使用异丁司特治疗酗酒和抑郁和/或焦虑情绪的制作方法

本申请根据35u.s.c.§119(e)要求2016年5月10日递交的美国临时申请no.62/333,990的优先权，该申请的内容通过引用整体并入本文。

过量摄入酒精是全球主要的健康问题。酗酒被认为是慢性疾病、药物成瘾、对危机的习得反应、潜在的心理或身体障碍的症状或这些因素的组合，并且以尽管存在大量的负面影响、身体影响和心理社会学影响仍反复使用酒精为标志。

治疗酒精使用障碍(alcoholusedisorder，aud)的大多数方法要求酗酒者认识到他/她的疾病并戒除酒精。治疗方案可包括以下的组合：心理康复治疗、有组织的自助小组、基于行为矫正的厌恶疗法、注射维生素或激素以及使用戒除维持药物。

许多被诊断患有aud的患者还表现出抑郁和/或焦虑情绪的症状。

迄今为止，只有少数药剂被食品和药物管理局(fda)批准用于治疗酗酒(alcoholism)，并且这些药剂仅适度有效。虽然诸如阿坎酸(campral)、昂丹司琼(zofran)、纳曲酮(vivitrol)、双硫仑(antabuse)和柠檬酸钙氰胺(calciumcitratecyanamide)的药物被用作治疗酗酒的治疗剂，但这些治疗剂具有与其功效有关的缺点和相关副作用。本文提供了涉及使用异丁司特(ibudilast)治疗被诊断患有酒精使用障碍并表现出抑郁和/或焦虑情绪的症状的患者的方法和组合物。

发明概述

在一个方面，本文提供了治疗被诊断患有酒精使用障碍的患者的方法，该方法包括向所述患者施用治疗有效量的异丁司特或其药学上可接受的盐，其中所述患者还表现出抑郁或焦虑情绪的症状。

在一些实施方式中，患者表现出轻度、中度和/或重度抑郁的症状。在一些实施方式中，患者表现出较低、中度和/或较高的焦虑情绪的症状。

在一些实施方式中，异丁司特可以以约3mg至约200mg的治疗有效日剂量、例如100mg或200mg的治疗有效日剂量经口施用。在本文中使用时，量是指异丁司特的量或异丁司特的药学上可接受的盐的游离碱当量。治疗有效日剂量可以作为单剂量施用，或者可以将其分成每剂50mg的两个剂量或每剂100mg的两个剂量。或者，可将治疗有效日剂量分为三个剂量或四个剂量。

对于某些实施方式，治疗有效日剂量为100mg或更少，并被分成两个剂量。该方法还包括组合疗法，其中一种或多种其他治疗剂可与异丁司特一起施用。适用于治疗aud和抑郁和/或焦虑情绪的其他治疗剂的非限制性实例包括已知在aud中具有效用的精神病药剂和/或治疗剂。

附图简介

图1图示了在维持试验(图左侧)和复发试验(图右侧)阶段期间p大鼠(上图)和had1大鼠(下图)的平均酒精摄入量。*指示与载剂显著不同的各剂量(p<0.05)。灰色条指示载剂值。

图2图示了在试验周期7、8、9期间慢性间歇性酒精(etoh)暴露的小鼠和对照(ctl)小鼠的平均酒精摄入量。为了实现比较目的，水平虚线指示经载剂处理的ctl小鼠在试验周期7期间的平均酒精摄入量。*指示与经载剂处理的小鼠相比更少的酒精摄入量(p<0.05)。#指示高于ctl组的摄入量(p<0.05)。

图3是说明人i期临床研究的流程图。

图4图示了：在i期临床研究过程中，异丁司特而非安慰剂显著降低了基础每日auq渴望。

图5图示了：在人i期临床研究期间，异丁司特不影响提示和压力诱导的auq渴望。

图6图示了：在人i期临床研究期间，异丁司特在提示反应性和压力程序二者期间增加了积极情绪。

图7图示了：在人i期临床研究期间，异丁司特不影响皮质醇对压力源的反应性，但确实导致与安慰剂相比的整体皮质醇水平的适度提高。

图8图示了：异丁司特和抑郁症状学(depressivesymptomatology)水平影响对酒精的“喜欢”和“想要”。

发明详述

除非另有说明，否则本技术的实践采用本领域技术范围内的化学、生物化学和药理学的常规方法。这些技术在文献中有充分说明。参见，例如：a.l.lehninger,biochemistry(worthpublishers,inc.,现行版)；morrison和boyd,organicchemistry(allynandbacon,inc.,现行版)；j.march,advancedorganicchemistry(mcgrawhill,现行版)；remington:thescienceandpracticeofpharmacy,a.gennaro编,第20版；goodman&gilmanthepharmacologicalbasisoftherapeutics,j.griffithhardman,l.l.limbird,a.gilman,第10版。本文引用的所有出版物、专利和专利申请均通过引用整体并入本文。

在本文和所附权利要求中使用时，不使用数量词限定时包括单数和复数，除非上下文另有明确说明。

向患者“施用”药物包括直接施用(包括自己施用)和间接施用(包括处方开具药物的行为)二者。例如，在本文中使用时，指示患者自己施用药物和/或向患者提供药物处方的医师是在向患者施用药物。

“包含”意指所述方法和组合物包括所列举的要素，但不排除其他要素。当用于限定方法和组合物时，“基本上由......组成”意指排除对用于所述目的的组合而言具有任何重要意义的其他要素。“由......组成”意指排除超过痕量要素的其他成分和用于施用本文中使用或提供的组合物的实质方法步骤或用于产生组合物或实现预期结果的方法步骤。由这些过渡术语和语句中的每一个限定的实施方式都在本技术的范围内。

“异丁司特”是指下式的化合物：

“药学上可接受的”是指对于本文提供的方法和组合物(例如，对于体外或体内施用，优选到哺乳动物的施用)安全且无毒。

“药学上可接受的盐”是化合物的药学上可接受的有机或无机的酸或碱盐。代表性的药学上可接受的盐包括例如碱金属盐，碱土金属盐，铵盐，水溶性盐和水不溶性盐，例如乙酸盐，氨芪磺酸盐(amsonate)(4,4-二氨基芪-2,2-二磺酸盐)，苯磺酸盐，苯甲酸盐，碳酸氢盐，硫酸氢盐，酒石酸氢盐，硼酸盐，溴化物，丁酸盐，钙，乙二胺四乙酸钙，樟脑磺酸盐(camsylate)，碳酸盐，氯化物，柠檬酸盐，克拉维酸盐，二盐酸盐，乙二胺四乙酸盐，乙二磺酸盐，丙酸酯十二烷基硫酸盐(estolate)，乙磺酸盐，富马酸盐，葡庚糖酸盐，葡萄糖酸盐，谷氨酸盐，乙醇酰基氨苯胂酸盐(glycollylarsanilate)，六氟磷酸盐，己基间苯二酚盐(hexylresorcinate)，海巴明(hydrabamine)，氢溴酸盐，盐酸盐，羟基萘甲酸盐，碘化物，异硫代硫酸盐，乳酸盐，乳糖醛酸盐，月桂酸盐，苹果酸盐，马来酸盐，扁桃酸盐，甲磺酸盐，甲基溴化物(methylbromide)，甲基硝酸盐，甲基硫酸盐，黏酸盐，萘磺酸盐，硝酸盐，n-甲基葡糖胺铵盐，3-羟基-2-萘甲酸盐，油酸盐，草酸盐，棕榈酸盐，双羟萘酸盐(pamoate)(1,1-亚甲基-双-2-羟基-3-萘甲酸盐，依伯酸盐(einbonate))，泛酸盐，磷酸盐/二磷酸盐，苦味酸盐，聚半乳糖醛酸盐，丙酸盐，对甲苯磺酸盐，水杨酸盐，硬脂酸盐，碱式乙酸盐(subacetate)，琥珀酸盐，硫酸盐，磺基水杨酸盐，苏拉酸盐(suramate)，丹宁酸盐，酒石酸盐，氯茶碱(teoclate)，甲苯磺酸盐，三乙基碘(triethiodide)和戊酸盐。药学上可接受的盐在其结构中可具有多于一个带电原子。在这种情况下，药学上可接受的盐可具有多个抗衡离子。因此，药学上可接受的盐可具有一个或多个带电原子和/或一个或多个抗衡离子。

术语“治疗”是指减弱或减轻，或改善或根除疾病或与疾病相关的一种或多种症状。在某些实施方式中，该术语是指使疾病的扩散或恶化降至最低程度，这是由于向患有这种疾病的患者施用一种或多种预防剂或治疗剂而引起的。出于本文提供的各个方面和实施方式的目的，“治疗”包括但不限于减轻、缓解或改善所治疗的疾病或病症的一种或多种临床表现或副作用，改良一种或多种临床结果，降低疾病程度，延迟或减缓疾病进展，改善、缓解或稳定疾病状态，以及本文所述的其他有益结果。

术语“有效量”是指足以在疾病的治疗或预防中提供治疗或预防益处或足以使与疾病相关的症状延迟或降至最低程度的化合物的量。此外，关于本文所用化合物的治疗有效量是指单独的或与在疾病的治疗或预防中提供治疗益处的其他疗法组合的化合物的量。与本文使用的化合物联合使用时，该术语可包括改良整体治疗、减少或避免疾病的症状或病因、或增强另一治疗剂的治疗功效或与另一治疗剂协同的量。全部治疗效果不一定通过施用一剂(或一次剂量)而出现，可以仅在施用一系列剂量后出现。因此，可以在一次或多次施用中施用有效量。

“受试者”或“患者”可包括动物，例如人、牛、马、绵羊、羔羊、猪、鸡、火鸡、鹌鹑、猫、狗、小鼠、大鼠、兔或豚鼠。动物可以是哺乳动物，例如非灵长类动物和灵长类动物(例如猴子或人)。在一个实施方式中，患者是人。

“酗酒”或“酒精依赖”或“酒精使用障碍”是慢性且常常是进行性的疾病，包括不能控制饮酒，沉浸于酒精，即使引起问题仍继续使用酒精，不得不饮用更多以达到同样的效果(身体依赖)，或在迅速减少或停止饮酒时有戒断症状。酗酒被认为是慢性疾病、药物成瘾、对危机的习得反应、潜在的心理或身体障碍的症状，或这些因素的组合，并且以尽管存在大量的负面身体和心理社会学影响仍反复使用酒精为标志。酗酒的体征和症状包括但不限于：不能限制饮酒量；感到强烈的需要或冲动去饮酒；发展对酒精的耐受性使得需要更多才能感受其效果；单独饮酒或隐瞒饮酒；在不饮酒时经历身体戒断症状，例如恶心、出汗和颤动；忘记对话或承诺，有时被称为“断片(blackout)”；形成在特定时间饮酒的惯例并在这种惯例受到干扰或质疑时变得恼火；在平时的饮酒时间接近时特别是如果不能获得酒精时烦躁不安；在家里、工作场所或车内非寻常的地方保存酒；大口饮酒、点双倍或故意喝醉以感觉良好，或饮酒以感觉“正常”；因饮酒而存在法律问题或人际关系、就业或财务方面的问题；以及对曾经带来快乐的活动和爱好失去兴趣。

下面描述的结果证明了：在盲测条件下，在选择性繁殖的酒精偏好(p)大鼠和大量饮酒(had1)大鼠中，异丁司特减少自发酒精消耗的能力。使用酒精依赖的小鼠模型检测了异丁司特治疗酒精依赖的能力；所述模型涉及慢性间歇性酒精(cie)暴露的重复循环(参见litten等人,addict.biol.,17:513-527,(2012))。由于提高的酒精摄入量是每个上述模型中使用的动物的特征且这种酒精摄入量增加被认为产生自与人类酒精依赖相关的生物学机制，因此上述模型被认为适合于检测异丁司特减少人类酒精摄入的效用。参见egli等人,addict.biol.,10:309-319,(2005)。

使用酒精偏好大鼠和大量饮酒大鼠的结果表明：与对照大鼠相比，异丁司特使两组中大鼠的酒精摄入量减少了约50％。如下文在实施例部分中进一步解释的那样，该试验旨在测量异丁司特在以下四个阶段中减少自发酒精消耗的能力：初始维持试验阶段、酒精饮用恢复阶段、酒精剥夺阶段和酒精再引入(复发)阶段。

如图1中所示，在维持阶段和复发阶段，异丁司特以剂量依赖性方式降低了酒精偏好大鼠和大量饮酒大鼠的酒精摄入量。然而，在没有施用治疗的恢复阶段期间，酒精摄入水平升高。

对于酒精偏好大鼠和大量饮酒大鼠，还观察到了异丁司特剂量与施用治疗的天数之间的相关性。在复发阶段的第一天，异丁司特减少酒精摄入的能力最强；在复发试验阶段的第2-5天，两组大鼠的酒精摄入水平逐渐升高。

异丁司特还减少了酒精依赖的成年雄性c57bl/6j小鼠模型的酒精摄入量。简而言之，将小鼠分成试验组(酒精依赖的)和对照组(非酒精依赖的)。使试验组中的小鼠暴露于慢性间歇性酒精(cie)蒸气(16小时/天×4天)，然后强迫其戒酒72小时。然后允许小鼠获得酒精2小时/天，持续5天的试验期。重复这种每周cie暴露随后进行5天试验期的模式9个周期。以相同的方式处理对照组中的小鼠，但使这些动物暴露于空气而不是酒精蒸气。将来自两组的小鼠进一步分成四个亚组，其中动物接受0mg/kg、3mg/kg、6mg/kg或12mg/kg剂量的异丁司特。

如图2中所示，异丁司特减少了对照组和试验组的酒精摄入量。异丁司特的治疗效果在试验组中更强，并且从周期7开始的重复的检测和药物治疗周期期间治疗效果增加。出乎意料地，在较高剂量下，异丁司特将试验组小鼠的酒精摄入量降低至低于对照组小鼠的酒精摄入水平的水平。

在一个方面，本文提供了治疗被诊断患有酒精使用障碍(aud)的患者的方法，所述方法包括：向所述被诊断患有aud的患者施用治疗有效量的异丁司特或其药学上可接受的盐，其中所述患者还表现出抑郁或焦虑情绪的症状。

在一些实施方式中，被诊断患有aud的患者还表现出轻度抑郁的症状。在一些实施方式中，被诊断患有aud的患者还表现出中度抑郁的症状。在一些实施方式中，被诊断患有aud的患者还表现出重度抑郁的症状。

在一些实施方式中，被诊断患有aud的患者还表现出较高的焦虑情绪的症状。在一些实施方式中，被诊断患有aud的患者还表现出中度焦虑情绪的症状。在一些实施方式中，被诊断患有aud的患者还表现出较低的焦虑情绪的症状。

除了异丁司特之外，aud和抑郁和/或焦虑情绪的治疗可任选地包括一种或多种其他治疗剂。这些药剂可与异丁司特一起施用或单独施用。

在一些实施方式中，其他治疗剂可以是精神病治疗剂。精神病治疗剂的实例包括但不限于锂、舍曲林、西酞普兰、卡马西平、氨磺必利、氯米帕明、加巴喷丁、阿米替林、多塞平、拉莫三嗪、阿莫沙平、依他普仑、左乙拉西坦、阿戈美拉汀、氟西汀、安非他酮、氟伏沙明、奥卡西平、丙咪嗪、托吡酯、氯米帕明、米氮平、丙戊酸钠、地昔帕明、帕罗西汀、双丙戊酸钠、去甲文拉法辛、丙戊酸钠、度洛西汀、依他普仑、吗氯贝胺、去甲替林、苯乙肼、瑞波西汀、噻奈普汀、反苯环丙胺、曲唑酮、文拉法辛、维拉佐酮、沃替西汀或前述一种或多种的任意组合。

在一些实施方式中，其他治疗剂被批准并且已知在aud中具有效用。在一些实施方式中，其他治疗剂可以是阿坎酸、巴氯芬、纳曲酮、喹硫平、双硫仑、昂丹司琼、伐尼克兰、托吡酯、哌唑嗪、舍曲林和左乙拉西坦或前述一种或多种的任意组合。在一些实施方式中，其他治疗剂是纳曲酮。

在另一方面，提供了药物组合物，所述组合物包含治疗有效量的异丁司特或其药学上可接受的前药或其盐和药学上可接受的载体，用于治疗aud以及抑郁或焦虑情绪中的一种或两种。

在一些实施方式中，本文提供的药物组合物包含适于全身施用的制剂。经口剂型包括片剂、锭剂、胶囊、糖浆剂、经口混悬剂、乳剂、颗粒剂和丸剂。替代性制剂包括可借助于合适的稀释剂而重构的冻干剂、粉剂或透皮贴剂。用于重构固体组合物(例如在注射前)的合适稀释剂的实例包括抑菌性注射用水、5％葡萄糖水溶液、磷酸盐缓冲盐水、林格氏(ringer's)溶液、盐水、无菌水、去离子水及其组合。

适于肠胃外施用的制剂包括适于注射的水性和非水性等渗无菌溶液，以及水性和非水性无菌混悬剂。本文提供的肠胃外制剂任选地包含在单位剂量或多剂量密封容器(例如安瓿和小瓶)中，并且可以储存在仅需要于即将使用前添加无菌液体载体(例如注射用水)的冷冻干燥(冻干)条件下。

本文提供的制剂是适于经口或肠胃外递送的缓释制剂。缓释组合物可含有单独的异丁司特或异丁司特与第二种药物的组合。对于这样的组合物，与非缓释制剂相比，每种药物随时间被缓慢释放或吸收。缓释制剂可以使用前药形式的活性剂，延迟释放药物递送系统例如包衣，脂质体，聚合物基质或水凝胶。

药学上可接受的载体材料可以是有机或无机惰性载体材料，例如适合经口施用的载体材料。合适的载体包括水、明胶、阿拉伯树胶、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、滑石、植物油、聚亚烷基二醇、凡士林等，它们被用于制造片剂、胶囊、锭剂等。此外，药物制品还可含有其他药物添加剂，例如调味剂、防腐剂、稳定剂、乳化剂和缓冲剂。根据公认的药物配制实践添加这些剂。

本文提供的组合物递送治疗有效剂量的异丁司特。在这种情况下，异丁司特的治疗有效剂量取决于所治疗病症的严重程度、所治疗患者的病史、接受治疗的人的年龄和体重，通常在约3mg/天至约300mg/天的剂量范围内。

根据患者的需要，主治医师可以改变给药方案。本文提供的治疗方法包括作为单剂量、作为两个日剂量、作为三个日剂量、作为四个日剂量、作为五个日剂量施用异丁司特，持续一天至数天、数周、数月、甚至数年的时间过程。示例性给药时间表包括但不限于如此施用：每天五次、每天四次、每天三次、每天两次、每天一次、每两天一次、每周三次、每周两次、每周一次、每月两次、每月一次等等。

在一些实施方式中，将异丁司特以单一治疗有效剂量每日施用。示例性日剂量包括但不限于以下剂量：约10mg、约20mg、约30mg、约40mg、约50mg、约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg、约110mg、约120mg、约130mg、约140mg、约150mg、约160mg、约170mg、约180mg、约190mg、约200mg、约210mg、约220mg、约230mg、约240mg、约250mg、约260mg、约270mg、约280mg、约290mg或约300mg。

对于某些治疗方案，将异丁司特以两个日剂量施用，其中每个剂量含有约3-150mg异丁司特。例如，每个剂量可含有约5mg异丁司特、约10mg异丁司特、约20mg异丁司特、约30mg异丁司特、约40mg异丁司特、约50mg异丁司特、约60mg异丁司特、约70mg异丁司特、约80mg异丁司特、约90mg异丁司特、约100mg异丁司特、约110mg异丁司特、约120mg异丁司特、约130mg异丁司特、约140mg异丁司特或约150mg异丁司特。

实施例

实施例1.评估异丁司特作为用于减少小鼠自发酒精消耗的治疗剂

实施例1-a

在盲测条件下，在选择性繁殖的酒精偏好(p)大鼠和大量饮酒(had1)大鼠以及酒精依赖性小鼠模型中检查异丁司特(mn-166)减少自发酒精消耗的能力。虽然每种模型的特征在于提高的酒精摄入量，但诸如喹硫平和左乙拉西坦的药物在这些模型中不会选择性地减少酒精饮用。

为了进行研究，将成年雄性p大鼠和had1大鼠随机分配为接受以下四种剂量的异丁司特中的一种-0mg/kg、3mg/kg、6mg/kg或9mg/kg，其中每种剂量分配8只大鼠。将每个给药组平衡至平均2小时/天酒精(15％v/v)摄入量。大鼠同时可获得水，mazola玉米油被用作载剂。

研究被分成四个试验阶段。在维持试验阶段，使用递送3mg/kg、6mg/kg或9mg/kg异丁司特的标准溶液，在每个酒精试验区段前60分钟，向治疗组大鼠皮下注射异丁司特(2ml/kgs.c.)，并在8小时后向大鼠皮下施用相同剂量的异丁司特。而向对照组中的大鼠皮下施用2ml/kgmazola玉米油。该流程连续进行4天。维持试验阶段之后是两周的无药物恢复阶段，在此期间允许大鼠获得酒精并测量大鼠消耗的酒精量。

恢复阶段之后是两周的强制戒酒阶段。在强制戒酒后，通过将酒精再引入大鼠持续连续5天(即复发试验阶段)来检查异丁司特对酒精饮用的影响。在维持试验阶段和复发试验阶段，每只动物接受相同剂量的异丁司特。

图1示出了该研究的结果。因此，观察到：在维持试验阶段期间，异丁司特使p大鼠和had1大鼠二者的酒精摄入量减少了约50％(图1，左图)。单独的双向混合anova分析指示p大鼠[f(3,28)＝12.425,p<0.001]和had1大鼠[f(3,28)＝14.943,p<0.001]的酒精摄入量剂量依赖性减少。相对于注射载剂的对照，4种剂量的异丁司特中的每一种都在4天的维持试验阶段减少了酒精摄入量(p’s≤0.001)。

在5天的复发试验阶段期间，异丁司特也使p大鼠和had1大鼠的酒精摄入量减少了约50％(图1，右图)。单独的双向混合anova分析指示：相对于对照(p<0.05)和had1大鼠[f(3,28)＝25.801,p<0.001]，p大鼠[f(3,28)＝8.483,p<0.001]的酒精摄入量剂量依赖性减少，其中6mg/kg剂量和9mg/kg剂量显著减少了酒精饮用。实际上，发现与对照相比，每次试验剂量的异丁司特都减少酒精摄入量(p<0.05)。

p[f(12,112)＝3.257,p<0.001]和had1[f(12,112)＝2.094,p＝0.023]系列中的显著剂量×天相互作用表明：通过异丁司特的酒精摄入量减少在施用药物的第一天最为强健(数据未显示)。

实施例1-b

在单独的研究中，成年雄性c57bl/6j小鼠被用于评估异丁司特作为治疗酒精依赖的治疗剂。两组小鼠被用于该研究。使用2小时/天自由选择(15％v/v酒精)饮用程序训练第一组中的小鼠饮用酒精(酒精依赖性(etoh)小鼠)，而第二组中的小鼠被提供水并充当对照(酒精非依赖性(ctl))小鼠。酒精依赖性组和酒精非依赖性组均具有相同数量的小鼠(n＝37-38/组)。

然后将酒精依赖性组中的小鼠暴露于慢性间歇性酒精(cie)蒸气16小时/天，持续4天。在72小时强制戒断期后，再次允许酒精依赖性小鼠每天获得酒精2小时，持续5个连续试验日。重复这种连续4天的慢性间歇性酒精蒸汽暴露、随后是强制戒断和5天的酒精获得试验期的模式9个周期。以类似的方式处理对照(ctl)组中的小鼠，但在吸入室中使用空气代替酒精蒸气。

对照小鼠和酒精依赖性小鼠都在试验周期4、5和6期间在每日饮酒区段开始前9小时和1小时接受皮下(s.c.)注射载剂，以使动物适应处理和注射施用。

在试验周期6结束时，将酒精依赖性组和对照组中的小鼠分成四个亚组，其中在试验周期7和8期间，动物接受以下四种剂量的异丁司特中的一种-0mg/kg、3mg/kg、6mg/kg或12mg/kg。每个亚组包含9-10只小鼠(n＝9-10只/组)。在试验周期9期间，增加异丁司特的剂量，其中酒精依赖性小鼠和对照小鼠接受以下四种剂量的异丁司特中的一种-0mg/kg、6mg/kg、12mg/kg或18mg/kg。因此，在试验周期9期间，向先前接受3mg剂量的小鼠施用18mg/kg剂量的异丁司特。

观察到小鼠的酒精摄入量随着连续暴露于慢性间歇性酒精蒸气而增加。然而，对于对照小鼠，在研究的九个试验周期中，酒精摄入量保持相对相同。因此，从试验周期6开始，酒精依赖性小鼠比对照小鼠消耗显著更大量的酒精(组的主效应[f(1,67)＝35.84,p<0.001)，并且这种效应在试验周期7[f(1,67)＝21.80,p<0.001]、试验周期8[f(1,67)＝12.52,p<0.001]和试验周期9[f(1,66)＝32.55,p<0.001]期间持续。

有趣的是，异丁司特降低酒精消耗的治疗效果看起来随着暴露于慢性间歇性酒精蒸气和药物治疗的重复循环而增强。如图2中所示，剂量为12mg/kg的异丁司特在酒精依赖性小鼠中减少了酒精。相对于酒精依赖性组和对照组中接受载剂(0mg异丁司特)的小鼠(p<0.05)，在试验周期8期间，在酒精依赖性小鼠和对照小鼠中，相同剂量的异丁司特更大程度地减少了酒精消耗[f(3,67)＝3.36,p<0.05]。

图2中的数据进一步说明：在试验周期9期间，12mg/kg剂量和18mg/kg剂量的异丁司特在酒精依赖性小鼠中比在对照小鼠中更有效地降低酒精摄入量(组×剂量相互作用：[f(3,66)＝4.50,p<0.01])。成对比较表明：用载剂或6mg异丁司特处理的酒精依赖性小鼠比对照组中各自的对应物消耗显著更多的酒精(p<0.05)。相比之下，对于接受12mg/kg剂量和18mg/kg剂量的异丁司特的酒精依赖性小鼠和对照小鼠，酒精摄入量没有显著差异。这些结果表明：12mg/kg或18mg/kg剂量的异丁司特将酒精依赖性小鼠的酒精摄入量有效降低至对照组中小鼠的酒精摄入水平(图2)。

此外，酒精摄入量减少不是由摄食行为的一般抑制引起的。观察到：异丁司特以不影响对照组小鼠的酒精饮用量的剂量减少酒精依赖性小鼠的酒精饮用量。此外，酒精摄入量减少与并发的水摄入量显著增加有关。虽然异丁司特(特别是9mg/kg剂量的异丁司特)导致p大鼠和had大鼠的24小时食物摄入量暂时减少，但水摄入量并没有受到这种影响，这种效果在5天的试验阶段期间减弱。

实施例2.评价异丁司特治疗酗酒和抑郁和/或焦虑情绪的安全性、耐受性和功效

进行1b期实验室研究以确定异丁司特(50mgbid)在人体中作为潜在的aud治疗剂的安全性、耐受性和初始功效。进行人体研究以试验：(1)异丁司特(50mgbid)不会不利地改变对静脉内施用的酒精的心血管反应；(2)异丁司特(50mgbid)改变对静脉内施用的酒精的主观反应和酒精引起的渴望；和(3)异丁司特(50mgbid)改变压力诱导和提示诱导的渴望。

为了实现每个上述特定目的，进行随机、交叉、双盲、安慰剂对照的研究以确定异丁司特在目前具有aud的个体中的安全性、耐受性和功效。参与者处于21-65岁之间；满足aud的dsm-5诊断标准；报告了在登记前的90天期间，在30天内饮用了至少48个标准的酒；并且是未寻求治疗的酒精依赖性个体，他们同意在医疗机构住院进行研究的一部分。

最初，每个受试者回答了有关饮酒量和饮酒频率的问题。使用时间线跟踪(tlfb)流程通过电话进行初步筛选。在筛选访问期间，要求受试者提供吸烟和药物使用数据。本发明人开发了病历访谈问卷，以筛选禁忌研究参与的身体状况。在研究医师对每位参与者的病史以及实验室试验进行审查之后，参与者进行了体检，其中测量了生命体征、体重和其他参数。收集血样品和尿样品以检测：(a)肝功能、(b)葡萄糖水平、(c)药物的存在和(d)血液化学。女性参与者同意在每次静脉内酒精施用之前进行尿妊娠筛查。图3中的流程图说明了研究流程。

用异丁司特(50mgbid)和安慰剂(pbo)处理24名患有aud的未寻求治疗的个体。参与者完成了两种酒精iv激发，一种是在服用ibud6天后，一种是在服用匹配的pbo6天后，研究药物条件之间有5-10天的清除期。参与者的特征如下表1所示。异丁司特以含有延迟释放的10mg制剂的胶囊形式获得。还获得了匹配的安慰剂胶囊。每位参与者在每种用药情况的第1-5天期间访问了临床和转化研究中心(ctrc)，在此期间，他们每天早上访问研究护士，在直接观察下服用早晨研究用药并将晚间研究用药带回家。参与者在第6天留下过夜并在第7天出院。在每日访问至ctrc期间，研究护士收集生命体征，以开放式方式询问副作用并使用治疗紧急事件系统评估(saftee)。

该研究包括治疗组和安慰剂组，每个参与者都完成了每日评估问卷，以给出情绪变化、戒断效应、酒精渴望，并给出与其他副作用有关的问题。因此，用异丁司特50mg(5×10mg胶囊)每日两次(bid)或安慰剂(pbo)处理未寻求治疗的酒精依赖性个体。然而，为了使厌恶感降至最低程度，试验组中的每个参与者在研究的第1天和第2天每天两次(bid)接受20mg异丁司特。在第3-6天，将剂量增加至两个单独剂量，每剂50mg。在达到稳定目标剂量的异丁司特(或安慰剂)后，参与者在第5天(pm)完成了压力暴露范例，在第6天(am)完成了酒精提示暴露，并在第6天(pm)完成了静脉内酒精激发。在静脉内酒精激发之后，对参与者进行监测24小时，然后出院。在5-10天的清除期之后，研究参与者再次进入ctrc，在那里他们接受了相反的治疗(ibud或pbo)用于研究的第二部分。参见图3。

a.静脉内酒精施用(iv-a)

在研究医师的监督下使用6％酒精iv输注由研究护士进行输注。酒精输注列线图提供了基于参与者的性别和体重来获得输注速率的公式。因此，男性参与者以通过以下公式确定的速率输注：0.166-ml/分钟×重量(以kg计)，而女性参与者的输注速率计算为0.126-ml/分钟×重量(以kg计)。

在输注期间每3-5分钟监测呼吸酒精含量(brac)，直至获得.02g.dl、.04g.dl、.06g.dl和.08g.dl的目标brac，然后将输注速率降低至原始速率的一半，以在试验阶段期间维持稳定的brac水平。在静脉内酒精激发之前评估以下参数，并在每个目标brac时再次评估以下参数：(1)双相酒精效果量表(baes)，以获得可靠且有效的酒精刺激和镇静作用的量度；(2)酒精冲动问卷(auq)-一个8项量表，其中受试者评价他们目前对酒精的渴望，这适合检查饮酒的冲动水平；(3)酒精评级量表，其捕获“喜欢”和“想要”酒精；(4)情绪状态量表(poms；mcnair1971)，其被用于记录积极和消极的情绪状态；和(5)在基线和每个目标水平的brac时的心率和血压水平测量值。

b.提示反应性评估(cr)

本研究还评估了在每种药物剂量时参与者对酒精提示的反应性，使得参与者充当他们自己的对照。重复提示评估可以是有用的，因为研究表明并非所有酒精依赖性患者都具有提示反应性。cr评估遵循已良好建立的程序，参与者在适应了心理生理监测仪时接受了有关评估的标准化指示。

cr评估区段开始于3分钟的放松期，其中参与者被要求安静地坐着并且什么都不做。然后参与者拿着一杯水并闻3分钟作为标准程序，以控制简单暴露于任何可饮用液体的效果，然后是第二个3分钟的放松期。接下来，每个参与者拿着一杯他们喜欢的酒精饮料并闻三分钟。在每个试次期间，要求参与者在听到音调时嗅饮料持续连续5秒。在每个3分钟的时间段期间给予十三次音调。改变音调之间的间隔以确保每个参与者接收相同的嗅觉暴露。参与者嗅水或所选酒精饮料的顺序没有被平衡，因为已知会发生遗留效应并且会影响cr的确定。除了饮料的性质之外，水试次提供了控制刺激和运动的各个方面的基线。允许参与者在提示反应性评估之前不久和之后立即进行吸烟休息。

在每个3分钟酒精暴露后，每个参与者使用11点likert量表(例如，“根本没有”到“非常强烈的冲动”)评价他/她饮酒的冲动。使用dynamap成人生命体征监测仪连续监测心率(每分钟心跳次数；bpm)和血压(收缩压、舒张压和平均动脉压[map])，并在每个3分钟试次中取平均值。异丁司特的治疗效果是基于该化合物减弱或消除提示引起的酒精消耗渴望的能力来衡量的。

c.压力反应性评估(sr)

在进入crtc时(第1天)收集到的个人信息被用于生成中性条件和压力条件的个性化脚本。要求参与者确定最近的压力体验并在0-10的likert量表上进行评定，其中评级为10被认为是压力最大的体验。仅评级≥8的压力事件被用于脚本开发中。还收集了与压力事件和中性事件相关的身体症状数据用于脚本开发。

在研究期间，每次暴露由5分钟的磁带记录的脚本组成，所述脚本叙述参与者生活中最近的压力(或中性)事件，包括认知感受和身体感受。压力条件和中性条件是随机的、平衡的，并且条件之间的两小时间隔避免了遗留效应。

对于压力条件和中性条件，在基线时和意象后给予情绪、饮酒冲动和生理反应性的以下测量：(1)情绪状态量表简版(poms)收集了关于(a)积极情绪和消极情绪的数据；(2)酒精冲动问卷(auq)测量了当前(即，压力意象后)主观的酒精渴望水平；(3)通过收集唾液样品评估了皮质醇水平，并使用dynamap成人生命体征监测仪测量了心率和血压。异丁司特的治疗效果是基于该化合物减弱或消除压力引起的酒精消耗渴望的能力来衡量的。

结果

安全性

在研究期间，异丁司特具有良好的耐受性和安全性。在研究过程中，没有受试者由于不良事件相关原因而退出研究，并且没有异丁司特剂量减少。在24种潜在的不良药物作用中，在异丁司特相比于安慰剂方案期间仅报告头痛的频率显著较高(p<0.05)；具体是4个实例相比于0个实例)。在酒精消耗的情况下，在brac期间，异丁司特未影响心率或血压作为主效应或作为酒精影响的调节剂(p≥0.35)。

每日渴望

在研究过程中，异丁司特而非安慰剂显著降低了基础每日酒精渴求(auq)(ρ<0.05，参见图4)。

酒精提示和压力反应性

异丁司特不影响提示和压力诱导的auq渴望。然而，在提示反应性(ρ＝0.07，参见图5)和压力程序(ρ<0.05，图6)期间，异丁司特而非安慰剂增加了积极情绪。此外，异丁司特不影响皮质醇对压力源的反应性，但异丁司特确实导致与安慰剂相比皮质醇水平的适度提高(ρ＝0.07，参见图7)。

酒精输注

在输注期间，异丁司特并未影响对酒精的主观反应。

这些结果表明：异丁司特可用于通过增加积极情绪来治疗aud，这可以改善在长时间戒断期间经常观察到的情绪障碍。这些发现也与对情绪障碍中神经炎症的假设作用一致。

事后分析

结果表明：异丁司特在暴露于酒精相关提示和压力意像期间产生持续的情绪提升。这并不奇怪因为aud和抑郁经常共存。此外，心理神经免疫学报告显示了促炎细胞因子与消极情绪和抑郁之间的联系。有可能mn-166通过其对促炎细胞因子的机制作用可增强情绪，从而改变对酒精的主观反应。

为了探究mn-166、情绪和对酒精的主观反应之间的可能关系，进行了进一步的分析。在所有参与者中都探讨了以下变量：

1.收集抑郁症状学的基线分数(通过beck抑郁量表(bdi)测量)。

2.在具有较高的bdi分数(较多抑郁症状学)和焦虑的受试者以及具有较低的bdi分数(较少抑郁症状学)和焦虑的受试者之间比较对酒精激发的反应(例如酒精诱导的刺激、积极情感、消极情感、“喜欢”和“想要”)。

研究结果显示：相较于暴露于安慰剂的bdi分数较高的受试者和bdi分数较低的受试者，暴露于mn-166的bdi分数较高的受试者对酒精激发显示出较少积极反应和较多消极反应，包括酒精诱导的刺激、积极情感和消极情感。这些结果总结在下表2中，其表明mn-166通过其对促炎细胞因子的作用，使患有并存疾病(诸如aud和抑郁)的个体受益。

表2

¹测量的反应包括：酒精诱导的刺激、积极情感、消极情感、“喜欢”和“想要”

评估了用药顺序(先异丁司特与先安慰剂)的影响，发现用药顺序没有改变对酒精相关测量以及压力暴露试验和提示暴露试验的前后用药影响的结果。另外，在第一用药和第二用药的第1天比较情绪和渴望得分。确定了无论用药顺序如何，都未发现这些有显著差异。

说明性实施方式

1.一种治疗被诊断患有酒精使用障碍(aud)的患者的方法，所述方法包括：向被诊断患有aud的患者施用治疗有效量的异丁司特或其药学上可接受的盐，其中所述患者还表现出抑郁或焦虑(dysphoric)情绪的症状。

2.实施方式1所述的方法，其中所述症状指示所述患者患有轻度抑郁。

3.实施方式1或2所述的方法，其中所述症状指示所述患者患有中度抑郁。

4.实施方式1-3之任一所述的方法，其中所述症状指示所述患者患有重度抑郁。

5.实施方式1-4之任一所述的方法，其中所述症状指示所述患者经受较重的焦虑情绪。

6.实施方式1-5之任一所述的方法，其中所述症状指示所述患者经受中度焦虑情绪。

7.实施方式1-6之任一所述的方法，其中所述症状指示所述患者经受较轻的焦虑情绪。

8.实施方式1-7之任一所述的方法，其中所述异丁司特或其药学上可接受的盐经口施用。

9.实施方式1-8之任一所述的方法，其中所述异丁司特或其药学上可接受的盐每天施用至少一次。

10.实施方式1-9之任一所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐的所述治疗有效量为每天约3mg至约200mg。

11.实施方式1-10之任一所述的方法，其中所述治疗有效量作为单剂量施用，或分成两个、三个或四个剂量施用。

12.实施方式1-11之任一所述的方法，其中所述治疗有效量为约100mg/天或更少，并且被分成两个或更多个剂量。

13.实施方式1-12之任一所述的方法，其中所述治疗有效量为100mg/天，并且被分成两个或更多个剂量。

14.实施方式1-11之任一所述的方法，其中所述治疗有效量为约200mg/天或更少，并且被分成两个或更多个剂量。

15.实施方式1-11和14之任一所述的方法，其中所述治疗有效量为200mg/天，并且被分成两个或更多个剂量。

16.实施方式1-15之任一所述的方法，其中所述异丁司特或其药学上可接受的盐作为组合疗法的一部分被施用，所述组合疗法包括一种或多种其他治疗剂。

17.实施方式16所述的方法，其中所述一种或多种其他治疗剂是精神病治疗剂。

18.实施方式17所述的方法，其中所述精神病治疗剂是锂、舍曲林、西酞普兰、卡马西平、氨磺必利、氯米帕明、加巴喷丁、阿米替林、多塞平、拉莫三嗪、阿莫沙平、依他普仑、左乙拉西坦、阿戈美拉汀、氟西汀、安非他酮、氟伏沙明、奥卡西平、丙咪嗪、托吡酯、氯米帕明、米氮平、丙戊酸钠、地昔帕明、帕罗西汀、双丙戊酸钠、去甲文拉法辛、丙戊酸钠、度洛西汀、依他普仑、吗氯贝胺、去甲替林、苯乙肼、瑞波西汀、噻奈普汀、反苯环丙胺、曲唑酮、文拉法辛、维拉佐酮、沃替西汀或前述一种或多种的任意组合。

19.实施方式16所述的方法，其中所述一种或多种其他治疗剂被批准并且已知在aud中具有效用。

20.实施方式19所述的方法，其中所述被批准并且已知在aud中具有效用的治疗剂是阿坎酸、巴氯芬、纳曲酮、喹硫平、双硫仑、昂丹司琼、伐尼克兰、托吡酯、哌唑嗪、舍曲林和左乙拉西坦。

21.实施方式19或20所述的方法，其中被批准并且已知在aud中具有效用的治疗剂是纳曲酮。

虽然已经说明和描述了某些实施方式，但是应该理解，可以根据本领域的普通技术在其中进行改变和修改，而不脱离如在所附权利要求中限定的更广泛方面的技术。

本文说明性描述的实施方式可以在缺少本文未具体公开的任何一种或多种要素、一种或多种限制的情况下适当地实施。因此，例如，术语“包括”、“包含”等应当被广泛地理解而不受限制。另外，本文使用的术语和表述被用作描述性而非限制性术语，并且无意使用这些术语和表述来排除所示和所述特征的任何等价物或其部分，但应当认识到可以在要求保护的技术的范围内进行各种修改。

本公开不限于本申请中描述的特定实施方式。在不脱离本发明的精神和范围的情况下，可以进行许多修改和变化，这对本领域技术人员来说是明显的。除了本文列举的方法和组合物之外，本公开范围内的功能等价的方法和组合物对于本领域技术人员而言从前面的描述是明显的。这些修改和变化旨在落入所附权利要求的范围内。本公开仅受所附权利要求的条款以及这些权利要求有权享有的等价物的完整范围的限制。应理解，本公开不限于特定的方法、药剂、化合物、组合物或生物系统，其当然可以变化。还应理解，本文使用的术语仅用于描述特定实施方式的目的，而不是限制性的。

此外，在本公开的特征或方面是以马库什组的方式描述的情况下，本领域技术人员应认识到，本公开也因此以马库什组的任何单独成员或多个成员的亚组的方式来描述。

本领域技术人员应理解，出于任何和所有目的，特别是在提供书面描述方面，本文公开的所有范围还涵盖任何和所有可能的子范围及其子范围的组合。任何列出的范围可被容易地认为是充分描述并使得同一范围能够被分解成至少相等的两份、三份、四份、五份、十份等。作为非限制性实例，本文所讨论的每个范围可被容易地分解成下三分之一、中三分之一和上三分之一等。本领域技术人员还应理解，所有语言(例如“至多”、“至少”、“大于”、“小于”等)均包括所述的数字并涉及可随后如上所述分解成子范围的范围。最后，本领域技术人员应理解，范围包括每个单独的成员。

本说明书中提及的所有出版物、专利申请、已授权专利和其他文献均通过引用并入本文，如同每个单独的出版物、专利申请、已授权专利或其他文献被具体和单独地指出通过引用整体并入一样。通过引用并入的文本中包含的定义在与本公开中的定义相矛盾的情况下被排除。

所附权利要求中阐述了另一些实施方式。