治疗肠炎性病症的组合物的制作方法

治疗肠炎性病症的组合物的制作方法
【专利说明】
[0001] 本申请是申请日为2008年11月26日、申请人为特克赛尔公司、发明名称为"治疗 肠炎性病症的组合物"的中国专利申请200880117667. 2的分案申请。
技术领域
[0002] 本发明涉及治疗肠炎性病症的领域。本发明特别地涉及使用包括针对来自人类普 通饮食的食物抗原的人Trl细胞的药剂治疗炎性肠病和与食物不耐受或变态反应有关的 肠炎的方法。
【背景技术】
[0003] 如本文使用的肠炎性病症指炎性肠病和与食物不耐受或变态反应有关的炎症。
[0004] 炎性肠病（IBD)指一组疾病，包括克罗恩病（Crohn'sdisease)和溃疡性结肠炎 两者。这两种疾病经常被分为一组是因为它们具有相似的发病机制和临床表现。在缺少侵 入性影像学研宄的情况下，不可能区分这两种疾病，在许多出版物和研宄中这两种疾病经 常被认为是一种疾病。任一种疾病的明确诊断都需要影像学研宄诸如内窥镜检查（乙状结 肠镜检查或结肠镜检查）、双重对比钡剂灌肠法和计算机体层摄影（CT)扫描；结合以实验 室试验，包括全血细胞计数以检测升高的白细胞水平、红细胞沉降率和血清白蛋白浓度。
[0005] 两种疾病均为慢性复发/缓解型胃肠道炎性疾病。克罗恩病最常累及的胃肠道区 域是小肠和大肠，后者也称为结肠，包括直肠；然而，克罗恩病可累及从口至肛门的整个胃 肠道。可存在单个或多个炎症斑。溃疡性结肠炎仅累及大肠。溃疡性结肠炎中的炎症和溃 疡限于粘膜和粘膜下层，它们是大肠的四个层中最内侧的两个层。克罗恩病中的炎症和溃 疡可蔓延至小肠和大肠两者中肠壁的所有层。疾病的常见症状包括腹泻、腹痛、直肠出血和 体重减轻。克罗恩病的并发症包括肠痈、瘘、从肠的一部分通向另一部分并允许液体或分泌 物通过的异常通道，以及肠梗阻。一般来说，两种疾病的病程是间歇性的，疾病的加重伴随 着缓解期。然而，溃疡性结肠炎可以是单发事件，或具有不间断症状的连续事件。
[0006] 尽管对于IBD的治疗干预有许多选择，但许多具有不合乎需要的副作用，使得对 于治疗慢性疾病是不太理想的。对于轻度的溃疡性结肠炎，一般一线治疗是经口或局部 (即，灌肠法）递送氨基水杨酸盐。氨基水杨酸盐类由含有5-氨基水杨酸（5-ASA)的药剂组 成，其是在IBD中采用的一种最古老的抗炎化合物。以高剂量使用时，5-ASA可诱导急性发 作的缓解。尽管通常用于维持治疗，但5-ASA已经证明不能有效地维持缓解。常用的5-ASA 制剂包括柳氮磺P比啶、口服和局部使用的美沙拉嘆（mesalamine)、奥沙拉秦（olsalazine) 和巴柳氮。各种制剂被修饰以将可获得的活性药物提供至目的部位（例如，小肠或大肠）。 然而，使用5-ASA，副作用很常见。
[0007] 皮质类固醇是诱导IBD发作缓解的最有效的药剂之一，并且一般是用5-ASA治疗 失败时的第二治疗选择。化合物首先经口或直肠递送，同时伴随或不伴随5-ASA的给药。在 口服递送失败时，该化合物经静脉内给药。理想地，皮质类固醇仅用于短程的治疗，并且疾 病缓解时逐步停药。通常用于治疗IBD的皮质类固醇包括泼尼松、布地奈德和氢化可的松。 与皮质类固醇的应用相关的许多严重和显著副作用限制了其应用。短期使用的常见副作用 包括失眠、盗汗、情绪变化和葡萄糖代谢改变。长期维持治疗一般仅保留用于严重的难治性 病例。长期治疗可导致肾上腺萎缩，而突然停药可导致肾上腺皮质功能不全、低血压、甚至 死亡。其他副作用包括痤疮、异常脂肪沉积、毛发过度生长和骨质疏松症。在克罗恩病中， 皮质类固醇可妨碍瘘的愈合，加重疾病状态。
[0008] 对口服或直肠皮质类固醇制剂有反应的个体经常施以维持量的5-ASA。然而，一些 医生在缓解期期间不提供药物干预。
[0009] 需要静脉皮质类固醇治疗的个体一般以免疫抑制剂与5-ASA的组合来维持，上述 免疫抑制剂诸如6-巯基嘌呤和/或硫唑嘌呤。此类严重疾病一般考虑胃肠外营养。当患 者对上述治疗无反应时，可尝试施用免疫抑制剂环孢素A来避免手术去除患病的肠段。免 疫抑制剂干预不是没有不合乎需要的副作用。6-巯基嘌呤和硫唑嘌呤可引起发热、皮瘆、恶 心和头疼，更严重的副作用包括白细胞减少、胰腺炎、严重感染和骨髓抑制。环孢素A可具 有更严重的副作用，包括感觉异常（类似灼伤或麻刺感的异常感觉）、毛发过度生长、高血 压、震颤、肾功能不全、头痛和机会性感染。
[0010] 抗生素，一般为环丙沙星或双唑泰栓，用作5-ASA或皮质类固醇的添加治疗（add ontherapy)，尤其是患有瘘管性或结肠疾病的患者。与所有其他治疗一样，施用抗生素长 期治疗也有副作用。
[0011] 英夫利昔单抗（Infliximab)和阿达木单抗（adalimumab)是目前药物治疗炎性肠 病的最后手段。英夫利昔单抗是由75%人蛋白和25%鼠蛋白组成的嵌合单克隆抗体，而阿 达木单抗是全人源化抗体。英夫利昔单抗和阿达木单抗是a-肿瘤坏死因子（TNF-a)-一 一种强有力的炎性细胞因子一一的抑制剂。该药物通过结合可溶性和膜结合的TNF-a而 用作槽（sink)。通过抑制在炎性级联反应中高的激活剂，可抑制许多炎性通路。如在产品 标签中所标明的那样，该药物首先经静脉给药治疗，随后每8周用作维持药物。然而，因为 其是生物药剂，因此免疫反应可限制该药物的实用性。
[0012] 因此，免疫抑制剂一般与英夫利昔单抗维持治疗联合施用。正如炎性肠病的所有 其他治疗一样，英夫利昔单抗也有严重的副作用。TNF-a在赘生性细胞的根除中具有重要 作用；因此，其抑制会导致机会性感染、恶性肿瘤和其他并发症，尤其是作为长期治疗策略 更是如此。
[0013] 手术干预是治疗炎性肠病的一种方法，但非根治性的。由于IBD的慢性性质和相 对早的发病年龄，在对药物干预无反应的患者的一生中可能需要多次手术。有可能去除几 段短的肠段而没有严重的副作用。然而，去除较大的或多段肠段可导致短肠综合征，患有短 肠综合征的个体不能吸收营养素。部分大肠的去除可导致需要进行结肠造口术或其他更进 一步的手术操作。因此，手术不是治疗炎性肠病的优选方法。治疗炎性肠病的手术干预会 导致更多的疾病。在完全去除结肠时，外科医生可从小肠建造回肠贮袋以允许粪便通过肛 门，而不需要永久的造口。贮袋炎（Pouchitis)是回肠贮袋的一种非特异性炎症，其一般在 重建后的前两年内发生。症状包括排便频率的不断增加，可伴有失禁、出血、发热和/或急 迫感。在具有溃疡性结肠炎的患者中，近20~30%经历至少一次发作。抗生素足以治疗贮 袋炎；然而，仍需要类似于IBD中使用的那些治疗的其他更积极的治疗方法。
[0014] 在近年来治疗炎性肠病的新治疗方式中，W02007/027132公开了一种治疗所述疾 病的方法，包括施用从患者的前哨淋巴结收集并在体外扩增的调节性CD4+CD25+T细胞。
[0015] 另一种类型的肠炎性病症是由于食物不耐受或变态反应引起的。人类在消耗饮食 蛋白质后常常或多或少地遭受严重的变态反应或不耐受反应。在成人中食物变态反应或不 耐受的流行率为大约1-2%，在儿童中为大约6-8%。食物变态反应或不耐受主要与有限范 围的食品有关，主要是花生、坚果（treenuts)、鸡蛋、牛奶、小麦（谷蛋白）、大豆、鱼和贝壳 类。
[0016] 迄今，对于食物变态反应或不耐受没有有效的治疗方法。大多数过敏体质的或不 耐受的个体使自己适应于自身处境并避免摄入他们过敏或不耐受的食品。可使用涉及药 物，诸如抗组胺剂、解充血剂或类固醇的治疗方法，但这些方法仅可用于对抗不耐受或过敏 反应的症状。它们不预防未来接触变应原或饮食蛋白所导致新的变应原性反应或新的不耐 受。
[0017] 在本发明中，由此，申请人的目的是提供一种基于使用Trl细胞的用于肠炎性病 症的治疗方法，该细胞不同于调节性⑶4+⑶25+T细胞。
[0018]Groux等人（Nature1997,389:737-742)描述了在小鼠中抗原（卵清蛋白）特异 性Trl细胞的传递仅当所述Trl细胞在体内被抗原（在本例中，通过给小鼠饲以卵清蛋白） 刺激时，防止由致病性CD4+CD45RB*T细胞诱发的炎性肠病。另外，Foussat等人（Journal ofImmunology2003,171:5018-5026)描述了抗原（卵清蛋白）特异性Trl细胞和抗原 (饮用水中的卵清蛋白）的共同施用治愈了小鼠中持续发生的炎性肠病。抗原的共同施用 是Trl细胞发生效力的必要条件。
[0019] 根据本发明，本发明人的目的是提供一种治疗需要该治疗的对象的肠炎性病症的 方法，所述治疗基于单独施用针对来自人类普通饮食的食物抗原的Trl细胞。特别地，本发 明人惊奇地发现所述针对来自人类普通饮食的食物抗原的Trl细胞不需要与Trl细胞所针 对的抗原共同施用而发生效力。
[0020] 发明概述
[0021] 本发明涉及一种组合物，包含至少一个针对来自人类普通饮食的食物抗原的人 Trl细胞群。
[0022] 所述来自人类普通饮食的食物抗原优选地选自包括下列的组：牛抗原、钙结合的 S100、a-乳清蛋白、乳球蛋白诸如0-乳球蛋白、牛血清白蛋白、酪蛋白、大西洋鲑鱼抗原、 鸡抗原、卵清蛋白、Ag22、伴清蛋白、溶菌酶或鸡血清蛋白、虾抗原、小麦抗原、芹菜抗原、胡 萝卜抗原、苹果抗原、苹果脂质转运蛋白、苹果肌动蛋白抑制蛋白（profilin)、梨抗原、异黄 酮还原酶、鳄梨抗原、杏抗原、桃抗原、大豆抗原、花生、卵清蛋白，它们的片段、变体和混合 物。优选地，所述食物抗原是卵清蛋白、酪蛋白、e-乳球蛋白、大豆蛋白、麦醇溶蛋白、花生， 它们的片段、变体和混合物。
[0023] 本发明的另一个目的是提供包括本发明的组合物的药剂或药物组合物。
[0024] 本发明还涉及一种治疗需要该治疗的对象的肠炎性病症的方法，包括向所述对象 施用有效量的本发明的药剂或药物组合物。
[0025] 在本发明的优选实施方案中，所述方法用于治疗炎性肠病。在本发明的一个实施 方案中，所述炎性肠病是克罗恩病。在本发明的另一实施方案中，所述炎性肠病是溃疡性结 肠炎。
[0026] 在本发明的另一个优选的实施方案中，所述方法用于治疗与食物变态反应或不耐 受有关的肠炎。在一个实施方案中，所述食物不耐受是乳糜泻疾病。在另一个实施方案中， 所述食物变态反应是乳蛋白变态反应。在另一个实施方案中，所述食物变态反应是花生变 态反应。在另一个实施方案中，所述食物变态反应是卵清蛋白变态反应。
[0027] 在一个优选的实施方案中，要施用于需要其的对象的药剂或药物组合物包括与所 述对象的细胞自体同源的人Trl细胞。
[0028] 在本发明的另一个实施方案中，治疗需要该治疗的对象的肠炎性病症的方法包括 将有效量的本发明的药剂或药物组合物与用于治疗肠炎性病症的另一种治疗剂联合施用 于该对象。
[0029] 附图简要说明
[0030] 图1 :小鼠抗鱼蛋白Trl和小鼠抗大豆蛋白Trl淋巴细胞的细胞因子表达谱。（A) 由小鼠抗鱼蛋白Trl细胞产生的IL-4、IL-10和IFN-Y。（B)由小鼠抗大豆蛋白Trl细胞 产生的IL-4、IL-10 和IFN-y。
[0031] 图2 :小鼠抗鱼蛋白和小鼠抗大豆蛋白Trl细