一种鸦胆子苦醇在制备治疗缺血性脑卒中的药物中的应用

本发明属于医药
技术领域：
，具体涉及一种鸦胆子苦醇在制备治疗缺血性脑卒中的药物中的应用。
背景技术：
：心血管疾病中脑卒中的发病率一直居高不下，特别是缺血性脑卒中占多数。缺血性脑卒中是由于局部脑缺血及永久性脑梗死引发的突发神经功能缺损。其常见原因包括大动脉的动脉粥样硬化性闭塞、脑栓塞性梗死、腔隙性脑梗和由远端动脉狭窄及脑血流下降导致的分水岭区域梗死。脑卒中患者约有1/3在发病后不久死亡，幸存者则由于偏瘫、失语等后遗症致残丧失工作能力甚至生活自理能力。缺血性脑卒中作为一种常见疾病，严重危害人类的健康，影响着人类的生活质量，并给患者家庭带来沉重的经济负担。脑缺血后引起脑组织损伤的机制包括水肿、微血管血栓形成、程序性细胞死亡(凋亡)以及梗塞造成的细胞坏死。其中，炎性介质(如il-1β，肿瘤坏死因子-α等)参与介导了脑水肿和微血管血栓形成，引起颅内压增高。另外，许多因素可以引起细胞坏死，包括储存的atp的耗竭、电解质紊乱(包括钙内流)、自由基引起细胞膜的脂质过氧化、兴奋性神经毒性和乳酸堆积造成的酸中毒等。抗脑缺血性脑卒中药物种类繁多，但绝大多数药物的疗效并不另人满意，且药物毒副作用较大。因此研究开发安全有效防治缺血性脑卒中的新药将是摆在我们面前的一项艰巨任务。鸦胆子是一种在亚洲地区广泛分布，尤其在中国南方地区较多的植物。作为一味中药材，它可以治疗癌症，阿米巴痢疾，疟疾等疾病。鸦胆子苦醇是从鸦胆子中分离出的一种醌类化合物，它被用于抗癌，抗感染，抗疟，抗病毒等。鸦胆子苦醇能够抑制肿瘤细胞的增殖，但对正常细胞的毒性较小。目前对于鸦胆子苦醇在缺血性脑卒中防治领域里的研究和应用还未见文献报道。技术实现要素：本发明的目的是提供一种鸦胆子苦醇在制备治疗缺血性脑卒中的药物中的应用，从而为治疗缺血性脑卒中提供了一种新的药物。本发明提供了一种鸦胆子苦醇在制备治疗缺血性脑卒中的药物中的应用，其中，所述鸦胆子苦醇的分子式为c26h32o11，分子量为520.54，分子结构式为：优选的，所述药物为鸦胆子苦醇与药物赋形剂或载体结合制成的药物组合物。优选的，所述药物赋形剂为溶剂、乳化剂、增塑剂、崩解剂、填充剂、粘合剂、甜味剂或润滑剂中的任意一种或至少两种的组合。优选的，所述药物组合物的剂型可以为液体制剂、颗粒剂、片剂、冲剂、胶丸、胶囊、缓释剂、滴丸剂或注射剂。优选的，所述药物组合物的剂型为注射剂优选的，所述药物组合物的给药方式可以为口服、静脉内注射或腹腔注射。优选的，所述的缺血性脑卒中为急性期和修复期的缺血性脑卒中。与现有技术相比，本发明提供了一种鸦胆子苦醇在制备治疗缺血性脑卒中的药物中的应用，具有以下优点和有益效果：经过研究发现，鸦胆子苦醇可明显改善大鼠脑缺血再灌注损伤引起的神经行为学障碍、缩小脑梗塞体积、减轻脑缺血大鼠脑水肿。因此，鸦胆子苦醇具有成为缺血性脑卒中防治药物的潜力，具有较强的临床应用价值。附图说明图1为实施例1中对照组、模型组、5mg/kg鸦胆子苦醇组和10mg/kg鸦胆子苦醇组的大鼠的脑切片的照片。具体实施方式为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明优选实施方案进行描述，但是应当理解，这些描述只是为了进一步说明本发明的特征和优点，而不是对本发明权利要求的限制。本发明所有原料，对其来源没有特别限制，在市场上购买的或按照本领域技术人员熟知的常规方法制备的即可。本发明优选实施例中试验用的大鼠为健康成年雄性sprague-dawley(sd)大鼠，清洁级，体重为240-260g，购自南通大学实验动物中心。本发明优选实施例中所采用的鸦胆子苦醇购自sigma-aldrich；所采用的红四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium，ttc)粉剂购自上海灵锦精细化工有限公司。本发明优选实施例中所采用的鸦胆子苦醇注射剂为鸦胆子苦醇和溶剂结合制成的注射剂，其中，溶剂由10％的dmso、40％的聚乙二醇200和50％的生理盐水组成。本发明中术语“再灌注”指恢复血流供应。实施例1测试鸦胆子苦醇对sd(sprague-dawley)大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用：将48只大鼠随机分为4组，分别命名为对照组、模型组、5mg/kg鸦胆子苦醇组和10mg/kg鸦胆子苦醇组，每组12只。模型组：参照longaez方法并稍作改良的大脑中动脉线栓法(middlecerebralarteryocclusion,mcao)制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。尼龙线插入平均深度为18.5土0.5mm(从eca分叉处算起)，结扎固定尼龙线，缝合皮肤，栓线外留lcm线头。缝合皮肤2h后再灌注24h，灌注时勿需再次麻醉和切开颈部，提拉栓线至有阻力时表明尼龙线头端己达到ica分叉切口处，血流再通，大鼠苏醒后出现血管栓塞的同侧hornor征和对侧肢体运动障碍即为模型成功。对照组：按照模型组的方法将尼龙线插入，但平均深度为l.0cm(从eca分叉处算起)，其余步骤同模型组，制备得到对照组大鼠模型。5mg/kg鸦胆子苦醇组：按照模型组的方法制备得到大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，灌注的同时将大鼠通过腹腔注射鸦胆子苦醇注射剂，剂量为5mg/kg。10mg/kg鸦胆子苦醇组：按照模型组的方法制备得到大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，灌注的同时将大鼠通过腹腔注射鸦胆子苦醇注射剂，剂量为10mg/kg。神经行为学评分参考zealonga6分制对模型组、对照组、5mg/kg鸦胆子苦醇组和10mg/kg鸦胆子苦醇组的大鼠神经行为学进行评分。评分标准为：0分：无神经损伤症状；1分：不能完全伸展对侧前爪；2分：向外侧转圈；3分：向对侧倾倒；4分：不能自发行走，意识丧失；5分：死亡。表1各组大鼠神经行为学评分组别动物数神经行为学评分对照组120±0模型组123.17±0.755mg/kg鸦胆子苦醇组121.17±0.75***10mg/kg鸦胆子苦醇组120.67±0.82***注：与模型组相比，***表示p<0.001各组大鼠神经行为学评分结果见表1，对照组动物无神经功能缺损，其它各组均有不同程度的神经功能缺损分值。5mg/kg鸦胆子苦醇组和10mg/kg鸦胆子苦醇组与模型组神经行为学评分具有非常显著的差异(p<0.001)。说明鸦胆子苦醇能明显改善缺血再灌注大鼠的神经行为学功能，且有剂量依赖性。脑梗死灶测量分别取模型组、对照组、5mg/kg鸦胆子苦醇组和10mg/kg鸦胆子苦醇组的大鼠各6只，迅速取脑，并去除嗅脑、小脑和低位脑干，冰冻10分钟，从额极到枕极作2mm厚度的连续额状切片，切片置于0.5％ttc溶液中，于37℃避光孵育30分钟，间隔5分钟摇动切片。然后将切片置于4％多聚甲醛缓冲液中固定，24h后拍照，所得的照片如图1所示，其中黑色区为正常脑组织，白色区为梗死区。将照片输入计算机，用imagej&scionimage图像处理软件计算梗死面积，各脑片梗死面积之和乘以厚度(2mm)为总的梗死体积，脑梗死灶体积与全脑体积比为脑梗死百分体积。表2各组大鼠脑梗死百分体积组别动物数脑梗死百分体积(％)对照组60±0模型组611.52±4.165mg/kg鸦胆子苦醇组66.10±1.55***10mg/kg鸦胆子苦醇组62.81±1.60***注：与模型组相比，***表示p<0.001。各组大鼠脑梗死百分体积结果见表2，与模型组相比，鸦胆子苦醇组脑梗死百分体积均明显缩小，以鸦胆子苦醇高剂量组作用最为显著(p<0.001)。脑含水量测定分别取模型组、对照组、5mg/kg鸦胆子苦醇组和10mg/kg鸦胆子苦醇组的大鼠各6只，将大鼠迅速断头取脑，用干湿法测脑组织含水率，具体为：在冰块上将大鼠迅速断头取脑，然后将取出的脑组织放在一个内有生理盐水湿润的定性滤纸的培养皿中，以防水分蒸发，同时快速去掉脑皮质表面的软脑膜和凝血块；用分析天秤分别准确称量处理后的大脑左右两个半球的重量，然后置于100℃烤箱24小时后，再次称重，以[湿重－干重)/湿重]×100％即为相对含水量。表3各组大鼠脑相对含水量注：与对照组相比，##表示p<0.01；与模型组相比，*表示p<0.05，**表示p<0.01。各组大鼠脑相对含水量的测定结果见表3，与模型组相比，5mg/kg鸦胆子苦醇组和10mg/kg鸦胆子苦醇组的大鼠的缺血侧侧脑组织(右半球)含水量都显著低于模型组的大鼠。该结果说明，鸦胆子苦醇可显著降低缺血再灌注损伤脑组织的含水量，减轻缺血侧脑半球水肿程度。以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点，对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。当前第1页12