风茹草萃取物的用途的制作方法

本发明有关于一种植物萃取物的第二用途，特别指一种风茹草萃取物的用途。

背景技术：

糖尿病为目前具有最高罹患率的代谢性疾病，对于全球公共卫生都造成极大隐忧。糖尿病的成因为缺乏胰岛素和/或胰岛素活性，而会产生高血糖的病征，进而造成患者器官受损，例如糖尿病性视网膜病变，糖尿病肾病和心血管疾病等。

更进一步来说，糖尿病会造成肝脏损伤，具体来说，糖尿病患者的肝脏微血管会产生病变，导致肝脏缺血而坏死；糖尿病会诱发脂肪肝的发生；降血糖药物会损害肝功能等。据统计，糖尿病合并肝损伤的发生率已提高至30％。当糖尿病患者出现肝脏损伤时，许多降糖药物无法继续使用，反而不利于控制糖尿病，但是若持续使用降糖药物，将会持续加重肝脏损伤，也对于糖尿病患者的健康十分不利。

因此，目前临床上缺少一种能够治疗糖尿病引起的肝损伤的有效成份，并且须避免造成血糖上升或是加重肝脏损伤。

技术实现要素：

本发明的主要目的在于提供一种风茹草萃取物的用途，其能够将一有效量的风茹草萃取物用于治疗或/及预防糖尿病或高血糖症引发的肝脏疾病。

本发明的次一目的在于提供一种风茹草萃取物的用途，其能够避免化学药物对于患者器官的损害，降低使用化学药物所造成的副作用，达到提升用药安全的功效。

据此，为能达成上述目的，本发明揭露一种风茹草萃取物用于制造治疗或/及预防糖尿病引发的肝脏疾病的医药组合物的用途。因此，当该医药组合物中含有有效量的风茹草萃取物，通过投予该医药组合物至罹患有糖尿病或高血糖症的个体，能够有效地避免个体肝脏组织或细胞遭受到破坏。

其中，该风茹草萃取物由一风茹草以水作为萃取溶剂，进行萃取程序所获得。

具体来说，该糖尿病引发的肝脏疾病包含有肝纤维化、肝脏肥大、脂肪肝等。

在本发明的一实施例中，该该糖尿病引发的肝脏疾病与至少一生物标帜物表现量下降相关，举例来说，该生物标志物为p-pi3k或bcl-2等与促进细胞凋亡相关者。

在本发明的另一实施例中，该糖尿病引发的肝脏疾病与至少一生物标帜物表现量上升相关，而会促使肝脏组织发生肝脏细胞肥大、肝脏细胞凋亡、肝脏细胞受损、肝脏细胞纤维化等病征，其中，该生物标志物为cyto.c、切割的凋亡蛋白酶3、il-6、stat3、mek5、erk5、nfatc3、anp、bnp、fgf2、perk1/2、upa或mmp2等。

本发明的有益效果在于：

本发明提供一种风茹草萃取物的用途，其能够将一有效量的风茹草萃取物用于治疗或/及预防糖尿病或高血糖症引发的肝脏疾病；其能够避免化学药物对于患者器官的损害，降低使用化学药物所造成的副作用，达到提升用药安全的功效。

附图说明

图1为以西方墨点法分析各组大鼠肝脏中与存活及凋亡相关蛋白质的表现。

图2为各组大鼠肝脏中与存活及凋亡相关蛋白质的表现量。

图3为以西方墨点法分析各组大鼠肝脏中与肝脏肥大相关生物标志物的表现。

图4为各组大鼠肝脏中与肝脏肥大相关生物标志物的表现量(一)。

图5为各组大鼠肝脏中与肝脏肥大相关生物标志物的表现量(二)。

图6为以西方墨点法分析各组大鼠肝脏中与肝脏纤维化相关生物标帜物的表现。

图7为各组大鼠肝脏中与肝脏纤维化相关生物标志物的表现量。

图8为各组大鼠肝脏切片经h&e染色的结果。

图9为各组大鼠肝脏切片经梅生三色染色的结果。

具体实施方式

本发明揭露风茹草萃取物的第二用途，详言之，由于风茹草萃取物来自于天然植物，长期使用不会对于人体产生危害，并且，经过本发明所揭内容可知，投予一有效量的风茹草萃取物至罹患糖尿病的个体或是高血糖症的个体，能够有效地抑制其肝脏细胞凋亡或受损的情形发生，因此，本发明所揭风茹草萃取物能够用于治疗或/及预防糖尿病或高血糖诱发的肝脏疾病，如肝纤维化、脂肪肝等。

本发明所谓“风茹草”，又称香茹草，学名为glossogynetenuifolia，属于菊科。

以下，为能验证本发明的功效，将兹举若干实施例，并搭配附图作更进一步说明如后。

实施例一：制备风茹草萃取物

将风茹草样品(glossogynetenuifoliacassini)在40℃下干燥24小时。取20g干燥的风茹草样品，磨碎，与200ml去离子水混合并煮沸1小时，将含水混合物离心(2000rpm，10分钟)，取得上清液，再进行过滤，移除残渣后，在低于30℃的温度下干燥萃取溶液，得到一风茹草萃取物。

实施例二：动物试验

将八周龄雄性wistar大鼠，以皮下注射streptozotocin(stz)，剂量为65mg/kg，并结合烟碱酰胺，其剂量为230mg/kg，合并高脂饮食，以诱发糖尿病高血糖模式，而该些糖尿病高血糖模式大鼠分别依据组别以不同条件进行饲养，说明如下：

疾病组：未给予任何药物；

低剂量风茹草萃取物组(简称低剂量组)：经饮水给予风茹草萃取物，剂量为50mg/kg；

高剂量风茹草萃取物组(简称高剂量组)：经饮水给予风茹草萃取物，剂量为150mg/kg；

药物组：投予服降血糖药acarbose。

上述组别与空白组(正常大鼠)分别以其饲养条件饲养4周。

试验完成后，牺牲各组大鼠，分别取其肝脏进行以下实施例的检测。

实施例三：分析各组大鼠与存活及凋亡相关蛋白质的表现

以西方墨点法分析各组大鼠肝脏组织中与存活和凋亡信号传导途径相关蛋白的表现，结果如图1至图2所示。

由图1至图2的结果可知，疾病组大鼠肝脏组织内中与存活蛋白相关蛋白质：p-pi3k和bcl-2的表现下降，并且，其内与促凋亡相关蛋白质：cyto.c及切割的凋亡蛋白酶3则表现上升；相较于疾病组大鼠，低剂量组、高剂量组及药物组大鼠肝脏组织内与存活蛋白相关蛋白质的表现分别明显降低，并且，其内与存活相关蛋白的表现分别提升。

由此结果显示，长期罹患糖尿病确实会造成肝脏受损，而通过投予本发明所揭风茹草萃取物至罹患糖尿病的个体，能够抑制肝脏细胞走向凋亡，因此，本发明所揭风茹草萃取物能够有效地用于治疗或/及预防糖尿病相关肝脏疾病。

实施例四：分析各组大鼠肝脏细胞中与肝脏受损相关生物标帜物的表现

以西方墨点法分析各组大鼠肝脏组织中与肝脏肥大相关生物标志物：活化的il-6、stat3、mek5、erk5、nfatc3、anp、bnp、p-p38和p-jnk，以及与纤维化相关蛋白质：fgf2、perk1/2、upa、mmp2和mmp9的表现，结果如图3至图7所示。

由图3至图7的结果显示，疾病组大鼠的肝脏确实高度表现与肝脏肥大与肝脏纤维化相关的生物标帜物，也即罹患糖尿病的个体会使其肝脏受损，并具有肝脏肥大或肝脏纤维化等病征；而相较于疾病组，投予本发明所揭风茹草萃取物的低剂量组极高剂量组大鼠肝脏中与肝脏肥大与肝脏纤维化相关的生物标帜物，其表现分别下降，并且，相较于药物组大鼠来说，高剂量组大鼠对于肝脏内抑制与肝脏肥大与肝脏纤维化相关的生物标帜物的效果明显较佳。

由此实施例的结果可知，本发明所揭风茹草萃取物确实能够减缓或治疗糖尿病患者肝脏受损，并且，具有治疗或/及预防高血糖脂肪肝、高血糖肝纤维化等疾病的功效。

实施例五：各组大鼠肝脏组织切片h&e染色的结果

将各组大鼠肝脏组织切片后，分别以苏木精和曙红(h&e)进行染色，结果如图8所示。

由图8的结果可知，相较于空白组大鼠，疾病组大鼠肝脏组织排列松散，具有窦状隙扩张、肝细胞空泡、多灶性坏死等现象，并且累积大量脂肪。相较于疾病组大鼠，低剂量组及高剂量组大鼠的肝脏组织排列较为紧密，并且脂肪累积的现象减少；并且，相较于药物组来说，低剂量组及高剂量组大鼠能更有效地抑制脂肪累积于肝脏。

由上述结果显示，通过投予本发明所揭风茹草萃取物至罹患糖尿病的个体，能够有效地治疗或预防与血糖调控相关的肝脏疾病发生。

实施例六：各组大鼠肝脏组织切片梅生三色染色的结果

将各组大鼠肝脏组织切片后，分别以梅生三色染色法进行处理，结果如图9所示。

请参图9，疾病组大鼠肝脏切片有明显的蓝色染色，显示疾病组大鼠肝脏组织有严重纤维化的现象；相较于疾病组大鼠，低剂量组及高剂量组大鼠肝脏切片的染色极度不明显，并且与药物组及空白组大鼠肝脏切片染色结果相近。

由图9的结果显示投予本发明所揭风茹草萃取物能够有效抑制因糖尿病诱导产生的肝纤维化情形，并且，其效果相近于市售药物。而基于本发明所揭风茹草萃取物来自于天然植物，对于人体不会产生不良副作用，因而可推知本发明所揭风茹草萃取物具有取代化学药物的潜力。