一种畜禽养殖场专用除臭剂及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种畜禽养殖场专用除臭剂及其应用，其菌种组成为：嗜酸乳杆菌106~108个/ml、罗伊氏乳杆菌107~109个/ml、多粘芽孢杆菌104~106个/ml、迟缓芽孢杆菌106~108个/ml、凝结芽孢杆菌106~109个/ml、粪肠球菌104~106个/ml、屎肠球菌107~109个/ml、皱褶假丝酵母菌104~107个/ml、粗壮假丝酵母菌104~107个/ml、酵米面假单胞菌104~106个/ml、沼泽红假单胞菌106~108个/ml、果香地霉104~106个/ml、棒曲酶106~108个/ml、糙孢曲酶106~108个/ml和球孢链霉菌106~109个/ml。本发明以喷洒方式处理畜禽舍以及堆积发酵的排泄物，有效降低恶臭气体的释放量，为畜禽养殖场恶臭的有效处理和环境保护提供技术支持。除此之外本发明还可以喷洒到畜禽体表，保持畜禽体表清洁卫生，有利于畜禽的生长。
【专利说明】一种畜禽养殖场专用除臭剂及其应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种除臭剂，具体是涉及一种畜禽养殖场专用除臭剂及其应用，属于环境保护【技术领域】。
【背景技术】
[0002]随着畜禽养殖业的规模化发展，畜禽排泄物对养殖场周围环境的污染也日趋严重，其中产生恶臭气体是主要方式之一。造成畜禽粪便恶臭气体产生的主要原因是粪便堆积过程中氨气、硫化氢、甲烷和有机酸等物质的挥发与释放。恶臭气体不仅给养殖场环境周围居民带来嗅觉上的不适，而且对人的呼吸、消化、心血管、内分泌及神经系统都有影响；长期生活在恶臭污染环境中还会引起厌食、失眠、记忆力下降等功能性疾病；吸入恶臭甲醛和苯有强烈致癌作用；高浓度恶臭还可以使接触者发生肺水肿甚至窒息死亡。因此，养殖场恶臭气体的合理处理，是控制养殖场环境卫生、改善防疫条件和减少环境污染的重要环节，也是保障畜禽养殖业健康发展的重要措施。
[0003]目前，处理恶臭气体采用的方法主要有燃烧法、氧化法、吸收法、吸附法、中和脱臭法等多种，但都存在处理效率低、产生二次污染、对设备的要求高、不易操作等不足。因此，寻求高效、环保的除臭方法是当前国内恶臭污染治理研究的前沿课题，其中之一就是微生物除臭法。这是由于微生物不仅可以分解畜禽粪便在发酵过程中产生氨气、硫化氢和甲烷等恶臭气体，而且可以产生多种无机酸，形成不利于腐败微生物生活的酸性环境，并从根本上降解产生恶臭气体的物质。因此，微生物除臭法具有传统的物理化学除臭方法不可比拟的优越性，已逐步在恶臭或有毒有害气体污染控制【技术领域】凸显出主导作用。
[0004]应用微生物除臭剂处理养殖场恶臭，可分为体内调控和体外调控两种形式。目前多数学者的研究集中在体内调控方面，如将微生物作为饲料添加剂，以增加饲料蛋白的消化吸收从而减少臭气排放，然而体内调控属间接除臭，效果不明显，尤其以微生物作为饲料添加剂，还可能具有潜在致病性，替代并转移抗生素抗性基因，扰乱正常动物微生物区系，产生有害代谢产物等隐患。在体外调控方面的研究主要集中在单一除臭菌种的筛选和除臭效果的检测，而恶臭气体的成分复杂，包括氨气、硫化氢、甲烷和有机酸等恶臭物质，且这些恶臭物质的去除需要多种微生物的综合作用才能达到明显的效果。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供一种畜禽养殖场专用除臭剂，以喷洒方式处理畜禽舍以及堆积发酵的排泄物，除此之外还可以喷洒到畜禽体表，保持畜禽体表清洁卫生，有利于畜禽的生长。该畜禽养殖场专用除臭剂不仅可以减少空气中的恶臭气体，还能有效降解产生恶臭气体的物质，从根源上削弱恶臭物质的产生，具有传统方法不可比拟的优势和安全性，以克服传统方法存在的处理效率低、成本高且存在一定安全隐患等不足。
[0006]本发明解决其技术问题所采用的技术方案如下:
一种畜禽养殖场专用除臭剂，由以下微生物菌种组成:嗜酸乳杆菌10卜108个/ml、罗伊氏乳杆菌1(Τ109个/ml、多粘芽孢杆菌1(Τ106个/ml、迟缓芽孢杆菌1(Τ?08个/ml、凝结芽孢杆菌16?19个/ml、粪肠球菌14?16个/ml、屎肠球菌107?109个/ml、皱裙假丝酵母菌1417个/ml、粗壮假丝酵母菌1417个/ml、酵米面假单胞菌14?16个/ml、沼泽红假单胞菌16?18个/ml、果香地霉14?16个/ml、棒曲酶16?18个/ml、糙孢曲酶16?18个/ml和球孢链霉菌10卜109个/ml ；
所述嗜酸乳杆菌和罗伊氏乳杆菌的制备方法:
Cl)培养基的组成:牛肉膏8?10g、蛋白胨8?10g、酵母膏4?6g、葡萄糖3飞g、吐温800.5ml、醋酸钠3?5g、柠檬酸钠2?4g、磷酸氢二钾Hg、硫酸镁0.4^0.6g、硫酸锰0.2^0.3g、硫酸亚铁0.Γ0.2g、蒸馏水100g ;所有培养基原料在使用前进行灭菌处理；
(2)发酵培养:量取两份由上述原料配制而成的培养基5?10ml装入两个试管中，在无菌条件下，用接种环分别挑取培养皿上的嗜酸乳杆菌和罗伊氏乳杆菌接入两个试管中，3(T35°C条件下振荡培养6?12h，之后加入经过灭菌处理的植物提取物0.5?lg，继续培养12?24h，得到嗜酸乳杆菌和罗伊氏乳杆菌的培养物；
所述植物提取物的制备方法为:将枸杞和桑葚按质量比1:2混合，在含有f 3%的氯化钠溶液中浸泡12?24h,浸泡温度为35?37°C,浸泡结束后过滤,取滤洛；将滤洛置于干燥箱内烘干，使其水分低于12%，烘干温度为55飞5°C，粉碎，过60目筛，得枸杞和桑葚的粉状物；往粉状物中加入8(Γ85%的乙醇，在6(T70°C温度下蒸煮3?5h，取滤液，将滤液浓缩，喷雾干燥，粉碎，过60目筛，即得植物提取物；
所述多粘芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌的制备方法:
(1)培养基的组成:牛肉膏25?30g、蛋白胨5?8g、葡萄糖15?20g、氯化钠3?5g、磷酸氢二钠2?3g、氯化镁0.2^0.4g、蒸馏水100g ；
(2)发酵培养:称取上述培养基原料制备多粘芽孢杆菌培养液、迟缓芽孢杆菌培养液和凝结芽孢杆菌培养液，分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上多粘芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌分别接入装有多粘芽孢杆菌培养液、迟缓芽孢杆菌培养液和凝结芽孢杆菌培养液的试管中，26?37°C条件下进行振荡培养24?36h，分别得到各菌的液体培养物；
所述粪肠球菌和屎肠球菌的制备方法:
(1)培养基的组成:牛肉膏3?5g、蛋白胨l(Tl5g、氯化钠:T5g、蔗糖8?10g、磷酸氢二钾l?2g、蒸懼水100g组成；
(2)发酵培养:称取上述培养基原料制备粪肠球菌培养液和屎肠球菌培养液,分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上粪肠球菌和屎肠球菌分别接入装有粪肠球菌培养液和屎肠球菌培养液的试管中，26?37°C条件下进行振荡培养24?36h，分别得到各菌的液体培养物；
所述皱褶假丝酵母菌和粗壮假丝酵母菌的制备方法:
(1)培养基的组成:酵母膏2?4g、蛋白胨4?6g、葡萄糖3?6g、蒸懼水100g；
(2)发酵培养:称取上述培养基原料制备皱褶假丝酵母菌培养液和粗壮假丝酵母菌培养液，分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上皱褶假丝酵母菌和粗壮假丝酵母菌分别接入装有皱褶假丝酵母菌培养液和粗壮假丝酵母菌培养液的试管中，26?37°C条件下进行振荡培养24?36h，分别得到各菌的液体培养物； 所述酵米面假单胞菌和沼泽红假单胞菌的制备方法:
(1)培养基的组成:氯化铵2?4g、磷酸氢二钾0.5?lg、氯化镁0.2^0.4g、氯化钠2?4g、酵母膏0.5?lg、硫酸镁Hg、硫代硫酸钠0.4^0.6g、蒸馏水100g组成；
(2)发酵培养:称取上述培养基原料制备酵米面假单胞菌和沼泽红假单胞菌培养液,分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上酵米面假单胞菌和沼泽红假单胞菌分别接入装有酵米面假单胞菌培养液和沼泽红假单胞菌培养液的试管中，26?37°C条件下进行振荡培养24?36h，分别得到各菌的液体培养物；
所述果香地霉、棒曲酶、糙孢曲酶和球孢链霉菌的制备方法:
Cl)培养基的组成:蔗糖25?30g、蛋白胨10?15g、硫酸镁0.5?lg、氯化钾0.5?lg、硫酸亚铁0.ΟΓΟ.03g、磷酸氢二钾I?2g、蒸馏水100g ；
(2)发酵培养:称取上述培养基原料制备果香地霉、棒曲酶、糙孢曲酶和球孢链霉菌培养液，分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上果香地霉、棒曲酶、糙孢曲酶和球孢链霉菌分别接入装有果香地霉培养液、棒曲酶培养液、糙孢曲酶培养液和球孢链霉菌培养液的试管中，26?37°C条件下进行振荡培养24?36h，分别得到各菌的液体培养物；
一种畜禽养殖场专用除臭剂的制备方法如下:
将各菌的液体培养物添加到畜禽除臭剂专用培养液中，使各菌达到上述菌种浓度，混合均匀即可；
所述畜禽除臭剂专用培养液由以下物质组成:牛肉膏l(Tl5g、蛋白胨:T5g、麦芽糖3飞g、葡萄糖2?4g、氯化钠Hg、磷酸二氢钾广28、硫酸亚铁2?48、硫酸镁Hg、硫酸锌I?2g、蒸懼水lOOOg。
[0007]一种畜禽养殖场专用除臭剂的使用方法:每天早晚在畜禽舍内各喷洒一次，每天用量 0.3?0.6kg/m3。
[0008]有益效果
本发明适用于处理畜禽养殖场舍地面排泄物、舍内空面中的臭气以及猪体身上的粪污，能有效降低空气中的恶臭气体，并从根源上降低恶臭气体的释放量，为畜禽养殖场恶臭的处理和环境保护提供了技术支持。本发明与传统方法相比，具有如下优势:
(O除臭效率高:本发明所用的微生物菌种均是经过筛选获得的，经过有机组合，可大大提高除臭效果，有效降低畜禽养殖场恶臭气体的释放量；
(2)安全环保:本发明不含化学药品，采用的是纯微生物处理方法，不会造成二次污染，且各菌种均是常用菌种，安全有保障；
(3)菌种的适应性强:通过多种菌种的有机组合和培养液的精心配制，保证了除臭剂可在常态条件下保持着高效的除臭效果；
(4 )发挥作用大:本发明既可以用于处理畜禽舍内的粪污，又可有效降解畜禽舍内空气中的恶臭气体。同时，由于除臭液成中性，对猪体几乎没有刺激，还可喷洒到猪体表面，保持畜禽体表清洁卫生，有利于畜禽的生长。
具体实施例
[0009]以下通过具体实施例来进一步描述本发明。
[0010]实施例1
一种畜禽养殖场专用除臭剂，由以下微生物菌种组成:嗜酸乳杆菌16个/ml、罗伊氏乳杆菌17个/ml、多粘芽孢杆菌14个/ml、迟缓芽孢杆菌16个/ml、凝结芽孢杆菌16个/ml、粪肠球菌14个/ml、屎肠球菌17个/ml、皱裙假丝酵母菌14个/ml、粗壮假丝酵母菌14个/ml、酵米面假单胞菌14个/ml、沼泽红假单胞菌16个/ml、果香地霉14个/ml、棒曲酶16个/ml、糙孢曲酶16个/ml和球孢链霉菌16个/ml ；
所述嗜酸乳杆菌和罗伊氏乳杆菌的制备方法:
(1)培养基的组成:牛肉膏8g、蛋白胨8g、酵母膏4g、葡萄糖3g、吐温800.5ml、醋酸钠3g、朽1檬酸钠2g、磷酸氢二钾lg、硫酸镁0.4g、硫酸猛0.2g、硫酸亚铁0.lg、蒸懼水100g ；所有培养基原料在使用前进行灭菌处理；
(2)发酵培养:量取两份由上述原料配制而成的培养基5ml装入两个试管中，在无菌条件下，用接种环分别挑取培养皿上的嗜酸乳杆菌和罗伊氏乳杆菌接入两个试管中，30°C条件下振荡培养6h，之后加入经过灭菌处理的植物提取物0.5g，继续培养12h，得到嗜酸乳杆菌和罗伊氏乳杆菌的培养物；
所述植物提取物的制备方法为:将枸杞和桑葚按质量比1:2混合，在含有1%的氯化钠溶液中浸泡12h，浸泡温度为35°C,浸泡结束后过滤,取滤洛；将滤洛置于干燥箱内烘干,使其水分低于12%，烘干温度为55°C，粉碎，过60目筛，得枸杞和桑葚的粉状物；往粉状物中加入80%的乙醇，在60°C温度下蒸煮3h，取滤液，将滤液浓缩，喷雾干燥，粉碎，过60目筛，即得植物提取物；
所述多粘芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌的制备方法:
(1)培养基的组成:牛肉膏25g、蛋白胨5g、葡萄糖15g、氯化钠3g、磷酸氢二钠2g、氯化镁0.2g、蒸馏水100g;
(2)发酵培养:称取上述培养基原料制备多粘芽孢杆菌培养液、迟缓芽孢杆菌培养液和凝结芽孢杆菌培养液，分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上多粘芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌分别接入装有多粘芽孢杆菌培养液、迟缓芽孢杆菌培养液和凝结芽孢杆菌培养液的试管中，26°C条件下进行振荡培养24h，分别得到各菌的液体培养物；
所述粪肠球菌和屎肠球菌的制备方法:
(O培养基的组成:牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠3g、蔗糖8、磷酸氢二钾lg、蒸馏水100g组成；
(2)发酵培养:称取上述培养基原料制备粪肠球菌培养液和屎肠球菌培养液,分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上粪肠球菌和屎肠球菌分别接入装有粪肠球菌培养液和屎肠球菌培养液的试管中，26°C条件下进行振荡培养24h，分别得到各菌的液体培养物；
所述皱褶假丝酵母菌和粗壮假丝酵母菌的制备方法:
(1)培养基的组成:酵母膏2g、蛋白胨4g、葡萄糖3g、蒸懼水100g；
(2)发酵培养:称取上述培养基原料制备皱褶假丝酵母菌培养液和粗壮假丝酵母菌培养液，分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上皱褶假丝酵母菌和粗壮假丝酵母菌分别接入装有皱褶假丝酵母菌培养液和粗壮假丝酵母菌培养液的试管中，26°C条件下进行振荡培养24h，分别得到各菌的液体培养物；
所述酵米面假单胞菌和沼泽红假单胞菌的制备方法:
(1)培养基的组成:氯化铵2g、磷酸氢二钾0.5g、氯化镁0.2g、氯化钠2g、酵母膏0.5g、硫酸镁lg、硫代硫酸钠0.4g、蒸懼水100g组成；
(2)发酵培养:称取上述培养基原料制备酵米面假单胞菌和沼泽红假单胞菌培养液,分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上酵米面假单胞菌和沼泽红假单胞菌分别接入装有酵米面假单胞菌培养液和沼泽红假单胞菌培养液的试管中，26°C条件下进行振荡培养24h，分别得到各菌的液体培养物；
所述果香地霉、棒曲酶、糙孢曲酶和球孢链霉菌的制备方法:
Cl)培养基的组成:蔗糖25g、蛋白胨10g、硫酸镁0.5g、氯化钾0.5g、硫酸亚铁0.0lg,磷酸氢二钾lg、蒸馏水100g ；
(2)发酵培养:称取上述培养基原料制备果香地霉、棒曲酶、糙孢曲酶和球孢链霉菌培养液，分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上果香地霉、棒曲酶、糙孢曲酶和球孢链霉菌分别接入装有果香地霉培养液、棒曲酶培养液、糙孢曲酶培养液和球孢链霉菌培养液的试管中，26°C条件下进行振荡培养24h，分别得到各菌的液体培养物；
一种畜禽养殖场专用除臭剂的制备方法如下:
将各菌的液体培养物添加到畜禽除臭剂专用培养液中，使各菌达到上述菌种浓度，混合均匀即可；
所述畜禽除臭剂专用培养液由以下物质组成:牛肉膏10g、蛋白胨3g、麦芽糖3g、葡萄糖2g、氯化钠lg、磷酸二氢钾lg、硫酸亚铁2g、硫酸镁lg、硫酸锌lg、蒸馏水lOOOg。
[0011]一种畜禽养殖场专用除臭剂的使用方法:每天早晚在畜禽舍内各喷洒一次，每天用量 0.3kg/m3。
[0012]实施例2
一种畜禽养殖场专用除臭剂，由以下微生物菌种组成:嗜酸乳杆菌18个/ml、罗伊氏乳杆菌19个/ml、多粘芽孢杆菌16个/ml、迟缓芽孢杆菌18个/ml、凝结芽孢杆菌19个/ml、粪肠球菌16个/ml、屎肠球菌19个/ml、皱裙假丝酵母菌17个/ml、粗壮假丝酵母菌17个/ml、酵米面假单胞菌16个/ml、沼泽红假单胞菌18个/ml、果香地霉16个/ml、棒曲酶18个/ml、糙孢曲酶18个/ml和球孢链霉菌19个/ml ；
所述嗜酸乳杆菌和罗伊氏乳杆菌的制备方法:
Cl)培养基的组成:牛肉膏10g、蛋白胨10g、酵母膏6g、葡萄糖5g、吐温80 0.5ml、醋酸钠5g、柠檬酸钠4g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁0.6g、硫酸锰0.3g、硫酸亚铁0.2g、蒸馏水100g ;所有培养基原料在使用前进行灭菌处理；
(2)发酵培养:量取两份由上述原料配制而成的培养基1ml装入两个试管中，在无菌条件下，用接种环分别挑取培养皿上的嗜酸乳杆菌和罗伊氏乳杆菌接入两个试管中，35°C条件下振荡培养12h，之后加入经过灭菌处理的植物提取物lg，继续培养24h，得到嗜酸乳杆菌和罗伊氏乳杆菌的培养物；
所述植物提取物的制备方法为:将枸杞和桑葚按质量比1:2混合，在含有3%的氯化钠溶液中浸泡24h，浸泡温度为37°C,浸泡结束后过滤,取滤洛；将滤洛置于干燥箱内烘干,使其水分低于12%，烘干温度为65°C，粉碎，过60目筛，得枸杞和桑葚的粉状物；往粉状物中加入85%的乙醇，在70°C温度下蒸煮5h，取滤液，将滤液浓缩，喷雾干燥，粉碎，过60目筛，即得植物提取物；
所述多粘芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌的制备方法:
(1)培养基的组成:牛肉膏30g、蛋白胨Sg、葡萄糖20g、氯化钠5g、磷酸氢二钠3g、氯化镁0.4g、蒸懼水100g ；
(2)发酵培养:称取上述培养基原料制备多粘芽孢杆菌培养液、迟缓芽孢杆菌培养液和凝结芽孢杆菌培养液，分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上多粘芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌分别接入装有多粘芽孢杆菌培养液、迟缓芽孢杆菌培养液和凝结芽孢杆菌培养液的试管中，37°C条件下进行振荡培养36h，分别得到各菌的液体培养物；
所述粪肠球菌和屎肠球菌的制备方法:
(1)培养基的组成:牛肉膏5g、蛋白胨15g、氯化钠5g、蔗糖10g、磷酸氢二钾2g、蒸馏水100g组成；
(2)发酵培养:称取上述培养基原料制备粪肠球菌培养液和屎肠球菌培养液,分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上粪肠球菌和屎肠球菌分别接入装有粪肠球菌培养液和屎肠球菌培养液的试管中，37°C条件下进行振荡培养36h，分别得到各菌的液体培养物；
所述皱褶假丝酵母菌和粗壮假丝酵母菌的制备方法:
(1)培养基的组成:酵母膏4g、蛋白胨6g、葡萄糖6g、蒸懼水100g；
(2)发酵培养:称取上述培养基原料制备皱褶假丝酵母菌培养液和粗壮假丝酵母菌培养液，分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上皱褶假丝酵母菌和粗壮假丝酵母菌分别接入装有皱褶假丝酵母菌培养液和粗壮假丝酵母菌培养液的试管中，37°C条件下进行振荡培养36h，分别得到各菌的液体培养物；
所述酵米面假单胞菌和沼泽红假单胞菌的制备方法:
(1)培养基的组成:氯化铵4g、磷酸氢二钾lg、氯化镁0.4g、氯化钠4g、酵母膏lg、硫酸镁2g、硫代硫酸钠0.6g、蒸懼水100g组成；
(2)发酵培养:称取上述培养基原料制备酵米面假单胞菌和沼泽红假单胞菌培养液,分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上酵米面假单胞菌和沼泽红假单胞菌分别接入装有酵米面假单胞菌培养液和沼泽红假单胞菌培养液的试管中，37°C条件下进行振荡培养36h，分别得到各菌的液体培养物；
所述果香地霉、棒曲酶、糙孢曲酶和球孢链霉菌的制备方法:
(1)培养基的组成:鹿糖30g、蛋白胨15g、硫酸镁lg、氯化钾lg、硫酸亚铁0.03g、磷酸氢二钾2g、蒸馏水100g ；
(2)发酵培养:称取上述培养基原料制备果香地霉、棒曲酶、糙孢曲酶和球孢链霉菌培养液，分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上果香地霉、棒曲酶、糙孢曲酶和球孢链霉菌分别接入装有果香地霉培养液、棒曲酶培养液、糙孢曲酶培养液和球孢链霉菌培养液的试管中，37°C条件下进行振荡培养36h，分别得到各菌的液体培养物； 一种畜禽养殖场专用除臭剂的制备方法如下:
将各菌的液体培养物添加到畜禽除臭剂专用培养液中，使各菌达到上述菌种浓度，混合均匀即可；
所述畜禽除臭剂专用培养液由以下物质组成:牛肉膏15g、蛋白胨5g、麦芽糖5g、葡萄糖4g、氯化钠2g、磷酸二氢钾2g、硫酸亚铁4g、硫酸镁2g、硫酸锌2g、蒸馏水lOOOg。
[0013]一种畜禽养殖场专用除臭剂的使用方法:每天早晚在畜禽舍内各喷洒一次，每天用量 0.6kg/m3。
[0014]实施例3
一种畜禽养殖场专用除臭剂，由以下微生物菌种组成:嗜酸乳杆菌17个/ml、罗伊氏乳杆菌18个/ml、多粘芽孢杆菌15个/ml、迟缓芽孢杆菌17个/ml、凝结芽孢杆菌17个/ml、粪肠球菌15个/ml、屎肠球菌18个/ml、皱裙假丝酵母菌15个/ml、粗壮假丝酵母菌15个/ml、酵米面假单胞菌15个/ml、沼泽红假单胞菌17个/ml、果香地霉15个/ml、棒曲酶17个/ml、糙孢曲酶17个/ml和球孢链霉菌17个/ml ；
所述嗜酸乳杆菌和罗伊氏乳杆菌的制备方法:
(1)培养基的组成:牛肉膏9g、蛋白胨9g、酵母膏5g、葡萄糖4g、吐温800.5ml、醋酸钠4g、朽1檬酸钠3g、磷酸氢二钾1.5g、硫酸镁0.5g、硫酸猛0.25g、硫酸亚铁0.15g、蒸懼水100g;所有培养基原料在使用前进行灭菌处理；
(2)发酵培养:量取两份由上述原料配制而成的培养基8ml装入两个试管中，在无菌条件下，用接种环分别挑取培养皿上的嗜酸乳杆菌和罗伊氏乳杆菌接入两个试管中，33°C条件下振荡培养10h，之后加入经过灭菌处理的植物提取物0.6g，继续培养18h，得到嗜酸乳杆菌和罗伊氏乳杆菌的培养物；
所述植物提取物的制备方法为:将枸杞和桑葚按质量比1:2混合，在含有2%的氯化钠溶液中浸泡18h，浸泡温度为36°C,浸泡结束后过滤,取滤洛；将滤洛置于干燥箱内烘干,使其水分低于12%，烘干温度为60°C，粉碎，过60目筛，得枸杞和桑葚的粉状物；往粉状物中加入82%的乙醇，在65°C温度下蒸煮4h，取滤液，将滤液浓缩，喷雾干燥，粉碎，过60目筛，即得植物提取物；
所述多粘芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌的制备方法:
(1)培养基的组成:牛肉膏26g、蛋白胨6g、葡萄糖16g、氯化钠4g、磷酸氢二钠2.5g、氯化镁0.3g、蒸馏水100g;
(2)发酵培养:称取上述培养基原料制备多粘芽孢杆菌培养液、迟缓芽孢杆菌培养液和凝结芽孢杆菌培养液，分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上多粘芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌分别接入装有多粘芽孢杆菌培养液、迟缓芽孢杆菌培养液和凝结芽孢杆菌培养液的试管中，30°C条件下进行振荡培养30h，分别得到各菌的液体培养物；
所述粪肠球菌和屎肠球菌的制备方法:
(1)培养基的组成:牛肉膏4g、蛋白胨12g、氯化钠4g、蔗糖9g、磷酸氢二钾1.5g、蒸馏水100g组成；
(2)发酵培养:称取上述培养基原料制备粪肠球菌培养液和屎肠球菌培养液,分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上粪肠球菌和屎肠球菌分别接入装有粪肠球菌培养液和屎肠球菌培养液的试管中，30°C条件下进行振荡培养30h，分别得到各菌的液体培养物；
所述皱褶假丝酵母菌和粗壮假丝酵母菌的制备方法:
(1)培养基的组成:酵母膏3g、蛋白胨5g、葡萄糖5g、蒸懼水100g；
(2)发酵培养:称取上述培养基原料制备皱褶假丝酵母菌培养液和粗壮假丝酵母菌培养液，分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上皱褶假丝酵母菌和粗壮假丝酵母菌分别接入装有皱褶假丝酵母菌培养液和粗壮假丝酵母菌培养液的试管中，30°C条件下进行振荡培养30h，分别得到各菌的液体培养物；
所述酵米面假单胞菌和沼泽红假单胞菌的制备方法:
(1)培养基的组成:氯化铵3g、磷酸氢二钾0.6g、氯化镁0.3g、氯化钠3g、酵母膏0.6g、硫酸镁1.5g、硫代硫酸钠0.5g、蒸馏水100g组成；
(2)发酵培养:称取上述培养基原料制备酵米面假单胞菌和沼泽红假单胞菌培养液,分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上酵米面假单胞菌和沼泽红假单胞菌分别接入装有酵米面假单胞菌培养液和沼泽红假单胞菌培养液的试管中，30°C条件下进行振荡培养30h，分别得到各菌的液体培养物；
所述果香地霉、棒曲酶、糙孢曲酶和球孢链霉菌的制备方法:
Cl)培养基的组成:蔗糖26g、蛋白胨16g、硫酸镁0.6g、氯化钾0.6g、硫酸亚铁0.02g、磷酸氢二钾1.5g、蒸馏水100g ；
(2)发酵培养:称取上述培养基原料制备果香地霉、棒曲酶、糙孢曲酶和球孢链霉菌培养液，分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上果香地霉、棒曲酶、糙孢曲酶和球孢链霉菌分别接入装有果香地霉培养液、棒曲酶培养液、糙孢曲酶培养液和球孢链霉菌培养液的试管中，30°C条件下进行振荡培养30h，分别得到各菌的液体培养物；
一种畜禽养殖场专用除臭剂的制备方法如下:
将各菌的液体培养物添加到畜禽除臭剂专用培养液中，使各菌达到上述菌种浓度，混合均匀即可；
所述畜禽除臭剂专用培养液由以下物质组成:牛肉膏12g、蛋白胨4g、麦芽糖4g、葡萄糖3g、氯化钠1.5g、磷酸二氢钾1.5g、硫酸亚铁3g、硫酸镁1.5g、硫酸锌1.5g、蒸馏水100g0
[0015]一种畜禽养殖场专用除臭剂的使用方法:每天早晚在畜禽舍内各喷洒一次，每天用量 0.4kg/m3。
[0016]试验效果:本发明的除臭剂有效活菌数多，除臭效果好。用本发明实施例1-3配制的除臭剂在双胞胎(集团)股份有限公司下属的养殖场进行了试验，结果表明粪便中NH3和H2S释放量分别下降55?75%和3(Γ40%，其中实施例3配制的除臭剂效果最佳，粪便中NH3和H2S释放量分别下降75%和40%。
【权利要求】
1.一种畜禽养殖场专用除臭剂，其特征在于由以下微生物菌种组成:嗜酸乳杆菌16^lO8个/ml、罗伊氏乳杆菌107?109个/ml、多粘芽孢杆菌1^lO6个/ml、迟缓芽孢杆菌16?18个/ml、凝结芽孢杆菌16?19个/ml、粪肠球菌14?16个/ml、屎肠球菌17?19个/ml、皱褶假丝酵母菌14?17个/ml、粗壮假丝酵母菌14?17个/ml、酵米面假单胞菌14?16个/ml、沼泽红假单胞菌1618个/ml、果香地霉1^lO6个/ml、棒曲酶106?108个/ml、糙孢曲酶106?108个/ml和球孢链霉菌106?109个/ml。
2.根据权利要求1所述一种畜禽养殖场专用除臭剂，其特征在于由以下微生物菌种组成:嗜酸乳杆菌17个/ml、罗伊氏乳杆菌18个/ml、多粘芽孢杆菌15个/ml、迟缓芽孢杆菌17个/ml、凝结芽孢杆菌17个/ml、粪肠球菌15个/ml、屎肠球菌18个/ml、皱裙假丝酵母菌15个/ml、粗壮假丝酵母菌15个/ml、酵米面假单胞菌15个/ml、沼泽红假单胞菌17个/ml、果香地霉15个/ml、棒曲酶17个/ml、糙孢曲酶17个/ml和球孢链霉菌17个/ml。
3.根据权利要求1-2所述一种畜禽养殖场专用除臭剂，其特征在于各菌的制备方法: 所述嗜酸乳杆菌和罗伊氏乳杆菌的制备方法: Cl)培养基的组成:牛肉膏8?10g、蛋白胨8?10g、酵母膏4?6g、葡萄糖3飞g、吐温800.5ml、醋酸钠3?5g、柠檬酸钠2?4g、磷酸氢二钾Hg、硫酸镁0.4^0.6g、硫酸锰0.2^0.3g、硫酸亚铁0.Γ0.2g、蒸馏水100g ;所有培养基原料在使用前进行灭菌处理； (2)发酵培养:量取两份由上述原料配制而成的培养基5?10ml装入两个试管中，在无菌条件下，用接种环分别挑取培养皿上的嗜酸乳杆菌和罗伊氏乳杆菌接入两个试管中，3(T35°C条件下振荡培养6?12h，之后加入经过灭菌处理的植物提取物0.5?lg，继续培养12?24h，得到嗜酸乳杆菌和罗伊氏乳杆菌的培养物； 所述植物提取物的制备方法为:将枸杞和桑葚按质量比1:2混合，在含有广3%的氯化钠溶液中浸泡12?24h,浸泡温度为35?37°C,浸泡结束后过滤,取滤洛；将滤洛置于干燥箱内烘干，使其水分低于12%，烘干温度为55飞5°C，粉碎，过60目筛，得枸杞和桑葚的粉状物；往粉状物中加入8(Γ85%的乙醇，在6(T70°C温度下蒸煮3?5h，取滤液，将滤液浓缩，喷雾干燥，粉碎，过60目筛，即得植物提取物； 所述多粘芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌的制备方法: (O培养基的组成:牛肉膏25?30g、蛋白胨5?8g、葡萄糖15?20g、氯化钠3?5g、磷酸氢二钠2?3g、氯化镁0.2^0.4g、蒸馏水100g ； (2)发酵培养:称取上述培养基原料制备多粘芽孢杆菌培养液、迟缓芽孢杆菌培养液和凝结芽孢杆菌培养液，分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上多粘芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌分别接入装有多粘芽孢杆菌培养液、迟缓芽孢杆菌培养液和凝结芽孢杆菌培养液的试管中，26?37°C条件下进行振荡培养24?36h，分别得到各菌的液体培养物； 所述粪肠球菌和屎肠球菌的制备方法: (1)培养基的组成:牛肉膏3?5g、蛋白胨l(Tl5g、氯化钠:T5g、蔗糖8?10g、磷酸氢二钾l?2g、蒸懼水100g组成； (2)发酵培养:称取上述培养基原料制备粪肠球菌培养液和屎肠球菌培养液,分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上粪肠球菌和屎肠球菌分别接入装有粪肠球菌培养液和屎肠球菌培养液的试管中，26?37°C条件下进行振荡培养24?36h，分别得到各菌的液体培养物； 所述皱褶假丝酵母菌和粗壮假丝酵母菌的制备方法: (1)培养基的组成:酵母膏2?4g、蛋白胨4?6g、葡萄糖3?6g、蒸懼水100g； (2)发酵培养:称取上述培养基原料制备皱褶假丝酵母菌培养液和粗壮假丝酵母菌培养液，分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上皱褶假丝酵母菌和粗壮假丝酵母菌分别接入装有皱褶假丝酵母菌培养液和粗壮假丝酵母菌培养液的试管中，26?37°C条件下进行振荡培养24?36h，分别得到各菌的液体培养物； 所述酵米面假单胞菌和沼泽红假单胞菌的制备方法: Cl)培养基的组成:氯化铵2?4g、磷酸氢二钾0.5?lg、氯化镁0.2^0.4g、氯化钠2?4g、酵母膏0.5?lg、硫酸镁Hg、硫代硫酸钠0.4^0.6g、蒸馏水100g组成； (2)发酵培养:称取上述培养基原料制备酵米面假单胞菌和沼泽红假单胞菌培养液,分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上酵米面假单胞菌和沼泽红假单胞菌分别接入装有酵米面假单胞菌培养液和沼泽红假单胞菌培养液的试管中，26?37°C条件下进行振荡培养24?36h，分别得到各菌的液体培养物； 所述果香地霉、棒曲酶、糙孢曲酶和球孢链霉菌的制备方法: Cl)培养基的组成:蔗糖25?30g、蛋白胨10?15g、硫酸镁0.5?lg、氯化钾0.5?lg、硫酸亚铁0.ΟΓΟ.03g、磷酸氢二钾I?2g、蒸馏水100g ； (2)发酵培养:称取上述培养基原料制备果香地霉、棒曲酶、糙孢曲酶和球孢链霉菌培养液，分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上果香地霉、棒曲酶、糙孢曲酶和球孢链霉菌分别接入装有果香地霉培养液、棒曲酶培养液、糙孢曲酶培养液和球孢链霉菌培养液的试管中，26?37°C条件下进行振荡培养24?36h，分别得到各菌的液体培养物。
4.根据权利要求3所述一种畜禽养殖场专用除臭剂，其特征在于各菌的制备方法: 所述嗜酸乳杆菌和罗伊氏乳杆菌的制备方法: (I)培养基的组成:牛肉膏9g、蛋白胨9g、酵母膏5g、葡萄糖4g、吐温80 0.5ml、醋酸钠4g、朽1檬酸钠3g、磷酸氢二钾1.5g、硫酸镁0.5g、硫酸猛0.25g、硫酸亚铁0.15g、蒸懼水100g;所有培养基原料在使用前进行灭菌处理； (2 )发酵培养:量取两份由上述原料配制而成的培养基8ml装入两个试管中，在无菌条件下，用接种环分别挑取培养皿上的嗜酸乳杆菌和罗伊氏乳杆菌接入两个试管中，33°C条件下振荡培养10h，之后加入经过灭菌处理的植物提取物0.6g，继续培养18h，得到嗜酸乳杆菌和罗伊氏乳杆菌的培养物； 所述植物提取物的制备方法为:将枸杞和桑葚按质量比1:2混合，在含有2%的氯化钠溶液中浸泡18h，浸泡温度为36°C,浸泡结束后过滤,取滤洛；将滤洛置于干燥箱内烘干,使其水分低于12%，烘干温度为60°C，粉碎，过60目筛，得枸杞和桑葚的粉状物；往粉状物中加入82%的乙醇，在65°C温度下蒸煮4h，取滤液，将滤液浓缩，喷雾干燥，粉碎，过60目筛，即得植物提取物； 所述多粘芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌的制备方法: (I)培养基的组成:牛肉膏26g、蛋白胨6g、葡萄糖16g、氯化钠4g、磷酸氢二钠2.5g、氯化镁0.3g、蒸馏水100g ； (2)发酵培养:称取上述培养基原料制备多粘芽孢杆菌培养液、迟缓芽孢杆菌培养液和凝结芽孢杆菌培养液，分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上多粘芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌分别接入装有多粘芽孢杆菌培养液、迟缓芽孢杆菌培养液和凝结芽孢杆菌培养液的试管中，30°C条件下进行振荡培养30h，分别得到各菌的液体培养物； 所述粪肠球菌和屎肠球菌的制备方法: (O培养基的组成:牛肉膏4g、蛋白胨12g、氯化钠4g、蔗糖9g、磷酸氢二钾1.5g、蒸馏水100g组成； (2)发酵培养:称取上述培养基原料制备粪肠球菌培养液和屎肠球菌培养液,分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上粪肠球菌和屎肠球菌分别接入装有粪肠球菌培养液和屎肠球菌培养液的试管中，30°C条件下进行振荡培养30h，分别得到各菌的液体培养物； 所述皱褶假丝酵母菌和粗壮假丝酵母菌的制备方法: (1)培养基的组成:酵母膏3g、蛋白胨5g、葡萄糖5g、蒸懼水100g； (2)发酵培养:称取上述培养基原料制备皱褶假丝酵母菌培养液和粗壮假丝酵母菌培养液，分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上皱褶假丝酵母菌和粗壮假丝酵母菌分别接入装有皱褶假丝酵母菌培养液和粗壮假丝酵母菌培养液的试管中，30°C条件下进行振荡培养30h，分别得到各菌的液体培养物； 所述酵米面假单胞菌和沼泽红假单胞菌的制备方法: (1)培养基的组成:氯化铵3g、磷酸氢二钾0.6g、氯化镁0.3g、氯化钠3g、酵母膏0.6g、硫酸镁1.5g、硫代硫酸钠0.5g、蒸馏水100g组成； (2)发酵培养:称取上述培养基原料制备酵米面假单胞菌和沼泽红假单胞菌培养液,分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上酵米面假单胞菌和沼泽红假单胞菌分别接入装有酵米面假单胞菌培养液和沼泽红假单胞菌培养液的试管中，30°C条件下进行振荡培养30h，分别得到各菌的液体培养物； 所述果香地霉、棒曲酶、糙孢曲酶和球孢链霉菌的制备方法: Cl)培养基的组成:蔗糖26g、蛋白胨16g、硫酸镁0.6g、氯化钾0.6g、硫酸亚铁0.02g、磷酸氢二钾1.5g、蒸馏水100g ； (2)发酵培养:称取上述培养基原料制备果香地霉、棒曲酶、糙孢曲酶和球孢链霉菌培养液，分装入试管，每管5ml，灭菌保存备用；在无菌条件下，用接种环挑取培养皿上果香地霉、棒曲酶、糙孢曲酶和球孢链霉菌分别接入装有果香地霉培养液、棒曲酶培养液、糙孢曲酶培养液和球孢链霉菌培养液的试管中，30°C条件下进行振荡培养30h，分别得到各菌的液体培养物。
5.根据权利要求1-2所述一种畜禽养殖场专用除臭剂，其特征在于制备方法如下: 将各菌的液体培养物添加到畜禽除臭剂专用培养液中，使各菌达到上述菌种浓度，混合均匀即可； 所述畜禽除臭剂专用培养液由以下物质组成:牛肉膏l(Tl5g、蛋白胨:T5g、麦芽糖3飞g、葡萄糖2?4g、氯化钠Hg、磷酸二氢钾Hg、硫酸亚铁2?4g、硫酸镁Hg、硫酸锌I?2g、蒸懼水lOOOg。
6.根据权利要求5所述一种畜禽养殖场专用除臭剂，其特征在于制备方法如下: 将各菌的液体培养物添加到畜禽除臭剂专用培养液中，使各菌达到上述菌种浓度，混合均匀即可； 所述畜禽除臭剂专用培养液由以下物质组成:牛肉膏12g、蛋白胨4g、麦芽糖4g、葡萄糖3g、氯化钠1.5g、磷酸二氢钾1.5g、硫酸亚铁3g、硫酸镁1.5g、硫酸锌1.5g、蒸馏水100g0
7.根据权利要求1-2所述一种畜禽养殖场专用除臭剂，其特征在于使用方法:每天早晚在畜禽舍内各喷洒一次，每天用量0.3^0.6kg/m3。
8.根据权利要求7所述一种畜禽养殖场专用除臭剂，其特征在于使用方法:每天早晚在畜禽舍内各喷洒一次，每天用量0.4kg/m3。
【文档编号】A61K8/99GK104307012SQ201410615491
【公开日】2015年1月28日 申请日期:2014年11月5日 优先权日:2014年11月5日
【发明者】王勇飞, 吴志青, 赵艳平 申请人:双胞胎（集团）股份有限公司