一种基于预防奶牛乳腺炎的杀菌制剂及制备方法与流程

本发明涉及药物制备技术领域，具体是一种基于预防奶牛乳腺炎的杀菌制剂及制备方法。

背景技术：

奶牛乳腺炎是通过化学、物理或者微生物因素感染奶牛乳腺而引发的炎症反应,是对奶牛养殖业危害最严重的一种疾病。目前,全世界的奶牛约有1/3患有不同类型的乳腺炎,日本的平均发病率为45.1％，我国的发病率高达70％～80％1-2。

传统方法(药浴法)可预防乳腺炎，但是污染的浴杯将导致交叉感染。而且在我国东北及内蒙各别地区，冬季气温很低，由于常规药浴液需与水混合使用，气温过低容易使得奶牛乳头发生冻伤；

另外，抗生素是治疗奶牛乳房炎的有效方法，在奶牛养殖业中常被用于医治奶牛的乳腺炎，且被频繁地超剂量使用，不仅引起奶牛的耐药性，由此还导致了牛奶中含有高浓度的药物残留。牛奶中抗生素的残留是无法通过清洗、浸泡、加热等方法去除的，因此，抗生素残留严重影响乳品质量，给奶牛养殖业和乳品加工业造成巨大的经济损失。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种基于预防奶牛乳腺炎的杀菌制剂及制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种基于预防奶牛乳腺炎的杀菌制剂，所述的杀菌制剂包括以下重量份的原料组成:

蒲公英10～20份、金银花10～20份、鱼腥草5～15份、野菊花8～16份、甘草4～9份、黄芩7～18份、漏芦2～8份、王不留行4～12份、夏枯草3～11份、连翘2～9份、紫花地丁1～5份、牛蒡子2～7份、浙贝1～4份。

作为本发明进一步的方案：所述的杀菌制剂具体按照重量份数由以下原料组成：

蒲公英15份、金银花15份、鱼腥草8份、野菊花9份、甘草7份、黄芩13份、漏芦5份、王不留行8份、夏枯草7份、连翘5份、紫花地丁3份、牛蒡子4份、浙贝2份。

作为本发明再进一步的方案：所述杀菌制剂为外用制剂。

作为本发明再进一步的方案：所述外用制剂的剂型为凝胶剂。

作为本发明再进一步的方案：所述凝胶剂的ph值为7.0。

一种基于预防奶牛乳腺炎的杀菌制剂的制备方法，包括如下材料：

蒲公英、金银花、鱼腥草、野菊花、甘草、黄芩、漏芦、王不留行、夏枯草、连翘、紫花地丁、牛蒡子、浙贝、绿原酸对照品、甘油、羧甲基纤维素钠、山梨酸钾、亚硫酸钠、乙醇、三乙醉胺、甲醇；

具体步骤如下：

一、将蒲公英、金银花、鱼腥草、野菊花、甘草、黄芩、漏芦、王不留行、夏枯草、连翘、紫花地丁、牛蒡子、浙贝鉴定后去除杂物，冷水洗净，并置于60℃烘箱中进行烘干，并分别置于粉碎机中进行粉碎，并粉碎过40目筛，密封保存备用；

二、精密称取绿原酸对照品2mg,加入50％甲醇溶液溶解并定容于10ml棕色容量瓶中制成200ug/ml的绿原酸溶液,再从中分别精密量取2.5，2,1.25,0.75,0.5ml制成50,40,25,15,10ug/ml的标准品溶液待用，将其中25ug/ml的绿原酸标准品溶液以50％甲醇溶液作空白试液,在紫外线波长范围内扫描，测得其最大吸收波长为327nm处，再以50％甲醇溶液作空白试液将配制好的各浓度绿原酸标准品溶液于327nm处分别测定其吸光度值，获得绿原酸的标准回归方程；

三、按照上述重量份分别精密称取金蒲公英、金银花、鱼腥草、野菊花、甘草、黄芩、漏芦、王不留行、夏枯草、连翘、紫花地丁、牛蒡子、浙贝的粉末，加人一定倍数的水,80℃水浴煎煮一定时间再浓缩至1:2得到浸膏,放冷,再加人75％的乙醇并搅拌,过夜，采用布氏漏斗过滤得到滤液,减压浓缩至1:1制得生药量为lg/ml的溶液，微孔滤膜过滤后备用；

四、以绿原酸提取率为指标,通过加水量煎煮次数、煎煮时间3个变量在单因素试验确定不同水平后,以正交试验方式确定其最佳提取条件；

五、将一定量甘油加入一定量羧甲基纤维素钠中研磨均匀,加入适量纯化水至10ml充分溶胀,放置一定时间后加入山梨酸钾,放置一段时间后进行外用凝胶制剂的评价，通过羧甲基纤维素钠,甘油,山梨酸钾的量的不同,单因素试验确定不同水平后再以正交试验方式确定最佳提取条件；

六、将复方提取液、亚硫酸钠加入到上述最优基质中,使各成分满足处方要求,用三乙醇胺调节ph值至7.0，得到凝胶剂。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明中蒲公英、金银花、鱼腥草、野菊花、甘草、黄芩、漏芦、王不留行、夏枯草、连翘、紫花地丁、牛蒡子、浙贝的功效是清热解毒、消肿散结，具备杀菌抗炎、增强免疫活性的作用，漏芦、王不留行又具有通络下乳的功效，可以促进乳汁的分泌，且蒲公英是菊科植物蒲公英和同属多种植物的干燥全草,具有抗菌、抗肿瘤,提高免疫及促进泌乳的作用，并通过采用羧甲基纤维素钠作为凝胶基质,主要特点是其易溶，黏附性和成膜性均优良而且价格低廉，加人甘油作为处方的润湿剂主要起润滑及保湿作用,可使凝胶外观细腻、均匀，山梨酸钾是对机体毒性最小的防腐剂,可抑制细菌、霉菌的生长，亚硫酸钠主要起抗氧化作用，三乙醇胺是常用中和剂,通过与羧甲基纤维素钠的中和可形成稳定的高分子结构,实现增稠和保湿的效果，调节ph值至7.0的目的是对奶牛乳房皮肤无刺激性，从而使得该杀菌制剂可对奶牛乳腺炎具有有效预防的效果。

附图说明

图1为本发明中标准曲线吸光度(y)与绿原酸含量(x)回归关系图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明实施例中，一种基于预防奶牛乳腺炎的杀菌制剂，所述的杀菌制剂包括以下重量份的原料组成:

蒲公英10～20份、金银花10～20份、鱼腥草5～15份、野菊花8～16份、甘草4～9份、黄芩7～18份、漏芦2～8份、王不留行4～12份、夏枯草3～11份、连翘2～9份、紫花地丁1～5份、牛蒡子2～7份、浙贝1～4份。

所述的杀菌制剂具体按照重量份数由以下原料组成：

蒲公英15份、金银花15份、鱼腥草8份、野菊花9份、甘草7份、黄芩13份、漏芦5份、王不留行8份、夏枯草7份、连翘5份、紫花地丁3份、牛蒡子4份、浙贝2份。

所述杀菌制剂为外用制剂。

所述外用制剂的剂型为凝胶剂。

所述凝胶剂的ph值为7.0。

一种基于预防奶牛乳腺炎的杀菌制剂的制备方法，包括如下材料：

蒲公英、金银花、鱼腥草、野菊花、甘草、黄芩、漏芦、王不留行、夏枯草、连翘、紫花地丁、牛蒡子、浙贝、绿原酸对照品、甘油、羧甲基纤维素钠、山梨酸钾、亚硫酸钠、乙醇、三乙醉胺、甲醇；

具体步骤如下：

一、将蒲公英、金银花、鱼腥草、野菊花、甘草、黄芩、漏芦、王不留行、夏枯草、连翘、紫花地丁、牛蒡子、浙贝鉴定后去除杂物，冷水洗净，并置于60℃烘箱中进行烘干，并分别置于粉碎机中进行粉碎，并粉碎过40目筛，密封保存备用；

二、精密称取绿原酸对照品2mg,加入50％甲醇溶液溶解并定容于10ml棕色容量瓶中制成200ug/ml的绿原酸溶液,再从中分别精密量取2.5，2,1.25,0.75,0.5ml制成50,40,25,15,10ug/ml的标准品溶液待用，将其中25ug/ml的绿原酸标准品溶液以50％甲醇溶液作空白试液,在紫外线波长范围内扫描，测得其最大吸收波长为327nm处，再以50％甲醇溶液作空白试液将配制好的各浓度绿原酸标准品溶液于327nm处分别测定其吸光度值，获得绿原酸的标准回归方程；

三、按照上述重量份分别精密称取金蒲公英、金银花、鱼腥草、野菊花、甘草、黄芩、漏芦、王不留行、夏枯草、连翘、紫花地丁、牛蒡子、浙贝的粉末，加人一定倍数的水,80℃水浴煎煮一定时间再浓缩至1:2得到浸膏,放冷,再加人75％的乙醇并搅拌,过夜，采用布氏漏斗过滤得到滤液,减压浓缩至1:1制得生药量为lg/ml的溶液，微孔滤膜过滤后备用；

四、以绿原酸提取率为指标,通过加水量煎煮次数、煎煮时间3个变量在单因素试验确定不同水平后,以正交试验方式确定其最佳提取条件；

五、将一定量甘油加入一定量羧甲基纤维素钠中研磨均匀,加入适量纯化水至10ml充分溶胀,放置一定时间后加入山梨酸钾,放置一段时间后进行外用凝胶制剂的评价，通过羧甲基纤维素钠,甘油,山梨酸钾的量的不同,单因素试验确定不同水平后再以正交试验方式确定最佳提取条件；

六、将复方提取液、亚硫酸钠加入到上述最优基质中,使各成分满足处方要求,用三乙醇胺调节ph值至7.0，得到凝胶剂。

结果分析，如图1可知，标准曲线吸光度(y)与绿原酸含量(x)回归关系为:y＝0.06647x+0.0447,r²＝0.9978,最佳线性范围为10～50ug/ml。

经多次试验,最终确定主要考察加水量、煎煮时间、煎煮次数3种因素3种水平,以正交l9(3⁴)设计试验,结果见表1：

表1

由表1可见,加水量6倍、煎煮1h、煎煮3次的情况下为最佳提取条件,得出的绿原酸浓度为11.20ug/ml,提取率为0.28％，极差r表明,对提取影响因素最大的为煎煮次数,其次是加水量，在进行精密度和重现性验证试验时,rsd分别为0.17％、0.15％，证明本试验精密度和重复性良好。

经多次试验,最终确定主要考察羧甲基纤维素钠、甘油、山梨酸钾3种因素3种水平，以正交l9(3⁴)设计试验，凝胶为外用制剂,从光泽性、涂展性、均匀度三个方面进行评价,评分标准见表2,试验结果见表3；

表2

表3

由表3可见,羧甲基纤维素钠0.28g.甘油1.40g、山梨酸钾0.050g时凝胶基质的外观性质最好，极差r表明,羧甲基纤维素钠对凝胶基质的影响最大，其次是甘油,影响最小的是山梨酸钾，验证试验证明精密度和重复性良好。

本发明的工作原理是：

本发明选用羧甲基纤维素钠作为凝胶基质,主要特点是其易溶，黏附性和成膜性均优良而且价格低廉，加人甘油作为处方的润湿剂主要起润滑及保湿作用,可使凝胶外观细腻、均匀，山梨酸钾是对机体毒性最小的防腐剂,可抑制细菌、霉菌的生长，亚硫酸钠主要起抗氧化作用，三乙醇胺是常用中和剂,通过与羧甲基纤维素钠的中和可形成稳定的高分子结构,实现增稠和保湿的效果，调节ph值至7.0的目的是对奶牛乳房皮肤无刺激性。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。