本发明属于化学制剂领域。
背景技术：
硫酸软骨素(Chondroitin Sulfate，CS)是从动物软骨组织中提取的一种糖胺聚糖，化学结构复杂，糖链中编码着大量的生物信息。硫酸软骨素通过与许多功能蛋白质相互作用，参与细胞分裂、分化、组织器官形成和中枢神经系统发育等许多细胞事件和生理过程，在医药领域中具广阔应用前景。
上世纪90年代中期开始，硫酸软骨素类处方药和膳食补充剂，在欧洲和北美被广泛用于骨关节炎的治疗。受国际市场对硫酸软骨素原料药强劲需求的拉动，我国硫酸软骨素产业快速发展。中国已是全球硫酸软骨素原料的主要生产供应国，产品出口亚、欧、美、南美和大洋洲几十个国家，年出口量高达近4000吨。
目前市售硫酸软骨素以钠盐形式存在。国内外有些保健食品中，同时含有硫酸软骨素钠与某种钙盐，一般是碳酸钙，由于碳酸钙的微溶性，导致这种混合物无论在体外还是在体内消化道内都与硫酸软骨素钙这种单一化合物有着本质区别。尚无硫酸软骨素钙盐功效及产品的报道。
硫酸软骨素与钙结合对硫酸软骨素的生物功能有着重要作用，有研究显示，软骨中蛋白多糖结合的钙，释放后用于骨钙化，因此硫酸软骨素钙是骨骼钙化的直接钙载体。美国专利“Composition containing readily absorbable calcium and process for producing the same(USP：6203827)”中提到钙在硫酸软骨素的存在下，更有利于钙吸收。硫酸软骨素钙属于有机酸钙的一种，由于硫酸软骨素可以促进钙的吸收，所以这种钙盐可能会有比普通钙盐更优越的功效。
技术实现要素：
我们通过实验尝试发现，硫酸软骨素钙可制备用于预防和治疗骨质疏松药物或制备用于增加骨密度保健食品。与普通的“硫酸软骨素钠+某种钙盐”的混合物组合形式相比，本化合物因为不含有硫酸软骨素钠中的钠离子和钙盐中的酸根，在同样钙摄入量的情况下，可以减少服用量。尽管目前无法阐明其药理药效学机制，但是这种化合物在预防和治疗骨质疏松领域的实验结果令人满意。
硫酸软骨素钙中钙含量大于6％，硫酸软骨素含量大于90％。钙含量测定采用欧洲药典“那屈肝素钙”的络合滴定法检测。硫酸软骨素含量测定采用美国药典“Chondroitin Sulfate Sodium”的氯化十六烷基吡啶(Hexadecylpyridinium chloride，CPC)滴定法检测，或者中国药典“硫酸软骨素钠”的酶解高效液相法检测。
硫酸软骨素钙的服用量为0.2-2.0克/天，可用于任何剂型的口服制剂或注射剂。
具体实施方式：
实施例所使用硫酸软骨素钙的制备方法采用中国专利“一种硫酸软骨素钙生产工艺(申请号CN201510785845.0)”中所用方法制备，产品质量指标：钙含量6.8％，硫酸软骨素含量92.0％。
实施例1，硫酸软骨素钙片剂的制备
原辅料分别粉碎过80目筛，80℃烘干2h备用。称取处方量的硫酸软骨素钙、微晶纤维素、乳糖、二氧化硅和硬脂酸镁，置于三维混合机中混合15min。混合均匀的药物粉末置于粉末直压型旋转式压片机中压片，控制片重1.00g，硬度30-40N。
实施例2，硫酸软骨素钙胶囊剂的制备
原辅料分别粉碎过80目筛，80℃烘干2h备用。称取处方量的硫酸软骨素钙、乳糖、预胶化淀粉、二氧化硅和硬脂酸镁，置于三维混合机中混合15min。混合均匀的药物粉末填充于0#胃溶型胶囊壳中，控制填充量0.49g/粒。
实施例3，硫酸软骨素钙口服液体制剂的制备
称取处方量纯化水，依次加入蔗糖、山梨醇、山梨酸钾、柠檬酸和苹果酸溶解，形成澄清溶液，加入硫酸软骨素钙溶解，形成10％的硫酸软骨素钙溶液。过滤后灌装于中硼硅口服液瓶中，每瓶10ml。
实施例4，硫酸软骨素钙注射剂的制备
称取处方量硫酸软骨素钙，加入注射用水溶解，加入适量HCl/NaOH调节pH5-8，便用0.22微米聚酰胺滤膜过滤除菌，灌装至安瓿瓶，规格2ml/支。
实施例5，硫酸软骨素钙对骨质疏松大鼠的影响
机体中的钙绝大部分储存于骨骼及牙齿中，若摄入钙量不足会影响机体和骨骼的生长发育。生长期大鼠在摄食低钙饲料的基础上补充受试含钙产品，与低钙对照组比较在促进机体及骨骼的生长发育，增加骨矿物质含量和增加骨密度功能上的作用，可对受试物增加骨密度功效进行评价。
实验动物：出生4周左右的断乳SD大鼠，雌性，每组10只。
基础饲料配方：钙含量150mg/100g的低钙饲料。
实验分组：对照组，高剂量碳酸钙组和3个剂量实验组：34mg/kg.bw组，100mg/kg.bw组和340mg/kg.bw组(硫酸软骨素钙推荐用量为0.2-2.0克/天，折合人体摄入量3.4-34mg/kg.bw，大鼠使用这个标准的10倍量)，5组动物均用低钙饲料和蒸馏水喂饲。
灌胃液的配制：分别取硫酸软骨素钙0.34g、1.00g、3.40g，加蒸馏水定容至100ml，配制成34mg/kg.bw、100mg/kg.bw、340mg/kg.bw组的灌胃液，含钙分别为2.4mg/kg.bw、6.8mg/kg.bw、24mg/kg.bw；高剂量碳酸钙组经口灌入24mg/kg.bw的钙，与高剂量硫酸软骨素钙组钙含量水平一致，灌胃液的配制：取碳酸钙0.60g加蒸馏水定容至100ml。所有动物灌胃量均为1ml/100g.bw，每天1次，每周称体重并按体重调整灌胃量，对照组以蒸馏水灌胃。
动物处理：实验时间为4周。试验结束，放血处死大鼠，取双侧股骨，于105℃烤箱中烤至恒重，称量骨干重。取左侧股骨进行骨密度测定，双能X线骨密度仪扫描，测定整根股骨的BMD值(g/cm2)。右侧股骨用原子吸收法测定钙含量。
*与对照组比较P＜0.05
*与对照组比较P＜0.05
#与碳酸钙比较P＜0.05
大鼠左股骨骨密度与右股骨钙含量两项指标显示，各剂量实验组显著高于对照组(P＜0.05)，中高剂量实验组显著高于高剂量碳酸钙组(P＜0.05)；从体重指标看，对动物生长无不良影响。
实施例6，硫酸软骨素钙对切除卵巢大鼠骨密度的影响
雌激素减少会导致骨量减少和骨组织微结构破坏，最终导致骨密度降低、骨骼脆性增加。模型建立之后给模型实验组大鼠补充受试样品，通过受试物抑制破骨或促进成骨等骨代谢调节作用，观察其在增加骨密度的效果，从而对受试样品增加骨密度的功能进行评价。
动物分组：选择SPF级雌性大鼠60只，体重280-320g，随机分为6组，即空白对照组、模型对照组、高剂量碳酸钙组、硫酸软骨素钙34mg/kg.bw组、硫酸软骨素钙100mg/kg.bw组、硫酸软骨素钙340mg/kg.bw组(硫酸软骨素钙临床推荐用量为0.2-2.0克/天，折合人体摄入量3.4-34mg/kg.bw，大鼠使用这个标准的10倍量)，6组动物均用低钙饲料和蒸馏水喂饲。
制备动物模型：腹腔注射10％的水合氯醛麻醉各组大鼠，注射体积为0.3ml/kg，由腹部正中切口，钝性分离腹肌肌膜后进腹，找到卵巢，丝线结扎将之摘除，缝合切口，术后肌肉注射2万单位的青霉素，连续3天，术后1周拆线。空白对照组大鼠行类似手术但不切除双侧卵巢，仅摘除部分脂肪。
动物给药：分别取硫酸软骨素钙0.34g、1.00g、3.40g，加蒸馏水定容至100ml，配制成34mg/kg.bw、100mg/kg.bw、340mg/kg.bw组的灌胃液，含钙分别为2.4mg/kg.bw、6.8mg/kg.bw、24mg/kg.bw；高剂量碳酸钙组经口灌入24mg/kg.bw的钙，与高剂量硫酸软骨素钙组钙含量水平一致，灌胃液的配制：取碳酸钙0.60g加蒸馏水定容至100ml。所有动物于手术后1周开始灌胃给予相对应的药液，灌胃体积均为1ml/100g.bw，每天1次，连续灌胃12周，空白对照组、模型对照组分别给予等体积蒸馏水。各组大鼠每周称体重并按体重调整灌胃量。
动物处理：试验结束后，颈椎脱臼处死大鼠，剥离右侧股骨，经105℃烘烤8h至恒重，冷却至室温后，测量股骨中点处和远心端的骨密度值(BMD)。
△：与空白对照组比较，P＜0.01；
▲：与模型对照组比较，P＜0.05，▲▲：与模型对照组比较，P＜0.01；
#：与高剂量碳酸钙组比较，P＜0.05。
各硫酸软骨素钙组及碳酸钙组大鼠右侧股骨中心骨密度与股骨远心端骨密度显著高于模型对照组大鼠右侧股骨中心骨与远心端骨密度，P＜0.05或P＜0.01；硫酸软骨素钙340mg/kg组大鼠右侧股骨中心骨密度与股骨远心端骨密度显著高于碳酸钙高剂量组，P＜0.05。