专利名称：引藻萃取物的制作方法
技术领域：
本发明是关于一种引藻(Chlorella sorokiniana)萃取物，尤其是指一种适 用于治疗糖尿病、肥胖及血脂异常的引藻萃取物。
背景技术：
过氧化体增生齐ll活化受体(peroxisome proliferator-activated receptors, PPARs)属于核受体家族，其可控制许多细胞功能及代谢过程，其中如 PPARa、 PPARS、及PPARY等三种哺乳动物的PPARs已被鉴定确认，(参考 Lee C.H. et al., Endocrinology 2003, 144: 2201-7)。关于活化方面，PPARs 会触发一连串转录事件，导致脂质及葡萄糖的代谢改变(例如参考Willson T.M. et al.， J Med Chem 2000， 43, 527-50;及Moraes L,A. et al., Pharmacol Ther. 2006， 110,371-85)。
以PPARs在脂质及葡萄糖代谢上所扮演的角色来看，如PPARs的于第 二型糖尿病、肥胖、C型肝炎、血脂异常、冠状动脉心脏病、发炎性疾病 及癌症等疾病的重要性，贝IJPPARs可为以上相关疾病具发展性的治疗标 的。举例而言，作为PPARY促效剂的格列酮(glitazones)，则已经用于治疗 第二型糖尿病。另外例如作为PPARot促效剂的纤维酸酯(fibrates)，其可作 为有效降低血液中三酸甘油含量的药物。不过，大部分PPAR类的治疗剂， 其功效有限且具有明显的副作用。
因此，仍需发展出可调控PPAR活性的药物，以更为有效地控制脂质 及葡萄糖的代谢。
发明内容
本发明的目的在于提供一种引藻(单细胞嗜温性绿藻)萃取物，其能够 有效的活化PPARa及PPARy。因此本发明一方面关于一种萃取物，其包含 肉豆蔻酸(myristic acid)、棕榈酸(palmitic acid)、棕榈烯酸(palmitoleic acid)、油酸(oleic acid)、亚麻油酸(linoleic acid)、次亚麻油酸(linolenic acid)、及硬 脂酸(stearic acid)，其中含量分别为萃取物干重的0.1%至5%、 10%至60%、 2%至15%、 2%至15%、 2%至15%、 0.8%至6%、及0.5%至5%。其中较佳而
言，肉豆蔻酸、棕榈酸、棕榈烯酸、油酸、亚麻油酸、次亚麻油酸、及硬 脂酸的含量分别为萃取物干重的0.5%至4%、 15%至50%、3.5%至12%、3.5% 至12%、 3%至12%、 1.2%至5%、及0.8%至4%。然而，在萃取物中依上述 次序的七种成分，其含量更佳分别为萃取物干重的0.7%至1.7%、 19.2%至 43.6%、 4.4%至10.1%、 4.4%至10.0%、 3.9%至8.8%、 1.8%至4.00/0、及1.1% 至2.6%。
该萃取物可还包含十六碳二烯酸(hexadecadienoic acid)、十六碳烯酸 (hexadecenoic acid)、及十八碳烯酸(octadecenoic acid)，其含量分别为萃取 物干重的0.8%至6%、 1.2%至8%、及1.2%至8%。在一实施例中，十六碳二 烯酸、十六碳烯酸、及十八碳烯酸的含量分别为萃取物干重的1.2%至5%、 2%至7%、及2%至7%。举例而言，在萃取物中的十六碳二烯酸、十六碳烯 酸、及十八碳烯酸，其含量也可分别为萃取物干重的1.9%至4.3%、 2.6%至 6.00/o、及2.60/0至5.90/0。
本发明另一方面关于一种治疗糖尿病、肥胖或血脂异常的方法，此方 法包含投递有效剂量的上述萃取物给所需主体。
含上述萃取物及医药上可接受的载体的医药组成物、使用这种组成物 治疗糖尿病、肥胖或血脂异常的用途及使用此种组成物制出治疗这些疾病 的药剂的用途，也涵盖在本发明范围内。
以下列举几个本发明实施例的详细内容，由权利要求范围及下述说 明，本发明其它特征、目标及优点将更臻明确。
具体实施例方式
本发明萃取物是利用醋酸乙酯萃取引藻(Chlorella sorokiniana)的方式 来进行制备，以此所得的萃取物可再以薄层层析法(thin layer chromatography)、 快速管柱层析法(flash column chromatography)、 高效液 相层析法(high performance liquid chromatography)或j壬何其它合适的方法
进行纯化。以下将提出一个实际实施例。该萃取物能够有效活化PPRAa/Y，造成脂质及葡萄糖代谢改变，所以 可以用于治疗糖尿病、肥胖或血脂异常。因此，本发明关于一种治疗上述 其中1疾病的方法，由投递有效剂量的萃取物给所需主体。「有效剂量」 一词是指能够对于该主体产生上述治疗效果的萃取物剂量。如同本领域技 术人员所知，有效剂量可能会依投药的途径、赋形剂的使用、以及与其它
药剂共同使用而改变。「治疗」 一词是指以治愈(cure)、疗伤(heal)、减轻 (alleviate)、缓禾口 (relieve)、改变(alter)、补救(remedy)、改良(ameliorate)、 改善(improve)、或影响(affect)目标疾病、目标疾病的症状、或朝目标疾病 发展等为目的，投递该萃取物给具有糖尿病、肥胖或血脂异常、或具有倾 向其中一疾病发展的主体。
为实现上述其中一方法，可由口服、直肠、肠外、喷雾吸入、或经由 植入式贮藏器，将上述萃取物的单独组成物或该萃取物与医药上可接受载 体的混合组成物投递给所需主体。于此所使用的「肠外」 一词，包含皮下 (subcutaneous)注射、皮内(intracutaneous)注身寸、静脉(intravenous)注身t、肌 肉(intramuscular)注射、关节内(intraarticular)注身寸、动脉(intraarterial)注射、 滑膜内(intrasynovial)注射、胸骨内(intrasternal)注射、鞘内(intrathecal)注射、 病灶内(intralesional)注射和颅内(intracranial)注射或输液技术(infiision techniques)。
口服组成物为任何口服上可接受的药剂形式，可包含但不限于药片、 胶囊、乳剂及水悬浮液、分散液及溶液。通常用于药片的载体包含乳糖及 玉米淀粉， 一般药片也会添加如硬脂酸镁的润滑剂。若要以胶囊形式口服 投药，可使用的稀释剂包括乳糖及干玉米淀粉。当水悬浮液或乳化液以口 服方式投药，则有效成分会悬浮或溶解于结合乳化剂或悬浮剂的油相中。 如果需要的话，可添加一些甜味剂、香料或着色剂。
可根据本领域已知技术，使用适合的分散剂或湿润剂(例如Tween 80) 及悬浮剂，配制无菌可注射式的组成物(如水或油质悬浮液)。无菌可注射 式的配制液，也可为肠外上可接受的无毒稀释剂或溶剂中的无菌可注射式 溶液或悬浮液，举例如l,3-丁二醇溶液。在可接受载体及溶剂间，能使用 者为甘露醇、水、林格氏液及等渗透的氯化钠溶液。此外，公知上使用无 菌固定油作为溶剂或悬浮基质(如合成的单-或双-甘油酯)。可根据医药配制领域的已知技术，制备出吸入组成物，且可添加苯甲 醇或其它合适的防腐剂、加强生物可利用性的吸收促进剂、氟碳化合物、 及/或其它本领域已知的稳定剂或分散剂，以制备成盐水溶液。
局部组成物可配置成油状、霜状、乳液状、油膏状及类似形式，而适 用于此组成物的载体包括植物性或矿物性油、白矿脂(白色软石蜡)、支链 脂肪或油脂、动物性脂肪及高分子量醇类(大于C12)，较佳的载体为有效成 分可溶于其中者。如果需要的话，也可包含乳化剂、安定剂、湿润剂与抗 氧化剂，以及引入颜色或香味的药剂。此外，这些局部性的配方中也可添
加透皮加强剂，这类透皮加强剂的例子则记载于美国专利第3,989,816及 4，444,762号。霜剂较佳配制方式，是将矿物油、自乳化性蜂蜡及水的混合 物，与溶于少量的油质(如杏仁油)中的有效成分进行掺合。此类霜剂举例 包含约40份水、约20份蜂蜡、约40份矿物油及约1份杏仁油。油膏剂可将
植物油(如杏仁油)中的有效成分与温软石蜡混合，而后冷却混合物的方式 配制。这类油膏剂举例可包含约30重量百分比杏仁油及约70重量百分比的
白色软石蜡。
医药组成物的载体必须为「可接受的」，亦即可与配方中的有效成分 (较佳者为可稳定有效成分)兼容，且对受治疗的主体无害。举例而言，如 环糊精(其可与萃取物中一至多个活性化合物形成特定且更为稳定的错合 物)的稳定剂，则可作为用来投递活性化合物的医药赋形剂。其它载体的例 子包括胶状二氧化硅、硬脂酸镁、纤维素、月桂硫酸钠、及D&G黄色弁10。
合适的体外分析可用于预先估量此发明萃取物对于PPARa/y的效率， 参见以下所述的实施例，更可检査萃取物对于治疗糖尿病、肥胖或血脂异 常的效果。例如投递萃取物给具有疾病的动物(如小鼠试验模型)，而后取 得其治疗效果，基于此结果，则可决定适当的剂量范围及投药途径。
不需额外详加解释，相信上述的描述已可适当的实施本发明，因此以 下具体实施例仅为说明用，并非用于限制诸如此类的其余揭露范围。此所
引载包含专利的所有公开物，则完整并入以供参酌。 实施例l:制备引藻萃取物
弓I藻(Chlorella 301"0^1^1^)粗萃水溶液(^￥87-10)由中华民国台湾彰化
县国际绿藻有限公司所提供。其制备方式如下将引藻(Cryptomonadales)接种于含营养基质的培养瓶中，持续在营养 基质中通气，同时以震荡器震荡培养瓶，培养引藻约1.5个月。
以ALFA-LAVEL离心机收集引藻(Cryptomonadales algae)，并以喷雾干 燥机干燥形成粉末。将70kg的水加入30kg的引藻粉末，10(TC下煮沸30分 钟后，以离心移去未溶解的残渣并收集上清液，使用真空干燥机自上清液 移除约95%的水分，过滤剩下的上清液，脱色后得到引藻粗萃溶液。
将100mL的粗萃溶液加水稀释，直至成为原始体积的两倍，并以EtOAc 进行萃取(200mLx4)，然后减压浓縮有机层，残余物装填于硅胶管柱，以 丙同-正己垸梯度(30°/。-100%)流洗，收集CE1-CE8等8个分液，每一分液的 干重经测定后分别为CE1: 7.0 mg、 CE2: 17.9 mg、 CE3: 59.0 mg、 CE4: 60.9 mg、 CE5: 68.4 mg、 CE6: U5.7mg、 CE7: 33.4mg及CE8: 170.2 mg。
再使用制备式的TLC纯化分液CE3，利用33% EtOAc的正己垸溶液展 开，可获得6个CE3-1-CE3-8等6个
次分液，每一分液的干重经测定后分别为CE3-1: 5.3 mg、 CE3-2: 1.3 mg、 CE3-3: 25.6 mg、 CE3-4: 3.5 mg、 CE3-5: 15.5 mg及CE3-6: 5.6 mg。
于氮气下将8.2 mg的CE3-3溶解在二氯甲烷(0.6 mL)，并与20%三氟化 硼乙醚的甲醇溶液(4mL)混合后，密封溶液且于100。C下搅伴5分钟。待冷 却后，添加饱和氯化钠水溶液(IO mL)以中和溶液，然后以正己垸(2 mL) 萃取。使用MgS04干燥有机层，并减压浓缩有机层以得到黄色油状甲酯产 物(CE3-3M)。使用气相层析系统(Hewlett-Packard 6890 gas chromatography system)搭配质谱选择侦测仪(HP5973 mass selective detector)、自动液态样 品取样器(HP7673 automatic liquid sampler)及质谱管柱(Agilent DB-5MS column, 30 cmx250 pm, 0.25 ^m膜厚)分析CE3-3M组成物，载气使用流速为 lmL/min的氦气。把进口温度维持在25(TC，将样本(l ^L)以1:50的分流比 注入。温箱的起始温度维持在12(TC持续3分钟，接着设定以l(TC/min的速 度(持续1分钟)增加至18(TC，然后以2。C/min的速度(持续5分钟)增加至 210°C，全部运作时间为30分钟。在70eV游离能及230。CMS离子源温度下， 记录50-500 amu范围的质谱，并以化学工作站软件(HP Chem Station software)收集及整合数据，透过整合全部离子流光谱图的讯号峰面积，并 转成百分比来决定每一成份的含量，同时将该些成分的延迟时间与商业标准品及国家技术标准局的MS搜寻引擎(National Institute of Standards And Technology MS Search program)进行比较，以鉴定出各成分的身分。
由GC层析结果可观察到10种脂肪酸，且由GC-MS搜寻库中可确定其 中7种。下表显示全部脂肪酸的相对比例及延迟时间
号码化合物名
延迟时间
相对比例％
2
4
6
7
9
10
11.9
C16:2 C16:l C16:l
C14:0 十六碳二烯酸 十六碳烯酸 棕榈烯酸 棕榈酸 C16:0 [十六碳烷酸] 亚麻油酸 C18:2 [(Z),(Z)-9-12-十八碳二烯酸] 次亚麻油酸 C18:3 [(Z)，(Z),(Z)-9-,12-，15-[十八碳烯酸] 油酸 C18:l 21.8
十八碳烯酸 C18:l 22.0 硬脂酸 C18:0 22.7
15.6 15.9 15.9
16.6 21.5
21.7
1.7
4.3 6.0 10.1
43.6
8.8 4.0
10.0
5.9 2.6
实施例2:生物性分析
透过以下分析，研究CE3及CE3-3对于PPARoc/Y的活化效果。 PPARy配体結合分析
在E. coli中以麸胱甘肽硫转移酶(glutathione S-transferase, GST)融合蛋 白的方式表现出hPPARY的配体结合区域后，使用麸胱甘肽-琼脂糖胶体(Amersham Biosciences, NJ)透过亲合纯化法根据操作指南分离出重组蛋 白。制备出的GST-hPPARy^D重组蛋白，最终使用浓度约为5nM，而山羊 抗-GST抗体(商品编号27-4577-01， Amersham Biosciences, NJ)则以1:2000 稀释使用。将蛋白A-硅酸钇闪烁迫近分析微球(Protein A-yttrium silicate scintillation proximity assay beads)悬浮于含有10 mM Tris-Cl， pH 7.2 、 1 mM EDTA、 10。/。(w/v)甘油、lOmM钼酸钠、1 mM二硫苏糖醇、0.5 mM苯甲 基磺酰氟(phenylmethylsulfonyl fluoride)、 2 (ig/mL苯甲脒(benzamidine)、及 0.0ln/。迭氮化钠(sodium azide)的50 mL分析缓冲液中。
样本萃取物溶于DMSO使其最终浓度为5 pg/mL，并使用乙醇将放射 标定的PPAR配体[3H]罗格列酮(rosiglitazone, 60 Ci/mmol, American Radiolabeled Chemicals, MO)稀释425倍，最终使用浓度为7.8 nM。
依序于96-孔微滴定盘(商品编号6005290, Packard Instrument, CT)加入 GST-PPAR/BD、山羊抗-GST抗体、均匀悬浮的蛋白A-硅酸钇闪烁迫近分 析微球、样本萃取物、及经稀释的[SH]罗格列酮溶液(每个20)aL)后，于4"C 下轻微震荡培养。待24小时后，使用微盘闪烁磷光计数器(1叩(^111^@ Microplate Scintillation & Luminescence Counter, Packard Instrument Co.， Inc, USA)定出放射量。
结果显示，CE3及CE3-3两者皆具结合效力，其中显示对于结合于 PPAR,BD的卩H]罗格列酮，CE3具有大于95。/。的置换效果，而CE3-3具有大 于99.8%的置换效果。对于PPAR^BD的IC5。值，则使用8个3重复数据的剂 量反应曲线计算，而CE3及CE3-3的IQo值分别为2.7吗/mL及1.6吗/mL。
PPARoc碳末结合分析(PPARa Charcoal Binding Assay)
碳末结合分析的方法相似于Mahindroo, et al., J Med Chem 2005, 48: 8194-208; Mahindroo N. et al., J Med Chem 2006, 49: 1212-6; Mahindroo N. et al., J Med Chem 2006， 49: 6421-6424; Lu， I. L. et al.， J Med Chem 2006, 49: 2703-12等所描述的方法。
配制具有或不具有样本萃取液的含TEGM缓冲液(IO mM Tris, pH 7.2、 lmMEDTA、 10%甘油、7 |iL/100 mL的卩-巯乙醇、lOmM钼酸钠、1 mM 二硫苏糖醇、2 )ig/mL苯甲脒、及0.5mM苯甲基磺酰氟)及2.5 nM [3H] L-783,483 (79 |iCi/mmol，由台湾国家卫生研究院生物技术与药物研究组合成)的分析溶液，以最终体积为300 1^L在24'C下培养24小时后，与200 的糊精/明胶层覆的碳末在冰上培养10分钟，以移除未结合的配体。以3000 rpm于4。C下离心10分钟后，在液体闪烁计数器(TRI-CARB 2100TR liquid scintillation analyzer)中计算上清液的放射性。
取代卩H] L-783,483结合于PPARaLBD的ICs。值，贝U6个3重复数据的剂量 反应曲线计算，其中CE3及CE3-3的IC5。值分别为5.0 ^ig/mL及2.3吗/mL。
PPAR转录活性分析
在37。C且5y。 C02的潮湿环境下，24孔细胞培养盘中具有含有10%胎牛 血清、100单位/mL青霉素G、 100mg/mL硫酸链霉素、及0.25吗/mL双性霉 素B (amphotericin B)的高葡萄糖含量DMEM (Dulbecco's modified Eagle's medium)，于其中培养人类肝癌Huh7细胞株(5 x 104个细胞/孔)。待24小时后， 根据操作指南使用转染齐U(Fugene 6 transfection reagent, Roche, Germany) 进行转染。具体而言，将0.5 mL的转染剂、0.05 jig的pGAL4-PPAR^BD质 体、0.14 pg的pG5-TK-Luc报导子、及0.25 ng的pRL-SV40水母荧光素酶质 体(Renillaluciferaseplasmid)的转染混合液，作为转染的内控制组，添加至 培养盘的每个孔中，并于37'C且5。/。 C02的环境下，将Huh7细胞在转染混 合液中培养过夜。而后，在含有不同浓度样本萃取物DMSO溶液的新鲜高 葡萄糖含量DMEM中，培养细胞24小时，而对照组细胞则培养在DMSO。
待24小时后收集细胞，遵照操作指南使用细胞溶解缓冲液(Passive⑧ Lysis Buffer, Promega, WI)制出细胞溶解液，再使用双荧光素酶分析组 (Dual-Luciferase Reporter Assay kit, Promega, Madison, WI)评估，并以冷 光仪(SIRIUS-0 luminometer, Berthold detection systems, Pforzheim, Germany)计算荧光素酶的活性。简单地说，将50 )iL的荧光素酶分析剂 (Luciferase Assay Reagent II， LARII)加入含5 iiL的细胞溶解产物的试瓶中， 测量混合液的萤火虫荧光素酶活性，而后加入50 pL的反应中止剂(Stop & Glo Reagent)，并测量混合液的水母荧光素酶活性。分析中使用的DMSO， 最高浓度为0.1。/。，其对于激活作用的活性没有影响。在全部的这些结果中， 由PPAR配体罗格列酮(2 pM)所活化者视为正反应对照组，激活作用的结 果以萤火虫荧光素酶讯号/水母荧光素酶讯号的比例表示。CE3达到正反应对照组PPARY最大活化的55.6。/。，而CE3-3达到正反应 对照组PPARY最大活化的63.415/()。
前脂肪细胞分化分析(Preadipocyte Differentiation Assay) 在含有10%胎小牛血清、100单位/mL青霉素G、 100 mg/mL硫酸链霉 素、及150 nM胰岛素的DMEM中，添加或未添加测试分划，于37。C且5。/。 C02的潮湿环境下培养簇集脂肪细胞3T3-L1细胞3天。培养基每两天更换， 持续保持细胞在此状态下，直到脂肪细胞出现为止(约9天)。如TroubaK.J. et al." Toxicol Appl Pharmacol 2000， 168， 25-35所述，以油红-0 (Oil Red-O， Sigma)染色分化成脂肪细胞的细胞。简单地讲，在10%福尔马林中至少固 定1小时，然后浸入油红-0染色2小时，再以水彻底冲洗，于32"C下干燥样 本。
CE3及CE3-3对于3T3-L1前脂肪细胞展现出中度成脂分化的活性。 其它实施例
本发明已经描述出一些实施例，不过应可了解到在不背离本发明精神 及范畴的前提下，能够进行各种修改。据此，其它实施例也落入本发明的 权利要求范畴中。
上述实施例仅系为了方便说明而举例而已，本发明所主张的权利范围 自应以申请专利范围所述为准，而非仅限于上述实施例。
权利要求
1、一种引藻萃取物，包括肉豆蔻酸、棕榈酸、棕榈烯酸、油酸、亚麻油酸、次亚麻油酸、及硬脂酸；其中，该肉豆蔻酸、该棕榈酸、该棕榈烯酸、该油酸、该亚麻油酸、该次亚麻油酸、及该硬脂酸的含量分别为萃取物干重的0.1％至5％、10％至60％、2％至15％、2％至15％、2％至15％、0.8％至6％、及0.5％至5％。
2、 如权利要求l所述的萃取物，其中，该肉豆蔻酸、该棕榈酸、该棕 榈烯酸、该油酸、该亚麻油酸、该次亚麻油酸、及该硬脂酸的含量分别为 萃取物干重的0.5%至4%、 15%至50%、 3.5%至12%、 3.5%至12%、 3%至12%、 1.2%至5%、及0.8%至4%。
3、 如权利要求2所述的萃取物，其中，该肉豆蔻酸、该棕榈酸、该棕 榈烯酸、该油酸、该亚麻油酸、该次亚麻油酸、及该硬脂酸的含量分别为 萃取物干重的0.7%至1.7%、 19.2%至43.6%、 4.4%至10.1%、 4.4%至10.0%、 3.9%至8.8%、 1.8%至4.0%、及1.1%至2.6%。
4、 如权利要求l所述的萃取物，其中，包括十六碳二烯酸、十六碳烯 酸、及十八碳烯酸；其中，该十六碳二烯酸、该十六碳烯酸、及该十八碳 烯酸的含量分别为萃取物干重的0.8%至6%、 1.2%至8%、及1.2%至8%。
5、 如权利要求4所述的萃取物，其中，该十六碳二烯酸、该十六碳烯 酸、及该十八碳烯酸的含量分别为萃取物干重的1.2%至5%、 2%至7%、及 2%至7%。
6、 如权利要求4所述的萃取物，其中，该十六碳二烯酸、该十六碳烯 酸、及该十八碳烯酸的含量分别为萃取物干重的1.9%至4.3%、2.6%至6.0%、 及2.6%至5.9%。
7、 如权利要求2所述的萃取物，其中，包括十六碳二烯酸、十六碳烯酸、及十八碳烯酸；其中，该十六碳二烯酸、该十六碳烯酸、及该十八碳 烯酸的含量分别为萃取物干重的0.8%至6%、 1.2%至8%、及1.2%至8%。
8、 如权利要求7所述的萃取物，其中，该十六碳二烯酸、该十六碳烯 酸、及该十八碳烯酸的含量分别为萃取物干重的1.2%至5%、 2%至7%、及2%至7%。
9、 如权利要求8所述的萃取物，其中，该十六碳二烯酸、该十六碳烯 酸、及该十八碳烯酸的含量分别为萃取物干重的1.9%至4.3%、2.6%至6.0%、 及2.6%至5.9%。
10、 如权利要求3所述的萃取物，其中，包括十六碳二烯酸、十六碳 烯酸、及十八碳烯酸；其中，该十六碳二烯酸、该十六碳烯酸、及该十八 碳烯酸的含量分别为萃取物干重的0.8%至6%、 1.2%至8%、及1.2%至8%。
11、 如权利要求10所述的萃取物，其中，该十六碳二烯酸、该十六碳 烯酸、及该十八碳烯酸的含量分别为萃取物干重的1.2%至5%、 2%至7%、 及2%至7%。
12、 如权利要求ll所述的萃取物，其中，该十六碳二烯酸、该十六碳 烯酸、及该十八碳烯酸的含量分别为萃取物干重的1.9%至4.3%、 2.6%至 6.0%、及2.6%至5.9%。
13、 一种医药组成物，其包括权利要求l所述的萃取物及一医药上可 接受的载体。
14、 如权利要求13所述的医药组成物，其中，该肉豆蔻酸、该棕榈酸、 该棕榈烯酸、该油酸、该亚麻油酸、该次亚麻油酸、及该硬脂酸的含量分 别为萃取物干重的0.5%至4%、 15%至50%、 3.5%至12%、 3.5%至12%、 3% 至12%、 1.2%至5%、及0.8%至4%。
15、 如权利要求14所述的医药组成物，其中，该肉豆蔻酸、该棕榈酸、 该棕榈烯酸、该油酸、该亚麻油酸、该次亚麻油酸、及该硬脂酸的含量分 别为萃取物干重的0.7%至1.7%、 19.2%至43.6%、 4.4%至10.1%、 4.4%至 10.0%、 3.9%至8.8%、 1.8%至4.0%、及1.1%至2,6%。
16、 如权利要求13所述的医药组成物，其中，该萃取物包括十六碳二 烯酸、十六碳烯酸、及十八碳烯酸，其中，该十六碳二烯酸、该十六碳烯 酸、及该十八碳烯酸的含量分别为萃取物干重的0.8%至6%、 1.2%至8%、 及1.2%至8%。
17、 如权利要求16所述的医药组成物，其中，该十六碳二烯酸、该十 六碳烯酸、及该十八碳烯酸的含量分别为萃取物干重的1.2%至5%、 2%至 7%、及2%至7%。
18、权利要求13所述的医药组成物在制备治疗糖尿病、肥胖或血脂 异常药中的应用。
全文摘要
本发明是有关于一种引藻萃取物，其包含肉豆蔻酸、棕榈酸、棕榈烯酸、油酸、亚麻油酸、次亚麻油酸、及硬脂酸。本发明亦有关于此萃取物治疗糖尿病、肥胖及血脂异常的用途。
文档编号A61K36/02GK101444542SQ20081017293
公开日2009年6月3日 申请日期2008年10月24日 优先权日2007年10月25日
发明者周友诚, 徐祖安, 王顺德, 谢兴邦, 赵宇生 申请人:国际绿藻有限公司