[0064]该复方聚维酮碘消毒液含聚维酮碘以有效碘浓度计为1%，含美洲大蠊提取物每 1000ml 不少于 0· 8g。
[0065] 实施例7
[0066] 处方
[0067] 聚维酮碘（PVP_I)50g美洲大蠊醇提物（以总氨基酸计）不少于〇· %甘油50ml 碘酸钾2g山梨酸5g ^
[0008] 制备成 1000ml
[0069] 制法
[0070] 取PVP-I50g，美洲大蠊提取物（以总氨基酸计）不少于〇. 8g，加入80%所需量的 纯水、甘油50ml、碘酸钾2g及山梨酸5g，加热溶解，滤过，滤液加水至 1〇〇〇ml，搅匀，灭菌，滤 过，灌装，即得。 乂 ^
[0071] 该复方聚维酮碘消毒液含聚维酮碘以有效碘浓度计为5%，含美洲大蠊提取物每 1000ml 不少于 0. 8g。
[0072] 实施例8
[0073] 处方
[0074]聚维酮碘（PVP-1) 100g美洲大蠊醇提物（以总氨基酸计）不少于〇·叱甘油200ml 碘酸钾2g山梨酸lg
[0075] 制备成 1000ml
[0076] 制法
[0077]取PVP-IlOOg，美洲大蠊提取物（以总氨基酸计）不少于〇· 8§，加入80%所需量的 纯水、甘油200ml、碘酸钾2g及山梨酸lg，加热溶解，滤过，滤液加水至1000m1，搅匀，灭菌， 滤过，灌装，即得。
[0078]该复方聚维酮碘消毒液含聚维酮碘以有效碘浓度计为10%，含美洲大蠊提取物每 1000ml 不少于 0. 8g。
[0079] 实施例9
[0080] 处方
[0081]聚维酮碘（PVP-I) l〇〇g美洲大蠊醇提物（以总氨基酸计）不少于〇. %甘油l5〇ml 山梨酸2g苯甲酸钠3. 5g碘酸钾lg
[0082] 制备成 1000ml
[0083] 制法
[0084]取？￥?-110(^，美洲大蠊提取物（以总氨基酸计）不少于〇.恥，加入80%所需量 的纯水、甘油150ml、碘酸钾lg、苯甲酸钠 3. 5g及山梨酸2g，加热溶解，滤过，滤液加水至 1000ml，搅勻，灭菌，滤过，灌装，即得。
[0085] 该复方聚维酮碘消毒液含聚维酮碘以有效碘浓度计为10%，含美洲大蠊提取物每 1000ml 不少于 0. 8g。
[0086] 实施例1〇
[0087] 处方
[0088]聚维酮碘（PVP-I) l〇〇g美洲大蠊醇提物（以总氨基酸计）不少于〇. 8g甘油150ml 山梨酸2g苯甲酸钠3. 5g碘酸钾5g _9] 制备成1000ml
[0090] 制法
[0091] 取PVP-Il〇〇g，美洲大蠊提取物（以总氨基酸计）不少于〇_ 8g，加入8〇%所需量 的纯水、甘油150ml、碘酸钾5g、苯甲酸钠3. 5g及山梨酸2g，加热溶解，滤过，滤液加水至 1000ml，搅匀，灭菌，滤过，灌装，即得。
[0092]该复方聚维酮碘消毒液含聚维酮碘以有效碘浓度计为1〇%，含美洲大蠊提取物每 1000ml 不少于 0· 8g。
[0093]本发明实施例中美洲大蠊提取物的均为去油脂品，其制备方法可以参见现有技术 中的公开方法，如201210446614. 3。也可参照如下方法：
[0094]取美洲大蠊，粉碎，用80%?90%的乙醇提取，第一次加7倍量乙醇回流提取2小 时，第二次加5倍量乙醇回流提取1. 5小时，第三次加3倍量乙醇回流提取1小时，合并提 取液，静置8h以上，滤过，滤液回收乙醇并浓缩成稠膏（相对密度约l 30(85t；))，加入2〇 倍浸膏量的纯水，加热搅拌，静置，冷却，使油脂充分上浮，取下清液，过滤，滤液浓缩成稠膏 (相对密度约L 3〇 (85°C ))，得美洲大蠊提取物。
[0095]以下通过试验例具体说明本发明的有益效果。
[0096]下述试验例中，复方聚维酮碘消毒液中的有效碘浓度参照各具体试验步骤要求， 消毒液中所含美洲大蠊提取物以总氨基酸计，每1000ml含〇. 8?〇. 9g。
[0097] 试验例1复方聚维酮碘消毒液的药理作用考察：
[0098] 1.复方聚维酮碘消毒液对体外培养血管内皮细胞增殖的影响
[0099] 1. 1 材料
[0100] 1. 1· 1 细胞株
[0101] 内皮细胞细胞株ECV_3〇4购于山东省医学科学院。
[0102] 1. 1. 2主要试剂
[0103] 复方聚维酮碘消毒液（实验中所用的复方聚维酮碘消毒液，其中除了聚维酮碘、 美洲大蠊提取物、碘酸钾外，不含防腐剂和其他辅料）
[0104] 美洲大蠊饮片、美洲大蠊醇提物（四川科伦药业集团有限公司）
[0105] 聚维酮碘溶液（PVP-I，批号：101004,有效碘浓度10. 〇% )，（成都永安制药有限公 司）
[0106] 聚维酮碘粉末（纯度彡99%，郑州赛诺康化工产品有限公司）
[0107] RPMI1640 培养基，（美国 GIBC0 公司）
[0108] 胎牛血清，（上海玉博生物科技有限公司）
[0109] PBS缓冲液（pH = 7. 4)，（福州迈新生物技术开发有限公司）
[0110] 0. 25%胰蛋白酶，（北京格源天润生物科技有限公司）
[0111] 青霉素（80万U/ml)，（山东鲁抗制药股份有限公司）
[0112] 链霉素（100万U/ml)，（山东鲁抗制药股份有限公司）
[0113] 溴化丙啶（PI)，（SIGMA)
[0114] 鼠抗人PCNA单克隆抗体，（上海亿欣生物科技有限公司）
[0115] 兔抗人Ki-67单克隆抗体，（上海亿欣生物科技有限公司）
[0116] PV-9000通用型二抗，（上海亿欣生物科技有限公司）
[0117] DAB，（上海亿欣生物科技有限公司）
[0118] 1.1. 3 仪器
[0119] 酶标仪，Bi〇-RAD550,(美国 Bio-RAD 公司）
[0120] 倒置显微镜，olympus，（日本）
[0121]医用净化工作台，APR-GM-ZYT-6,（成都艾普瑞实验设备有限公司）
[0122] 微型迷你振荡器，MS-1，（日本IKA公司）
[0123] 医用低速离心机，TOL-5,（四川蜀科仪器有限公司）
[0124] C02细胞培养箱，MC0175,（日本三洋电器有限公司）
[0125] 液氮生物容器，YDS-30,（成都信杰诚贸易有限公司）
[0126] _2〇°C冰箱，康佳，（安徽康佳电器有限公司）
[0127] -80°C超低温冰箱，Therm〇F〇rma725型，（日本三洋电器有限公司）
[0128] 电热恒温干燥箱，（成都特思特仪器有限公司）
[0129] 流式细胞仪，FACSCalibur，（美国BD公司）
[0130] 培养板，6、24、96 孔，（COSTER)
[0131] 1.1. 4各溶液配方
[0132] (l)RPMI 1640培养液：取一包rpmi 1640培养基粉末溶解于300ml三蒸水再用三蒸 水洗包装袋内两次。加入磁性搅棒，放在振荡器上搅匀，加入2gNaHC03，定容接近l〇〇〇ml，并 用lmol HCL溶液调pH值至7. 0?7· 2,并加入青霉素使终浓度至l〇〇U/ml和链霉素终浓度 100U/ml。0_22um滤膜两张过滤除菌，无菌条件下分装，4°C冷藏备用。每批使用不超过两 周。
[0133] (2)PI 复合染液：生理盐水：129. 6ml、PI :10ml、RNase :2mg、1.0 % Triton-100 : 0· 5ml、枸椽酸钠：200mg，加蒸馏水至200ml，调整pH值至7· 2?7. 6,4?避光保存。
[0134] ⑶ 1 :5〇PCNA 或 Ki-67 抗体：取 PCNA 或 Ki-67 抗体原液 10 μ 1，以 490 μ 1 PBS 稀 释至500 μ 1，现用现配。
[0135] 1.2实验方法
[0136] 1.2.1细胞培养
[0137] 内皮细胞株ECV-304培养于含1〇%胎牛血清的RPMIIMO培养液中，内含终浓度为 100U/ml的青霉素和链霉素，置于37t：、 5% C02饱和湿度细胞培养箱内单层培养，待细胞长 满80%?90%后，PBS缓冲液冲洗两遍，〇· 25%胰蛋白酶消化约5?8min待出现筛孔效应 后，用lml吸管轻轻吹打完全后传代。
[0138] 1. 2. 2复方聚维酮碘消毒液对体外培养ecv-304细胞增殖的影响
[0139]分别取复方聚维酮碘消毒液适量，用RPMI1640培养基分别稀释至一定浓度的溶 液，具体方法步骤如下：
[0140] 1· 2. 2· 1消化制备单细胞悬液：待培养瓶内细胞长满约8〇 %?9〇 %后，力口 lml0_25%胰蛋白酶消化，镜下观察见细胞回缩，出现筛孔效应，倒掉消化液，加入含1〇%胎 牛血清的RPMI16402?3ml吹打，使细胞脱壁，加培养液至10ml继续吹打使细胞之间分散 成单个细胞，并于镜下观察，制备成单细胞悬液。
[0141] I·2·2· 2计算细胞密度：用1ml刻度吸管吸取少许细胞悬液，滴在计数板上并置于 倒置显微镜下观察，计数并计算细胞密度。
[0142]细胞数Μ = 4大格细胞总数/4X 104
[0143] 1.2. 2. 3调整细胞密度：使细胞密度调至〇.8?LoxwYmi,-般每瓶细胞需加 培养基至24?25ml即可得到所需细胞密度。
[0144] 1. 2· 2. 4接种：24孔板每板分为i个对照组和3个实验组，每组设6个实验复孔。 每孔加入lml细胞悬液，置于培养箱内约2h后细胞贴壁。
[0145] 1. 2· 2· 5加入复方聚维酮碘消毒液：待镜下观察细胞贴壁后，取出培养板向实验 孔加不同配比组成的复方聚维酮碘消毒液。具体方法为：从实验孔中取出20 μ 1培养液弃 去，然后加入等体积的复方聚维酮碘消毒液。
[0146] 1. 2. 2. 6细胞培养、形态学观察及细胞计数：加入不同复方聚维酮碘消毒液后放 入培养箱继续培养，于第4、8、12和24h观察细胞生长状况，并进行细胞计数。
[0147] 1.2. 3对细胞周期的影响
[0148]将ECV_3〇4细胞接种于6孔培养板上，用含有效碘浓度为〇.丨〇%、5. 〇〇%、ι〇. 〇〇% 的^方聚维酮碘消毒液的培养液分别培养24h后用胰酶适度消化制备单个细胞悬液，收集 至离心管lOOOrpm离心15min，弃上清。PBS冲洗2次，加0.5ml PBS吹匀，用5ml注射器将 细胞吸起打入5Π 11701%冷乙醇中，封口膜封口。4°C固定过夜。lOOOrpm离心15min，弃上清 液，PBS冲洗2次。用0· 4ml PBS重新悬细胞并转至Tube中轻轻吹打（防止细胞破碎），将 细胞悬液和等体积的PI复合染液混合，染色（4°C, 20?30min)，400目尼龙网过滤后上机 检测。ModFit分析软件分析，用S期细胞比率（SPR)表示相对增殖力。
[0149] SPR = S/ (Go/Gi+S+02/M)
[0150] 1.2.4对？0熟、1^67表达的影响
[0151]采用第二代聚合酶两步法（PV法）分析，其步骤为：
[0152] 1. 2. 4. 1在无菌条件下将消毒好的盖玻片放入6孔培养板；
[0153] 1· 2· 4. 2将ECV-3〇4培养于盖玻片上（6片/实验组），待细胞贴壁后加入等量的 复方聚维酮碘消毒液，有效碘浓度分别为10. 00 %、7. 50 %、5. 00 %、2. 50 %和0· 10 %，培养 24h ；
[0154] 1· 2. 4· 3由培养板中取出盖玻片，冷丙酮固定细胞（室温，i〇min)，pbs冲洗 (2minX3 次）；
[0155] 1. 2· 4. 445?烤片 3h，PBS 冲洗 5min，三次；
[0156] 1· 2. 4. 5 滴加 0· 5% Triton-X100(37O，10min)，PBS 冲洗 5min，三次；
[0157] 1· 2. 4· 6每张切片滴加蒸馏水新鲜配置的3% H202(37°C，10min)，以灭活内源性过 氧化物酶，PBS冲洗5min，三次；
[0158] 1_2.4_7滴加一抗（鼠抗人？0碰1861:50，兔抗人1^671861 :50)，37。〇201^11后 4°C过夜；
[0159] 1· 2. 4. 837°C复温 lh，PBS 冲洗 2min，三次；
[0160] 1.2.4.9滴加二抗中试剂1，37。〇，2〇1!^11，卩83冲洗51^11,三次 ；
[0161] 1. 2. 4. 10 滴加二抗中试剂 2,37°C，30min ;PBS 冲洗 5min，三次；
[0162] 1. 2· 4· 11滴加新鲜配置的DAB显色，镜下控制时间，蒸馏水冲洗终止反应；
[0163] 1· 2· 4· I2苏木素轻度复染，自来水冲洗；梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封 片；
[0164] 1. 2. 4. 13镜下观察并照相，计数100个细胞中的阳性细胞数，随机选择6个视野， 计算均值X 100%为阳性细胞的比率。
[0165] 1.2. 5统计处理方法
[0166] 数据处理采用SPSS18· 0软件。实验数据均用均数土标准差表示，多组均数间的 比较采用F检验，多组均数间的多重比较采用q检验。Ρ<0· 05有统计学意义；P>0. 05无统 计学意义。
[0167] 1.3实验结果
[0168] 1. 3. 1对体外培养ECV-304细胞增殖的影响
[0169] ECV-304细胞在不同配比组成的复方聚维酮碘消毒液培养液中培养不同时间后， 可见细胞计数和细胞形态与有效碘浓度及作用时间存在一定关系（时间剂量效应关系，见 表 1 -1)。
[0170] 1. 3· 1. 1. 1不同有效碘浓度的复方聚维酮碘消毒液作用4h对ECV-304细胞数量 及形态的影响：加复方聚维酮碘消毒液培养4h，与对照组比较，康复新液组和各实验组细 胞计数均显著增加，PVP-I组有增强趋势但无统计学意义，各组细胞形态无明显改变，细胞 呈圆形或不规则形，均匀透亮,贴壁后内皮细胞呈典型铺路石状镶嵌排列，或呈扁平的短梭 形、多角形，键嵌排列。
[0171] 1. 3. 1. 1. 2不同有效碘浓度的复方聚维酮碘消毒液作用8h对ECV-304细胞数量及 形态的影响：培养8h后，康复新液组和各实验组细胞计数均显著增加，与对照组、PVP-I组 比较有统计学意义，形态无明显改变；PVP-I组细胞计数有减少趋势，可见形态改变，细胞 内可见空泡现象以及中毒颗粒。
[0172] L 3. 1. 1. 3不同有效碘浓度的复方聚维酮捵消毒液作用12h对ECV-304细胞数量 及形态的影响：培养12h后，康复新液组和各实验组细胞计数均显著增加，与对照组、PVP-I 组比较有统计学意义，形态无明显改变；PVP-I组细胞计数显著减少，可见细胞形态明显改 变为成纤维样长梭形，细胞内可见空泡现象以及中毒颗粒。
[0173] 1. 3. 1. 1. 4不同有效碘浓度的复方聚维酮碘消毒液作用24h对ECV-304细胞数量 及形态的影响：培养24h后，康复新液组和各实验组细胞计数均显著增加，与对照组、PVP-I 组比较有统计学意义，形态无明显改变；PVP-I组细胞计数显著减少，可见细胞形态明显改 变为成纤维样长梭形，且可见部分细胞回缩脱壁，细胞内可见空泡现象以及中毒颗粒。
[0174]表1-1不同时间段复方聚维酮碘消毒液对细胞计数的影响 [0175]
【权利要求】
1. 一种复方聚维酮碘消毒液，其特征在于：每1000ml消毒液中含有如下用量的原料： 聚维酮碘10?l 〇0g，美洲大蠊提取物以总氨基酸计在〇. 8g以上，碘酸钾适量，余量为 水。
2. 根据权利要求1所述的复方聚维酮碘消毒液，其特征在于：聚维酮碘的含量为25? 100g。
3. 根据权利要求2所述的复方聚维酮碘消毒液，其特征在于：聚维酮碘的含量为50? 100g。
4. 根据权利要求1所述的复方聚维酮碘消毒液，其特征在于：碘酸钾的含量为1?5g。
5. 根据权利要求1所述的复方聚维酮碘消毒液，其特征在于：消毒液中还含有如下辅 料：防腐剂或/和助溶剂。
6. 根据权利要求5所述的复方聚维酮碘消毒液，其特征在于：所述防腐剂为苯甲酸钠 或/和山梨酸钾；所述助溶剂为甘油或/和吐温。
7. 根据权利要求1所述的复方聚维酮碘消毒液，其特征在于：所述美洲大蠊提取物为 去油脂的美洲大蠊提取物。
8. 根据权利要求1或7所述的复方聚维酮碘消毒液，其特征在于：所述美洲大蠊提取 物的制备方法为：去美洲大蠊，乙醇提取后，去除油脂，即得。
9. 根据权利要求8所述的复方聚维酮碘消毒液，其特征在于：制备方法的具体操作如 下： 取美洲大蠊，粉碎，用80%?90% v/v乙醇提取，醇提液回收乙醇并浓缩后，加水，力口 热搅拌，静置，冷却，待油脂充分上浮，取下清液，过滤，滤液浓缩或干燥后，得美洲大蠊提取 物。
10. 权利要求1-9任意一项所述复方聚维酮碘消毒液的制备方法，其特征在于：它包括 如下操作步骤： (1) 按配比称取原料； (2) 取去油脂的美洲大蠊提取物、聚维酮碘和碘酸钾，加水溶解后，加入常规辅料，混 匀，滤过，灭菌，即得消毒液。
【文档编号】A61K35/64GK104248645SQ201410300615
【公开日】2014年12月31日 申请日期:2014年6月27日 优先权日:2013年6月28日
【发明者】张廷模, 苏柘僮, 邹俊波 申请人:成都百草和济科技有限公司