用于治疗结肠癌的药物及制备方法和应用与流程

文档序号:16339320发布日期:2018-12-19 06:51阅读:181来源:国知局
本发明涉及医药
技术领域
。更具体地说,本发明涉及一种用于治疗结肠癌的药物及其制备方法。
背景技术
结肠癌(carcinomaofcolon)是常见的发生于结肠部位的消化道恶性肿瘤,发病率一直高居胃肠道肿瘤的前几名。据相关研究数据显示,我国的结肠癌发病率和死亡率呈逐年上升趋势,尤其在一些大型城市发展更为明显。近年来的研究表明,中药已经被广泛应用于治疗结肠癌,尤其是对于不能耐受手术者,且伴有其他重要脏器疾病等多发性症状的中晚期病患,经常采用扶阳固本、活血化瘀、清热解毒等医疗方法,而且医疗效果明显,在减少疼痛、降低毒副作用以及提高患者的生存期质量等方面具有较为独特的优势。牵牛子(semenpharbitidis),为旋花科牵牛属,一年生蔓性缠绕草本花卉。具有泻水通便、消痰涤饮、清热解毒等功效。技术实现要素:本发明的一个目的是解决至少上述问题,并提供至少后面将说明的优点。本发明的另一个目的是提供一种用于治疗结肠癌的药物,实验表明该药物对结肠癌ht-29细胞具有很高的抑制率,可用于治疗结肠癌。为了实现本发明的这些目的和其它优点,提供了一种用于治疗结肠癌的药物,包括牵牛子提取物,所述牵牛子提取物的制备包括以下步骤:s1、将牵牛子置于沸水中提取,得到水提液;s2、将s1中的水提液分离提纯后即得牵牛子提取物。优选地是,所述的用于治疗结肠癌的药物,s1中使用沸水提取2次,每次2~3h,合并2次的提取液即得水提液;s2中水提液分离提纯具体包括:将水提液在80℃的温度下浓缩至比重为1.01,然后采用d101大孔树脂洗脱,洗脱剂依次为体积分数为20%、60%的乙醇,收集60%的乙醇洗脱液,除去乙醇,浓缩至比重为1.08,即得牵牛子提取物。优选地是,所述的用于治疗结肠癌的药物,还包括动植物提取物,所述动植物提取物的制备方法包括以下步骤:a1、将重量份为3~6份的肉苁蓉、2~4份的北五味子、1~4份的黄精、2~4份的马鞭草、1~4份的柘木、1~3份的当归、1~3份的没药、1~3份的茯苓、2~4份的白芷、1~3份的败酱草、2~4份的紫草、2~5份的丹参、1~4份的红花、1~4份的肉桂粉碎得到第一混料;a2、将重量份为1~3份的蟾蜍蛆虫,1~3份的穿山甲片粉碎后,加入重量份为5~10份的石油醚中浸泡5~10h后,除去石油醚,得到第二混料;a3、将第一混料、第二混料置于密闭容器中,然后向密闭容器中通入饱和水蒸气以使密闭容器中的压力为0.7~1.4mpa,维持30~40min后,然后于4~7s内使密闭容器中压力降低至3~5pa,保持4~6min后,取出得到第三混料;a4、向第三混料中加入重量份为25~30份的水,于温度为85~95℃下煎煮2~3h,过滤,得到滤液和第一滤渣,备用;然后,将第一滤渣置于体积分数为80~90%的乙醇溶液中浸泡5~10h,过滤,得到浸泡液和第二滤渣,然后将第二滤渣置于渗漉装置中,使用浸泡液进行渗漉,控制渗漉流速为250~400ml/h,得到渗漉液,然后将渗漉液与滤液混合,真空浓缩干燥后即得动植物提取物;其中,动植物提取物与牵牛子提取物的质量比为1~1.2:5。优选地是,所述的用于治疗结肠癌的药物的制备方法,包括以下步骤:b1、取相同质量的三份稀释剂,将其中的第一份稀释剂与牵牛子提取物混合均匀后碾磨成粉末,制得第一混合粉末;b2、将动植物提取物与第二份稀释剂混合均匀后碾磨成粉末,制得第二混合粉末;b3、将第三份稀释剂、第一混合粉末、第二份混合粉末与粘合剂混合均匀,制得第三混合粉末,再在第三混合粉末中加入润滑剂后混合均匀,制得第四混合粉末,备用;b4、将b3中制得的第四混合粉末进行压片,即得所述用于治疗结肠癌的药物;其中,每份稀释剂与牵牛子提取物的质量比为0.6~1:1,粘合剂与牵牛子提取物的质量比为0.06~0.08:1,润滑剂与牵牛子提取物的质量比为0.03~0.05:1。优选的是,所述的用于治疗结肠癌的药物中,所述稀释剂由可压性淀粉和微晶纤维素按质量比为3:1混合而成。优选的是,所述的用于治疗结肠癌的药物中,所述粘合剂由羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素和聚维酮按质量比为2:1:1混合而成。优选的是,所述的用于治疗结肠癌的药物中,所述润滑剂由硬脂酸镁和微粉硅胶按质量比为3:2混合而成。本发明至少包括以下有益效果:1、本发明的用于治疗结肠癌的药物,实验表明该药物对结肠癌ht-29细胞具有很高的抑制率,可用于治疗结肠癌。2、本发明的用于治疗结肠癌的药物,还包括动植物提取物,该动植物提取物中的蟾蜍蛆虫、肉苁蓉、黄精等对结肠癌细胞具有抑制作用,丹参、茯苓等中草药能够产生协同增效作用,抑制结肠癌细胞生长。3、本发明的用于治疗结肠癌的药物,对肾炎也具有很好的治疗作用。用于药物制备中的动植物提取物,其含有的北五味子对肾脏有调节作用,补心益肾,柘木、败酱草等具有清热解毒,祛瘀排脓等功效等作用,可用于治疗肾炎。4、本发明的用于治疗结肠癌的药物,在制备动植物提取物过程中,将第一混料、第二混料置于密闭容器中先通入高压饱和水蒸汽,使密闭容器中维持高压环境,然后瞬间降低密闭容器中内的压力,在此过程中高压蒸汽首先渗透至中第一混料、第二混料内部,在压力下降过程中,高压蒸汽会从第一混料、第二混料内部喷出,产生“爆破”,高压蒸汽可充分将第一混料、第二混料内可溶性有效成分溶解出来,随后通过后续的水提、乙醇浸泡以及渗漉更容易将第一混料、第二混料内的药用成分释放出来,这种方法比传统的水提法,可极大提高动植物的提取物的产率。本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现,部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。具体实施方式下面对本发明做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。需要说明的是,下述实施方案中所述实验方法,如无特殊说明,均为常规方法,所述试剂和材料,如无特殊说明,均可从商业途径获得。实施例1一种用于治疗结肠癌的药物,包括牵牛子提取物,所述牵牛子提取物的制备包括以下步骤:s1、将牵牛子置于沸水中提取,得到水提液;s2、将s1中的水提液分离提纯后即得牵牛子提取物。所述的用于治疗结肠癌的药物,s1中使用沸水提取2次,每次2.5h,合并2次的提取液即得水提液;s2中水提液分离提纯具体包括:将水提液在80℃的温度下浓缩至比重为1.01,然后采用d101大孔树脂洗脱,洗脱剂依次为体积分数为20%、60%的乙醇,收集60%的乙醇洗脱液,除去乙醇,浓缩至比重为1.08,即得牵牛子提取物。所述的用于治疗结肠癌的药物的制备方法,包括以下步骤:b1、取相同质量的两份稀释剂,将其中的第一份稀释剂与牵牛子提取物混合均匀后碾磨成粉末,制得第一混合粉末;b2、将第二份稀释剂、第一混合粉末与粘合剂混合均匀,制得第二混合粉末,再在第二混合粉末中加入润滑剂后混合均匀,制得第三混合粉末,备用;b3、将b2中制得的第三混合粉末进行压片,即得所述用于治疗结肠癌的药物;其中,每份稀释剂与牵牛子提取物的质量比为0.8:1,粘合剂与牵牛子提取物的质量比为0.07:1,润滑剂与牵牛子提取物的质量比为0.04:1。所述的用于治疗结肠癌的药物中,所述稀释剂由可压性淀粉和微晶纤维素按质量比为3:1混合而成。所述的用于治疗结肠癌的药物中,所述粘合剂由羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素和聚维酮按质量比为2:1:1混合而成。所述的用于治疗结肠癌的药物中,所述润滑剂由硬脂酸镁和微粉硅胶按质量比为3:2混合而成。实施例2一种用于治疗结肠癌的药物,包括牵牛子提取物,所述牵牛子提取物的制备包括以下步骤:s1、将牵牛子置于沸水中提取,得到水提液;s2、将s1中的水提液分离提纯后即得牵牛子提取物。所述的用于治疗结肠癌的药物,s1中使用沸水提取2次,每次2h,合并2次的提取液即得水提液;s2中水提液分离提纯具体包括:将水提液在80℃的温度下浓缩至比重为1.01,然后采用d101大孔树脂洗脱,洗脱剂依次为体积分数为20%、60%的乙醇,收集60%的乙醇洗脱液,除去乙醇,浓缩至比重为1.08,即得牵牛子提取物。所述的用于治疗结肠癌的药物,还包括动植物提取物,所述动植物提取物的制备方法包括以下步骤:a1、将重量份为3份的肉苁蓉、2份的北五味子、1份的黄精、2份的马鞭草、1份的柘木、1份的当归、1份的没药、1份的茯苓、2份的白芷、1份的败酱草、2份的紫草、2份的丹参、1份的红花、1份的肉桂粉碎得到第一混料;a2、将重量份为1份的蟾蜍蛆虫,1份的穿山甲片粉碎后,加入重量份为5份的石油醚中浸泡5h后,除去石油醚,得到第二混料;a3、将第一混料、第二混料置于密闭容器中,然后向密闭容器中通入饱和水蒸气以使密闭容器中的压力为0.7mpa,维持30min后,然后于4s内使密闭容器中压力降低至3pa,保持4min后,取出得到第三混料;a4、向第三混料中加入重量份为25份的水,于温度为85℃下煎煮2h,过滤,得到滤液和第一滤渣,备用;然后,将第一滤渣置于体积分数为80%的乙醇溶液中浸泡5h,过滤,得到浸泡液和第二滤渣,然后将第二滤渣置于渗漉装置中,使用浸泡液进行渗漉,控制渗漉流速为250ml/h,得到渗漉液,然后将渗漉液与滤液混合,真空浓缩干燥后即得动植物提取物;其中,动植物提取物与牵牛子提取物的质量比为1:5。所述的用于治疗结肠癌的药物的制备方法,包括以下步骤:b1、取相同质量的三份稀释剂,将其中的第一份稀释剂与牵牛子提取物混合均匀后碾磨成粉末,制得第一混合粉末;b2、将动植物提取物与第二份稀释剂混合均匀后碾磨成粉末,制得第二混合粉末;b3、将第三份稀释剂、第一混合粉末、第二份混合粉末与粘合剂混合均匀,制得第三混合粉末,再在第三混合粉末中加入润滑剂后混合均匀,制得第四混合粉末,备用;b4、将b3中制得的第四混合粉末进行压片,即得所述用于治疗结肠癌的药物;其中,每份稀释剂与牵牛子提取物的质量比为0.6:1,粘合剂与牵牛子提取物的质量比为0.06:1,润滑剂与牵牛子提取物的质量比为0.03:1。所述的用于治疗结肠癌的药物中,所述稀释剂由可压性淀粉和微晶纤维素按质量比为3:1混合而成。所述的用于治疗结肠癌的药物中,所述粘合剂由羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素和聚维酮按质量比为2:1:1混合而成。所述的用于治疗结肠癌的药物中,所述润滑剂由硬脂酸镁和微粉硅胶按质量比为3:2混合而成。实施例3一种用于治疗结肠癌的药物,包括牵牛子提取物,所述牵牛子提取物的制备包括以下步骤:s1、将牵牛子置于沸水中提取,得到水提液;s2、将s1中的水提液分离提纯后即得牵牛子提取物。所述的用于治疗结肠癌的药物,s1中使用沸水提取2次,每次2.5h,合并2次的提取液即得水提液;s2中水提液分离提纯具体包括:将水提液在80℃的温度下浓缩至比重为1.01,然后采用d101大孔树脂洗脱,洗脱剂依次为体积分数为20%、60%的乙醇,收集60%的乙醇洗脱液,除去乙醇,浓缩至比重为1.08,即得牵牛子提取物。所述的用于治疗结肠癌的药物,还包括动植物提取物,所述动植物提取物的制备方法包括以下步骤:a1、将重量份为4份的肉苁蓉、3份的北五味子、2份的黄精、3份的马鞭草、2份的柘木、2份的当归、2份的没药、2份的茯苓、3份的白芷、2份的败酱草、3份的紫草、3份的丹参、2份的红花、2份的肉桂粉碎得到第一混料;a2、将重量份为2份的蟾蜍蛆虫,2份的穿山甲片粉碎后,加入重量份为7份的石油醚中浸泡7h后,除去石油醚,得到第二混料;a3、将第一混料、第二混料置于密闭容器中,然后向密闭容器中通入饱和水蒸气以使密闭容器中的压力为1.0mpa,维持35min后,然后于5s内使密闭容器中压力降低至4pa,保持5min后,取出得到第三混料;a4、向第三混料中加入重量份为27份的水,于温度为90℃下煎煮2.5h,过滤,得到滤液和第一滤渣,备用;然后,将第一滤渣置于体积分数为85%的乙醇溶液中浸泡7h,过滤,得到浸泡液和第二滤渣,然后将第二滤渣置于渗漉装置中,使用浸泡液进行渗漉,控制渗漉流速为330ml/h,得到渗漉液,然后将渗漉液与滤液混合,真空浓缩干燥后即得动植物提取物;其中,动植物提取物与牵牛子提取物的质量比为1.1:5。所述的用于治疗结肠癌的药物的制备方法,包括以下步骤:b1、取相同质量的三份稀释剂,将其中的第一份稀释剂与牵牛子提取物混合均匀后碾磨成粉末,制得第一混合粉末;b2、将动植物提取物与第二份稀释剂混合均匀后碾磨成粉末,制得第二混合粉末;b3、将第三份稀释剂、第一混合粉末、第二份混合粉末与粘合剂混合均匀,制得第三混合粉末,再在第三混合粉末中加入润滑剂后混合均匀,制得第四混合粉末,备用;b4、将b3中制得的第四混合粉末进行压片,即得所述用于治疗结肠癌的药物;其中,每份稀释剂与牵牛子提取物的质量比为0.8:1,粘合剂与牵牛子提取物的质量比为0.07:1,润滑剂与牵牛子提取物的质量比为0.04:1。所述的用于治疗结肠癌的药物中,所述稀释剂由可压性淀粉和微晶纤维素按质量比为3:1混合而成。所述的用于治疗结肠癌的药物中,所述粘合剂由羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素和聚维酮按质量比为2:1:1混合而成。所述的用于治疗结肠癌的药物中,所述润滑剂由硬脂酸镁和微粉硅胶按质量比为3:2混合而成。实施例4一种用于治疗结肠癌的药物,包括牵牛子提取物,所述牵牛子提取物的制备包括以下步骤:s1、将牵牛子置于沸水中提取,得到水提液;s2、将s1中的水提液分离提纯后即得牵牛子提取物。所述的用于治疗结肠癌的药物,s1中使用沸水提取2次,每次3h,合并2次的提取液即得水提液;s2中水提液分离提纯具体包括:将水提液在80℃的温度下浓缩至比重为1.01,然后采用d101大孔树脂洗脱,洗脱剂依次为体积分数为20%、60%的乙醇,收集60%的乙醇洗脱液,除去乙醇,浓缩至比重为1.08,即得牵牛子提取物。所述的用于治疗结肠癌的药物,还包括动植物提取物,所述动植物提取物的制备方法包括以下步骤:a1、将重量份为6份的肉苁蓉、4份的北五味子、4份的黄精、4份的马鞭草、4份的柘木、3份的当归、3份的没药、3份的茯苓、4份的白芷、3份的败酱草、4份的紫草、5份的丹参、4份的红花、4份的肉桂粉碎得到第一混料;a2、将重量份为3份的蟾蜍蛆虫,3份的穿山甲片粉碎后,加入重量份为10份的石油醚中浸泡10h后,除去石油醚,得到第二混料;a3、将第一混料、第二混料置于密闭容器中,然后向密闭容器中通入饱和水蒸气以使密闭容器中的压力为1.4mpa,维持40min后,然后于7s内使密闭容器中压力降低至5pa,保持6min后,取出得到第三混料;a4、向第三混料中加入重量份为30份的水,于温度为95℃下煎煮3h,过滤,得到滤液和第一滤渣,备用;然后,将第一滤渣置于体积分数为90%的乙醇溶液中浸泡10h,过滤,得到浸泡液和第二滤渣,然后将第二滤渣置于渗漉装置中,使用浸泡液进行渗漉,控制渗漉流速为400ml/h,得到渗漉液,然后将渗漉液与滤液混合,真空浓缩干燥后即得动植物提取物;其中,动植物提取物与牵牛子提取物的质量比为1.2:5。所述的用于治疗结肠癌的药物的制备方法,包括以下步骤:b1、取相同质量的三份稀释剂,将其中的第一份稀释剂与牵牛子提取物混合均匀后碾磨成粉末,制得第一混合粉末;b2、将动植物提取物与第二份稀释剂混合均匀后碾磨成粉末,制得第二混合粉末;b3、将第三份稀释剂、第一混合粉末、第二份混合粉末与粘合剂混合均匀,制得第三混合粉末,再在第三混合粉末中加入润滑剂后混合均匀,制得第四混合粉末,备用;b4、将b3中制得的第四混合粉末进行压片,即得所述用于治疗结肠癌的药物;其中,每份稀释剂与牵牛子提取物的质量比为1:1,粘合剂与牵牛子提取物的质量比为0.08:1,润滑剂与牵牛子提取物的质量比为0.05:1。所述的用于治疗结肠癌的药物中,所述稀释剂由可压性淀粉和微晶纤维素按质量比为3:1混合而成。所述的用于治疗结肠癌的药物中,所述粘合剂由羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素和聚维酮按质量比为2:1:1混合而成。所述的用于治疗结肠癌的药物中,所述润滑剂由硬脂酸镁和微粉硅胶按质量比为3:2混合而成。细胞抑制实验分别配置十一组100ml密度为2×104个/ml的对数生长期人结肠癌ht-29细胞悬液,分别接种于96孔板中将96孔板放入37℃、5%co2的饱和湿度培养箱中,培养24h后,其中一组加入100ml的rpmi-1640培养基,作为实验对照组;其中5组分别加入质量为20mg、40mg、60mg、80mg、100mg本发明实施例1的药物组合物,作为实验1组;其中5组分别加入质量为20mg、40mg、60mg、80mg、100mg本发明实施例3的药物,作为实验2组;孵育20、44、68h后向各组中加入20ml的5mg/mlmtt,在37℃、5%co2的饱和湿度培养箱中孵育4h后,移去上清液,加入150ml的dmso,震荡10min,用酶标仪(=490nm)n定吸光度值(a),细胞生长抑制率m=(1-给药组a值/对照组a值)×100%。表1实验1组细胞生长抑制率m1(100%)表2实验2组细胞生长抑制率m2(100%)从表1与表2中可知,本发明实施例1、实施例3的药物对结肠癌细胞具有很好的抑制作用,随着药物使用时间的增长与药物浓度的增加,本发明实施例1、实施例3的药物对结肠癌细胞的抑制效果越好。同时在相同质量浓度下实施例3的药物对结肠癌细胞的抑制作用高于实施例1药物的抑制作用,说明实施例3药物中加入的动植物提取物可进一步提高对结肠癌细胞的抑制作用。肾炎治疗实验(1)实验方法购买120只生长良好的雄性sd大鼠,平均分为4组,每组30只,依次编号为1、2、3、4组。将第1、2、3组的大鼠作为实验组进行肾炎诱导,将240mg/kg注射剂量的肾炎诱导因子庆大霉素进行6天的腹膜内注射以诱发实验组大鼠的肾炎症状;对第4组大鼠进行正常喂养,作为正常对照组。对实验1组的大鼠以400mg/kg的每日剂量口服本发明的实施例1中的药物;对实验2组的大鼠以400mg/kg的每日剂量口服本发明的实施例3中的药物;同时将实验3组的大鼠作为阴性对照组,不喂服任何药物。口服后7天进行尸检。采集血样以测量血液尿氮(bloodureanitrogen,bun)和肌酸酐(creatinine,cre),求取平均值。(2)实验结果表3组别剂量(mg/kg)bun(mg/dl)cre(mg/dl)实验1组40080.051.53实验2组40021.430.70阴性对照组89.651.79正常组19.980.67从上表3可看出,本发明的实施例3的药物对肾炎有很好的治疗效果。动植物提取物产率分别按照以下方法制备动植物提取物,并比较动植物提取物的产率。方法一a1、将重量份为4份的肉苁蓉、3份的北五味子、2份的黄精、3份的马鞭草、2份的柘木、2份的当归、2份的没药、2份的茯苓、3份的白芷、2份的败酱草、3份的紫草、3份的丹参、2份的红花、2份的肉桂粉碎得到第一混料;a2、将重量份为2份的蟾蜍蛆虫,2份的穿山甲片粉碎后,加入重量份为7份的石油醚中浸泡7h后,除去石油醚,得到第二混料;a3、将第一混料、第二混料置于密闭容器中,然后向密闭容器中通入饱和水蒸气以使密闭容器中的压力为1.0mpa,维持35min后,然后于5s内使密闭容器中压力降低至4pa,保持5min后,取出得到第三混料;a4、向第三混料中加入重量份为27份的水,于温度为90℃下煎煮2.5h,过滤,得到滤液和第一滤渣,备用;然后,将第一滤渣置于体积分数为85%的乙醇溶液中浸泡7h,过滤,得到浸泡液和第二滤渣,然后将第二滤渣置于渗漉装置中,使用浸泡液进行渗漉,控制渗漉流速为330ml/h,得到渗漉液,然后将渗漉液与滤液混合,真空浓缩干燥后,最终得到动植物提取物2.98g;方法二a1、将重量份为4份的肉苁蓉、3份的北五味子、2份的黄精、3份的马鞭草、2份的柘木、2份的当归、2份的没药、2份的茯苓、3份的白芷、2份的败酱草、3份的紫草、3份的丹参、2份的红花、2份的肉桂粉碎得到第一混料;a2、将重量份为2份的蟾蜍蛆虫,2份的穿山甲片粉碎后,加入重量份为7份的石油醚中浸泡7h后,除去石油醚,得到第二混料;a3、将第一混料、第二混料混合后加入30g的水,于温度为95℃下煎煮3h,过滤,得到滤液,将滤液真空浓缩干燥后即得动植物提取物;最终得到1.73mg的动植物提取物。方法一为本发明的动植物提取物的提取方法,方法二为传统的提取方法,从上面结果可知本发明的动植物提取物的提取方法的产率高于传统提取方法。尽管本发明的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用,它完全可以被适用于各种适合本发明的领域,对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改,因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本发明并不限于特定的细节。当前第1页12
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