本发明公开了一种麻黄根提取物及其在制备抗疲劳功能产品中的应用，属于中医药
技术领域：
。
背景技术：
：随着现代社会生活节奏的加快，社会竞争的加剧，生存压力加大，“亚健康”状态成为困扰人们的大敌。who提出亚健康状态最典型的表现为疲劳。疲劳是一种生理性现象，对人来说是一种保护性的机制，这是身体向我们发出应该休息的信号。疲劳一般可分为：体力疲劳、脑力疲劳、心理疲劳和病理疲劳。以上四种疲劳中，除了病理性疲劳外，如果不是持久性、过度性的疲劳外，一般可以通过科学膳食、合理营养等自我保健手段来进行调理、消除。目前，市场上抗疲劳的功能产品很多，如红牛、启力、力保健等，应用这类产品可以迅速缓解人体的疲劳感，使人感觉头脑清醒，精神兴奋。这类产品以饮料制品居多，一般多含有咖啡因，咖啡因具有兴奋中枢的作用，其含量为每100ml饮料中约含咖啡因15-100mg。在应用这类含咖啡因的产品后，短时间内精神得到一定的兴奋，然而当饮用一定量后，兴奋度并不随饮用量的增加而增加，反而在大量饮用这类饮料后，会使人体感到更加疲惫，甚至形成深度疲劳。西医采用补充氨基酸、肌醇等营养能源物质，起到暂时舒缓疲劳的作用，作用效果不持久。还有一些缓解体力疲劳的药物或补品含有激素，毒副作用较大，而且不方便服用，或没有经过药理验证，迄今为止，人们一直在寻找一种制作简单、功效确切、服用方便、无副作用的抗疲劳的药物。麻黄根为麻黄科植物草麻黄ephedrasinicastapf或中麻黄ephedraintermediaschrenketc.a.mey.的干燥根和根茎，具有固表止汗的功能，主治自汗、盗汗。但对于麻黄根提取物的研究少之又少，“麻黄根提取物对自发性高血压大鼠降压作用的观察”(《中国医院药学杂志》2010年第17期)研究了麻黄根提取物对自发性高血压大鼠的降压作用。本发明以麻黄根为原料，用本发明的制备方法得到麻黄根提取物，通过动物及人体试验，证明其具有非常确切的抗疲劳的功能，为其在制备抗疲劳产品中的应用提供了广阔的应用前景。技术实现要素：本发明的目的是提供一种疗效确切、制备方法简单的麻黄根提取物。本发明的另一目的是提供一种麻黄根提取物在制备抗疲劳产品中的应用。为达到上述目的，本发明通过以下技术方案来实现：一种麻黄根提取物的制备方法，包括以下步骤：(1)取麻黄根，加水提取两次，第一次加入麻黄根重量的6～8倍量的水，提取时间为1～2小时，第二次加入麻黄根重量的5～7倍量的水，提取时间为0.5～1小时，过滤，合并两次滤液，滤液减压浓缩至在50～55℃测得比重为1.20～1.30g/cm3的浓缩液；(2)将步骤(1)的药渣加乙醇提取两次，第一次使用80～85％的乙醇，乙醇加入量为麻黄根重量的5～7倍量，提取时间为1～1.5小时，第二次使用70～75％的乙醇，乙醇加入量为麻黄根重量的5～7倍量，提取时间为0.5～1小时，过滤，合并两次滤液，滤液减压浓缩至在50～55℃测得比重为1.10～1.20g/cm3的浓缩液；(3)将步骤(1)和步骤(2)的浓缩液合并，继续浓缩至在50～55℃测得比重为1.30～1.40g/cm3的浸膏；(4)将步骤(3)的浸膏进行真空干燥，粉碎过60-100目筛，即得。优选的，步骤(1)中滤液减压浓缩至在50℃测得比重为1.30g/cm3的浓缩液。优选的，步骤(2)中第一次乙醇提取使用的乙醇浓度为80％，第二次乙醇提取使用的乙醇浓度为75％。优选的，步骤(2)中滤液减压浓缩至在50℃测得比重为1.15g/cm3的浓缩液。优选的，步骤(3)中浓缩液减压浓缩至在55℃测得比重为1.36g/cm3的浸膏。优选的，步骤(4)中干燥至药粉含水量为4.0％～5.0％。本发明中所述的乙醇浓度为体积浓度。由上述方法制备得到的麻黄根提取物。上述麻黄根提取物在制备抗疲劳产品中的应用。本发明的有益效果在于：本发明首次公开了一种麻黄根提取物的制备方法，该方法制得的麻黄根提取物经动物及人体试验，具有显著的抗疲劳的功效，功效确切，无毒副作用；制作方法简单，适合工业化生产。试验例下面通过动物及人体试验数据，进一步说明本发明的有益效果：一、动物试验小鼠抗疲劳试验研究：健康昆明种小鼠160只，体重18g～22g，雌雄各半。预饲7d后，随机分为如下六组：空白对照组、本发明1组、本发明2组、本发明3组，每小组40只。并进行如下灌胃处理：以体重为基准，空白对照组灌胃0.9％的生理盐水，剂量为0.15ml/10g；本发明1组灌胃本发明实施例1制备的提取物，本发明2组灌胃本发明实施例2制备的提取物，本发明3组灌胃本发明实施例3制备的提取物，剂量均为1.5g/kg/d，每天上午9点和下午5点左右各灌胃一次，共给药30d。试验期间动物自由摄食和饮水，末次灌胃前一天晚上停食。1试验方法：1.1小鼠负重游泳试验末次灌胃30min，进行负重游泳实验，于小鼠尾根部负荷体重4％的铅皮，游泳箱水深不少于30cm，水温25±0.5℃，观察游泳时间，力竭判断标准按dawson法。1.2血清中尿素氮的测定末次灌胃30min后，将其在温度为25±0.5℃的游泳箱中不负重游泳90min，休息60min后采血。拔眼球取全血(不加抗凝剂)置4℃冰箱约3h，血凝固后，2000r/min离心15min，取血清测定血清中尿素氮含量。1.3血乳酸的测定末次灌胃30min后，于温度为25±0.5℃的游泳箱中游泳60min后立即取出，分别于游泳前﹑游泳后，用毛细管从內眦采血20μl，测定血乳酸含量。1.4肝糖原的测定末次灌胃30min后，于温度为25±0.50℃的游泳箱中游泳90min后将动物立即处死，取肝脏1g，放入盛有30ml30％koh的试管中，匀浆1min，将匀浆液倒入离心管，3000r/min15min，取上清液置沸水浴中20min，冷却后转移到25ml试管中，用蒸馏水定容，摇匀待用。测定时取200μl样品液，采用蒽酮比色法测定糖含量。2试验结果：2.1各试验组对小鼠负重游泳能力的影响表一各组小鼠体重和负重游泳时间比较组别样本量体重(g)游泳时间(min)空白对照组4031.98±2.8610.37±3.13本发明1组4032.09±2.1626.24±3.98**本发明2组4031.46±4.0227.56±2.37**本发明3组4031.52±3.1728.38±4.01**注：*p＜0.05，**p＜0.01与空白对照组比较。从表一的试验结果可以看出，各组小鼠的体重无明显差别，但是本发明1组、本发明2组、本发明3组小鼠的游泳时间明显长于空白对照组，p＜0.01，差异具有极其显著性。这说明本发明制备方法制得的麻黄根提取物对延长小鼠负重游泳时间的效果非常明显。2.2各试验组对小鼠血清尿素氮含量的影响表二各试验组对小鼠血清尿素氮含量的影响组别血尿素含量(mg/l)空白对照组885.873±108.743本发明1组706.813±74.095*本发明2组696.684±58.087*本发明3组684.315±56.328*注：*p＜0.05，**p＜0.01与空白对照组比较。从表二的试验结果可以看出，本发明1组、本发明2组、本发明3组小鼠的血清尿素氮水平显著低于空白对照组，p＜0.05，差异具有显著性。这说明本发明制备方法制得的麻黄根提取物具有显著的降低小鼠运动后血清尿素氮含量的功效。2.3各试验组对小鼠血乳酸代谢水平的影响表三各试验组对小鼠血乳酸代谢水平的影响注：*p＜0.05，**p＜0.01与空白对照组比较。从表三的试验结果可以看出，游泳前本发明1组、本发明2组、本发明3组小鼠的血乳酸含量与空白对照组比较差异具有显著性(p<0.05)；游泳结束，各组小鼠血乳酸的含量均升高，本发明1组、本发明2组、本发明3组与空白对照组比较有显著差异(p<0.05)。说明本发明制备方法制得的麻黄根提取物具有显著的抑制血乳酸含量升高的效果。2.4各试验组对小鼠肝糖原含量的影响表四各试验组对小鼠肝糖原含量的影响组别肝糖原(mg/100g肝)空白对照组46.57±41.72本发明1组309.03±107.48**本发明2组315.12±98.54**本发明3组285.26±101.58**注：*p＜0.05，**p＜0.01与空白对照组比较。从表四的试验结果可以看出，本发明1组、本发明2组、本发明3组小鼠的肝糖原水平大幅度高于空白对照组(p＜0.01)，说明本发明制备方法制得的麻黄根提取物具有显著提升小鼠运动后肝糖原含量的功效。3结论：上述试验中仅列出了使用本发明实施例1至实施例3制备的麻黄根提取物的试验数据，使用其他实施例制备的组合物也均能达到相似的效果，在申请文件中就不再赘述。上述试验表明，本发明制备方法制得的麻黄根提取物具有显著的抗疲劳的功效，在整个实验过程中，小鼠的活动状态无异常，且检测过程中生化指标均无异常，所以该组合物在抗疲劳功效确切的前提下，对受试动物健康无影响，具有很高的安全性。二、人体试验1、资料和方法1.1研究对象：60例中老年志愿者参与，年龄55-65岁，男性32例，女性28例。所有对象均无吸烟史，无心肺疾病及骨骼肌疾病，而且实验前的运动试验无心肌缺血的症状和体征(运动心电图显示st段压低在1mm以内)。1.2试验方法：在双盲的情况下，志愿者按照随机表被随机分配到本发明组和空白对照组，每组30人。研究对象被要求在试验过程中保持生活方式相对不变，包括饮食习惯、锻炼和其他日常活动，并且不服用其他中草药和西药。本发明组服用本发明实施例3制得的提取物，每日2次，每次5克；空白对照组服用安慰剂；试验共进行8周。1.3检测指标：试验前后，在第0周和第8周，通过测定症状限制性的增量功率运动试验期间的最大氧摄取(vo2max)、最大通气率(vemax)、代谢当量(mets)和气体交换无氧阈值(vo2θ)，以及试验前及试验终止后3min，从手臂静脉取静脉血测定血乳酸浓度，来评估有氧能力、运动能力以及体能。1.4统计学分析计量资料用均数±标准差表示，采用t检验进行统计分析。1.5结果具体数据见下表：表1各组服用前后症状限制性的增量功率运动相关参数及比较注：*p＜0.05，**p＜0.01与服用前比较。表2各组运动试验前后血清乳酸水平(mmol/l)注：*p＜0.05，**p＜0.01与服用前比较。1.6结论8周治疗后，空白对照组的vo2max、vemax、mets、vo2θ、血清乳酸水平均无明显变化(p＞0.05)；而本发明组的vo2max、vemax、mets、vo2θ较服用前均有显著的提高(p＜0.05)，运动试验后血清乳酸水平较服用前有明显的降低(p＜0.05)。表明本发明制备方法制得的麻黄根提取物具有显著的抗疲劳的功能。具体实施方式实施例1(1)取麻黄根，加水提取两次，第一次加入麻黄根重量的6倍量的水，提取时间为1小时，第二次加入麻黄根重量的5倍量的水，提取时间为0.5小时，过滤，合并两次滤液，滤液减压浓缩至在50℃测得比重为1.20g/cm3的浓缩液；(2)将步骤(1)的药渣加乙醇提取两次，第一次使用80％的乙醇，乙醇加入量为麻黄根重量的5倍量，提取时间为1小时，第二次使用70％的乙醇，乙醇加入量为麻黄根重量的5倍量，提取时间为0.5小时，过滤，合并两次滤液，滤液减压浓缩至在50℃测得比重为1.10g/cm3的浓缩液；(3)将步骤(1)和步骤(2)的浓缩液合并，继续浓缩至在50℃测得比重为1.30g/cm3的浸膏；(4)将步骤(3)的浸膏进行真空干燥至药粉含水量为4.0％，粉碎过60目筛，即得。实施例2(1)取麻黄根，加水提取两次，第一次加入麻黄根重量的8倍量的水，提取时间为2小时，第二次加入麻黄根重量的7倍量的水，提取时间为1小时，过滤，合并两次滤液，滤液减压浓缩至在55℃测得比重为1.30g/cm3的浓缩液；(2)将步骤(1)的药渣加乙醇提取两次，第一次使用85％的乙醇，乙醇加入量为麻黄根重量的7倍量，提取时间为1.5小时，第二次使用75％的乙醇，乙醇加入量为麻黄根重量的7倍量，提取时间为1小时，过滤，合并两次滤液，滤液减压浓缩至在55℃测得比重为1.20g/cm3的浓缩液；(3)将步骤(1)和步骤(2)的浓缩液合并，继续浓缩至在55℃测得比重为1.40g/cm3的浸膏；(4)将步骤(3)的浸膏进行真空干燥至药粉含水量为5.0％，粉碎过100目筛，即得。实施例3(1)取麻黄根，加水提取两次，第一次加入麻黄根重量的7倍量的水，提取时间为1.5小时，第二次加入麻黄根重量的6倍量的水，提取时间为1小时，过滤，合并两次滤液，滤液减压浓缩至在50℃测得比重为1.30g/cm3的浓缩液；(2)将步骤(1)的药渣加乙醇提取两次，第一次使用80％的乙醇，乙醇加入量为麻黄根重量的6倍量，提取时间为1小时，第二次使用75％的乙醇，乙醇加入量为麻黄根重量的6倍量，提取时间为1小时，过滤，合并两次滤液，滤液减压浓缩至在50℃测得比重为1.15g/cm3的浓缩液；(3)将步骤(1)和步骤(2)的浓缩液合并，继续浓缩至在55℃测得比重为1.36g/cm3的浸膏；(4)将步骤(3)的浸膏进行真空干燥至药粉含水量为4.5％，粉碎过80目筛，即得。实施例4(1)取麻黄根，加水提取两次，第一次加入麻黄根重量的8倍量的水，提取时间为1小时，第二次加入麻黄根重量的6倍量的水，提取时间为1小时，过滤，合并两次滤液，滤液减压浓缩至在52℃测得比重为1.26g/cm3的浓缩液；(2)将步骤(1)的药渣加乙醇提取两次，第一次使用82％的乙醇，乙醇加入量为麻黄根重量的7倍量，提取时间为1.5小时，第二次使用75％的乙醇，乙醇加入量为麻黄根重量的5倍量，提取时间为0.5小时，过滤，合并两次滤液，滤液减压浓缩至在53℃测得比重为1.14g/cm3的浓缩液；(3)将步骤(1)和步骤(2)的浓缩液合并，继续浓缩至在50℃测得比重为1.38g/cm3的浸膏；(4)将步骤(3)的浸膏进行真空干燥至药粉含水量为4.3％，粉碎过60目筛，即得。实施例5(1)取麻黄根，加水提取两次，第一次加入麻黄根重量的7倍量的水，提取时间为1.5小时，第二次加入麻黄根重量的6倍量的水，提取时间为1小时，过滤，合并两次滤液，滤液减压浓缩至在55℃测得比重为1.28g/cm3的浓缩液；(2)将步骤(1)的药渣加乙醇提取两次，第一次使用80％的乙醇，乙醇加入量为麻黄根重量的7倍量，提取时间为1小时，第二次使用72％的乙醇，乙醇加入量为麻黄根重量的6倍量，提取时间为0.5小时，过滤，合并两次滤液，滤液减压浓缩至在50℃测得比重为1.13g/cm3的浓缩液；(3)将步骤(1)和步骤(2)的浓缩液合并，继续浓缩至在53℃测得比重为1.36g/cm3的浸膏；(4)将步骤(3)的浸膏进行真空干燥至药粉含水量为4.7％，粉碎过100目筛，即得。实施例6(1)取麻黄根，加水提取两次，第一次加入麻黄根重量的6倍量的水，提取时间为2小时，第二次加入麻黄根重量的5倍量的水，提取时间为0.5小时，过滤，合并两次滤液，滤液减压浓缩至在55℃测得比重为1.27g/cm3的浓缩液；(2)将步骤(1)的药渣加乙醇提取两次，第一次使用85％的乙醇，乙醇加入量为麻黄根重量的7倍量，提取时间为1小时，第二次使用70％的乙醇，乙醇加入量为麻黄根重量的6倍量，提取时间为1小时，过滤，合并两次滤液，滤液减压浓缩至在55℃测得比重为1.16g/cm3的浓缩液；(3)将步骤(1)和步骤(2)的浓缩液合并，继续浓缩至在53℃测得比重为1.30g/cm3的浸膏；(4)将步骤(3)的浸膏进行真空干燥至药粉含水量为4.5％，粉碎过80目筛，即得。实施例7(1)取麻黄根，加水提取两次，第一次加入麻黄根重量的8倍量的水，提取时间为2小时，第二次加入麻黄根重量的7倍量的水，提取时间为0.5小时，过滤，合并两次滤液，滤液减压浓缩至在54℃测得比重为1.23g/cm3的浓缩液；(2)将步骤(1)的药渣加乙醇提取两次，第一次使用83％的乙醇，乙醇加入量为麻黄根重量的5倍量，提取时间为1小时，第二次使用74％的乙醇，乙醇加入量为麻黄根重量的5倍量，提取时间为0.5小时，过滤，合并两次滤液，滤液减压浓缩至在55℃测得比重为1.20g/cm3的浓缩液；(3)将步骤(1)和步骤(2)的浓缩液合并，继续浓缩至在55℃测得比重为1.33g/cm3的浸膏；(4)将步骤(3)的浸膏进行真空干燥至药粉含水量为4.1％，粉碎过60目筛，即得。本发明的实施例仅是对技术方案的具体描述，并非是对技术方案的限制，本领域技术人员在不改变本发明的实质内容的条件下所做的替换或改动均落入本发明的保护范围。当前第1页12