一种具有抗抑郁功效的中药提取物及其制备方法和应用与流程

本发明属于中药提取领域，具体涉及一种具有抗抑郁功效的中药提取物及其制备方法和应用。

背景技术：

目前，抑郁症的治疗主要有三种方式：药物治疗、心理治疗和物理治疗，但仍以化学药物治疗为主。上市的抗抑郁化药种类有限，机制单一，有效率不高，尚未超过70％，并且副作用较大，如便秘、性欲降低等，在治疗抑郁症的同时也威胁着患者身体其他功能的健康。临床上在选用西药去治疗抑郁症时候要综合考虑治疗有效率、作用机制、选用剂量、副作用、药物相互作用等因素，并且对于一些复杂的抑郁症如双相多相抑郁、一种或多种疾病和抑郁的共病得不到理想的改善。

正是由于现有西药的缺陷和市场需求的紧迫性，国内外学者将目光转移到中草药提取物。如何从中草药中开发在具有明确抗抑郁药效基础上，或有着自己独特药效特点，或有着新型的抗抑郁作用机制，或针对特殊病情，或有着新的适应症，或具备副作用相对较小、多靶点、多功效等功效特点的新型抗抑郁药物，是未来抗抑郁药物研发的大趋势。

逍遥散是疏肝解郁的经典中药名方。前期本课题组两项授权专利(201010110283.7和201110084715.6)采用乙酸乙酯和石油醚提取表明逍遥散具有明确的抗抑郁作用，但一方面工业化生产具有诸多安全隐患，工艺可控性较差；一方面逍遥散原方组方药材较多，服用量相对较大，质量不易控制。因此本发明是在对逍遥散的研究基础上，采用组方更加简单、工艺更适合中试生产的醇水提取法制备一种中药提取物，并对其抗抑郁功效特点进行了研究。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种组方简单、工艺科学合理，具有显著改善抑郁症伴发的多项兼症的药效特点中药提取物及其制备工艺和应用。

本发明提供的一种具有抗抑郁功效的中药提取物，其特征在于中药组分配比和制备方法：

所述中药组分按质量份数计为：柴胡20～60、当归20～60、麸炒白术20～60、白芍20～60、薄荷8～20、炙甘草8～20；

所述制备方法，包括如下步骤：1)在所述组分药材中加入6-10倍重量的60～90％乙醇提取2次，每次1-3h，滤过，合并滤液，浓缩得醇提清膏；2)药渣加入6-10倍重量的水提取2次，每次1-3h，滤过，合并滤液，浓缩得水提清膏，在水提清膏中加入乙醇使含醇量达60～80％，静置24h，取上清液，浓缩至清膏；3)将清膏与醇提清膏合并，混匀后浓缩至稠膏，微波减压干燥，粉碎过80目筛，即得中药提取物。

所述组分按质量份数计优选为：柴胡30、当归30、麸炒白术30、白芍30、薄荷10、炙甘草15。

步骤1)中所述加入乙醇的重量为药材重量的8倍，乙醇浓度为75％，每次提取时间为2h。

步骤2)中所述加入水的重量为药材重量的8倍，每次提取时间为2h。

步骤3)中水提清膏加入乙醇后的含醇量为70％。

上述醇提清膏、水提清膏、清膏的密度控制在1.08～1.10，稠膏密度控制在1.24～1.26。

如上所述的中药提取物经实验证明具有明显的抗抑郁功效，其可在制备治疗抑郁症药物中应用。

本发明提供的一种中药颗粒剂，含有如上所述的中药提取物和辅料等。

本发明具有如下优点：

1、本发明提供组方相比逍遥散更加简单、服用剂量更少、质量更加可控，药理活性达到或超过上市抗抑郁西药文拉法辛、抗抑郁中药舒肝解郁及逍遥散。

2、采用工艺更加合理安全、更易于中试工业化生产的醇水提取法，最大程度、更加全面地提取有效成分，去除杂质，降低出膏率以减轻了患者服用剂量。

3、与临床常用抗抑郁西药文拉法辛相比，抗抑郁作用相当，且：①无文拉法辛引起的便秘、胃肠动力下降和性欲降低副作用；②改善cums抑郁大鼠伴发的学习记忆能力下降和焦虑情绪。

附图说明

图1本发明中药提取物的制备工艺流程图

具体实施方式

为了对本发明进行更进一步的详细描述，给出以下具体实施例，但仅作为阐明本发明，而不是为了限制本发明的保护范围。

实施例1

按质量份数称取柴胡30份、当归30份、麸炒白术30份、白芍30份、薄荷10份、炙甘草15份，加入8倍重量的75％乙醇提取2次，每次2h，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.09的醇提清膏；药渣加入8倍重量的水提取2次，每次2h，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.09的水提清膏；在水提清膏中加入乙醇使含醇量达70％，静置24h(4℃)，取上清液浓缩至相对密度为1.09的清膏，与醇提清膏合并，混匀后浓缩至相对密度为1.25的稠膏，微波减压干燥，得到干浸膏，粉碎，过80目筛，即得。

实施例2

按质量份数称取柴胡30份、当归30份、麸炒白术20份、白芍20份、薄荷10份、炙甘草15份，加入8倍重量的60％乙醇提取2次，每次2h，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.08的醇提清膏；药渣加入8倍重量的水提取2次，每次2h，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.08的水提清膏；在水提清膏中加入乙醇使含醇量达60％，静置24h(4℃)，取上清液浓缩至相对密度为1.08的清膏，与醇提清膏合并，混匀后浓缩至相对密度为1.24的稠膏，微波减压干燥，得到干浸膏，粉碎，过80目筛，即得。

实施例3

按质量份数称取柴胡30份、当归30份、麸炒白术30份、白芍20份、薄荷10份、炙甘草15份，加入8倍重量的90％乙醇提取2次，每次2h，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.10的醇提清膏；药渣加入8倍重量的水提取2次，每次2h，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.10的水提清膏；在水提清膏中加入乙醇使含醇量达80％，静置24h(4℃)，取上清液浓缩至相对密度为1.10的清膏，与醇提清膏合并，混匀后浓缩至相对密度为1.26的稠膏，微波减压干燥，得到干浸膏，粉碎，过80目筛，即得。

实施例4抗抑郁药效实验

4.1实验动物

sd成年雄性健康大鼠(北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号：scxk(京)2014-0012)

4.2实验药品与药材

盐酸文拉法辛(成都康弘药业集团股份有限公司，规格：25mg/粒，批号：国药准字h20070269)

舒肝解郁胶囊(成都康弘药业集团股份有限公司，规格：0.36g/粒，批号：国药准字z20080580)

实施例1制备的中药提取物，其中的柴胡、当归、麸炒白术、白芍、炙甘草和薄荷均购于山西省华阳药业有限公司，经山西大学中医药现代研究中心主任秦雪梅教授鉴定均为正品。

4.3动物分组及给药

大鼠适应性饲养1周，期间进行糖水训练，根据体重将大鼠随机分为7组，每组10只。

①空白对照组(k)

②模型组对照组(m)

③文拉法辛组(35mg/kg)(y)

④舒肝解郁组(150mg/kg)(s)

⑤中药提取物高剂量组(16.6g生药/kg)(g)

⑥中药提取物中剂量组(8.3g生药/kg)(z)

⑦中药提取物低剂量组(4.2g生药/kg)(d)

全部药物均用蒸馏水溶解，各组动物依据体重每天灌胃1次(1ml/100g)。

4.4模型建立

刺激因子包括禁食、禁水、4℃冰水游泳、50℃热刺激、夹尾、间歇足底电击、束缚、超声刺激、昼夜颠倒。每日随机给予1种刺激，每种刺激累计使用2-3次。除空白对照组外，其余各组均单笼饲养并实施造模程序，造模时间为28d。造模开始后同时灌胃给药，药物组给予相应浓度药液，模型组及空白对照组给予等体积蒸馏水。

4.5检测指标

体重：在实验第0、7、14、21、28d称量大鼠体重。

糖水偏爱率：造模结束后测定大鼠l％糖水消耗量，计算糖水偏爱率。

旷场实验：大鼠放入旷场箱5min，记录后4min内大鼠的穿格次数和直立次数。

4.6实验结果

中药提取物对cums大鼠体重、糖水偏爱率和旷场实验等指标的影响由表1、2、3可知：中药提取物可以改善由cums造模应激引起的大鼠体重增长缓慢、在旷场实验中活动力降低和对蔗糖甜度的偏好下降，一定程度上表明中药提取物具有良好的抗抑郁作用，其药理活性达到或超过上市抗抑郁西药文拉法辛和抗抑郁中药舒肝解郁。

表1中药提取物对cums大鼠体重的影响

与空白组相比#p<0.05,##p<0.01，与模型组相比*p<0.05,**p<0.01

表2中药提取物对cums大鼠糖水偏爱率的影响

与空白组相比#p<0.05,##p<0.01，与模型组相比*p<0.05,**p<0.01

表3中药提取物对cums大鼠旷场实验的影响

与空白组相比#p<0.05,##p<0.01，与模型组相比*p<0.05,**p<0.01

实施例5抗抑郁药效特点—改善cums抑郁大鼠胃肠功能研究

5.1实验动物

同实施例4。

5.2实验药品与药材

同实施例4。

5.3动物分组及给药

同实施例4。

5.4模型建立

同实施例4。

5.5检测指标

粪便：造模结束后，将实验各组大鼠放于代谢笼中，用塑料烧杯收集12h大鼠粪便，清点粪便数量，称重(湿重)，用烘箱洪干(70℃，3h)再称重(干重)。计算粪便含水量＝(湿重干重)/湿重×100％。

小肠推进和胃排空实验：处死前一天，禁食不禁水12h。次日在处死大鼠30min前根据1ml/100g剂量灌胃自制半固体营养糊，30min后处死大鼠，迅速解剖取出全胃，结扎胃贲门、胃幽门和回盲部，用滤纸擦干后称重得到胃全重(g)和小肠。用手术剪沿着胃壁的大弯剪开，用蒸馏水清洗胃内容物，滤纸擦干后称重得到胃净重(g)。

胃内残留率＝(胃全重-胃净重)/自制半固体营养糊重量×100％

小肠推进率＝小肠全长/自制半固体糊推进处的距离×100％

5.6实验结果

表4显示：cums应激使得大鼠的排便数量增加、粪便含水量下降。相比文拉法辛不能改善这一现象并呈现负调节情况，经中药提取物给药后可以改善上述指标的异常，表明中药提取物在改善cums大鼠抑郁样症状的同时，无引起粪便异常副作用。表5和6显示：造模应激减缓了大鼠的小肠蠕动和胃排空功能，文拉法辛相比模型组的小肠推进率和胃内餐路率有下降趋势，提示文拉法辛可能有着降低胃肠功能副作用，中药提取物可以在治疗抑郁症的同时改善大鼠胃肠功能。

表4中药提取物对cums大鼠粪便的影响

与空白组相比#p<0.05,##p<0.01，与模型组相比*p<0.05,**p<0.01

表5中药提取物对cums大鼠小肠推进率的影响

与空白组相比#p<0.05,##p<0.01，与模型组相比*p<0.05,**p<0.01

表6中药提取物对cums大鼠胃排空率的影响

与空白组相比#p<0.05,##p<0.01，与模型组相比*p<0.05,**p<0.01

实施例6抗抑郁药效特点—改善cums抑郁大鼠性功能研究

6.1实验动物

同实施例4。

6.2实验药品与药材

同实施例4。

6.3动物分组及给药

同实施例4。

6.4模型建立

同实施例4。

6.5检测指标

实验前48h，雌鼠皮下注射雌二醇10μg(溶于0.lml红花油)；实验前2h，皮下注射黄体酮10μg。将cums雄鼠和动情期雌鼠合笼，夜间7-9时，观察30min内雄鼠的性行为，记录爬背潜伏期、爬背次数。

6.6实验结果

交配实验中雄鼠的爬背行为可以一定程度反映其性欲的大小。表7显示：cums应激使大鼠的爬背潜伏期延长、爬背次数减少，一定程度上反应大鼠性欲的唤醒收到造模应激的影响。相比文拉法辛对此指标呈现负调节，经中药提取物给药后可以改善上述指标的异常，表明中药提取物在改善cums大鼠抑郁样症状的同时，无引起性欲降低副作用。

表7中药提取物对cums大鼠性欲的影响

与空白组相比#p<0.05,##p<0.01，与模型组相比*p<0.05,**p<0.01

实施例7抗抑郁药效特点—改善cums抑郁大鼠伴发学习记忆能力下降和焦虑情绪研究

7.1实验动物

同实施例4。

7.2实验药品与药材

同实施例4。

7.3动物分组及给药

同实施例4。

7.4模型建立

同实施例4。

7.5检测指标

造模结束后进行morris水迷宫和高架十字迷宫实验，选取水迷宫中的定位航行期空间搜索潜伏期和穿越平台次数作为对cums大鼠认知功能的考察；选取高架十字迷宫中的进入开放臂次数比例和进入开臂时间比例作为对cums大鼠焦虑情绪的考察。

7.6实验结果

表8显示：cums抑郁大鼠在空间探索期中穿越平台次数和目标象限路程减少，提示cums抑郁大鼠会伴有认知障碍的发生。相比文拉法辛不能调节这一现象，中药提取物给药后可以改善这一症状。

表8中药提取物对cums大鼠学习记忆的影响

与空白组相比#p<0.05,##p<0.01，与模型组相比*p<0.05,**p<0.01

cums抑郁大鼠在高架十字迷宫中进入开壁时间比例和进入开壁次数比例减少，提示cums抑郁大鼠会伴有焦虑情绪的产生。文拉法辛和中药提取物给药后均可以改善这一症状。

表9中药提取物对cums大鼠焦虑情绪的影响

与空白组相比#p<0.05,##p<0.01，与模型组相比*p<0.05,**p<0.01

实施例8无糖颗粒剂

中药提取物粉末与预胶化淀粉以5:2的比例混合，采用干法制粒，制成颗粒，制粒时干法制粒机的参数调节为：挤压速度6.0rpm；送料速度7.0rpm；制粒速度10.0rpm；侧封压力13mpa；挤压压力27mpa。制粒时所用筛网的目数为10目，整粒筛网为40目。颗粒经过整粒，经复合膜包装后即得成品。

实施例9含糖颗粒剂

中药提取物粉末与蔗糖及糊精以2:0.5:0.5的比例混合，以75％乙醇为润湿剂，采用摇摆式制粒机，过10目不锈钢筛网制粒，干燥，过40目筛网整粒，采用复合膜包装即得。