本发明涉及门鸟氨酸在制备防治脂肪肝药物中的用途。
背景技术：
：肝脏是人体内最大的消化腺，负责体内物质能量代谢，维持着人类日常生命活动。肝脏病变，包括病毒性肝炎，肝硬化，脂肪肝，肝癌等，是一种常见的危害性极大的疾病，应以积极预防为主。肝病种类按照发病机理可以分为病毒性肝病和非病毒性肝病：非病毒性肝病主要包括以下几种：(1)酒精性肝病，是由于长期大量饮酒(嗜酒)所致的肝脏损伤性疾病；(2)药物或毒物性肝病，是由化学毒物(如磷、砷、四氯化碳等)、药物或生物毒素所引起的肝炎或所致的肝脏病变；(3)非酒精性脂肪肝(nafld)，是指由于糖尿病、血脂肪过高、体重过重等各种原因引起的肝细胞内脂肪堆积过多的肝脏病变，其包括单纯性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎及其相关肝硬化，随着肥胖及其相关代谢综合征全球化的流行趋势，非酒精性脂肪肝现已成为欧美等发达国家和我国富裕地区慢性肝病的重要病因，非酒精性脂肪肝除可直接导致失代偿期肝硬化、肝细胞癌外，还可影响其他慢性肝病的进展，并参与2型糖尿病和动脉粥样硬化的发病。nafld的发病机制至今尚未明确，主要有以下两种假说：①外周胰岛素抵抗增加脂质的降解，促进游离脂肪酸(ffa)转运到肝脏，增加脂肪酸的β-氧化，因此导致氧化应激；②肝细胞内的异常导致肝细胞对来自氧化应激的损伤更易感。nafld的治疗方法为减轻体重和药物治疗，常用治疗药物有(1)胰岛素增敏剂，如噻唑烷二酮类药物、二甲双胍等；(2)抗氧化剂，如维生素e、水飞蓟素等；(3)降脂药，如非诺贝特，hmgcoa还原酶抑制剂等；(3)肝细胞保护药，如多烯磷脂酰胆碱、硫普罗宁等；(4)血管紧张素ⅱ受体拮抗剂，如替米沙坦；(5)减肥药物，如胰高血糖素样肽-1(glp-1)类似物。胰岛素抵抗是nafld患者的一个基本特征，噻唑烷二酮类药物是一种强效的胰岛素增敏剂，其可以增加脂肪组织对胰岛素的敏感性，初步研究发现噻唑烷二酮类药物能改善nafld患者胰岛素抵抗及抑制肝脏炎症反应作用，减轻肝脏脂肪含量，改善肝功能，其机制可能与改善胰岛索抵抗、调节细胞因子等有关，该类药物已成为治疗nafld极具潜力的一类药物。法尼酯x受体(fxr)是一种重要的核转录因子，研究表明，fxr的活化可增强胰岛素信号传导的敏感性，减少糖原异生，减少肝内脂肪堆积，缓解脂肪肝导致的肝纤维化，在fxr缺失小鼠模型中，检测到血浆和肝脏的胆固醇及甘油三酯的水平增加，在fxr缺失小鼠9和 12月龄时，有明显肝损伤和肝细胞凋亡，在15月龄时则出现肝腺瘤及肝细胞癌；fxr的配体或激动剂可通过激活fxr及fxr靶基因shp，抑制肝星状细胞表达ecm，并增加ecm的清除，从而减少ecm沉积，最后发挥治疗肝纤维化作用。门冬氨酸鸟氨酸(门鸟氨酸)是l-鸟氨酸和l-门冬氨酸反应形成的一种稳定化合物，具有增加促进肝细胞代谢、参与肝细胞的修复等作用，临床上用于因急、慢性肝病(如各型肝炎、肝硬化、脂肪肝、肝炎后综合症)引发的血氨升高及肝性脑病，如伴发或继发于肝脏解毒功能受损(如肝硬化)的潜在性或发作期肝性脑病，尤其适用于治疗肝昏迷早期或肝昏迷期的意识模糊状态。技术实现要素：本申请人实验研究发现门鸟氨酸和一些活性化合物联合用药对脂肪堆积过多的肝脏病变具有良好的治疗作用。本发明提供了一种药物组合物在制备防治脂肪肝药物中的用途，其特征在于，所述组合物包含：(a)门鸟氨酸或其药学上可接受的盐，或是门冬氨酸鸟氨酸组合物，或是精氨酸的谷氨酸盐(l-精氨酸l-谷氨酸)，其中所述的门冬氨酸鸟氨酸组合物由鸟氨酸或其盐和门冬氨酸或其盐组成的，其中鸟氨酸或其盐和门冬氨酸或其盐的摩尔比为10-1：1-10，或是8-1：1-8，或是5-1：1-5，或是3-1：1-3，或是2-1：1-2，优选1：1。(b)选自下列至少一种活性成分或其可药用盐和可药用载体：(1)维生素e；(2)法尼醇x受体的配体或法尼醇x受体激动剂；(3)噻唑烷二酮类药物；其中所述法尼醇x受体的配体或法尼醇x受体激动剂选自下列化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或多晶型物：熊去氧胆酸、熊去氧胆酸钠、熊去氧胆酸三水镁盐、奥贝胆酸、牛磺熊去氧胆酸、牛磺熊去氧胆酸钠、gw4064、fexaramine、turofexorateisopropyl(xl335)、px-104或px20606，优选熊去氧胆酸、奥贝胆酸、牛磺熊去氧胆酸。其中所述噻唑烷二酮类药物选自(s)-((3，4-二氢-2-(苯基-甲基)-2h-1-苯并吡喃-6-基)甲基-噻唑烷-2，4-二酮(恩格列酮)、5{[4-(3-(5-甲基-2-苯基-4-噁唑基)-1-氧代丙基)-苯基]-甲基}-噻唑烷-2，4-二酮(达格列酮)、5-{[4-((1-甲基-环己基)甲氧基)-苯基]甲基}-噻唑烷-2，4-二酮(环格列酮)、5-{[4-(2-(1-吲哚基)乙氧基)苯基]甲基}-噻唑烷-2，4-二酮(drf2189)、5-{4-[2-(5-甲基-2-苯基-4-噁唑基)-乙氧基]苄基}-噻唑烷-2，4-二酮、5-(2-萘基磺酰基)-噻唑烷-2，4-二酮(ay-31637)、双{4-[(2，4-二氧代-5-噻唑烷基)甲基]苯基}甲烷、5-{4-[2-(5-甲基-2-苯基-4-噁唑基)-2-羟基乙氧基]苄基}-噻唑烷-2，4-二酮(ad-5075)、5-[4-(1-苯基-1-环丙烷羰基氨基)-苄基]-噻唑烷-2，4-二酮(dn-108)、5-{[4-(2-(2，3-二氢吲哚-1-基)乙氧基)苯基] 甲基}-噻唑烷-2，4-二酮、5-[3-(4-氯-苯基)-2-丙炔基]-5-苯基磺酰基)-噻唑烷-2，4-二酮、5-[3-(4-氯苯基)]-2-丙炔基]-5-(4-氟苯基-磺酰基)噻唑烷-2，4-二酮、5-{[4-(2-(甲基-2-吡啶基-氨基)-乙氧基)苯基]甲基}-噻唑烷-2，4-二酮(罗格列酮)、5-{[4-(2-(5-乙基-2-吡啶基)乙氧基)苯基]甲基}-噻唑烷-2，4-二酮(吡格列酮)、5-{[4-((3，4-二氢-6-羟基-2，5，7，8-四甲基-2h-1-苯并吡喃-2-基)甲氧基)-苯基]-甲基}-噻唑烷-2，4-二酮(曲格列酮)、5-[6-(2-氟-苄氧基)萘-2-基甲基]-噻唑烷-2，4-二酮(mcc555)、5-{[2-(2-萘基)-苯并噁唑-5-基]甲基}-噻唑烷-2，4-二酮和5-(2，4-二氧代噻唑烷-5-基-甲基)-2-甲氧基-n-(4-三氟甲基-苄基)苯甲酰胺(krp297)，优选吡格列酮。此外，本发明的组成物可进一步包括诸如维生素a、维生素e、维生素b1、维生素b2、维生素b3、维生素b6、维生素b12、叶酸、维生素c、维生素d3中的至少一种维生素；诸如铜、钙、铁、镁、钾、锌等矿物质；以及适量的其他安全食物添加剂。进一步地，本发明所提供的药物组合物中门鸟氨酸和奥贝胆酸的质量比为50～1000：1，或是800：1，或是700：1，或是600：1，或是500：1，或是400：1，或是300：1，或是150：1，或是100：1，或是50：1，优选600-1000:1，最优选600：1；进一步地，本发明所提供的药物组合物中门鸟氨酸和以吡格列酮为代表的噻唑烷二酮类药物的质量比为60～300：1，或是200：1，或是160：1，或是120：1，或是80：1，或是60：1，优选120-200:1，最优选200：1；进一步地，本发明所提供的药物组合物中，所述门冬氨酸鸟氨酸(门鸟氨酸)或其药学上可接受的盐用量为每天1mg/kg-50mg/kg，或是每天不超过45mg/kg，或是每天不超过40mg/kg，或是每天不超过35mg/kg，或是每天不超过30mg/kg，或是每天不超过25mg/kg，或是每天不超过20mg/kg，或是每天不超过15mg/kg，或是每天不超过10mg/kg，或是每天不超过5mg/kg，或是每天不超过1mg/kg，优选每天为20-40mg/kg。所述法尼醇x受体的配体含量为每天不超过20mg/kg，优选每天不超过10mg/kg；其中熊去氧胆酸含量为每天不超过15mg/kg，或是每天不超过110mg/kg，或是每天不超过5mg/kg，优选每天为6-10mg/kg；奥贝胆酸含量为每天不超过0.4mg/kg，或是每天不超过0.3mg/kg，或是每天不超过0.2mg/kg，或是每天不超过0.1mg/kg，优选每天为0.2mg/kg；牛磺熊去氧胆酸含量为每天不超过10mg/kg，或是每天不超过8mg/kg，或是每天不超过6mg/kg，或是每天不超过4mg/kg，或是每天不超过2mg/kg，优选每天为3-5mg/kg；所述噻唑烷二酮类药物的用量为每天0.05-0.5mg/kg，其中：所述罗格列酮含量为每天不超过0.15mg/kg，或是每天不超过0.13mg/kg，或是每天不超过0.1mg/kg，或是每天不超过0.08mg/kg，或是每天不超过0.06mg/kg，或是每天不超过0.05mg/kg，优选每天为 0.06-0.08mg/kg；吡格列酮含量为每天不超过0.5mg/kg，或是每天不超过0.4mg/kg，或是每天不超过0.3mg/kg，或是每天不超过0.2mg/kg，或是每天不超过0.1mg/kg，优选每天为0.2-0.25mg/kg；本发明提供了所述药物组合物和药学上可接受的载体在制备防治脂肪肝药物中的用途，所述脂肪肝包括脂肪性肝炎、非酒精性脂肪肝病、非酒精性脂肪性肝炎、非酒精性脂肪性肝炎伴发肝纤维化、非酒精性脂肪性肝炎伴发肝硬化、非酒精性脂肪性肝炎伴发肝硬化及肝细胞癌、肝纤维化、肝硬化以及继发性脂肪肝疾病。本发明的组合物可以制备为任何形式，例如颗粒、粉末、片剂、包衣片剂、胶囊、药丸、糖浆、滴剂、溶液、混悬剂和乳剂，或者活性成分的缓释制剂。本发明的组成物可进一步包括一种或多种医药或生理上可接受的载体，这些载体将适当配制以便于给药。例如，医药或生理上可接受的载体可以是水、林格氏液、缓冲盐水、葡萄糖、麦芽糖糊精、甘油、醇、蜂蜜、甘露醇、山梨醇、糊精、乳糖、焦糖、明胶、硫酸钙、硬脂酸镁、滑石粉、高岭土、吐温、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钙、表面活性剂、环糊精及其衍生物、磷脂类、磷酸盐类、淀粉类及其衍生物、硅衍生物、纤维素类及其衍生物、吡咯烷酮类、聚乙二醇类、丙烯酸树脂类、酞酸酯类、丙烯酸共聚物、苯三酸酯类中的一种或几种。本发明的组成物还可以包括医药或生理上可接受的添加剂，例如稀释剂、分散剂、表面活性剂、溶剂、崩解剂、甘味剂、粘合剂、涂层剂、发泡剂、滑润剂、助流剂或芳香剂。本发明的组成物可以根据传统方法来通过各种途径给药，包括口服、静脉内、动脉内、腹腔内、胸腔内、透皮、鼻腔、吸入、直肠、眼部和皮下导入。本发明的有益效果：本发明提供了门鸟氨酸与奥贝胆酸或噻唑烷二酮类药物组合后用于制备防治脂肪肝的用途，药物组合后门鸟氨酸使用剂量比单独给予门鸟氨酸要低很多，而且药物组合后比单方用药效果更优。临床应用中单独给予门鸟氨酸，用药剂量较大，使得门鸟氨酸临床上只能制备有限的剂型，如颗粒剂，本发明通过药物组合降低了门鸟氨酸的用药剂量，为研制更多类型的门鸟氨酸制剂提供了可能；同时本发明药物组合中奥贝胆酸或噻唑烷二酮类药物用量很少。药物组合后，奥贝胆酸或噻唑烷二酮类药物使用剂量也比临床上要低很多，由于其用药剂量降低，也可一定程度降低奥贝胆酸或噻唑烷二酮类药物副作用。具体实施方式实施例1：对高脂饮食诱导肥胖小鼠的肝脏脂质和甘油三酯的影响将78只6周大c57bl/6小鼠分成两组，6只给予含10％脂肪的正常饮食(正常对照组)，72只给予含60％脂肪的高脂肪饮食，饲养10周，高脂饲养小鼠再分成12组：模型组，每日灌胃0.5％的cmc-na溶液；阳性对照组，每日给予门鸟氨酸1g/kg；药物组合1组，每日给予门鸟氨酸0.6g/kg及奥贝胆酸4mg/kg；药物组合2组，每日给予门鸟氨酸0.6g/kg及奥贝胆酸1mg/kg；药物组合3组，每日给予门鸟氨酸0.6g/kg及奥贝胆酸0.6mg/kg；药物组合4组，每日给予门鸟氨酸0.6g/kg及吡格列酮5mg/kg；药物组合5组，每日给予门鸟氨酸0.6g/kg及吡格列酮3mg/kg；药物组合6组，每日给予门鸟氨酸0.6g/kg及吡格列酮2mg/kg；以上各组动物给予盐水溶液或药物2周后，处死动物，取出部分肝组织(左叶)，使组织在2∶1氯仿/甲醇溶液(10ml)中匀浆，并将其过滤到15ml玻璃离心管中。再添加5ml的2∶1氯仿/甲醇溶液，然后添加2.5ml的0.9％nacl。彻底混合后，在10℃下，以2,000g离心提取物5分钟，弃去水层后，在氮气下干燥有机层，并通过称重来评估总脂质含量，elisa试剂盒分析肝组织中积聚的甘油三酯的量，检测结果示于表1中。表1：受试物对肥胖小鼠肝脂质含量和甘油三酯的影响由结果中可看出模型组小鼠肝脏脂肪明显增多，而不同组合比例的药物联用给予模型小鼠后，小鼠肝脏脂肪明显减少，这说明本发明的药物组合比单方给药效果更优，而且降低组合药物的剂量仍然能达到相同的效果，且本发明药物组合中奥贝胆酸的用量最少可达到奥贝胆酸：门鸟氨酸为1：1000，罗格列酮的用量最少可达到罗格列酮：门鸟氨酸为1：300，除此，本发明药物组合相比单方给药剂量低。实施例2：对高脂饮食诱导肥胖小鼠的肝功能的影响动物分组和处理同实施例1，各组动物处死前，取血离心后收集血清样本，分别用alt检测试剂盒和ast检测试剂盒测量各组小鼠血清中的转氨酶。组别alt(u/l)ast(u/l)正常对照30.5±24.245.8±8.5模型组254.1±32.3437.1±36.6阳性对照166.8±26.2353.5±31.2药物组合1137.3±18.9335.2±24.9药物组合2143.2±23.8325.3±15.1药物组合3134.6±16.3341.2±13.6药物组合4138.7±20.3328.4±18.2药物组合5128.5±14.7334.3±12.1药物组合6140.4±12.8340.5±24.3表2：受试物对肥胖小鼠血清转氨酶的影响由结果中可看出模型组小鼠血清alt、ast含量与正常对照组相比大幅度升高，而给予了不同药物组合比例的小鼠血清alt、ast含量与模型组相比明显下降，结果说明本发明中门鸟氨酸与相关活性药物联合在对大鼠脂肪肝的治疗能产生较好的效果，而且降低组合药物的剂量仍然能达到相同的效果，除此，本发明药物组合相比单方给药剂量低。实施例3：制备门鸟氨酸组合物颗粒剂取等质量的门鸟氨酸和奥贝胆酸，加入处方量的甘露醇、阿斯巴甜、枸橼酸及烯吡咯烷酮-k30水溶液，搅拌均匀，16目制粒，干燥，14目整粒，即得。当前第1页12