专利名称：骨质疏松症的联合治疗的制作方法
骨质疏松症描述了一组由不同病因引起但均以每单位体积中骨质量的净损失为特点的疾病。这种骨质量损失的后果是骨架不能为人体提供足够的结构支持，结果导致骨折。一种最常见的骨质疏松症发生在停经后不久的妇女身上。大多数妇女在停经后3-6年内骨柱区域内损失20-60%的骨质量。这种快速的骨损失通常与骨吸收和骨形成两者的增加有关。然而吸收循环较为主，其结果是骨质量的净损失。
因此，在停经后的妇女中骨质疏松症是一种常见的严重疾病。仅在美国估计就有两千五百万妇女患此疾病。这种疾病的结果是既造成身体的伤害也造成经济损失。大量的经济损失是由于该疾病的慢性特征，此疾病的后遗症需要大量且长期的资金支持(医院治疗和家庭护理)。更年老的病人中这种损失尤其大。另外，虽然通常不认为骨质疏松症是威胁生命的病症，但是在老年妇女中20-30%的死亡率与臀部骨折有关。高百分数的死亡率直接与停经后骨质疏松症有关。
骨中对停经后骨质疏松影响最敏感的组织是柱骨。这种组织经常是指松质骨，特别集中在靠近骨端、靠近关节和在脊椎骨的节中。小骨样结构是柱体组织的特点，这些结构内部互相联接，并与更坚固、更密实的皮质组织联接，从而形成骨外表面和中心骨干。柱体(trabeculae)的这种互相交叉的网状结构给外皮结构以侧面支持，而且对整个结构的生物机械强度是重要的。主要是柱体的净吸收和损失导致停经后骨质疏松患者的骨衰竭和骨折。从停经后妇女柱体损失的观点来看，并不奇怪最通常的骨折都与下述骨有关，即高度依赖于柱体支持的骨例如脊椎骨、支持重量的骨(大腿骨)和前臂。确实，臀部骨折，collies骨折和脊椎骨粉碎性骨折是停经后骨质疏松症的表征。
在治疗和研究停经后骨质疏松症方面一个很重要的概念是骨折阈的概念。骨折阈是一种点值，骨密度(从而骨强度)减少到该值时有很大的骨折可能性。这一点值对所有的妇女而言并不是一个通值而对个体来说是一个相对数，这一点值依赖于很多因素如重量、生活方式或其他有可能引起骨折的因素。
通常，大多数停经前妇女骨密度高于骨折阈，因此发生骨折的可能性较低。一个妇女停经前的骨密度和停经后的骨损失速率将决定她何时或是否将跨过骨折阈并处于骨折的危险之中。对因骨质疏松而已骨折的妇女来说，理想的疗法是提高其骨密度(强度)，使之高于骨折阈值。另外，对骨密度仍然高于阈值的妇女来说，保持骨密度高于阈值是有利的。
如今，对停经后骨质疏松症唯一适宜的有效治疗是荷尔蒙替代疗法，特别是雌激素替代疗法，因为停经后妇女缺乏雌激素。在治疗骨质疏松中，雌激素的作用机理尚不十分清楚，但普遍认为雌激素能抑制骨吸收。雌激素替代疗法(ERT)的净结果是保持妇女的骨密度在该疗法开始时的水平，即此疗法保持骨密度。当ERT开始时，如果一个妇女高于骨折阈，并且如果保持了ERT，她将保持高于此阈值而且骨折的危险性小。事实上在妇女停经时或停经后不久使用ERT尚有争议。
然而对那些骨密度已经下降至骨折阈以下的妇女来说，ERT仅能保持其骨密度在她们开始此疗法时的水平。因此这些妇女将保持在阈值以下，并处于骨折的进一步危险的境地。对这些妇女来说，ERT仍然是可行的，因为它们可以避免坏情况变得更坏。然而很明显若有这样的疗法将是有利的，即该疗法应能增加骨密度使之高于骨折阈，至更正常水平然后保持此水平。目前，还没有有效的经批准的疗法能够提高骨密度至此水平。
如上所述，ERT是目前停经后骨质疏松症的唯一有效的经批准的治疗，对那些没有子宫的妇女，可以单独地给予雌激素(通常以雌甾酮的结合形式给予)。然而在大多数有子宫的停经妇女，未拮抗的雌激素提高了子宫内膜癌的危险性。因此也经常给予孕激素，既作为联合用药又可在循环疗法中应用，从而减少上述的危险。
“抗雌激素”是一个术语，它“已经广泛应用于抑制或改变雌激素作用的几种不同类型的化合物。孕激素和雄性激素被认为是抗雌激素的……”(GoodmanandGilman，ThePharmacologicalBasisofTherapeutics，6thEd，p1431.)。另外，某些合成化合物如他莫昔芬、克洛米芬、雷洛昔芬和萘福昔定被称作为抗雌激素剂，这些化合物在实验室和临床上都已显示出抑制雌激素的某些作用。合成的“抗雌激素剂”主要开发用于激素依赖型乳腺癌的治疗。这些化合物是经典的混合型激动剂拮抗剂，它们显示某些雌激素活性。例如广泛用于抗雌激素的他莫昔芬，在人体内表现有雌激素作用。
最近，由雷洛昔芬(以前称之为keoxifene)代表的“抗雌激素”组在动物实验中表明能抑制骨损失，说明这些化合物在治疗停经后骨质疏松症方面是有用的。(参见我们共同未决的专利申请，题目为抑制骨损失的方法，专利申请号07/920，933，1992年7月28日提交)。
我们已经发现将式Ⅰ的雷洛昔芬型化合物与某些孕激素一起给药，可以使骨密度恢复至几乎正常的水平，这是任何一个药物都不能单独起到的效果。
本发明提供了一种治疗骨质疏松症的新方法，该方法包括将1)式Ⅰ化合物或其药学上适用的盐或溶剂化物与2)选自甲羟孕酮、炔诺酮或异炔诺酮或者其药学上适用的盐的孕激素组合给药，给药剂量为使得其组合作用能保持或增强骨密度， 其中R和R1各自独立地是氢、羟基、C1-C6烷氧基、C1-C6酰氧基、C1-C6烷氧基-C2-C6酰氧基、R2取代的芳氧基、R2取代的芳酰氧基、R3取代的羰氧基或卤素;
R2是C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、氢或卤素以及R3是C1-C6烷氧基或芳氧基
n为2、3或4p为4、5或6。
本发明还提供了抑制骨损失的药物制剂，其中包括(1)式Ⅰ化合物或其药学上适用的盐或溶剂化物，和(2)选自甲羟孕酮、炔诺酮或异炔诺酮、或其药学上适用的盐的孕激素，以及一种或更多种药学上适用的载体，剂量为使得其组合作用能抑制骨损失。
本发明涉及发现组合用药疗法在治疗骨质疏松症中特别有用，所述组合用药疗法包括将选自式Ⅰ的2-苯基-3-芳酰基苯并噻吩类(苯并噻吩类)中的一个成分和选自甲羟孕酮、炔诺酮或异炔诺酮的孕激素的第二个成分一起用药。单独使用时，式Ⅰ的苯并噻吩类抑制发生在骨质疏松症患者中的骨损失，但不能增加骨密度使之恢复至在疾病过程开始前的正常水平。然而当与选定的孕激素联合使用时，不仅能保持骨密度，而且能增加骨密度至正常水平(使骨密度“正常化”)。如前所讨论，停经后骨质疏松症是因缺乏内源性雌激素而引起，所述内源性雌激素缺乏例如是由于自然的、外科手术的、或其他过程继发停经而发生于妇女中的内源性的雌激素缺乏。更少见地发生在男人身上的骨密度和骨质量的降低也与因为荷尔蒙调节损失有关，因此按照本发明方法，也是该疗法的对象。
在式Ⅰ化合物中描述的总的化学术语具有普通意义。例如，术语“C1-C3烷基”包括甲基、乙基、丙基和异丙基。
术语“C1-C6烷氧基”包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基和己氧基，还包括侧链结构例如异丙氧基和异丁氧基。
术语“C1-C6酰氧基”包括乙酰氧基、丙酰氧基、丁酰氧基、戊酰氧基、己酰氧基等，还包括侧链结构例如2，2-二甲基丙酰氧基和3，3-二甲基丁酰氧基。
术语“C1-C6烷氧基-C2-C6酰氧基”包括例如甲氧基乙酰氧基、甲氧基丙酰氧基、甲氧基丁酰氧基、甲氧基戊酰氧基、甲氧基己酰氧基、乙氧基乙酰氧基、乙氧基丙酰氧基、乙氧基丁酰氧基、乙氧基戊酰氧基、乙氧基己酰氧基、丙氧基乙酰氧基、丙氧基丙酰氧基、丙氧基丁酰氧基等。
本文中使用的烷基和烷氧基结构也包括环烷基和环烷基氧基，其中结构中碳数至少为3。
术语“R2取代的芳氧基“和“R2取代的芳酰氧基”包括基团例如苯氧基、噻吩氧基、呋喃氧基、萘氧基、苯甲酰氧基、噻吩甲酰氧基、呋喃甲酰氧基、萘甲酰氧基等，其中R2取代基可以为氢、羟基、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基或卤素。
术语“R3取代的羰氧基”(其中R3取代基可以为C1-C6烷氧基或芳氧基)包括碳酸酯结构如甲氧羰基氧基、乙氧羰基氧基、丙氧羰基氧基、丁氧羰基氧基、戊氧羰基氧基、己氧羰基氧基、苯氧羰基氧基、噻吩氧羰基氧基、呋喃氧羰基氧基和萘氧羰基氧基。
雷洛昔芬是下面的化合物
本发明优选的方法和制剂包括应用式Ⅰ化合物，其中R、R1为羟基、C1-C6酰氧基、C1-C6烷氧基-C2-C6酰氧基、R2取代的芳酰氧基或R3取代的羰氧基，后面的基团代表酯和碳酸酯构型所选定的孕激素为炔诺酮或异炔诺酮。其他优选的方法包括应用其中R、R1同上，n为2，p为5或6的式Ⅰ化合物并且所选定的孕激素为炔诺酮或异炔诺酮。
一个特别优选的方法包括应用R、R1为羟基，n为2，p为4或5的式Ⅰ化合物所选定的孕激素为炔诺酮。本发明最优选的实施方案涉及应用雷洛昔芬(特别是作为其盐酸给药时)和异炔诺酮。
可以按照已有方法制备本发明方法中的化合物，如按美国专利4，133，814和美国专利4，418，068和1992年7月28日提交的未决专利申请07/920，933中所述方法进行制备，所有这些文献均收编在本发明中作为参考。一般来讲，该方法从带有6-羟基和2-(4-羟基苯基)基团的苯并[b]噻吩开始。起始化合物被保护、酰化或烷基化，并且进行脱保护，生成其中R、R1均为羟基的式Ⅰ化合物。如果需要，然后可形成醚、酯和碳酸酯形式的式Ⅰ化合物。以上美国专利叙述了制备上述化合物的实施例。可能需要对这些方法进行改进，以适应特定取代基的活性官能团。这种改进对于本领域技术人员而言将是显而易见的。
式Ⅰ化合物可以与多种有机和无机酸、碱生成酸和碱加成盐，酸和碱加成盐包括通常用于药物化学上的生理上适用的盐。所述盐也可用于本发明方法和制剂中。
用于生成上述盐的典型的无机酸包括盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硝酸、硫酸、磷酸、连二磷酸等，可以应用由有机酸生成的盐，有机酸例如有脂肪族一或二羧酸、苯基取代的链烷酸、羟基链烷酸和羟基链烷二酸，以及芳香族酸、脂肪族和芳香族磺酸。因此所述药学上适用的盐包括乙酸盐、苯基乙酸盐、三氟乙酸盐、丙烯酸盐、抗坏血酸盐、苯甲酸盐、氯代苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、邻-乙酰氧基苯甲酸盐、萘-2-苯甲酸盐、溴化物、异丁酸盐、苯基丁酸盐、β-羟基丁酸盐、丁炔-1，4-二酸盐、己炔-1，4-二酸盐、癸酸盐、辛酸盐、氯化物，肉桂酸盐、柠檬酸盐、甲酸盐、富马酸盐、羟基乙酸盐、庚酸盐、马尿酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、羟基马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、烟酸盐、异烟酸盐、硝酸盐、草酸盐、邻苯二甲酸盐、对苯二甲酸盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、丙炔酸盐、丙酸盐、苯基丙酸盐、水杨酸盐、癸二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、焦硫酸盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磺酸盐、苯磺酸盐、对溴苯磺酸盐、氯代苯磺酸盐、乙烷磺酸盐、2-羟基乙烷磺酸盐、甲磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、对甲苯磺酸盐、二甲苯磺酸盐、酒石酸盐等。
酸加成盐一般可通过式Ⅰ化合物与等摩尔或过量的酸反应制得。反应物通常于互溶剂如乙醚或苯中进行反应。盐一般在约1小时～10天内从溶液中析出，并且可以经过滤分离，或者按常规方法除去溶剂。
通常用于生成盐的碱包括氢氧化铵、碱金属和碱土金属氢氧化物和碳酸盐，以及脂肪族和芳香族胺，脂肪族二胺和羟基烷胺。用于制备加成盐的碱尤其包括氢氧化铵、碳酸钾、氢氧化钙、甲胺、二乙胺、乙二胺、环己胺和乙醇胺。
与化合物(由该化合物衍生得到盐)相比较，药学上适用的盐一般具有提高溶解度的性质，因此它们通常更适用于配制液剂或乳剂。
另外，一些式Ⅰ化合物可以与水或有机溶剂如乙醇形成溶剂化物。这些溶剂化物也包括在本发明方法和制剂内。
本发明还提供了一种用于抑制骨损失的药物制剂，该药物制剂包括(1)式Ⅰ化合物或其药学上适用的盐或溶剂化物;(2)一种孕激素，选自甲羟孕酮、炔诺酮或异炔诺酮、或其药学上适用的盐;和(3)一种或更多种药学上适用的赋形剂。
药物制剂可以按本技术领域已知的方法制备。例如，将化合物与常用的赋形剂、稀释剂或载体一起配制，并可配制成片剂、胶囊剂、混悬液剂、粉剂等。适用于上述制剂的赋形剂、稀释剂和载体包括填充剂和增量剂如淀粉、糖、甘露糖醇以及硅衍生物;粘合剂如羧甲基纤维素和其他的纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮;湿润剂如甘油;崩解剂如琼脂、碳酸钙和碳酸氢钠;阻滞溶解剂如石蜡;吸收促进剂如季铵化合物;表面活性剂如鲸蜡醇、单硬脂酸甘油酯;吸附载体如高岭土和膨润土;以及润滑剂如滑石、硬脂酸钙和硬脂酸镁以及固体聚乙二醇。
本发明化合物也可以配制成方便口服的酏剂或溶液剂，或者配制成适于非经胃肠道(如经肌内、皮下或静脉途径)给药的溶液剂。另外，本发明化合物还非常适用于配制成缓释剂型等。缓释制剂可以这样构成，以使它们仅仅或最好在肠道的特定部位并可能在一定时间内释放活性成分。包衣材料、包袋材料和保护材料可以由例如聚合物质或蜡制得。
为治疗骨质疏松症或抑制骨损失，需应用的本发明的式Ⅰ化合物和所选定的孕激素的具体剂量将取决于由主治医师决定的病症的严重性、给药途径以及有关的因素。一般来讲，式Ⅰ化合物的有效剂量为约0.1-1000mg，一般为约50-400mg，最优选的是约50-200mg。一般来讲，选定的孕激素的有效剂量为约0.01-500mg，优选约1-200mg。该剂量每天将给需要这种治疗的患者一次或分大约三次，或根据需要分多次施用，以便有效地抑制骨损失过程。
实施例1在这些实施例中，使用停经后骨质疏松症模型，其中测定了不同治疗方法对股骨密度的影响。
75日龄SpragueDawley雌鼠(重量范围为225-275g)由CharlesRiverLaboratories(Portage，MI)提供。将这些大鼠分成3组房养，大鼠可随意接近食物(钙含量约1%)和水。室温保持在22.2°±1.7℃，最低相对湿度为40%，室内光照时间为12小时光亮，12小时黑暗。
到达后一周，在麻醉状态(肌内给药44mg/kg氯胺酮和5mg/kg赛拉嗪(Butler，Indianapolis，IN))对鼠进行双侧卵巢切除术。在外科麻醉手术恢复后的当天或者在外科手术后35天开始用赋形剂或本发明指示的化合物进行治疗。
口服剂量通过在0.5ml1%羧甲基纤维素(CMC)中用管饲法进行。
在外科手术时测量体重，以后在研究期间每周测量体重，剂量随着体重的变化而调整。用每一实验组平行评估赋形剂治疗的切除卵巢(ovex)的大鼠和未切除卵巢(Intact)的大鼠用作阴性和阳性对照。
每天治疗大鼠，持继35天(每个治疗组6只大鼠)，在第36天上通过断头活杀。35天的时间是以使骨密度最大程度的减少，如下文所述进行测量。在活杀时，取出子宫，分离出无关的组织，在测量湿重前除去液体成分，以确证与完全卵巢切除有关的雌激素缺乏。由于卵巢切除术子宫的重量一般减少约75%，然后将子宫放在10%的中性缓冲的富尔马林中，以备随后的组织学分析。
切除右股骨，在远干骺端离膝盖骨沟1mm处，用单光吸光测定法扫描。测量的光密度的结果代表作为骨矿物质含量和骨宽度的函数的骨密度计算值。(EE2＝乙炔基雌二醇，Ral＝雷洛昔芬，Provera＝普维拉)。
试验1化合物骨密度A)EE2(100μg/kg)28.270B)Ovex(未加化合物)8.033C)Intact(未加化合物)42.403D)Provera(10mg/kg)34.132E)Ral(0.01mg/kg)4.823F)Ral(0.1mg/kg)2.928G)Ral(1mg/kg)15.400H)Ral10mg/kg18.017I)D+E36.820J)D+F38.902K)D+G51.935L)D+H61.528
试验2化合物骨密度A)EE2(100μg/kg)53.122B)Ovex(未加化合物)25.918C)Intact(未加化合物)49.627D)炔诺酮(10mg/kg)42.087E)Ral(0.01mg/kg)15.672F)Ral(0.10mg/kg)30.265G)Ral(1mg/kg)46.237H)Ral10mg/kg35.765I)D+E38.795J)D+F53.122K)D+G59.155L)D+H57.485试验3化合物骨密度A)EE2(100μg/kg)46.670B)Ovex(未加化合物)20.340C)Intact(未加化合物)47.867D)异炔诺酮(10mg/kg)35.563E)Ral(0.01mg/kg)11.208F)Ral(0.1mg/kg)19.693G)Ral(1mg/kg)30.012H)Ral(10mg/kg)30.325I)D+E43.948J)D+F37.777K)D+G54.773L)D+H42.283
试验4化合物骨密度A)EE2(100μg/kg)59.802B)Ovex(未加化合物)33.538C)Intact(未加化合物)68.317D)异炔诺酮(10mg/kg)38.895E)Ral(0.01mg/kg)28.363F)Ral(0.10mg/kg)56.207G)Ral(1mg/kg)45.712H)Ral10mg/kg51.533I)D+E26.328J)D+F48.057K)D+G38.270L)D+H53.903试验5化合物骨密度A)EE2(100μg/kg)50.700B)Ovex(未加化合物)26.700C)Intact(未加化合物)28.545D)Provera(10mg/kg)60.832E)*化合物A(1mg/kg) 34.650F)化合物A(10mg/kg)48.688G)D+E61.273H)D+F58.472＊化合物A为其中n为2，p＝5，R、R1均为 正丁基的式Ⅰ化合物的盐酸盐。
试验6化合物骨密度A)EE2(100μg/kg)50.700B)Ovex(未加化合物)26.700C)Intact(未加化合物)28.545D)Provera(10mg/kg)60.832E)*化合物B(1mg/kg) 37.937F)化合物B(10mg/kg)42.873G)D+E75.498H)D+F68.163＊化合物B为其中n＝2，p＝5，R、R1均为 叔丁基的式Ⅰ化合物的盐酸盐。
权利要求
1.组合用于保持或增加骨密度或者抑制骨损失的式Ⅰ化合物或其药学上适用的盐或溶剂化物，以及一种选自甲羟孕酮、炔诺酮或异炔诺酮或者其药学上适用的盐的孕激素， 其中，R、R1各自独立地为氢、羟基、C1-C6烷氧基、C1-C6酰氧基、C1-C6烷氧基-C2-C6酰氧基、R2取代的芳氧基、R2取代的芳酰氧基、R3取代的羰氧基或卤素；R2为C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、氢或卤素、R3为C1-C6烷氧基或芳氧基；n为2、3或4；p为4、5或6。
2.权利要求1中所述的化合物，其中式Ⅰ化合物的给药量为0.1-约1000mg/kg体重，所选择的孕激素的给药量为约0.01-500mg/kg体重。
3.抑制骨损失的药物制剂，其中含有作为活性成分的(1)式Ⅰ化合物或其药学上适用的盐或溶剂化物和(2)一种选自甲羟孕酮、炔诺酮或异炔诺酮或者其药学上适用的盐的孕激素，以及一或多种药学上适用的载体;剂量为使得其组合作用能抑制骨损失; 其中，R、R1各自独立地为氢、羟基、C1-C6烷氧基、C1-C6酰氧基、C1-C6烷氧基-C2-C6酰氧基、R2取代的芳氧基、R2取代的芳酰氧基、R3取代的羰氧基或卤素;R2为C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、氢或卤素;和R3为C1-C6烷氧基或芳氧基;n为2、3或4和p为4、5或6。
全文摘要
本发明提供治疗骨质疏松症的新方法，该方法包括将式I化合物或其药用盐或溶剂化物与选自甲羟孕酮、炔诺酮、异炔诺酮或其药用盐的孕激素以能组合保持或增加骨密度的剂量给药；还提供抑制骨损失的药物制剂，该制剂包括式I化合物或其药用盐或溶剂化物和选自甲羟孕酮、炔诺酮、异炔诺酮或其药用盐的孕激素，以及一或多种药学上适用的载体，其剂量为使得其结合作用能抑制骨损失，其中R、R
文档编号A61K31/40GK1111511SQ95101458
公开日1995年11月15日 申请日期1995年1月26日 优先权日1994年1月28日
发明者L·J·布拉克, G·J·库里南 申请人:伊莱利利公司