一种黄芪甘草粉的制备方法及其产品的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种黄芪甘草粉的制备方法及其产品。
【背景技术】
[0002] 目前我国的养禽业高速发展，已步入世界禽业大国行列，但我国禽病的发生和危 害十分严重，禽类病毒性免疫抑制疾病是当前困扰养禽业的一类重要传染病，由于免疫抑 制状态的存在，常常造成疫苗免疫效果差或免疫失败，极易并发和继发其他传染病和寄生 虫病，增加了家禽的发病率和治疗难度，给养禽业造成巨大的经济损失。目前使用的免疫增 强剂种类很多，包括微生物免疫增强剂，如干扰素；化学性免疫增强剂，如左旋咪唑等，其存 在着高剂量产生免疫抑制、体内残留时间长等缺点，中药免疫增强剂具有资源丰富、安全方 便、功能全面、无残留及毒副作用小等优点，因此，研制和开发活性强的新型中药免疫增强 剂已成为迫切需要。
[0003] 黄芪甘草粉的活性成分主要为多糖和甘草酸，现代药理学研宄表明黄芪多糖和甘 草多糖具有增强机体免疫力的功效，甘草酸具有非特异性免疫调节作用。采用传统的水提 醇沉法制备黄芪甘草粉，醇沉除杂的同时也将大部分多糖类活性成分除去，导致质量下降， 影响临床疗效，而且醇沉过程中使用大量乙醇，工艺成本较高，时间较长；而采用水沉法作 为纯化方法时，除去的杂质较少，制备的粉稳定性较差。
[0004] 为有效地去除杂质，增加稳定性，并保留多糖类活性成分，有必要建立一种合理的 黄芪甘草粉的制备方法。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种黄芪甘草粉的制备方法，以达到多糖等有效成分含量 高且质量稳定的效果。
[0006] 本发明提供了一种的黄芪甘草粉的制备方法，包括以下步骤：
[0007] S1，用黄芪药材制备黄芪提取物；
[0008] S2，用甘草药材制备甘草提取物；
[0009] S3,将所述黄芪提取物和所述甘草提取物混合制备为黄芪甘草粉。
[0010] 在一个【具体实施方式】中，所述黄芪提取物的制备步骤包括：
[0011] a)将黄芪药材加水浸泡，提取后浓缩，优选浓缩至浓缩液的比重为1. 10-1. 15 ;
[0012] b)将步骤a)得到的浓缩液先用果胶酶和蛋白酶进行处理，再用壳聚糖醋酸溶液 进行处理；
[0013] c)将步骤b)得到的混合物进行过滤，用碱液将滤液调节至弱酸至中性，优选调至 pH值为5. 0-7. 0,然后浓缩，干燥即得黄芪提取物。
[0014] 在一个【具体实施方式】中，步骤a)中，所述提取为低温减压回流提取。优选地，所 述低温减压回流提取的条件是：真空度为-0. 03-0. 05MPa，温度为60-70°C，提取次数为2-4 次，提取时间为l_3h。在一个实施例中，所述提取的条件是：真空度为-0. 05MPa，在70°C下， 提取3次，每次2h。优选地，步骤a)中，以重量计，水的用量为黄芪药材的6-10倍。
[0015] 在一个【具体实施方式】中，在步骤b)中，果胶酶的用量为l_2g/100mL浓缩液。
[0016] 在一个【具体实施方式】中，在步骤b)中，蛋白酶的用量为l_2g/100mL浓缩液。
[0017] 在一个【具体实施方式】中，在步骤b)中，果胶酶和蛋白酶的质量比为1:2_2:1。
[0018] 在一个【具体实施方式】中，在步骤b)中，壳聚糖醋酸溶液的加入量与浓缩液的体积 比为 0· 15:1-0. 2:1。
[0019] 根据一个【具体实施方式】，所述甘草提取物的制备步骤包括：
[0020] A)用氨水溶液浸泡甘草药材，提取后浓缩，优选浓缩至浓缩液的比重为 1. 10-1. 15 ；
[0021] B)将步骤A)得到的浓缩液调节pH值为5. 0-6.0,然后先用果胶酶和蛋白酶进行 处理，再用壳聚糖醋酸溶液进行处理；
[0022] C)将步骤B)所得的混合物进行过滤，调节pH值为5. 0-7.0,浓缩，干燥即得甘草 提取物。
[0023] 根据一个【具体实施方式】，所述提取为低温减压回流提取。优选地，所述低温减压回 流提取的条件是：真空度为-0. 03-0. 05MPa，温度为60-70°C，提取次数为2-4次，提取时间 为l-3h。在一个实施例中，所述提取的条件是：真空度为-0.05MPa，在70°C下，提取3次， 每次2h。
[0024] 在一个【具体实施方式】中，步骤A)中，所述氨水溶液中氨的质量含量为0. 075 %~ 0· 168%〇
[0025] 优选地，步骤A)中，以重量计，水的用量为甘草黄芪药材的6-10倍。
[0026] 在一个【具体实施方式】中，在步骤B)中，果胶酶的用量为l-2g/100mL浓缩液。
[0027] 在一个【具体实施方式】中，在步骤B)中，蛋白酶的用量为l_2g/100mL浓缩液。
[0028] 在一个【具体实施方式】中，在步骤B)中，果胶酶和蛋白酶的质量比为1:2_2:1。
[0029] 在一个【具体实施方式】中，在步骤B)中，壳聚糖醋酸溶液的加入量与浓缩液的体积 比为 0· 15:1-0. 2:1。
[0030] 在一个【具体实施方式】中，所述黄芪药材和甘草药材的质量比为1:1。
[0031] 根据本发明的一个【具体实施方式】，所述黄芪甘草粉的制备方法包括：
[0032] 1)将甘草药材用氨水溶液浸泡，其中所述氨水溶液中氨的质量百分含量为 0. 075%~0. 168% ;
[0033] 2)提取后浓缩，将浓缩液调节pH值为5. 0-6. 0之间，分别按浓缩液体积的 1% -2 % (m/v)加入果胶酶和蛋白酶，放置，再加入15% -20% (v/v)壳聚糖醋酸溶液，静 置；
[0034] 3)过滤步骤2)所述的中药液，调节pH值为5. 0-7.0,浓缩，即得甘草提取物；
[0035] 4)将黄芪药材加水浸泡，提取后浓缩；
[0036] 5)分别按浓缩液体积的1% -2% (m/v)向步骤4)得到的浓缩液中加入果胶酶和 蛋白酶，放置，再加入15% -20% (v/v)壳聚糖醋酸溶液，静置；
[0037] 6)过滤步骤5)所述的中药液，调节pH值为5. 0-7.0,浓缩，即得黄芪提取物；
[0038] 7)将步骤3)制备的甘草提取物与步骤6)制备的黄芪提取物混合，加水，调节pH 值至4. 0-6. 0，离心，过滤，灌装，灭菌，即得。
[0039] 本发明所用的壳聚糖醋酸溶液中，壳聚糖的质量浓度为1%。其制备方法例如为取 壳聚糖，用1 %冰醋酸溶解，制成浓度为1 %的溶液。
[0040] 本发明还提供了由上述制备方法制备得到的产品。
[0041] 本发明还提供按照本发明方法制备所制备的黄芪甘草粉在制备预防鸡传染性支 气管炎药物中的应用。
[0042] 本发明提供了一种黄芪甘草粉的制备方法及其产品，有以下优点：
[0043] 1、使用尤其是0. 3-0. 6% (g/g)的氨水溶液对甘草进行提取，既可充分提取甘草 多糖，又显著提高甘草酸的提取率。
[0044] 2、采用减压低温回流提取，避免高温对中药活性成分的破坏，最大限度保留了活 性成分。
[0045] 3、采用蛋白酶和果胶酶对浓缩液中的蛋白质和果胶进行分解，用壳聚糖对浓缩液 进行絮凝纯化，可有效除去蛋白质、果胶、鞣质、淀粉等杂质成分，保留多糖、甘草酸等有效 成分，制备的粉澄清度更高，稳定性更好，效果更显著。
[0046] 4、对设备要求不高，制备工艺简单，可提高生产效率。
【具体实施方式】
[0047] 所用的物料和设备的来源和批号如下：
[0048] 黄芪，产地：内蒙，批号：20110903,来源：河南千方药业有限公司；
[0049] 甘草，产地：内蒙，批号：20111201，来源：河南千方药业有限公司；
[0050] 氨水，分析纯，批号：20100601，厂家：烟台市双双化工有限公司；
[0051] 盐酸，分析纯，批号：110301，厂家：洛阳化学试剂厂；
[0052] 果胶酶，规格：3万U/g，厂家：宁夏和氏璧生物技术有限公司；
[0053] 蛋白酶，规格：10万U/g，厂家：宁夏和氏璧生物技术有限公司；
[0054] 壳聚糖，规格：脱乙酰度85. 5%，厂家：济南海得贝海洋生物工程有限公司；
[0055] 低温提取浓缩机组，型号：TN-2/500,厂家：浙江凯迪药化机械有限公司；
[0056] 高速离心机，型号：GQLB_105N，厂家：辽阳鑫阳光液体分离设备有限公司；
[0057] 紫外-可见分光光度计，型号UV-2100,厂家：北京瑞利分析仪器公司；
[0058] 高效液相色谱仪，型号e2695,紫外检测器，型号2489,厂家：美国沃特世公司。
[0059] 以下通过实验例来进一步说明本发明的【具体实施方式】：
[0060] 实施例1 :甘草提取物的制备
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