藏茵陈的新用途的制作方法

本发明属于医药领域，具体涉及藏茵陈的新用途，尤其是藏茵陈在制备抑制肿瘤新生血管生成的药物中的用途。

背景技术：

血管生成(angiogenesis)是从已有血管发芽生成新血管的过程。这一过程与血管内皮细胞迁移和增殖相关。胚胎发育过程伴随着血管生成。但除了伤口愈合、女性经期及一些病理过程(如癌症)外，成人很少出现血管生成。

血管生成对恶性实体肿瘤的生长、转移乃至预后都有着极其重要的意义。血管生成是恶性实体肿瘤突破上皮基底膜后进一步生长所必须的。肿瘤中新形成的血管具有其自身独特的结构特点，表现为管壁不完整，无平滑肌成分，仅由有孔的内皮细胞和片状的基膜构成。多数学者认为，新生血管的结构特点使恶性肿瘤组织发生远处转移成为可能。因此，恶性实体肿瘤中新生血管的定量被认为是一种重要的独立的预后标志。

藏茵陈，藏语称“贾斗”，蒙语称“孟根地格图”，是藏族历史悠久的贵重八珍藏药之一，为龙胆科一年生矮小草本药用植物。主治黄疸型肝炎、肝硬化、肝腹水。藏茵陈在青藏高原家喻户晓，民间验方用藏茵陈、藏红花、熊胆治疗急性黄疸性肝炎，疗程短、治愈率高。藏茵陈味苦辛，性微寒.。藏医用于治疗消化不良。主治黄疸型肝炎、肝硬化、肝腹水。胆囊炎、胆道综合症、胆管反流性胃炎、急性骨髓炎、急性菌痢、急性黄疸性肝炎、急性结膜炎、急性咽喉炎及烫伤，也用于风火牙痛、热淋等症。尿路感染，妇科外阴疾患等症也有一定疗效；并可发汗、解热、驱虫。藏茵陈还富含维生素c和b，并含有人体所需的多种微量元素和多种氨基酸，具有很好的保健功能。每天取干茵陈少许和几枚大枣泡茶，经常饮用，可增加人体免疫力，轻身益气，保肝利胆，抗衰防癌。《百科全书·藏医分卷》汇集历代经典著作中以藏茵陈为主药命名的著名方剂共十余方，例如三味藏茵陈汤、四味藏茵陈汤、六味藏茵陈膏、八味藏茵陈散、十五味藏茵陈酥油丸等，这些方剂治疗肝胆疾病各有所长

虽然亦有报道称其具有防癌抗肿瘤作用，但是并未发现其具有破坏肿瘤血管生长发育，使得肿瘤血管变细或使得肿瘤血管壁变薄的作用。

技术实现要素：

本发明所解决的第一个技术问题是提供一种藏茵陈的药物新用途。

本发明所提供的藏茵陈的药物新用途是藏茵陈在制备破坏肿瘤血管生长的药物中的新用途。

具体的，其功效体现在藏茵陈可以使得肿瘤血管变细或使得肿瘤血管壁变薄；肿瘤血管结构崩坍；以及使得肿瘤血管通透性变差，由此破坏肿瘤血管的生长，由此阻碍给肿瘤病灶提供养分，抑制肿瘤生长，实现防癌抗肿瘤的目的。

所述药物是以有效剂量的藏茵陈为活性成分，按照药学常规方法，加入药学上的辅料制备而成的药剂。具体的可以制成口服制剂或者注射剂，通过口服、肌肉注射、静脉输入或腹腔注射等方式给药。

本发明所解决的第二个技术问题是提供一种破坏肿瘤血管生长的药物组合物，尤其主要活性成分为藏茵陈，按照药学常规方法制备而成的药剂。制备时还可以加入药学上的常规辅料制备。活性成分还可以配加其他抗肿瘤药增加协同增效的效果。

所得药剂每制剂单位含有藏茵陈5～100克。

所述常规辅料包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。

以藏茵陈为活性成分制备的破坏肿瘤血管生长的药物可以制成口服剂、注射液等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。

本发明所解决的第三个技术问题是提供上述破坏肿瘤血管生长的药物组合物的制备方法。

优选的方法之一：包括如下步骤：

a、藏茵陈加水煎煮，过滤得煎煮液；

b、干燥煎煮液即得。

进一步的，步骤b干燥煎煮液至含水量低于5％。

优选的方法之一：包括如下步骤：

a、藏茵陈加水煎煮，过滤得煎煮液；

b、煎煮液按照药学常规方法，加入药学上的常规辅料制备而得。

具体的可以制成口服制剂或者注射剂，可加入的常规辅料包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。

综上，本发明采用藏茵陈破坏肿瘤血管生长作用显著，为临床抑制肿瘤新生血管生成以及治疗肿瘤提供了一种全新的选择。

附图说明

图1藏茵陈干预的幼鱼光镜图。

图2藏茵陈干预的幼鱼荧光显微镜显示图的灰度格式图。

图3藏茵陈干预的幼鱼高倍荧光显微镜显示图的灰度格式图。

图4阳性对照-ptk787干预的幼鱼光镜图。

图5阳性对照-ptk787干预的幼鱼荧光显微镜显示图的灰度格式图。

图6阳性对照-ptk787干预的幼鱼高倍荧光显微镜显示图的灰度格式图。

图7阴性对照-vehiclecontrol(0.1％dmso)干预的幼鱼光镜图。

图8阴性对照-vehiclecontrol(0.1％dmso)干预的幼鱼荧光显微镜显示图的灰度格式图。

图9阴性对照-vehiclecontrol(0.1％dmso)干预的幼鱼高倍荧光显微镜显示图的灰度格式图。

具体实施方式

下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

考察藏茵陈药用新用途的试验如下：

实施例：

1.材料与方法

1.1材料

藏茵陈购自西藏拉萨，经成都中医药大学药学院鉴定为藏茵陈。所有试剂均购自sigma-aldrichco.(st.louis,mo)，ptk787(vatalanib)购自selleckchem。采用fli1a-egfp转基因斑马鱼进行实验。斑马鱼按照标准环境饲养。

1.2试剂配制

称取中药450g，8倍量水煎煮3次，每次1小时，将3次水煎液合并于800w电炉上浓缩至约400ml，过100目筛网(滤渣留样)后，均匀涂布于蒸发皿中，将蒸发皿置于电热鼓风干燥箱中，于60℃下间断干燥62小时后，继续于玻璃干燥器中室温干燥直至制成水分含量<5％(烘干法测定)的浸膏。

1.3实验过程

将受精后22小时的胚胎放入12孔板中(每孔30个胚胎)，采用中药干预26小时。中药水提物溶解于0.1％二甲亚砜(dmso)中，每孔加入中药水提物浓度为200μg/ml。阳性对照组为5μg/mlptk787(瓦他拉尼vatalanib,一种血管内皮生长因子受体拮抗剂)，阴性对照组为0.1％dmso。受精后48小时，三卡因麻醉幼鱼，使用nikonsmz1500荧光显微镜分析拍照。节间血管形成是评价药效的主要指标，同时也用于评价其毒性。

1.4结果及结论

采用藏茵陈、阳性对照-ptk787、阴性对照-vehiclecontrol干预的幼鱼光镜图、荧光显微 镜显示图(灰度格式图)、高倍荧光显微镜显示图(灰度格式图)分别见图1-9。

采用藏茵陈和ptk787干预的幼鱼均出现了血管生成的缺陷。光镜和荧光显微镜显示，与0.1％dmso阴性对照比较，采用藏茵陈干预的幼鱼，形成了较细的节间血管。高倍镜显示，幼鱼的节间血管的结构不完整。5μg/mlptk787阳性对照则能够完全抑制节间血管和背部纵向血管。藏茵陈没有导致斑马鱼死亡或者致畸，没有发现藏茵陈的神经毒性或者器官毒性。

综上，本发明采用藏茵陈破坏肿瘤血管生长作用显著，为临床阻碍给肿瘤病灶供给养分，防癌抗肿瘤提供了一种全新的选择。