用于提供可靠的非侵入式诊断测试的方法

用于提供可靠的非侵入式诊断测试的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及用于改进非侵入式诊断测试可靠性的方法。更具体地，本发明涉及用 于对通过执行评估疾病存在和/或严重程度的非侵入式测试获得的初始指数的可靠性进 行分析、并且提高所述测试诊断准确度的方法。
[0002] 本发明的方法可应用于改进评估疾病的存在诊断和/或严重程度的任意非侵入 式方法的可靠性，并且特别地应用于肝脏疾病。
【背景技术】
[0003] 肝脏疾病的诊断可以通过对肝脏纤维化的分析来执行。肝脏纤维化是指响应于由 于不同病因引起的肝细胞受损，纤维化创伤组织在肝脏中的累积，不同病因例如病毒感染 (诸如丙型肝炎病毒（HCV)和乙型肝炎病毒（HBV)等肝炎病毒）、酗酒、毒素或药物等。纤 维化病变的演变可导致肝硬化，其状况为肝功能受到损害。可以进行肝脏纤维化的治疗，其 可以减慢或终止纤维化进程，甚至逆转存在的肝脏损伤。相比较，肝硬化通常被认为是不可 逆性的。
[0004] 肝脏活检是用于诊断患者肝脏疾病的历史方式。基于肝脏活检，不同的等级用于 为纤维化和肝硬化分级，诸如Metavir和Ishak评分（其对肝硬化分级）。例如，使用用于 纤维化的Metavir评分等级，区分出五个级别（称为Metavir F阶段）：F0 (没有纤维化，没 有创伤）、Fl (肝门纤维化，很少创伤）、F2 (少量间隔，已出现创伤并延伸到包含血管的肝 脏外侧区域）、F3 (很多间隔，桥接纤维化扩散并连接至包含纤维化的其他区域）、以及最后 的F4(肝硬化或肝脏深度创伤）。在本专利应用中，对RK Fl、F2、F3、和F4的任何引用参 照Metavir阶段。
[0005] 然而，由于肝脏活检属于侵入式并且价格昂贵，作为对肝脏活检的替代，在过 去十年，肝脏纤维化的非侵入式诊断已经受到很大关注。第一代的简单血液纤维化 测试将普通间接血液标示物结合成简单比率，像APRI (Wai等人，肝脏病学2003)或 FIB-4 (Valley-Pichard等人，肝脏病学2007)。第二代的计算测试通过逻辑回归将间接和/ 或直接纤维化标示物结合来产生评分，如Fibrotest?(Imbert-Bismut等人，柳叶刀2001)、 ELF 评分（Rosenberg 等人，肠胃病学 2004)、FibroMeter?(Cales 等人，肝脏病学 2005)、 Fibrospect ?(Patel等人，中华肝脏病杂志2004)、以及肝脏评分（Adams等人，临床化学 2005)。例如，专利文献W02005/116901描述了用于评估肝脏疾病存在和其严重程度的非侵 入式方法，该方法通过测量特定变量的水平，包括生物变量和临床变量，并将所述变量结合 成数学公式以提供评分，通常称为"纤维化评分"。
[0006] 然而，这些非侵入式诊断测试不是100%的准确。实际上，可能出现假阳性和假阴 性结果，导致对患者错误的分级。错误可主要归因于参考物（肝脏活检）或测试结构（如 对学术数据的研宄）。而且，其他错误来源可由于标示物的测量或构成该测试的基础的物理 数据的测量所导致，或者由于操作者、或患者本身所导致。
[0007] 因此，需要一种方法，用于限制对患者错误分级的发生，并提高非侵入式测试的准 确度。示例6中示出基于AUROC的现有技术的Fibroscan假设可靠性的低效示例：不可靠 活检中的肝脏硬度评估的准确度（AUROC)并非明显不同于可靠活检中的肝脏硬度评估的 准确度。
[0008] 专利文献W02010/013235描述了一种用于诊断肝脏疾病的方法，其包括计算可靠 的评分，该评分包括从标准呼吸测试和其他参数获得的数据，诸如生理噪声。确定生理噪声 可包括使用专家决定系统。然而，专利文献W02010/013235的方法特定用于包括执行标准 呼吸测试的诊断测试，并不适于其他非侵入式诊断方法。
[0009] 在国际肝脏杂志ISSN1478-3223(2008)、第1352-1362页，发明人发表了名为"评 估和增加对于慢性丙型肝炎中肝脏纤维化血液测试的可靠诊断率"的文章。本文强调，可靠 性是与其在生物统计学中的含义不同的词语。在该现有技术文献中，术语"可靠的"或"可靠 性"用于限定可靠的诊断间隔（RDI)。RDI涉及根据纤维化阶段的更精确的诊断。因此，代 替F2/F3/F4阶段的粗略诊断（患者被诊断为具有纤维化，其为显著的（F2)或深度的（F3) 或硬化的（F4)，具有F3/F4诊断（患者被诊断为具有深度的（F3)或硬化的（F4)纤维化）） 的患者可获得RDI，在该现有技术文献中，可靠性是指诊断精度。
[0010] 在本发明中，可靠性不涉及RDI。本发明是用于改进测试可靠性的方法和专家系 统，并不能用于限定RDI。
[0011] 要强调的是，与现有技术文献相反，本发明中不限定RDI，可靠性级别描述了具有 通过独立的准确度预测器所限定的不同准确度等级的患者分组。例如，诊断测试在肾功能 不全的患者中具有比正常肾功能患者中相同测试明显更低的准确度。
[0012] 同样，需要强调的是，与标准偏差相比，本发明中描述的离散指数是一种结果、尤 其是评分的数值离散的新指数。
[0013] 因此，需要一种方法，用于改进诊断测试的可靠性。
[0014] 定义
[0015] 在本发明中，下述词语具有下述含义：
[0016] - "肝脏疾病"是指严重的肝损伤、慢性肝病、肝炎病毒感染（尤其是由乙型肝炎、 丙型肝炎、或丁型肝炎引起的感染）、肝毒性、肝癌、皮脂腺病、非酒精型脂肪肝病（NAFLD)、 非酒精型脂肪性肝炎（NASH)、自身免疫疾病、代谢肝病、或由肝脏的二次介入引起的疾病。
[0017] 根据一个实施例，肝毒性是酒精引起的肝毒性和/或药物引起的肝毒性（即由诸 如酒精或药物等外源性复合物引起的任意肝毒性）。
[0018] 根据一个实施例，自身免疫疾病选自由如下构成的组：自身免疫性肝炎（AIH)、原 发性胆汁型肝硬化（PBC)、以及原发性硬化型胆管炎（PSC)。
[0019] 根据另一实施例，代谢肝病选自由如下构成的组：非酒精型脂肪肝病（NAFLD)、血 色沉着病、威尔逊氏病和a 1抗胰蛋白酶缺乏。
[0020] 主体"是指动物。在一个实施例中，动物是哺乳动物，例如老鼠或诸如猫或狗等 宠物。根据优选实施例，动物为人类。
[0021] 根据一个实施例，包括人类的动物具有遭受上文定义的肝脏疾病痛苦的风险或正 在忍受这种痛苦。
[0022] - "非侵入式诊断测试"是指用于诊断、或用于评估疾病存在和/或严重程度的测 试，其可得出数据、指数或评分。该测试可利用对生物标示物、临床标示物、物理数据（例如 从诸如Fibroscan获取的）或评分的测量结果。在一个实施例中，数据可以是生物标示物、 临床标示物、物理数据、指数或评分。
[0023] 生物标示物的示例包括但不限于血糖、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇（HDL)、低 密度脂蛋白胆固醇（LDL)、天冬氨酸转氨酸（AST)、丙氨酸转氨酶（ALT)、AST/ALT、AST.ALT、 铁蛋白、血小板（PLT)、AST/PLT、凝血酶原时间（PT)或凝血酶原指数（PI)、透明质酸（HA 或hyaluronate)、血红蛋白、甘油三酯、α2巨球蛋白（A2M)、γ-谷酰胺转酞酶（GGT)、尿 素、胆红素、载脂蛋白Al (ApoAl)、III型前胶原氨基末端肽（Ρ3ΝΡ)、丙种球蛋白（GBL)、钠 (Na)、蛋白（ALB)、铁蛋白（Fer)、葡萄糖（Glu)、碱性磷酸酶（ALP)、YKL-40(人类软骨糖蛋 白39)、基质蛋白酶组织抑制剂1 (??ΜΡ-1)、转化生长因子（TGF)、角蛋白18和基质金属蛋白 酶2 (MMP-2)至基质金属蛋白酶9 (MMP-9)、上述参数的比率和数学组合。
[0024] 临床标示物的示例包括但不限于体重、体重指数、年龄、性别、臀围、腹围或身高及 其比率、诸如臀围/腹围。
[0025] 用于评估肝脏疾病的物理方法的示例包括但不限于医学影像数据和临床测量，例 如脾脏测量，特别是脾脏长度。根据一个实施例，物理方法选自包括如下构成的组：超声波 检查法，特别是多普勒超声波检查和弹性测定超声检查以及速度测定超声检查（使用所述 数据的优选测试是Fibroscan?、ARFI，VTE，超声成像）、如在光谱学中使用的MRI (磁共振 成像）以及MNR(核磁共振），特别是MNR弹性测定或速度测定。优选的，数据是肝脏硬度 评估（LSE)数据或脾硬度评估。根据本发明优选实施例，物理方法的数据从Fibr 0Scan11^i 得。根据本发明的优选实施例，从Fibroscan?得出的测量或数据是在本发明方法中涉及的 指数之一。
[0026] 测试的不例包括但不限于 ELF、FibroSpect?、APRI、FIB-4、Hepascore、 Fibrotest?、FibroMeter?、CirrhoMeter?、CombiMeter?、InflaMeter?。
[0027] -ELF是基于透明质酸、P3P、基质蛋白酶组织抑制剂I (??ΜΡ-1)和年龄的血液测 试。
[0028] -FibroSpect?是基于透明质酸、基质蛋白酶组织抑制剂1 (??ΜΡ-1)和α 2巨球蛋 白（Α2Μ)的血液测试。
[0029] -APRI是基于血小板和天冬氨酸转氨酸的血液测试。
[0030] -FIB-4是基于血小板、ASAT、丙氨酸转氨酶和年龄的血液测试。
[0031] -HEPASC0RE是基于透明质酸、胆红素 、α 2巨球蛋白、γ -谷酰胺转酞酶（GGT)、年 龄和性别的血液测试。
[0032] -FIBR0TEST?是基于α 2巨球蛋白、亲血色蛋白、载脂蛋白Α1、总胆红素、γ-谷酰 胺转酞酶（GGT)、年龄和性别的血液测试。
[0033] -FIBR0METER?和CIRRH0METER ?-起形成一族血液测试，其内容取决于慢性肝病 的原因和诊断目标，并且这种血液测试族被称为FM家族，其具体在示例1中说明。
[0034] -C0MBMETER?是基于FM家族的变量的数学组合（如示例1中具体所述）或使用 FIBR0SCAN?结果的FM家族测试结果的数学组合的测试家族。在一个实施例中，所述数学 组合是二元逻辑回归。
[0035] 在一个实施例中，CombiMeter是基于来自肝脏或脾脏弹性测定物理数据的数学 组合的评分，物理数据例如来自Fibroscan?诸如IQR