，加三倍体积95%乙醇溶液，于4°C冰箱静置过 夜，11000r/min离心20min，取沉淀，用23mL双蒸水溶解，加入10mL10%三氯乙酸溶液，去 除蛋白，7000r/min离心20min，取上清液ImL定容至100mL，得稀释样品溶液。精密吸 取稀释样品溶液lmL，按标准曲线制备操作步骤，于490nm波长处进行样品吸光度的测定。 每个样品重复测定3次，经线性方程计算得白背三七冻干粉中总多糖含量为26. 69±0. 53 mg/g〇
[0017] 2、黄酮类化合物 精确称取经120°C干燥恒重的芦丁标准品10mg，用80%的乙醇定容至30mL，置于水 浴上微热使溶解后定容至50mL，配成0. 2mg/mL的芦丁标准溶液。准确吸取芦丁标准溶液 0、0. 2、0. 4、0. 6、0. 8、1.0mL于10mL离心管中，再加入80%的乙醇溶液补足到5mL。各加 5%亚硝酸钠溶液0. 3mL，摇匀，静止6min后，加入10%硝酸铝溶液0. 3mL摇匀，放置15 min，加氢氧化钠溶液4mL，0.4mL蒸馏水补足重量，摇匀，放置10min，80%乙醇为空白调 零，于510nm处测其吸光度，得到芦丁标准溶液的工作曲线。用最小二乘法进行回归，得到 吸光度值与芦丁标准量的关系曲线。
[0018] 样品测定：称取按实施例1制备方法得到的白背三七冻干粉样品0. 5g，用50 mL80%乙醇溶解，60°C浸提3h，取浸提液，4°C4000r/min离心lOmin，精确吸取ImL样品液 于离心管中，其余步骤同标准测定，于510nm波长测定吸光度，用线性方程计算出总黄酮含 量，每个样品重复测定3次，得出白背三七冻干粉中总黄酮含量为：33. 59±2. 64mg/g。
[0019] 实施例3 降血糖、降血脂效果的动物实验 SPF级昆明种雄性断乳小鼠60只，随机5只一笼喂养。小鼠适应5天，除正常对照组，其 余小鼠饲喂高脂高糖饲料（高脂高糖饲料配方：猪油18%，蔗糖20%，蛋黄3%，基础饲料59%) 10天，之后禁食12h，一次性尾静脉注射由4°C的0.Imol/LpH4. 4无菌柠檬酸缓冲液配制 的链脲佐菌素（STZ)溶液（100mg/kg.BW)。注射STZ以后继续饲喂高脂高糖饲料，3天后 测小鼠空腹血糖，血糖值在16. 7~30mmol/L之间为造模成功。
[0020] 将造模成功的小鼠随机分为三组：糖尿病模型组、按实施例1制备方法得到的白 背三七冻干粉分别为1. 2%和4. 8%添食组。正常对照组和糖尿病模型组每天给予普通饲料 和普通水。按上述方式饲养4周，每天观察各组小鼠的进食和进水的情况。每周一次禁食 12h测空腹血糖，4周之后检测各组小鼠血脂水平。
[0021] 利用高脂高糖添食加STZ注射模拟糖尿病引发的高血糖症状。从结果可以看出， 模型对照组小鼠空腹血糖显著高于正常对照组，实验4周后，模型对照组小鼠空腹血糖水 平与正常对照组相比有显著性差异（P< 0.01)。用不同剂量的白背三七冻干粉添食后，糖 尿病小鼠空腹血糖均呈下降趋势，四周后小鼠空腹血糖值趋于正常对照组（P> 0.05)，且 与模型组相比有显著性差异（P< 0. 01)。以上结果表明，白背三七冻干粉可以有效降低高 脂高糖添食加STZ注射诱导的糖尿病小鼠的空腹血糖，表示白背三七冻干粉具有较好的降 血糖作用。白背三七冻干粉对2型糖尿病小鼠空腹血糖影响的实验结果参见表1。
[0022]表 1 :
表中，a#表示与正常对照组相比，P< 0.01，差异极显著；b#表示与模型组相比，P< 0. 01，差异极显著；b*表示与模型组相比，P< 0. 05,差异显著。
[0023] 与正常对照组相比较，模型组小鼠血中总胆固醇和甘油三酯水平均明显升高，说 明2型糖尿病模型小鼠出现了明显的脂代谢紊乱；与模型对照组相比较，经过四周的白背 三七添食后，不同剂量的白背三七冻干粉添食组小鼠的总胆固醇和甘油三酯水平均明显下 降。结果提示白背三七冻干粉对改善糖尿病脂代谢紊乱有较好作用。白背三七冻干粉对2 型糖尿病小鼠血脂影响的实验结果参见表2。
[0024] 表 2 :
【主权项】
1. 一种用于降血糖的白背三七冻干粉的制备方法，其特征在于：取新鲜、洁净的白背 三七的地上茎叶部分，经真空冷冻干燥处理后，粉碎成粉末，得到一种白背三七冻干粉。2. 根据权利要求1所述的一种用于降血糖的白背三七冻干粉的制备方法，其特征在 于：真空条件为<1.〇11*&1'，冷冻干燥温度为-5〇1：~-8〇1：，真空冷冻干燥处理时间为 Id~IOd03. 按权利要求1制备方法得到的一种用于降血糖的白背三七冻干粉。4. 如权利要求3所述的一种用于降血糖的白背三七冻干粉的应用，其特征在于：将其 用于制备口服降血糖粉剂、片剂或软胶囊制剂。
【专利摘要】本发明公开了一种用于降血糖的白背三七冻干粉、制备方法及其应用。采用真空冷冻干燥技术，将新鲜洁净的白背三七地上部分茎叶直接冻干，粉碎成粉末，得到一种白背三七冻干粉。由于采用了真空冷冻干燥技术处理白背三七茎叶的技术方案，保留了植物本身的理化性质和生理活性，避免了加工过程带来的药用成份丢失或活性成份失活，经动物实验表明，具有明显的降血糖、降血压和降血脂等效果。将其用于制备口服降血糖粉剂、片剂或软胶囊制剂，适用于高血糖、高血脂和高血压及其迸发症等患者的日常食品的辅助保健。本发明技术方案的实施，不仅减少药物加工的人力和物力，而且减少了生产环节中有效成分的损耗，提高药材的利用率，减少了自然资源的浪费。
【IPC分类】A61P3/06, F26B5/06, A61K36/28, A61K9/19, A61P3/10, A61P9/12
【公开号】CN104887732
【申请号】CN201510255374
【发明人】张雨青, 许冰清, 杨萍
【申请人】苏州大学
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年5月19日