一种鲜红薯叶纳米汁及其制备和应用的制作方法

本发明涉及一种鲜红薯叶汁的制备方法、涉及它的纳米溶液性质、世家它对高尿酸血症的治疗作用。因而本发明涉及鲜红薯叶纳米汁在制备高尿酸血症的治疗和预防药物中的应用。本发明属于生物医药领域。

背景技术：

肾功能不全引起的尿酸排泄受阻和过多摄入高嘌呤食物引起的尿酸生成增加，都可以造成高尿酸血症。高尿酸血症患者的体症是痛风。痛风发作时，患者疼痛难忍，严重影响生活质量。为了缓解痛苦，患者只能接受药物治疗。目前临床治疗痛风的药物有秋水仙碱、糖皮质激素、非甾体类抗炎药和别嘌呤醇。

秋水仙碱仍为目前治疗痛风尤其是重症痛风急性发作的有效药物。痛风患者在使用别嘌呤醇前服用秋水仙碱片，能明显降低痛风复发率，提高患者对别嘌呤醇的耐受性。由于秋水仙碱的副作用大，国外已明确禁用。非甾体类抗炎药可以短期内缓解疼痛。促肾上腺皮质激素或糖皮质激素撤药后易发生痛风反弹，一般只用于严重急性痛风发作伴有较重全身症状秋水仙碱或非甾体类抗炎药治疗无效的患者。别嘌呤醇可抑制尿酸的生成，是嘌呤氧化酶的强力抑制剂。虽然别嘌呤醇是至今惟一能有效减少尿酸生成、降低血液中尿酸水平、治疗原发性痛风的药物。但是别嘌呤醇的有严重不良反应。患者服用别嘌呤醇数周后常发生发热、皮疹、剥脱性皮炎和肝肾功能衰竭。肝肾功能衰竭是别嘌呤醇的致命不良反应。事实上，临床急需治疗高尿酸血症的药物。

红薯叶又称地瓜叶，富含蛋白质、胡萝卜素、维生素、铁和钙，属于高营养蔬菜。民间一直有红薯叶可增强免疫功能、可提高机体抗病能力、可促进新陈代谢、可延缓衰老、可降血糖、可通便利尿、可升血小板、可止血、可预防动脉硬化、可阻止细胞癌变、可催乳解毒、可保护视力和预防夜盲症的的说法。由于没有严格的药效学研究，所以这些说法的基础仅仅是经验。此外，这些说法与治疗高尿酸血症没有丝毫牵连。

发明人长期从事蔬菜鲜汁的治疗作用研究。对红薯叶的组分分析使发明人认识到，红薯叶鲜汁可以消除高尿酸血症。对红薯叶的组分分析还使发明人认识到，与民间烹制的红薯叶不同，红薯叶鲜汁不存在高温、油盐和佐料的影响。因而红薯叶的组分能以它们的天然状态发挥作用并形成纳米结构，帮助口服吸收。根据这些认识，发明人提出了本发明。

技术实现要素：

本发明的第一个内容是提供一种鲜红薯叶纳米汁。

本发明的第二个内容是提供制备鲜红薯叶纳米汁的方法，该方法包括:

(1)表面无泥沙的新鲜红薯叶1000kg于浸泡池中用3000kg-5000kg自来水水浸泡2小时。之后用3000kg-5000kg水至少洗3次，滤除水，得到清洁的新鲜红薯叶；

(2)将清洁的新鲜红薯叶放到水浪气饱清洗机中，在链条传动下用反渗透纯化水再清洗之后，通过传递窗进入30万级洁净区；

(3)将红薯叶送入离心式榨汁机破碎和榨汁，获得54±2kg鲜红薯叶原汁；

(4)将鲜红薯叶原汁装桶(10kg/桶)并密封；

(5)将密封的鲜红薯叶原汁桶(10kg/桶)经传递窗递出洁净区，入5℃库放置待用；

(6)按生产指令单用量从5℃库提出的鲜红薯叶原汁进入缓冲间，并用紫外灯照射30分钟对外皮消毒；

(7)经外皮消毒的鲜红薯叶原汁通过传递窗进入洁净配料间；

(8)在200l配料罐中将消毒的鲜红薯叶原汁用纯净水稀释，配制浓度为20％(w/w)的鲜红薯叶汁，搅拌30分钟后200目过滤，得到鲜红薯叶汁滤液；

(9)将鲜红薯叶汁滤液灌装(100ml/瓶)，之后传出净化区；

(10)瓶装鲜红薯叶汁滤液于0.16mpa灭菌20分钟、冷却、贴标；

(11)灭菌后的瓶装鲜红薯叶汁滤液装箱(12瓶/箱),入阴凉成品库放储存待用；

(12)测定鲜红薯叶汁滤液组分的纳米尺寸。

本发明的第三个内容是描述供鲜红薯叶纳米汁治疗和预防高尿酸血症的作用。

附图说明

图1鲜红薯叶汁的丁达尔效应。

图2鲜红薯叶汁组分的纳米尺寸。

图3鲜红薯叶汁组分的zeta电位。

具体实施方式

为了进一步阐述本发明，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本发明进行具体描述，不应当理解为对本发明的限制。

实施例1制备鲜红薯叶汁

表面无泥沙的新鲜红薯叶1000kg于浸泡池中用3000kg-5000kg自来水水浸泡2小时。之后用3000kg-5000kg水至少洗3次，滤除水，得到清洁的新鲜红薯叶。将自来水洗净的新鲜红薯叶放到水浪气饱清洗机中，在链条传动下用反渗透纯化水再清洗，之后通过传递窗进入30万级洁净区。在30万级洁净区将红薯叶送入离心式榨汁机破碎和榨汁，获得54±2kg鲜红薯叶原汁。将鲜红薯叶原汁装桶(10kg/桶)并密封。将密封的鲜红薯叶原汁桶(10kg/桶)经传递窗递出洁净区，入5℃库放置待用。按生产指令单用量从5℃库提出的鲜红薯叶原汁进入缓冲间，并用紫外灯照射30分钟对外皮消毒。经外皮消毒的鲜红薯叶原汁通过传递窗进入洁净配料间。在200l配料罐中将消毒的鲜红薯叶原汁用纯净水稀释，配制浓度为20％(w/w)的鲜红薯叶汁。搅拌30分钟后200目过滤，得到鲜红薯叶汁滤液。将鲜红薯叶汁滤液灌装(100ml/瓶)，之后传出净化区。瓶装鲜红薯叶汁滤液于0.16mpa灭菌20分钟、冷却、贴标。灭菌后的瓶装鲜红薯叶汁滤液装箱(12瓶/箱),入阴凉成品库放储存待用。

实施例2测定鲜红薯叶汁的丁达尔效应

将5ml鲜红薯叶汁置于无色透明的玻璃瓶中，用激光笔照射鲜红薯叶汁的中部。波长为650nm的激光使绿色透明的鲜红薯叶汁出现一条红色光道。可见，鲜红薯叶汁有丁达尔效应(见图1)。因为丁达尔效应是纳米溶液的特性，所以无色透明的鲜红薯叶汁是纳米溶液。鲜红薯叶汁的纳米溶液形态是本发明获得了意想不到的技术效果的证据。

实施例3测定鲜红薯叶汁中组分的纳米粒的平均粒径

将2ml鲜红薯叶汁置于专用测定池中，25℃在粒径分析仪(nano-zs90；malverninstrumentsltd,malvern,uk)上测定平均粒径。结果表明，鲜红薯叶汁中组分形成的纳米粒的平均粒径为60.0±10.2nm(见图2)。可见，鲜红薯叶汁中组分形成的纳米粒的粒径处在最有利于人体吸收和输送的粒径范围。这是本发明制备鲜红薯叶汁的方法获得的意想不到的技术效果的证据。

实施例4测定鲜红薯叶汁中组分的纳米粒的zeta电位

将2ml鲜红薯叶汁置于专用测定池中，25℃在zeta电位分析仪(zetapluss/n21394,brookhaveninstrumentscorporation)上测定纳米粒表面的zeta电位。结果表明，鲜红薯叶汁组分形成的纳米粒表面的zeta电位为-0.27±0.00mv(见图3)。可见，鲜红薯叶汁中组分形成的纳米粒的表面带电荷。

实施例5制备鲜红薯叶水煎液

表面无泥沙的新鲜红薯叶1000g于浸泡池中用3000g–5000g自来水水浸泡2小时。之后用3000g-5000g水至少洗3次，滤除水，得到清洁的新鲜红薯叶。将自来水洗净的新鲜红薯叶切碎放到烧瓶中，用3000g纯净化水加热至沸，萃取30min，倾出水提取液。共提取3次。得到的水提取液减压浓缩，获得54±2g鲜红薯叶水煎液。鲜红薯叶水煎液既没有测得丁达尔效应，也没有测得zeta电位。

实施例6测定鲜红薯叶纳米汁对高尿酸血症的治疗作用

因为—氧嗪酸钾诱发的高尿酸血症被公认为尿酸排泄受阻和尿酸生成增加诱发的高尿酸血症的共同模型，所以本发明在氧嗪酸钾诱发的高尿酸血症小鼠模型上测定鲜红薯叶汁的治疗作用。因为别嘌呤醇是至今惟一能有效减少尿酸生成、降低血中尿酸水平、治疗原发性痛风的药物。所以本发明选择别嘌呤醇为阳性对照药。

健康icr清洁级雄性小鼠(体重42±2g)，静息2天,操作间维持温度为22℃。按照文献的方法，小鼠口服氧嗪酸钾(剂量为250mg/kg/天)，连续口服7天，制造高尿酸血症小鼠模型。7天后，高尿酸血症小鼠随机分为5组，每组10只小鼠。第八天高尿酸血症小鼠口服0.5％cmc-na(剂量为0.4ml/只/天)，连续口服7天，构成cmc-na高尿酸血症组。第八天高尿酸血症小鼠口服别嘌醇与0.5％cmc-na的悬浮液(剂量为5mg/kg/天)，连续口服7天，构成别嘌醇高尿酸血症组。第八天高尿酸血症小鼠口服鲜红薯叶汁(剂量为0.4ml/只/天或0.04ml/只/天或0.004ml/只/天)，连续口服7天，构成鲜红薯叶汁高尿酸血症组。第八天高尿酸血症小鼠口服鲜红薯叶水煎液(剂量为0.4ml/只/天)，连续口服7天，构成鲜红薯叶水煎液高尿酸血症组。另外健康icr清洁级雄性小鼠随机分为5组，每组10只小鼠。小鼠口服0.5％cmc-na(剂量为0.4ml/只/天)，连续口服7天，构成cmc-na健康组。小鼠口服别嘌醇与0.5％cmc-na的悬浮液(剂量为5mg/kg/天)，连续口服7天，构成别嘌醇健康组。小鼠口服鲜红薯叶纳米汁(剂量为0.4ml/只/天或0.04ml/只/天或0.004ml/只/天)，连续口服7天，构成鲜红薯叶汁健康组。

小鼠接受最后一次治疗的翌日，经乙醚麻醉，断头取血，采用尿酸测定试剂盒定量测定血清(或血浆)中尿酸含量。即采用尿酸酶偶联trinder反应进行测定。尿酸酶先催化尿酸氧化，产生尿囊素和过氧化氢。随后，过氧化氢、4-氨基安替比林和n-乙基-n-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐经氧化酶作用(trinder反应)形成紫红色的醌亚胺化合物，从而引起546nm处吸光度上升，该变化与样本中的尿酸浓度成正比。操作见表1。

表1血清中尿酸含量测定操作

计算公式为：血液尿酸浓度(μm)＝(样品管吸光度/标准管吸光度)×标准品浓度(μm)。计算的结果列入表2。结果说明，与毒副作用明显的别嘌醇一样，鲜红薯叶汁对健康小鼠的血液中尿酸没有影响。在0.4ml/只/天剂量和0.04ml/只/天剂量下，与毒副作用明显的别嘌醇一样，连续治疗7天鲜红薯叶纳米汁可有效地降低血液中尿酸水平。因为鲜红薯叶纳米汁没有任何毒副作用，所以本发明获得了意想不到的技术效果。此外，鲜红薯叶水煎液不能降低小鼠血液中的尿酸水平。

表2鲜红薯叶纳米汁对氧嗪酸钾致小鼠的影响*

*n＝10；实验数据统计均采用t检验；a)与cmc-na高尿酸血症组比p<0.05,与别嘌醇高尿酸血症组比p>0.05；b)与cmc-na高尿酸血症组比p>0.05。