一种负载有干细胞外泌体和重组胶原蛋白的水凝胶及其制备方法与应用与流程

1.本发明属于凝胶制剂技术领域，具体涉及一种负载有干细胞外泌体和重组胶原蛋白的水凝胶及其制备方法与应用。


背景技术：

2.目前市场上抗衰美白的护肤品种类多样，抗衰美白功效参差不齐。为保持护肤品中活性组分的抗衰美白功效，通常于护肤品中添加多种添加剂组分，以维持该类护肤品的稳定性，然而这些额外添加的组分对皮肤不够温和，因此，开发一种组分简单、稳定性好且具有良好抗衰美白功效的水凝胶具有重要意义。


技术实现要素：

3.针对现有技术中存在的问题，本技术旨在提供一种负载有干细胞外泌体和重组胶原蛋白的水凝胶及其制备方法与应用，本发明水凝胶具有提高皮肤光泽度、改善皮肤弹性、降低皮肤粗糙度及祛皱的功效。
4.基于上述目的，本技术采用的技术方案如下：
5.第一方面，本技术提供一种负载有干细胞外泌体和重组胶原蛋白的水凝胶，以重量百分比计，所述水凝胶包括如下组分：干细胞外泌体0.1wt％～0.5wt％、重组胶原蛋白0.1wt％～0.5wt％、透明质酸钠2.5wt％～7.5wt％。
6.干细胞外泌体，是一种能被大多数干细胞分泌的微小囊泡，直径大约在30～150nm，由脂质、蛋白质和核酸组成。外泌体一旦通过胞吐作用从干细胞中释放，复杂的混合因子能作为信号分子传递给其他细胞，从而改变其他细胞的功能。干细胞外泌体能够持续修复衰老细胞，促进表皮细胞再生，强化肌肤自然代谢能力与黑色素细胞运作能力，从根源调节肌肤状态，达到抗衰美白的效果。
7.胶原蛋白存在于人体皮肤细胞的外基质中，胶原蛋白约占皮肤外基质的80％。人体每天约需更新10％的胶原蛋白，如果合成速度跟不上代谢速度，人体就会缺乏胶原蛋白，表现为皮肤缺乏弹性。胶原蛋白流失，将导致肌肤问题不断：皮肤松垮、色素沉着等。目前化妆品常用的胶原蛋白主要是动物来源，例如从猪皮、牛跟腱、鱼皮等动物组织提取，这种胶原为异种胶原，对人体具有免疫排斥反应，且动物来源胶原蛋白可能会携带病毒风险，例如，猪流感、疯牛病、猪丹毒等。而重组胶原蛋白是通过基因工程技术得到的人源胶原蛋白，对人体无免疫排斥反应，且无携带病毒风险，对人体皮肤十分的友好。重组胶原蛋白能够促进肌底胶原再生和抑制黑色素生成，具有优异的抗衰美白效果。
8.透明质酸钠是人体内一种固有的成分，是一种葡聚糖醛酸，没有种属特异性，它广泛存在于胎盘、羊水、晶状体、关节软骨、皮肤真皮层等组织；器官中它分布在细胞质、细胞间质中，对其中所含的细胞和细胞器官本身起润滑与滋养作用，透明质酸钠对人体具有十分良好的生物安全性。
9.本技术水凝胶以透明质酸钠作为水凝胶的主要赋形材料，于水凝胶中同时负载了重组胶原蛋白和干细胞外泌体，使得本技术水凝胶同时具有抗衰美白及祛皱的功效。
10.进一步地，以重量百分比计，所述水凝胶包括：干细胞外泌体0.3wt％、重组胶原蛋白0.3wt％、透明质酸钠5.0wt％。
11.经试验发现，当水凝胶中干细胞外泌体、重组胶原蛋白和透明质酸钠的含量分别为0.3wt％、0.3wt％和5.0wt％时，所制得的水凝胶具有相对更优的抗衰美白及祛皱功效。
12.进一步地，所述透明质酸钠的相对分子质量为6
×
103～1.2
×
106。
13.进一步地，所述透明质酸钠的相对分子质量为2
×
105。
14.进一步地，以重量百分比计，所述水凝胶还包括如下组分：谷胱甘肽0.05wt％～0.15wt％、九肽-1 0.05wt％～0.15wt％、1,2-己二醇0.01wt％～0.1wt％和甘油2～5wt％。
15.进一步地，以重量百分比计，所述水凝胶还包括如下组分：谷胱甘肽0.1wt％、九肽-1 0.1wt％、1,2-己二醇0.05wt％和甘油3wt％。
16.谷胱甘肽、九肽-1和1,2-己二醇均具有一定的抗衰美白效果，甘油具有补水保湿锁水的功效，使用后可以在肌肤表面形成一层保护膜，保护肌肤不受空气中的灰尘和杂质的侵害，使肌肤长效保持水润，甘油不仅可以使肌肤更加的湿润，还可以使妆容更加服帖。
17.第二方面，本技术提供一种负载有干细胞外泌体和重组胶原蛋白的水凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
18.将干细胞外泌体、重组胶原蛋白、透明质酸钠按照权利要求1所述重量百分比加入水中溶解混匀制得混合液，调节混合液的ph值至6～8，并将混合液于2℃～6℃冷藏12～36h，制得水凝胶。
19.进一步地，调节混合液的ph值至7，将混合液于4℃冷藏24h，制得水凝胶。
20.进一步地，所述制备方法还包括将制得的水凝胶转入真空挤出瓶或西林瓶中封装成品。
21.第三方面，本技术提供上述水凝胶在抗衰美白护肤品中的应用。
22.与现有技术相比，本技术的有益效果如下：
23.本发明以透明质酸钠和甘油作为主要赋形材料，于水凝胶中负载干细胞外泌体、重组胶原蛋白、谷胱甘肽、九肽-1、1,2-己二醇等多种有效组分，通过上述组分复配，使得本技术水凝胶具有良好的抗衰美白效果。本技术以透明质酸钠和甘油作为赋形材料，所制得的水凝胶不仅具有一定的保湿功效，还使得水凝胶具有良好的透明度及稳定性。
附图说明
24.图1为封装于真空挤出瓶中的水凝胶；
25.图2为封装于西林瓶中的水凝胶；
26.图3为实施例1水凝胶对皮肤光泽度改善效果图；
27.图4为实施例1水凝胶对皮肤弹性改善效果图；
28.图5为实施例1水凝胶对皮肤粗糙度改善效果图；
29.图6为实施例1水凝胶对眼周皱纹改善效果图。
具体实施方式
30.为更好地说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。本领域技术人员应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
31.实施例中所用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
32.实施例1
33.本实施例提供一种负载有干细胞外泌体和重组胶原蛋白的水凝胶，该水凝胶的制备方法如下：
34.称取透明质酸钠5g、甘油3g、干细胞外泌体0.3g、重组胶原蛋白0.3g、谷胱甘肽0.1g、九肽-1 0.1g、1,2-己二醇0.05g，然后在室温下将上述成分溶解于纯化水，并配置成100ml溶液。使用均质搅拌器充分混匀制得混合液；调节混合液的ph值至7，再将该溶液放置于4℃环境中冷藏24小时，使透明质酸钠充分溶胀形成凝胶制得水凝胶，之后将水凝胶放入离心管中离心消泡。最后，将消泡的水凝胶转入真空挤出瓶或者西林瓶中封装成品，制备抗衰美白水凝胶成品如图1、图2所示，可以看出本技术制得的水凝胶具有良好的透明度和均一稳定性。
35.效果例
36.每组选定10名受试者，男女各半，年龄为30～60岁，无皮肤病过敏史，符合受试者志愿入选标准，将受试产品，分别作用于每组受试者。使用方法：将水凝胶涂抹于眼周及面颊，每天晚上涂抹1次，试用28天。通过如下试验对实施例1制得的水凝胶进行功效分析。
37.1、皮肤光泽度分析
38.皮肤光泽度是衡量产品美白性能的一大指标，由skinglossmeter，sgm2008测得，其数值越大，表示皮肤越有光泽。以实施例1制得的水凝胶涂抹于面部皮肤进行试验，统计面颊皮肤光泽度的改善情况。
39.面颊皮肤光泽度的试验结果如图3所示，与基线值(第一天，d0)相比，面颊皮肤光泽度在d14(第14天)、d28(第28天)时分别上升了15.74％、30.98％。表明本发明水凝胶对皮肤具有一定的美白提亮效果。
40.2、皮肤弹性分析
41.皮肤弹性是衡量产品抗衰性能的指标之一，皮肤弹性由cutometer，mpa580测得，并取其参数r2(无负压时的回弹量与有负压时的最大拉升量的比值)作为皮肤弹性的评判依据。其数值越接近1，表示皮肤弹性越好。以实施例1制得的水凝胶涂抹于面部皮肤进行试验，统计面颊皮肤弹性的改善情况。
42.面颊皮肤弹性试验结果如图4所示：与基线值(第一天，d0)相比，面颊皮肤光泽度在d14(第14天)、d28(第28天)时分别上升了3.04％、6.12％。表明本发明水凝胶具有改善皮肤弹性的作用，对皮肤具有一定的抗衰效果。
43.3、皮肤粗糙度分析
44.皮肤粗糙度是衡量产品抗衰性能的指标之一，是由primos cr拍摄受试者的面颊局部皮肤3d图像，再通过分析得到的参数，可用sa值来表征。sa值是测量面积范围内每个点的高度的算术平均值，该参数的数值越低，则表示皮肤越平滑。以实施例1制得的水凝胶涂
抹于面部皮肤进行试验，统计面颊皮肤粗糙度的改善情况。
45.面颊皮肤粗糙度sa值的试验结果如图5所示：与基线值(第一天，d0)相比，面颊皮肤粗糙度在d14(第14天)、d28(第28天)时分别下降了2.14％、4.02％。表明本发明水凝胶有助于改善皮肤的粗糙度，对皮肤具有一定的抗衰效果。
46.4、眼周皱纹数量分析
47.眼周皱纹数量是衡量产品抗衰性能指标之一，眼周皱纹数量是用primos cr拍摄受试者的眼周局部皮肤3d图像，再通过分析得到，眼周皱纹数量是能够较好反映眼周皮肤衰老程度的参数。眼周皱纹数量越小，则表示眼周皮肤状况越好。以实施例1制得的水凝胶涂抹于眼周皮肤进行试验，统计眼周皮肤皱纹的改善情况。
48.眼周皱纹数量的试验结果如图6所示：与基线值(d0)相比，眼周皱纹数量在d14(第14天)、d28(第28天)时分别下降了30.12％、40.23％。表明本发明水凝胶具有良好的祛皱功效，具有一定的对抗衰老效果。
49.综上结果表明，本发明水凝胶提亮肤色、改善皮肤弹性、降低皮肤粗糙度及祛皱的作用，从而使得本发明水凝胶具有抗衰美白的功效。
50.实施例2
51.本实施例拟探究水凝胶中各组分含量对抗衰美白功效的影响。
52.参照实施例1所述水凝胶的制备方法及性能检测方法，调整水凝胶中各组分含量，分析不同组分的水凝胶的抗衰美白功效。每组选定10名受试者，男女各半，年龄为30～60岁，无皮肤病过敏史，符合受试者志愿入选标准，将受试产品，分别作用于每组受试者。使用方法：将水凝胶涂抹于眼周及面颊，每天晚上涂抹1次，试用28天。第28天统计受试者的反馈情况，结果如表1所示，表1中的皮肤光泽度、皮肤弹性、皮肤粗糙度、眼周皱纹数量等结果均以受试者第28天相对于试用之初的变化量。从表1中可以看出，干细胞外泌体和重组胶原蛋白浓度均为0.3wt％、透明质酸钠浓度为5.0wt％、谷胱甘肽浓度为0.1wt％、九肽-1浓度为0.1wt％时，水凝胶具有较好的抗衰美白效果以及更佳的经济成本。
53.表1不同组分的水凝胶的抗衰美白功效
54.[0055][0056]
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。