1.一种仿真胆囊壁合成材料的制备方法,其特征在于,包括步骤:
a.通过将壳聚糖溶解在酸性液体中,制成壳聚糖质量浓度范围为0.5%-12%的壳聚糖溶液;
b.基于所述壳聚糖溶液,制成壳聚糖支架;
c.将经过第一培养基培养后的脂肪干细胞加入到水凝胶中以获得具有预设细胞密度的混合物,并且将所述混合物浇注于所述壳聚糖支架上;以及
d.将丝素蛋白溶液浇注在已浇注于所述壳聚糖支架上的所述混合物之上以形成复合支架,然后将所述复合支架与质量浓度范围为0.5%-10%的cacl2溶液交联反应5-60分钟后置于第二培养基中,从而制成仿真胆囊壁合成材料。
2.根据权利要求1所述的仿真胆囊壁合成材料的制备方法,其中,还包括步骤:将所述复合支架从所述第二培养基中取出,然后在温度范围为-30℃-5℃的环境下进行冷冻后去除水分。
3.根据权利要求2所述的仿真胆囊壁合成材料的制备方法,其中,还包括步骤:对已去除水分的所述复合支架使用射线进行消毒灭菌处理。
4.根据权利要求1、2或3所述的仿真胆囊壁合成材料的制备方法,其中:
在步骤a中,所述壳聚糖是由甲壳素经过碱性脱乙酰作用制成,并且/或者所述酸性液体是体积占比为1%的醋酸,并且/或者所述壳聚糖溶液的质量浓度为2.5%;并且/或者
在步骤b中,使所述壳聚糖溶液通过沉淀形成微水凝胶并进行清洗,然后将其浇注在模具上进行自沉淀后再去除残留水分,从而获得所述壳聚糖支架;并且/或者
在步骤c中,所述脂肪干细胞使用以下步骤制成:
获得与母体分离的脂肪组织,并将其在质量浓度范围为0.1%-1%的氯霉素溶液中进行浸泡洗涤;
将经过浸泡洗涤后的所述脂肪组织切成小块并置于质量浓度范围为0.05%-0.2%的i型胶原酶中,并且在温度范围为35℃-39℃的环境下消化0.5-2小时后使用滤网进行过滤,并且在温度范围为35℃-39℃的环境下进行离心处理5-20分钟;
将经过离心处理获得的细胞冲悬在所述第一培养基中;以及
将所获得的细胞接种在培养皿上,在常规培养条件下培养,当细胞融合度达到80%-90%时以预设比例传代,将培养液每间隔1-3天进行更换,并将得到的脂肪干细胞进行流式细胞检测,并且进行成骨成脂分化鉴定;并且/或者
在步骤c中,所述水凝胶是通过将经高碘酸盐氧化后的海藻酸与明胶进行交联反应后制成;并且/或者
在步骤d中,所述丝素蛋白溶液使用以下步骤制成:
将家蚕蛹在碳酸钠中煮沸20-60分钟,然后使用去离子进行清洗以去除胶状的丝胶蛋白;
在室温下进行干燥后,将脱丝胶后的丝素蛋白纤维溶解在溴化锂溶液中2-6小时;
然后进行透析2-4天,从而获得所述丝素蛋白溶液;并且/或者
在步骤d中,所述复合支架与质量浓度范围为2%的cacl2溶液交联反应10分钟。
5.根据权利要求4所述的仿真胆囊壁合成材料的制备方法,其中:
在步骤a中,所述甲壳素是提取自甲壳类动物外骨骼和/或真菌的细胞壁;并且/或者
在步骤b中,使用三蒸水对所述壳聚糖溶液通过沉淀所形成的微水凝胶进行清洗,所述模具是多孔板;并且/或者
在步骤c中,所述脂肪组织在质量浓度为0.25%的氯霉素溶液中浸泡洗涤3次,并且/或者所述离心处理的加速度为160g,并且/或者所述滤网是直径为200mm的尼龙滤网,并且/或者所述培养皿的直径为10cm,并且/或者所述预设比例是1:3,并且/或者所述脂肪干细胞通过cd29、cd9、cd105和cd45进行流式细胞检测;并且/或者
在步骤c中,将所述水凝胶在温度范围为35℃-39℃的环境下以50-110rpm范围内的搅拌速度进行搅拌预热后,再将所述脂肪干细胞加入到经搅拌预热后的水凝胶中。
6.根据权利要求5所述的仿真胆囊壁合成材料的制备方法,其中,所述水凝胶中的海藻酸和水的质量占比分别是30%和70%,并且所述海藻酸的氧化度为30%。
7.根据权利要求1、2或3所述的仿真胆囊壁合成材料的制备方法,其中,所述预设细胞密度为1×106个细胞/ml,并且/或者所述第一培养基和/或所述第二培养基是含有质量浓度为10%的胎牛血清和质量浓度为1%的青霉素-链霉素溶液的dmem培养基。
8.一种仿真胆囊壁合成材料,其特征在于,所述仿真胆囊壁合成材料是根据权利要求1-7中任一项所述的仿真胆囊壁合成材料的制备方法制成的仿真胆囊壁合成材料。
9.一种根据权利要求8所述的仿真胆囊壁合成材料在制备仿真胆囊壁中的应用。
10.一种仿真胆囊壁,其特征在于,所述仿真胆囊壁包括根据权利要求8所述的仿真胆囊壁合成材料。