包括两种不同波长的曝光的光动力疗法的制作方法

本发明涉及光敏剂在改进的光动力疗法中的用途，所述光动力疗法具有降低的副作用，特别是疼痛。特别地，本发明涉及用于预防或治疗患者的皮肤病的包含光敏剂的组合物，其中组合物按以下步骤顺序使用：

(a)将所述组合物局部施用或皮下注射到所述患者的皮肤区域，

(b)将至少所述皮肤区域暴露于波长谱与太阳光类似或相同的光下持续30分钟至5小时，和

(c)将至少所述皮肤区域暴露于在所述光敏剂的吸收光谱中仅包含一个最大值的波长谱的光下，

并且本发明涉及使用概述的步骤治疗皮肤病的方法以及包含这种组合物和适于施加各自指示光的光源的试剂盒套装。

背景技术：

光动力疗法(pdt)是微创治疗方式，其用于治疗各种皮肤或其他上皮器官或黏膜的异常或病症，特别是癌症或癌前期病变，以及某些非恶性病变(例如，皮肤疾病如银屑病、光化性角化病(ak)和痤疮。pdt涉及将光敏剂整体或局部施用至身体的受影响区，然后暴露于光敏化光以活化光敏剂并将其转化为细胞毒性形式，从而杀死受影响的细胞或削弱其增殖潜能。

一些光敏剂在本领域是已知的，包括补骨脂素、卟啉(例如)、二氢卟吩和酞菁。对于局部或皮下的施用，当今临床上最相关的光敏剂是在靶细胞中代谢转化的前体形式的光敏剂。最相关的是5-氨基乙酰丙酸(ala)及其衍生物，例如诸如5-ala酯的酯。

尽管使用5-ala和5-ala衍生物的pdt对治疗多种疾病在临床上非常有效，但是这种治疗也导致了副作用。这些通常包括疼痛、红斑、肿胀、水肿、烧伤、发痒、表皮剥脱、色素沉着和长期刺激以及治疗后的超敏性。当治疗部位是脸、头皮或颈时，这类副作用尤其是不理想的。当pdt用于治疗病变(例如光化性角化病、痤疮、基底细胞癌、疣、银屑病、酒渣鼻、伤口愈合、原位鳞状细胞癌或其他过度增生或感染性疾病)时，以及当使用高功率光源的短期照明进行pdt时，通常会出现这种情况。特别是，在这些情况下患者经历的通常是实质性疼痛导致对这种治疗的不良接受，特别是如果pdt必须施用多于一次或施用于扩展的皮肤区域。

替代疗法是日光pdt，其使用了增加了曝光时间的太阳光以活化光敏剂，而不是常规pdt中使用的高功率光源。日光pdt的副作用，特别是疼痛被显著减少(dirschka等人，jeuracaddermatolvenereol,2018年7月19)。虽然日光pdt的疗效似乎与常规pdt相当，但是日光pdt的复发率明显更高。

本发明教导了光敏剂在包括两种不同光暴露的改进的pdt中的使用。因此，本发明尤其提供了减少的副作用，特别是减少的疼痛和复发率低的优点。

技术实现要素：

在第一方面，本发明提供了包含光敏剂的组合物，其用于预防或治疗患者的皮肤病，其中组合物按以下步骤顺序使用：

(a)将所述组合物施用至所述患者的皮肤区域，

(b)将至少所述皮肤区域暴露于波长谱与太阳光类似或相同的光下持续30分钟至5小时，优选1小时至3小时，更优选1小时至2小时，和

(c)将至少所述皮肤区域暴露于比步骤(b)更窄的波长谱的光，优选在所述光敏剂的吸收光谱中仅包含一个最大值的光。

在第二方面，本发明提供了在有需要的患者中治疗或预防皮肤病的方法，其中如本发明的第一方面所述，将光敏剂施用于患者的皮肤区域。

在第三方面，本发明提供了一种试剂盒套装，其包括能够发射具有与太阳光和/或黄-红光或紫-蓝光类似或相同的波长谱以及优选辐照度的光的光源和用于执行本发明第二方面的方法的步骤(b)和(c)的操作说明。

在第四方面，本发明提供了光源和控制器，所述光源能够发射具有与太阳光和黄-红光或紫-蓝光类似或相同的波长谱以及优选辐照度的光，其中控制器被程序化为用于执行本发明第二方面的方法的步骤(b)和(c)。

附图说明

在下文中，描述了本说明书中包括的附图的内容。在上下文中，还请参考上文和/或下文的本发明的详细描述。

图1：pdt的副作用(疼痛评分)是指与使用5-ala和本发明的pdt结合相比，通过光动力疗法所经历的疼痛的比较，所述光动力疗法使用了5-ala光敏剂然后利用通常所使用的pdt红光源进行照明，所述本发明的pdt使用了初始人造日光然后使用了相同的红光照明。采用疼痛视觉模拟量表(vas)对疼痛进行评分。治疗区域对两种治疗中经历的疼痛均有影响。出人意料的是，与施用光敏剂后仅使用红光照明相比，当施用光敏剂后使用日光和红光的组合时，所经历的疼痛明显减少。

图2：原卟啉ix(ppix)的吸收光谱是指350nm至700nm范围内的吸收光谱。最高吸收最大值位于405nm处。由于长波光更好的组织穿透性，一个小得多然而在临床上重要的吸收最大值位于635nm处。另外三个最大值位于500nm至550nm。

具体实施方式

在下面详细描述本发明之前，应理解本发明不限于本文所述的特定方法、方案和试剂，因为它们可以变化。还应理解，本文使用的术语仅用于描述特定实施方案的目的，并不旨在限制本发明的范围，本发明的范围仅受所附权利要求的限制。除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本领域普通技术人员通常理解的含义相同的含义。

优选地，本文使用的术语定义如“生物技术术语多语种词汇表：(iupac推荐)”，leuenberger,h.g.w，nagel，b.和klbl,h.编辑(1995),helveticachimicaacta，ch-4010basel，瑞士中所述。

在整个本说明书和随后的权利要求书中，除非上下文需要否则单词“包含”和其变体，将被理解为意味着收录所陈述的整数或步骤或整数组或步骤组但不排除任何其他整数或步骤或整数组或步骤组。在以下段落中，更详细地定义了本发明的不同方面。如此定义的每个方面可以与任何其他方面结合，除非明确相反的指示。特别地，指示为任选、优选或有利的任何特征可以与指示为任选、优选或有利的任何其他特征组合。

在本说明书的全文中引用了若干文献。无论是上文还是下文，本文引用的每个文件(包括所有专利、专利申请、科学出版物、制造商的说明书、说明书等)均通过引用整体并入本文。本文中的任何内容均不应被解释为承认本发明无权凭借在先发明而先于此类公开内容。本文引用的某些文件的特征在于“通过引用合并”。在这种并入的引用的定义或教导与本说明书中引用的定义或教导之间发生冲突的情况下，以本说明书的文本为准。

在下文中，将描述本发明的元素。这些元素通过特定实施方案列出，但应该理解的是，它们可以以任何方式和任何数量组合以建立另外的实施方案。不同描述的实施例和优选实施方案不应被解释为将本发明限制为仅明确描述的实施方案。该描述应被理解为支持并涵盖将明确描述的实施方案与任何数量的所公开和/或优选元素相结合的实施方案。此外，除非上下文另有说明，否则应认为本申请的描述中公开了本申请中所有所描述元素的任何排列和组合。

定义

在下文中，提供了本说明书中经常使用的术语的一些定义。在说明书的其余部分中，这些术语在其使用的每种情况下将分别具有定义的含义和优选的含义。

如本说明书和所附权利要求中所使用的，除非内容另有明确说明，要素前无数量词包括复数指代物。

当与数值结合使用时，术语“约”意味着包括在下限范围和上限范围之内的数值，该下限比指示的数值小5％并且该上限范围比指示的数值大5％。

本文所用的术语“载体”是指与治疗剂一起施用的稀释剂、佐剂、赋形剂或载剂。这种药学载体可以是无菌液体，例如水和油中的盐溶液，包括石油、动物、植物或合成来源的那些，例如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。当静脉内施用药物组合物时，盐溶液是优选的载体。也可以将盐溶液和葡萄糖水溶液和甘油溶液用作液体载体，特别是用于可注射溶液。合适的药物赋形剂包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、大米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸钠、甘油单硬脂酸酯、滑石、氯化钠、脱脂乳、甘油、丙烯、乙二醇、水、乙醇等。如果需要，组合物还可含有少量的润湿剂或乳化剂、或ph缓冲剂。这些组合物可以采用溶液、悬浮剂、乳剂、片剂、丸剂、胶囊剂、散剂、缓释制剂等形式。组合物可以配制成具有传统的黏合剂和载体例如甘油三酯的栓剂。本发明的组合物可以配制成中性形式或盐形式。药学上可接受的盐包括与游离氨基形成的盐，例如衍生自盐酸、磷酸、乙酸、草酸、酒石酸等的盐，以及与游离羧基形成的盐，例如衍生自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、氢氧化钙、氢氧化铁、异丙胺、三乙胺、2-乙基氨基乙醇、组氨酸、普鲁卡因等的盐。合适的药物载体的实例在e.w.martin的“remington'spharmaceuticalsciences”中描述。这样的组合物将含有治疗有效量的化合物，优选纯化形式的化合物，以及合适量的载体，以为患者提供合适的施用形式。制剂应适合于施用方式。

本文使用的术语“光敏剂”是指被光吸收活化的光敏分子。光敏剂的光活化可以引起光化学反应中的活性氧(包括单线态氧)形成。这些活性氧可以破坏吸收光敏剂的细胞。本发明的上下文中的光敏剂可以指直接光敏剂，即光敏分子或直接光敏剂的前体，所述前体在靶细胞中转化为直接光敏剂。直接光敏剂的非限制性实例是卟啉(即光卟啉)、二氢卟吩和酞菁。光敏剂的前体的非限制性实例是5-氨基乙酰丙酸(ala)及其衍生物，例如诸如5-ala酯的酯。ala作为直接光敏剂原卟啉ix(ppix)的生物合成前体。适合于本发明的所有ala衍生物的共同点是它们可以代谢成ppix。

ppix显示了几个吸收峰(见图2)，最大光吸收(所谓的soret峰)在405nm处，弱得多的吸收峰在635nm处。后一个吸收峰可用于激发ppix，同时减少来自血源性血红蛋白(在635nm处具有更低的吸收)的干扰。ppix还在505nm处具有吸收峰。图2示例性地显示了波长范围为350nm至700nm的ppix吸光度。尽管本领域技术人员知道可以在与吸收最大值的波长相同的波长下以最小能量来激发分子，但也可能用不同波长的光来光活化(＝激活)分子。使用不同于最高吸收最大值的波长可以有助于引发不同的效果，例如靶组织中其他光吸收分子的干扰减少，或与紫-蓝光相比在采用红光的情况下组织穿透性变得更高。在ppix的情况下，与最适合在635nm处激发ppix的红光相比，最适合在405nm处激发ppix的紫(或蓝)光需要相当少的能量来激发ppix。然而，红光的组织穿透性比紫(或蓝)光的组织穿透要高得多，因此红光更适合在表皮的更深层激发ppix(moan等人，proceedingsofthespie，1996，第2625卷,第544至549页)，特别是在表皮显示出芽和/或乳头状出芽区域的情况下(schmitz等人，jdtschdermatolges.2018年8月；16(8):1002-1013)。

本文使用的术语“波长谱”是指特定波长范围的光。例如红光的波长谱为620nm至750nm。较窄的波长谱包括较小的波长范围，如所指出的光谱。例如，当与太阳光的波长谱(约100nm至1000nm)比较时，红光的波长谱(620nm至750nm)是较窄的波长谱。

本文使用的术语“疼痛视觉模拟量表”或“vas”是指疼痛强度的一维测量(参见mccormack等人，psycholmed1988；18：1007-19)。疼痛vas是连续量表，包括通常长10厘米(100mm)的标线，其由两个语言描述符标定，每个描述符都对应一个极端症状。对于疼痛强度，量表由“无疼痛”(评分为0)和“尽可能严重的疼痛”或“可想象的最糟糕的疼痛”(评分为10)所标定。

本文使用的术语“辐照度”是指每单位面积表面所接收的辐射通量(或功率)并以瓦特每平方厘米(w/cm²)表示。术语“辐照度”与“强度”在光强方面等同使用。

本文使用的术语“曝辐量”是指每单位面积接收的辐射能(焦耳每平方厘米；j/cm²)或换句话说为表面的辐照度随着辐照时间推移的积分。该术语与术语“有效光剂量”和“辐射通量”等同使用。

实施方案

在下文中，将更详细地定义本发明的不同方面。除非明确指出相反情况，否则如此定义的每个方面可以与任何其他方面结合。特别地，指示为优选或有利的任何特征可以与指示为优选或有利的任何其他特征组合。

在第一方面，本发明提供了包含光敏剂的组合物，其用于预防或治疗患者的皮肤病，其中组合物按以下步骤顺序使用：

(a)将所述组合物局部施用或皮下注射到所述患者的皮肤区域，

(b)将至少所述皮肤区域暴露于具有与太阳光类似或相同的波长谱以及优选辐照度的光持续30分钟至5小时，优选1小时至3小时，更优选1小时至2小时，和

(c)将至少所述皮肤区域暴露于比步骤(b)更窄的波长谱的光，优选在所述光敏剂的吸收光谱中仅包含一个最大值的光，更优选在635nm处包含最大值的光。

吸收光谱是吸光度与波长的函数关系图。技术人员知道测量化合物的吸收光谱的各种方法。一种这样的方法为分光光度法。因此，分光光度法使通常为0.1nm、0.5nm或1nm的窄波长范围的光透过溶液中包含待测化合物的样品。分光光度计测量被化合物吸收的光。在一定的波长范围例如可见光内使用这种测量形成了所述化合物的吸收光谱。代表这种吸收光谱的曲线通常具有带有吸收峰的一个或多于一个最大值。将最大值的峰称为吸收峰。技术人员还知道如何通过本领域已知的数学方法定义曲线的最大值，例如吸收光谱。用于可被区分的曲线的一种这样的方法是导数测试。该测试可以区分曲线的最大值、最小值和鞍点。在一阶导数测试中确定曲线的斜率。曲线中的最大值是曲线在该点从升高转变为降低的点。换句话说，曲线的一阶导数最大值为0。在二阶导数测试中，确定了在一阶导数测试中确定的点是否是最大值。在该点的二阶导数小于0的情况下，曲线在该点具有最大值。

换句话说，在施用包含光敏剂的组合物后，将待治疗区域暴露于波长谱与太阳光类似或相同的光下持续至少30分钟，然后暴露于具有更窄的波长谱的光。第二次曝光的波长谱仅包含所述光敏剂的吸收光谱的一个最大值(＝吸收峰)的波长。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，步骤(c)的光是红光、蓝光、绿光或紫光。

红光是指波长谱为620nm至750nm的光。紫光是指波长谱为380nm至450nm的光。蓝光是指波长谱为450nm至495nm的光。绿光是指波长谱为495nm至570nm的光。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，步骤(c)的光是红光或紫光。红光是指波长谱为620nm至750nm的光。紫光是指波长谱为380nm至450nm的光。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，步骤(c)的光是红光。与波长更短的光相比，红光具有优秀的组织穿透性的特定优势。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，皮肤区域包括被疾病影响的皮肤或易受疾病影响的皮肤。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，在步骤(a)之后和步骤(b)之前的停留时间间隔为1分钟至90分钟，特别为5分钟至60分钟，更特别为15分钟至30分钟，优选没有曝光。停留时间间隔允许组合物或至少其中包含的光敏剂有时间到达预期的靶细胞/组织。如果所使用的光敏剂是实际光敏剂的前体，则停留时间特别有利于允许由前体产生的实际光敏剂的代谢转化和积累。停留时间可以在没有光照的情况下。这特别有利于避免光敏剂的光漂白，光漂白可能在暴露于光之后发生。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，步骤(b)中使用的光具有与平均太阳光相似的辐照度和/或谱分布。优选地当患者位于患者可以愉快地停留的位置时进行步骤(b)，根据天气，在室外阴凉处或在阳光下或在室内靠近窗户。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，步骤(b)中使用的光是与太阳光(＝日光)的波长谱类似或相同的合成光。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，步骤(b)中使用的光导致至少8j/cm²的曝辐量，优选8j/cm²至75j/cm²，更优选10j/cm²至40j/cm²，最优选15j/cm²至30j/cm²。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，步骤(b)中使用的光比步骤(c)中使用的光具有更低的辐照度，优选步骤(b)中使用的光的辐照度是步骤(c)中辐照度的1/2至1/15，即1/2、1/3、1/4、1/5、1/6、1/7、1/8、1/9、1/10、1/11、1/12、1/13、1/14或1/15。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，步骤(b)在至少10℃下进行，优选15℃，更优选20℃。对于施用该组合物的对象的皮肤温度来说，温度是重要的。皮肤温度越低，在光敏剂前体的情况下，吸收或代谢转化越慢。如果温度太低，靶细胞中光敏剂的量可能不足以影响靶细胞。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，步骤(b)的光具有可见光的波长谱(即380nm至780nm)，优选在约410nm和/或505nm和/或635nm处具有相等的总辐照度或辐照峰值。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，步骤(b)的光的波长谱为570nm至650nm，优选570nm至630nm。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，步骤(b)的光的波长谱为360nm至460nm，优选380nm至440nm。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，步骤(b)的光是黄光和/或橙光。黄光是指波长谱为570nm至590nm的光。橙光是指波长谱为590nm至620nm的光。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，步骤(c)的光的波长为570nm至750nm，优选570nm至670nm，更优选约635nm。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，步骤(c)的光的波长为360nm至495nm，优选360nm至460nm，更优选约410nm。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，步骤(c)的红光产生10j/cm²至75j/cm²的曝辐量，优选25j/cm²至75j/cm²，更优选25j/cm2至45j/cm²，最优选37j/cm²。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，步骤(c)的紫光产生1j/cm²至30j/cm²的曝辐量，优选5j/cm²至15j/cm²。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，步骤(c)的曝光的持续时间为至少5分钟，优选5分钟至60分钟，更优选5分钟至30分钟，最优选5分钟至20分钟。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，光敏剂选自5-氨基乙酰丙酸(ala)、ala-酯，特别是5-氨基-4-氧代戊酸甲酯或5-氨基-4-氧代戊酸己酯或它们的衍生物。在本发明的前体，特别是生物合成的前体的情况下，其也被称为光敏剂。例如，5-氨基乙酰丙酸(ala)及其衍生物为生物合成的前体。只有在ala代谢转化后，才合成光敏分子原卟啉ix，从而介导pdt对光活化的反应。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，所述组合物被配制为纳米乳剂，其额外包含：

(a)至少一种水性组分，和

(b)载体，其包含，

(i)至少一种亲脂组分，

(ii)至少一种表面活性剂和

(iii)至少一种醇。

光敏剂必须被靶细胞吸收，或者在光敏剂首先被转化为前体的情况下才能有效。作为纳米乳剂的组合物制剂促进了光敏剂的吸收。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，载体存在于水性组分中，基于纳米乳剂的总重量，表面活性剂以1重量％至30重量％的量存在，醇以0.1重量％至10重量％的量存在。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，载体存在于水性组分中。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，基于纳米乳剂的总重量，表面活性剂以1重量％至30重量％的量存在，醇以0.1重量％至10重量％的量存在。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，基于纳米乳剂的总重量，水性组分以50重量％至98重量％的量存在。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，至少一种醇是异丙醇和/或1-丙醇。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，至少一种亲脂组分是甘油三酯和/或其混合物。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，至少一种表面活性剂是卵磷脂和/或聚氧乙烯型表面活性剂。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，乳化颗粒的平均直径为10nm至100nm。

在本发明的第一方面的优选实施方案中，皮肤病是过度增生疾病，优选角化病，更优选光化性角化病；基底细胞癌、原位鳞状细胞癌、疣、痤疮、酒渣鼻或炎性或感染性皮肤病。

在第二方面，本发明提供了在有需要的患者中治疗或预防皮肤病的方法，其中如本发明的第一方面所述，将光敏剂施用于患者的皮肤区域。因此，本发明的方法提供了在有需要的患者中治疗或预防皮肤病的方法，其包括以下步骤：

(a)将所述组合物局部施用或皮下注射到所述患者的皮肤区域，

(b)将至少所述皮肤区域暴露于波长谱与太阳光类似或相同的光下持续30分钟至5小时，优选1小时至3小时，更优选1小时至2小时，和

(c)将至少所述皮肤区域暴露于比步骤(b)更窄的波长谱的光，优选在所述光敏剂的吸收光谱中仅包含一个最大值的光，更优选在635nm处包含最大值的光。

本发明的第一方面的所有上述优选实施方案在本发明方法的上下文中同样是优选的。

在第三方面，本发明提供了一种试剂盒套装，其包括能够发射具有与太阳光和/或黄-红光或紫-蓝光类似或相同的波长谱的光的光源和用于执行本发明第二方面的方法的步骤(b)和(c)的操作说明。

在第四方面，本发明提供了光源和控制器，所述光源能够发射具有与太阳光和黄-红光或紫-蓝光类似或相同的波长谱和/或辐照度，其中控制器被程序化为用于执行本发明第二方面的方法的步骤(b)和(c)。

适合用于发射步骤(b)和步骤(c)的光谱的光源单独地在本领域中众所周知，并且可以组合用于本发明的所有方面。

实施例

实施例1：联合pdt对经历的疼痛的效果

面部、头皮和/或前额患有轻度至中度光化性角化病(ak)的患者用bf-200ala(ameluz)治疗，所述bf-200ala(ameluz)是含有7.8％的5-氨基乙酰丙酸(ala)的局部施用的基于纳米乳剂的凝胶。施用之后是在无光的情况下停留一段时间，然后进行两次不同的曝光。对象经历的疼痛随后由vas评分所决定。

研究群体：

招募了被诊断为临床确认的轻度至中度光化性角化症病变的男性和女性研究对象(63岁至85岁)(见表1)。

表1：研究群体和vas评分

治疗方案：

根据研究组的不同，研究治疗包括一次单独的光动力疗法(pdt)，其由一次(常规pdt)或两次照明周期(联合pdt)组成。

在脱脂并仔细去除治疗区域内ak病变的疤、结痂和角化过度后，将一薄层ameluz施用于病变处，从而覆盖ak病变处和周围0.5cm至1.0cm的健康皮肤。用不透光的闭合敷料覆盖治疗区域30分钟。在整个照明周期使ameluz保持在病变处。如kellner等人(brjdermatol，2015年4月；172(4):1146-8)所述，根据与光源的距离，用系统(swissredag；瑞士)进行利用人工太阳光的日光照明并且范围为15000勒克斯至25000勒克斯。与ppix活化相关的光谱区域的辐照度(570nm至590nm的绿色/黄色和620nm至640nm的橙色/红色)分别为21.14mw/cm²和3.04mw/cm²。这些波长下的组合有效光剂量为14.3j/cm²至24.2j/cm²，其取决于与光源的距离，在较小程度上，其取决于经治疗的表面相对于上限的角度，但绝不低于自然的日光pdt所需的9.4j/cm²至10.8j/cm²。在停留时间和去除不透光的敷料后，立刻开始日光照明并持续连续2小时。

然后立刻使用红色光源(bf-rhodoled灯)在距离皮肤表面5cm至8cm处对整个治疗区照明10分钟，从而导致37j/cm²的总光剂量。在第二次曝光周期之后，立刻使用疼痛视觉模拟量表(vas)评估所经历的疼痛(见图1)。将这个研究组的结果与reinhold等人(brjdermatol，2016年10月；175(4):696-705)描述的bf-200ala(ameluz)的第iii期试验的第二研究组进行比较。简而言之，第二研究组也接收了如上所述的bf-200ala(ameluz)的治疗，其中主要的区别是没有进行日光照明步骤(常规pdt)。

联合pdt组中的vas评分取决于治疗的区域，前额是疼痛最严重的区域(vas评分中位数为3)，然后是头皮区域(vas中位数为2)和面部区域(vas中位数为1)。从图1中可以理解，在常规pdt组中，面部/前额组(区域a)的vas评分中位数为5分，头皮区域(区域b)的vas评分中位数测定为6。与常规pdt相比，联合pdt组的疼痛明显减轻。

实施例2：联合pdt对治疗光化性角化病的功效

通过目测和通过触诊来评估如实施例1所述的常规pdt和联合pdt关于清除个人病变的有效性，并在治疗后12周与基线进行比较。

使用的pdt治疗(见实施例1)均导致病变完全清除率超过90％。关于皮肤质量的美容效果也与利用常规pdt达到的效果没有显著差异。

实施例3：联合pdt的复发率

与日光pdt相比，常规pdt治疗后12个月的光化性角化病复发率有显著差异。在常规pdt中，轻度病变的复发率为5.2％，而日光pdt为17.7％，对于中度病变的复发率分别为11.4％和20.1％。这导致常规pdt治疗后12个月的总复发率为9.4％，而日光pdt为19.9％。复发率的这种显著差异代表了日光pdt的主要缺点。

在施用当天，整个研究人群还没有达到治疗后12个月的时间，但初步结果显示，联合pdt组治疗后12个月的总复发率约为10％。这实际上与常规pdt达到的9.4％的复发率相同，并且与仅使用日光pdt达到的19.9％相比有显著改善。

总之，本发明教导了光动力疗法(pdt)中光敏剂的新应用方式，其出人意料地组合了日光pdt显著减轻疼痛的优点和常规pdt降低复发率的优点。