1.肺水肿兔动物模型的建立方法,其特征在于:将待实验动物外接间断注入改变肺水含量增多的药剂,以增加肺间质、肺泡和细胞内的液体含量从而诱导模型产生肺水肿病变。
2.根据权利要求1所述的肺水肿兔动物模型的建立方法,其特征在于:所述实验动物的间断注入包括以下步骤:1)将待试验动物分为若干实验组;
2)实验组中的变量包括动物的体位以及药剂注入方式;
3)在注入过程中利用定量复苏,每次复苏囊通气后进行肺部超声检查。
3.根据权利要求2所述的肺水肿兔动物模型的建立方法,其特征在于:所述步骤3)中,超声检测的方法如下:
i)将每侧肺依次分为第一区域、第二区域和第三区域;
ii)每个区域分为上下两个部分,随后通过标记区分左侧、右侧、上侧和下侧;
iii)超声扫描过程中超声探头与肋骨垂直,扫描第一区域时采用仰卧位,扫描第二区域时采用侧卧位,扫描第三区域时采用俯卧位。
4.根据权利要求3所述的肺水肿兔动物模型的建立方法,其特征在于:所述步骤i)中区域划分方法为胸骨旁线至腋前线之间的区域为第一区域,腋前线至腋后线之间的区域为第二区域,腋后线至椎骨旁线的区域为第三区域。
5.根据权利要求1所述的肺水肿兔动物模型的建立方法,其特征在于:所述诱导病变后还包括肺组织取材,肺组织取材包括以下步骤:
s1,对每组待试验动物,在注入药剂量累计达60ml~80ml后,采用空气栓塞法处死;
s2,剖胸取出双肺,在双侧肺门根部进行结扎,在结扎线上离断气管;
s3,将肉眼可见病变部位的肺组织楔形取材后立即置于3%~4%含量的多聚甲醛溶液中;
s4,将取材组织放置于冰箱2~4摄氏度保存24小时固定后取出;
s5,将组织石蜡包埋后连续切片,切片厚度为3~5um。
6.根据权利要求5所述的肺水肿兔动物模型的建立方法,其特征在于:将石蜡切片进行苏木精-伊红染色法染色。
7.根据权利要求6所述的肺水肿兔动物模型的建立方法,其特征在于:将染色后的切片进行病理分析,分析过程如下:
a)烤片:将切片置于60℃恒温干燥箱内2h;
b)常规脱蜡水化:将切片置于二甲苯5min*2次脱蜡后,分别置于100%、100%、95%、95%、90%乙醇中各5min,除去二甲苯;
c)蒸馏水冲洗5min*3次,洗去乙醇;
d)苏木精染色15min,流动水冲洗15s;
e)1%盐酸酒精脱色3s,流动水冲洗15min;
f)伊红染色2min,流动水冲洗15s去除浮色;
g)脱水:将切片分别置于90%、95%、95%、100%、100%乙醇中各5min,二甲苯5min*2,使标本透明;
h)从二甲苯中取出已透明的载玻片,滴加适量中性树胶,盖上盖玻片封固标本,在光学显微镜下观察肺组织病理变化。
8.根据权利要求5所述的肺水肿兔动物模型的建立方法,其特征在于:所述步骤s2中,对肺部进行肺干重称量,所述肺干重称量方法如下用吸水纸吸净肺表面水分后进行称重,即为肺湿重,然后将肺组织放入干燥箱72小时后称重。
9.根据权利要求8所述的肺水肿兔动物模型的建立方法,其特征在于:对照正常肺组织湿干比,确定发生肺水肿病变的实验动物。
10.根据权利要求1、2或5任一项所述的肺水肿兔动物模型的建立方法,其特征在于:所述药剂为生理盐水。