本发明属于组织修复材料制备技术领域，尤其涉及一种刺身胶原蛋白复合再生纤维修复材料的制备方法。
背景技术：
纤维素作为天然的生物高聚物，具有生物可降解性、生物相容性以及独特的物理、化学和机械性能，已成为新型生物医学材料领域的研究热点。而现有技术多是采用再生纤维素与其他材料共混，冷冻干燥制备复合膜，采用此方法制得的复合膜均匀性、稳定性较差，且组织修复能力及药物附着性有待进一步的提高。
技术实现要素：
为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供了一种具有良好的组织修复能力及药物附着性的刺身胶原蛋白复合再生纤维修复材料的制备方法。
本发明采用以下技术方案：
一种刺身胶原蛋白复合再生纤维修复材料的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：称取干刺参50g，60℃水发两天，每天换水3次，再于500ml无水乙醇中40℃下连续浸提两天，每天更换1次乙醇，最后于常温下晾干；
步骤二：取晾干后的刺参在超氧化物歧化酶作用酶解反应4h，超氧化物歧化酶与底物质量比为1:6、ph6.5、温度45℃，反应完成后，煮沸5min灭酶，并迅速冷却至室温，2000r/min离心处理30min，取上清液加200ml无水乙醇沉淀过夜，再3000r/min离心处理30min，取上清液40℃旋转蒸发1h，得刺身胶原蛋白；
步骤三：将壳聚糖与质量浓度1％的醋酸按重量比1:8混合，常温下磁力搅拌2h，转速1000r/min，制成壳聚糖醋酸溶液；
步骤四：将蚕茧去蛹，置入煮沸的质量浓度为0.5％的碳酸钠水溶液中，浴比为1:50，除去蚕茧表面丝胶,将已成丝状的蚕茧捞出并拧干，再重复上述操作一次后，用去离子水洗净，风干后得到脱胶丝素；
步骤五：将cacl2在室温状态下溶解于甲酸中，搅拌30min，制得浓度为5wt.％的cacl2-fa溶液，然后将脱胶丝素溶解于cacl2-fa溶液中，磁力搅拌3h，获得再生丝素蛋白溶液，室温下干燥成膜，将膜用去离子水浸泡3h，再干燥，获得再生丝素蛋白膜，将再生丝素蛋白膜在室温状态下二次溶解于甲酸中，浴比为1:10，溶解时间为2h，得再生丝素蛋白纺丝液；
步骤六：取棉短绒5g，将其溶解在甲酸中，配制成质量浓度4％的纤维素溶液；
步骤七：将再生丝素蛋白纺丝液与纤维素溶液按重量比4:1混合均匀得再生纤维素纺丝液；
步骤八：将刺身胶原蛋白、壳聚糖醋酸溶液、再生纤维素纺丝液按质量比3:3:20混合均匀，使用超声波震荡对其进行分散，50℃条件下磁力搅拌1h，再在室温下继续搅拌8h，得到粘稠溶液置于与高压装置连接的医用针管中，通过静电纺丝制得修复材料，高压装置电压为20kv，纺丝流量2ml/h，将制得的材料置于体积浓度75％乙醇中浸泡30min，在40℃下真空干燥。
优选的，步骤八中所述的医用针管的容量为20ml。
优选的，步骤八中所述的医用针管的针头固定在距离静电纺丝接收板20cm处。
优选的，步骤八中所述的医用针管的针头内径为0.41mm。
本发明的有益效果在于：
1)刺身胶原蛋白作为一种天然的高分子生物材料，具有较低的免疫原性、优异的生物相容性和生物降解性，可引导组织再生，促进细胞增殖生长和止血作用等特性，是一种理想的组织工程支架材料。
2)丝素蛋白及壳聚糖具有良好的抗菌性、生物相容性及一定的组织修复能力。
3)纤维素具有良好的生物相容性、可降解性及优良的机械性能。
4)纤维素可以改善材料的机械性能，刺身胶原蛋白、丝素蛋白及壳聚糖可以改善材料的组织修复能力。
5)采用静电纺丝技术制备的材料，进一步提高了材料的孔隙率，有利于药物的附着。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的描述。
实施例1
一种刺身胶原蛋白复合再生纤维修复材料的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：称取干刺参50g，60℃水发两天，每天换水3次，再于500ml无水乙醇中40℃下连续浸提两天，每天更换1次乙醇，最后于常温下晾干；
步骤二：取晾干后的刺参在超氧化物歧化酶作用酶解反应4h，超氧化物歧化酶与底物质量比为1:6、ph6.5、温度45℃，反应完成后，煮沸5min灭酶，并迅速冷却至室温，2000r/min离心处理30min，取上清液加200ml无水乙醇沉淀过夜，再3000r/min离心处理30min，取上清液40℃旋转蒸发1h，得刺身胶原蛋白；
步骤三：将壳聚糖与质量浓度1％的醋酸按重量比1:8混合，常温下磁力搅拌2h，转速1000r/min，制成壳聚糖醋酸溶液；
步骤四：将蚕茧去蛹，置入煮沸的质量浓度为0.5％的碳酸钠水溶液中，浴比为1:50，除去蚕茧表面丝胶,将已成丝状的蚕茧捞出并拧干，再重复上述操作一次后，用去离子水洗净，风干后得到脱胶丝素；
步骤五：将cacl2在室温状态下溶解于甲酸中，搅拌30min，制得浓度为5wt.％的cacl2-fa溶液，然后将脱胶丝素溶解于cacl2-fa溶液中，磁力搅拌3h，获得再生丝素蛋白溶液，室温下干燥成膜，将膜用去离子水浸泡3h，再干燥，获得再生丝素蛋白膜，将再生丝素蛋白膜在室温状态下二次溶解于甲酸中，浴比为1:10，溶解时间为2h，得再生丝素蛋白纺丝液；
步骤六：取棉短绒5g，将其溶解在甲酸中，配制成质量浓度4％的纤维素溶液；
步骤七：将再生丝素蛋白纺丝液与纤维素溶液按重量比4:1混合均匀得再生纤维素纺丝液；
步骤八：将刺身胶原蛋白、壳聚糖醋酸溶液、再生纤维素纺丝液按质量比3:3:20混合均匀，使用超声波震荡对其进行分散，50℃条件下磁力搅拌1h，再在室温下继续搅拌8h，得到粘稠溶液置于与高压装置连接的医用针管中，通过静电纺丝制得修复材料，高压装置电压为20kv，纺丝流量2ml/h，将制得的材料置于体积浓度75％乙醇中浸泡30min，在40℃下真空干燥。
步骤八中所述的医用针管的容量为20ml，所述的医用针管的针头固定在距离静电纺丝接收板20cm处，针头内径为0.41mm。