一种产蛋鹌鹑用保肝增蛋口服液及其制备方法与流程

本发明属于鹌鹑养殖技术领域，具体地说，涉及一种产蛋鹌鹑用保肝增蛋口服液及其制备方法。

背景技术：

我国是个畜牧业养殖大国，鸡、鸭、鹅及鹌鹑存栏量巨大，对蛋类需求比较大。如果能在此方面有所突破，转而推向整个家禽养殖业，对我国的养殖业的质量提升还有人民健康方面会起到很大的作用。

鹌鹑蛋富含氨基酸、卵磷脂、脑磷脂等多种营养素，具有补气益血、强身健脑、预防细胞退化和肌体衰老等功能，是理想的滋补食品。养殖鹌鹑是一项投资小、产值高、资金周转快、经济效益高的养殖业，具有广阔的发展前景。在养殖过程中多种因素会影响到鹌鹑的产蛋性能，故提高鹌鹑的产蛋性能在鹌鹑养殖中尤为重要影响。但是鹌鹑随着日龄的增大，脂肪肝病症随之增多，产蛋量下降，导致利润减少。

肝脏是动物体内的一个重要代谢器官，与机体消化、解毒、免疫等方面密切相关。肝脏功能异常会导致各种疾病。其中酯类代谢紊乱会导致肝脏细胞脂肪堆积过多，产生脂肪肝，影响机体的正常代谢机能。肝脏疾病会严重影响家禽产蛋性能。

目前，还没有相关文献报道能针对预防和治疗鹌鹑脂肪肝的中药口服液出现，针对市场的需求研发能预防和治疗鹌鹑脂肪肝的中药口服液有重要意义。

技术实现要素：

有鉴于此，本发明针对上述的问题，提供了一种产蛋鹌鹑用保肝增蛋口服液及其制备方法。

为了解决上述技术问题，本发明公开了一种产蛋鹌鹑用保肝增蛋口服液，主要按照质量份由以下组分构成：茵陈4份-8份、太子参4份-8份、淫羊藿2份-6份、山剪刀草2份-6份、云芝2份-6份、老鹳草1份-4份。

本发明还公开了一种产蛋鹌鹑用保肝增蛋口服液的制备方法，包括以下步骤：

步骤1、称量：按照质量份称量以下组分：茵陈4份-8份、太子参4份-8份、淫羊藿2份-6份、山剪刀草2份-6份、云芝2份-6份、老鹳草1份-4份；

步骤2、将称量好的各组分用蒸馏水浸泡，进行煎煮处理；每次煎煮完成后待药液冷却，用漏斗滤过，收集两次的滤液进行离心处理，弃去底部残渣，收集上层清液；

步骤3、将上层清液进行浓缩处理，待浓缩液冷却后向其中加入乙醇进行醇沉，边加入乙醇边搅拌，随后置于3℃冰箱中静置一天，取出静置液，进行过滤处理，回收滤液中的乙醇；

步骤4、取出回收乙醇后的药液，向其中加入蒸馏水以及苯甲酸钠和苯甲酸，制备得到药液；用naoh调药液ph值，将所制的药液进行分装，灭菌，制备得到产蛋鹌鹑用保肝增蛋口服液。

进一步地，所述步骤2中的浸泡时间为15-45min，煎煮的料液比为1:12-1:20，一共煎煮2次，每次煎煮1-2h。

进一步地，所述步骤2中的离心时间为8-12min，离心转速为2000转/分钟。

进一步地，所述步骤3中的乙醇的体积浓度为50％-80％。

进一步地，所述步骤3中的浓缩后的药液浓度为1.02-1.05g/ml。

进一步地，所述步骤4中的药液体积总量与步骤1中各组分质量总量之比为1:1，苯甲酸钠与苯甲酸添加量相等，苯甲酸钠与步骤1中各组分质量总量的质量比为1:280。

进一步地，所述步骤4中的naoh的质量浓度为0.2％，药液ph值为5～7。

与现有技术相比，本发明可以获得包括以下技术效果：

本发明产蛋鹌鹑用保肝增蛋口服液对产蛋鹌鹑明显提高鹌鹑产蛋率和日均蛋重，从而提高鹌鹑的产蛋经济效益。不同程度的改善产蛋品质。而且也表明产蛋鹌鹑用保肝增蛋口服液可以减轻鹌鹑的脂肪肝变性，对肝脏起到一定的保护作用。

当然，实施本发明的任一产品并不一定需要同时达到以上所述的所有技术效果。

附图说明

此处所说明的附图用来提供对本发明的进一步理解，构成本发明的一部分，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。在附图中：

图1是本发明茵陈定性鉴别图；其中，1代表阴性对照，2-4代表供试品，5代表对照组；

图2是本发明太子参定性鉴别图；其中，1代表阴性对照，2-4代表对照药材，3-6代表供试品；

图3是本发明淫羊藿定性鉴别图；其中，1-3代表供试品，4代表阴性对照，5代表对照品；

图4是本发明口服液高效液相色谱图；

图5是本发明滨蒿内酯高效液相色谱图；

图6是本发明各组鹌鹑肝脏形态(苏木精-伊红染色，x400)，其中，a代表空白组，b代表保肝组，c代表益母组。

具体实施方式

以下将配合实施例来详细说明本发明的实施方式，藉此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题并达成技术功效的实现过程能充分理解并据以实施。

本发明提供一种产蛋鹌鹑用保肝增蛋口服液，其主要成分按照质量份由以下组分构成：茵陈4份-8份、太子参4份-8份、淫羊藿2份-6份、山剪刀草2份-6份、云芝2份-6份、老鹳草1份-4份。

其中，中药组分茵陈主要能清热利湿；退黄。主治：黄疸、小便不利、湿疮瘙痒、传染性黄疸型肝炎等药理学研究有利胆，保护肝功能解热，抗炎，降血脂，扩冠等作用，目前中医和西医学共同研究茵陈成分做出来的成果。茵陈有显著的保肝作用，对甲、乙型肝炎，黄疸型肝炎，有显著的疗效。有利胆，促进胆汁分泌，增加胆汁中胆酸和胆红素排出的作用，能增加心脏冠脉血流量，改善微循环，并有降血压，降血脂，抗凝血，利尿解热平喘，驱除蛔虫及抑制多种致病性皮肤真菌与细菌的作用。

太子参其性甘、性平、微苦；入脾肺二经，有益气健脾、生津润肺之功效，用于治疗脾虚体倦、食欲不振、病后虚弱、气阴不足、自汗口干、肺燥干咳等病症。临床上可单独使用或与其它中药配合使用，或用于成方制剂。近年来临床表明，太子参在治疗肝炎、糖尿病、冠心病、心绞痛、继发性再生障碍性贫血、白细胞减少症、甲亢、淋巴结核等疑难病症方面取得了新的进展。

淫羊藿味辛甘性温，走肝肾二经。为补命门、益精气、强筋骨、补肾壮阳之要药，临床常用于治疗男子阳痿不举、滑精早泄、小便不禁以及女子不孕等症。现代研究表明，淫羊藿含淫羊藿甙、挥发油、蜡醇、植物甾醇、鞣质、维生素e等成分。能兴奋性机能，对动物有促进精液分泌作用。还有降压(引起周围血管舒张)、降血糖、利尿、镇咳祛痰以及维生素e样作用。药理实验研究表明，淫羊藿能增加心脑血管血流量，促进造血功能、免疫功能及骨代谢，具有抗衰老、抗肿瘤等功效。

山剪刀草具有清热、解毒的功效。现代药理研究证实有较好的解痉、镇静、抗炎、消肿、解热和促进肾上腺皮质功能等药理作用。云芝性味：甘；淡；微寒。归经：肝；脾；肺经功能主治：健脾利湿；止咳平喘；清热解毒；抗肿瘤。主慢性活动性肝炎；肝硬化；慢性支气管炎；小儿痉挛性支气管炎；咽喉肿痛；多种肿瘤；类风湿性关节炎；白血病。

老鹳草味苦、微辛，性平。归肝、大肠经。老鹳草抗菌谱广，其黄酮类对多种杆菌有抑制作用，对痢疾杆菌f1株的抑菌作用低于金霉素、四环素，高于黄连素、穿心莲，与氯霉素及链霉素相近；其全草煎剂对金黄色葡萄球菌、乙型链球菌、肺炎链球菌、卡他球菌也有较明显的抑制作用。本品全草煎剂对亚洲甲型流感病毒京科68-1株和副流感病工型仙台株及单纯疱疹病毒均有较明显的抑制作用。老鹳草水提取物可使兔血液凝固增强；醇沉煎剂有显著镇咳作用；鞣质及其分解产物鞣云实精等均能抑制脂质过氧化，具有抗氧化、保肝作用；鼠掌老鹳草具有抗炎作用。全方合用具有清热祛毒、活血通淤、滋养肝脾以及强筋补肾、益气养精之功效。

本口服液由茵陈、太子参、淫羊藿、山剪刀草、云芝、老鹳草组成。本方具有清热祛毒、活血通淤、滋养肝脏以及强筋补肾、益气养精之功效。香豆素是茵陈中含有的主要成分，可以抑制肝脏中凝血因子的合成，具有明显保肝作用。

本发明还提供一种产蛋鹌鹑用保肝增蛋口服液的制备方法，包括以下步骤：

步骤1、称量：按照质量份称量以下组分：茵陈4份-8份、太子参4份-8份、淫羊藿2份-6份、山剪刀草2份-6份、云芝2份-6份、老鹳草1份-4份；

步骤2、将称量好的各组分用蒸馏水，浸泡15-45min后按照料液比为1:12-1:20进行煎煮处理，一共煎煮2次，每次煎煮1-2h；每次煎煮完成后待药液冷却，用漏斗滤过，收集两次的滤液，置于离心机离心8-12min，离心转速2000转/分钟，弃去底部残渣，收集上层清液。

步骤3、将上层清液进行浓缩处理，使药液浓缩至1.02-1.05g/ml范围内；待浓缩液冷却后向其中加入50％-80％的乙醇进行醇沉，边加入乙醇边搅拌，随后置于3℃冰箱中静置一天，取出静置液，进行过滤处理，回收滤液中的乙醇。

步骤4、取出回收乙醇后的药液，向其中加入适量蒸馏水以及苯甲酸钠苯甲酸，药液体积总量与步骤1中各组分质量总量之比为1:1，苯甲酸钠与苯甲酸添加量相等，苯甲酸钠与步骤1中各组分质量总量的质量比为1:280，用0.2％naoh调ph值使药液ph值在5～7之间，将所制的药液进行分装，灭菌，制备得到产蛋鹌鹑用保肝增蛋口服液。

实施例1

称量以下组分：茵陈600g、太子参600g、淫羊藿400g、山剪刀草400g、云芝400g、老鹳草200g；取上述处方于大烧杯中，加一定量的蒸馏水，浸泡0.5h后按照料液比为1:18进行煎煮处理，一共煎煮2次，每次煎煮1.5h。每次煎煮完成后待药液冷却，用漏斗滤过，收集两次的滤液，置于离心机离心10min，离心转速2000转/分钟，弃去底部残渣，收集上层清液。进行浓缩处理，使药液浓缩至1.04g/ml即可。待浓缩液冷却后向其中加入一定浓度的乙醇进行醇沉，边加入60％乙醇边搅拌，随后置于3℃冰箱中静置一天。取出静置液，进行过滤处理，回收滤液中的乙醇。取出回收乙醇后的药液，向其中加入适量蒸馏水以及10g的苯甲酸钠和10g的苯甲酸，使药液达到2800ml。用0.2％naoh调ph值使药液ph值在6之间。最后将所制的2800ml的药液进行分装，灭菌，即可制备得到产蛋鹌鹑用保肝增蛋口服液。

实施例2

按照质量份称量以下组分：茵陈400g、太子参800g、淫羊藿200g、山剪刀草600g、云芝200g、老鹳草400g；将称量好的各组分用蒸馏水，浸泡15min后按照料液比为1:20进行煎煮处理，一共煎煮2次，每次煎煮1h；每次煎煮完成后待药液冷却，用漏斗滤过，收集两次的滤液，置于离心机离心12min，离心转速2000转/分钟，弃去底部残渣，收集上层清液。将上层清液进行浓缩处理，使药液浓缩至1.02g/ml；待浓缩液冷却后向其中加入80％的乙醇进行醇沉，边加入乙醇边搅拌，随后置于3℃冰箱中静置一天，取出静置液，进行过滤处理，回收滤液中的乙醇。取出回收乙醇后的药液，向其中加入适量蒸馏水以及苯甲酸钠和苯甲酸，药液体积总量与中草药中各组分质量总量之比为1:1，苯甲酸钠与苯甲酸添加量相等，苯甲酸钠与中草药各组分质量总量的质量比为1:280，使药液达到2800ml。用0.2％naoh调ph值使药液ph值在5之间，最后将所制的2800ml的药液进行分装，灭菌，制备得到产蛋鹌鹑用保肝增蛋口服液。

实施例3

按照质量份称量以下组分：茵陈800g、太子参400g、淫羊藿600g、山剪刀草200g、云芝600g、老鹳草100g；将称量好的各组分用蒸馏水，浸泡45min后按照料液比为1:12进行煎煮处理，一共煎煮2次，每次煎煮2h；每次煎煮完成后待药液冷却，用漏斗滤过，收集两次的滤液，置于离心机离心8min，离心转速2000转/分钟，弃去底部残渣，收集上层清液。将上层清液进行浓缩处理，使药液浓缩至1.05g/ml范围内；待浓缩液冷却后向其中加入50％的乙醇进行醇沉，边加入乙醇边搅拌，随后置于3℃冰箱中静置一天，取出静置液，进行过滤处理，回收滤液中的乙醇。取出回收乙醇后的药液，向其中加入适量蒸馏水以及苯甲酸钠和苯甲酸，药液体积总量与中草药中各组分质量总量之比为1:1，苯甲酸钠与苯甲酸添加量相等，苯甲酸钠与中草药各组分质量总量的质量比为1:280，使药液达到2800ml。用0.2％naoh调ph值使药液ph值在7，最后将所制的2800ml的药液进行分装，灭菌，制备得到产蛋鹌鹑用保肝增蛋口服液。

实施例4口服液质量标准

一、茵陈的定性鉴别

量取10ml口服液于烧杯中，加入15ml乙酸乙酯进行振摇提取。15min后，取出提取液，再按相同方法提取一次。收集两次提取液，进行旋蒸，直至提取液蒸干。向其中加入2ml甲醇，作为供试品溶液。取按照相同工艺制备的无茵陈的口服液。按照上述方法进行操作。所得的甲醇溶液作为阴性对照溶液。取1g茵陈对照药材，加入20ml甲醇，置于超声仪中处理0.5h。过滤提取液，将其蒸干。向其中加入2ml甲醇，作为对照药材溶液。以2015年版中国药典tlc法为标准。用毛细管吸取上述三种溶液5至10μl，点于硅胶g薄层板上。待原点药液干燥后，放入展层缸中展开。展开剂为乙酸丁酯:甲酸:水(7：3：3)。一段时间后，取出薄层板。待其干燥后，置于365nm紫外光灯下观察。结果见图1。供试品与对照药材在薄层板上端斑点相对应。阴性对照差异明显。

二、太子参的定性鉴别

量取10ml口服液于烧杯中，加入20ml水饱和的正丁醇进行振摇提取。15min后，取出提取液，再按相同方法提取一次。收集两次提取液，进行旋蒸，直至提取液蒸干。加入2ml甲醇，作为供试品溶液。取按照相同工艺制备的无太子参的口服液。按照上述方法进行操作。所得的甲醇溶液作为阴性对照溶液。取1g太子参对照药材，用少许水湿润。随后加入10ml正丁醇，置于超声仪中处理0.5h。过滤提取液，将其蒸干。加入2ml甲醇，作为对照药材溶液。以2015年版中国药典tlc法为标准。用毛细管吸取上述三种溶液5至10μl，点于硅胶g薄层板上。待原点药液干燥后，放入展层缸中展开。展开剂为正丁醇:冰醋酸:水(7：1.5：1)。一段时间后，取出薄层板。待其干燥后，以10％硫酸乙醇溶液为显色剂。在105℃烘箱中加热，直到显示出明显的斑点。结果见图2。供试品与对照药材在薄层板中部斑点相对应。阴性对照差异明显。

三、淫羊藿的定性鉴别

量取10ml口服液于烧杯中，加入20ml甲醇。混匀后离心10min，取出上层清液。对其进行旋蒸，直到蒸干。加入2ml甲醇，作为供试品溶液。取按照相同工艺制备的无淫羊藿的口服液。按照上述方法进行操作。所得的甲醇溶液作为阴性对照溶液。取淫羊藿苷对照品1mg，加入甲醇2ml溶解。作为对照品溶液。以2015年版中国药典tlc法为标准。用毛细管吸取上述三种溶液5至10μl，点于硅胶g薄层板上。待原点药液干燥后，放入展层缸中展开。展开剂为乙酸乙酯:丁酮:甲酸:水(10：2：1：2)。一段时间后，取出薄层板，进行晾干处理。随后将薄层板置于365nm紫外光灯下观察，结果见图3。供试品与对照品在薄层板上端斑点相对应。阴性对照差异明显。

四、高效液相色谱法测香豆素含量

色谱条件：色谱柱为agilentmicrosorb100-5sb-c18柱，规格为250mm×4.6mm，5μm；流动相为乙腈:水(34：66)；检测波长为340nm；流速为1ml/min；柱温为25℃；

对照品溶液的制备：精密称取滨蒿内酯6.8mg，加入甲醇定容至100ml，进行超声溶解0.5h。即制得对照品溶液，浓度为0.068mg/ml.

供试品溶液的制备：精密量取口服液1ml，加入甲醇定容至100ml，进行超声溶解0.5h。用微孔滤膜过滤。即制得供试品溶液。

系统适应性试验：精密进样10μl的对照品溶液和供试品溶液。按照试验条件进行检测。图谱显示，滨蒿内酯在8.4min左右出峰，峰形良好。供试品在8.4min左右也有吸收峰，时间与滨蒿内酯一致。口服液中其余各组分有良好的分离关系。口服液色谱峰形图见图4，滨蒿内酯色谱峰形图见图5。

线性关系考察：分别精确进样1、5、10、15、20μl的照品溶液。按照色谱条件，测定峰面积。以峰面积为纵坐标y，对照品进样量为横坐标x(6.8-136μg)，绘制标准曲线。得标准曲线方程为y＝6×10⁶x+18263，r＝1。

精密度试验：精确进样10μl对照品溶液。连续重复进样6次。按照色谱条件进行检测。记录每次峰面积，结果rsd为0.59％。

稳定性试验：取口服液，按照供试品制备方法配置供试品溶液。在配制后的0、4、、8、24h时进样10μl。记录每次峰面积。结果其rsd为0.63％。

重复性试验：取同一份口服液，按试验条件制得6份供试品溶液。每份供试品进样10μl，记录峰面积。结果rsd为1.83％。

加样回收率试验：取口服液共6份，每份各1ml。分别加入滨蒿内酯0.345，0.351，0.432，0.445，0.518，0.528mg。按照供试品制备方法，制得加样回收供试液。测定含量，计算回收率。计算得平均回收率为98.13％，rsd为1.19％。加样回收率结果见表8。

表8加样回收率结果

口服液测定：取三份口服液制成供试品溶液，每份进样10μl，测定每份峰面积，计算香豆素含量。结果三份口服液香豆素含量分别为0.428mg/ml，0.436mg/ml，0.445mg/ml。

实施例5本发明的口服液对对鹌鹑产蛋性能的影响

一、实验方法

1、分组及给药方式：鹌鹑300日龄，体重100～130g，雌性，600只(四川九升食品公司)，随机分为3组，每组分为4笼。每笼50只：空白组、益母组、保肝组。实验组喂用口服液，按4ml/kg/笼/天。混入饲料给药；空白组给同剂量的生理盐水混入饲料喂养；益母组4ml/kg/笼/天。喂养30天。每日16：00-17：00收集所有鹌鹑蛋。

2、产蛋性能的测定：计算产蛋数量，称总蛋重。使用电子天平称量，精确到0.01g。计算产蛋率、平均日产蛋、平均蛋重、畸形蛋比率(每日/每周)，并每日记录数据。观察鹌鹑体态、羽毛，及鹌鹑蛋外形颜色，是否有血、肉斑蛋，统计血、肉斑的蛋数。

3、制作肝脏切片

产蛋性能试验结束后，每组取试验鹌鹑10只，进行屠宰，采取肝脏，把肝脏制成切片，观察肝脏变化。

4、统计方法

用spss软件对数据进行统计分析。

二、结果与分析

1、产蛋率和日均产蛋重

表1各组产蛋率和产蛋重统计表

注：同行数据肩标字母相同表示差异不显著(p>0.05)，肩标字母不同表示差异显著(p<005)。

从上表可见，各组间的产蛋率差异显著(p<0.05)，以保肝组为最高。表明在日粮中添加产蛋鹌鹑用保肝增蛋口服液对产蛋率的效果最好。

2、不同试验组鹌鹑蛋的品质

从表2中看出组鹌鹑所产蛋在蛋重比较，保肝组、益母组显著高于空白组(p<0.05)；哈氏单位比较保肝组显著高于空白组(p<0.05)。硬度、蛋壳厚度、蛋黄指数比较，各组间均未呈现显著差异(p>0.05)。

表2不同试验组鹌鹑蛋的品质

注：同行数据肩标字母相同表示差异不显著(p>0.05)，肩标字母不同表示差异显著(p<0.05)。

3、口服液干预老龄鹌鹑脂肪肝的效果

从图6中可以看出，a：空白组，整个肝小叶的肝细胞内均出现大小不一的脂肪空泡，将肝细胞核挤向周边，肝细胞索排列紊乱；b:保肝组，肝细胞完整，肝行小叶可见少量小的脂肪空泡；c:益母组，肝索清楚，肝小叶排列有序，可见少量脂肪空泡。

上述说明示出并描述了发明的若干优选实施例，但如前所述，应当理解发明并非局限于本文所披露的形式，不应看作是对其他实施例的排除，而可用于各种其他组合、修改和环境，并能够在本文所述发明构想范围内，通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本领域人员所进行的改动和变化不脱离发明的精神和范围，则都应在发明所附权利要求的保护范围内。