Promethazine在制备抗肝癌和/或结肠癌和/或肺癌产品中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种Promethazine在制备抗肝癌和/或结肠 癌和/或肺癌产品中的应用。
【背景技术】
[0002] 肿瘤是威胁人类健康的最常见也是最严重的一种疾病，研发高效抗肿瘤药物对延 长患者的生存周期至关重要。近年来，随着肿瘤基因组学学和分子药理学的飞速发展，新型 抗肿瘤药物的研发取得了不错的成果，但由于新药研发投入大，周期长等瓶颈无法克服，以 及肿瘤个体遗传变异大等特征，导致许多传统抗肿瘤药物效果不加，新药价格昂贵，副作用 未明。
[0003]BarabasiAL等研究者在2011年发表于《NatureReviewsGenetics》的论文中指 出，基于GWAS研究结果和互作组学（interactome)策略开展的分子网络分析有望揭示复杂 疾病新的药物靶点和分子标志物，并最终形成对疾病发病机制和治疗方案全新的认识。更 值得注意的是，药物重定位（drugrepositioning)研究发现，GWAS研究锁定的易感基因及 与其有蛋白-蛋白相互作用（protein-proteininteraction,PPI)的基因更容易成为药物 间接的靶点，这一发现有助于解释现有药物的作用机制并指导新药的研发。2014年，Okada Y等研究者在《Nature》上发表的论文中显示GWAS研究结果整合分析得到的类风湿性关节 炎的101个易感基因中有98个目前正用于治疗类风湿性关节炎药物的直接或间接靶标，而 且还通过药物重定位研究，他们还发现了数十个已获批准用于其他适应症的药物也可用于 治疗类风湿性关节炎。
【发明内容】
[0004] 本研究正是通过整合癌症组学Cosmicversion72数据库的癌症基因谱Cancer GeneCensus以及蛋白质相互作用STRINGversion10 数据库和DrugBankversion4. 2 中 FDA批准的药物数据库，获得的候选重定位药物，对肿瘤细胞系进行筛查实验，筛选出新的 抗肿瘤药物。做肿瘤细胞系筛选的候选肿瘤抑制药物见如下：
[0005] Nicardipine,Promethazine,Estrone,Promethazine,Sunlidac,Promethazine, Etonogestrel,Levonorgestrel,Mesalazine,Indomethacin,Sulfasalazine,Balsalazid e,Irbesartan,Ibuprofen,IsoprenalinejPentosanPolysulfate〇
[0006] 本发明的一个目的是提供Promethazine的新用途。
[0007] 本发明提供的Promethazine在制备治疗肝癌和/或结肠癌和/或肺癌产品中的 应用。
[0008] 本发明的第二个目的是提供Promethazine的新用途。
[0009] 本发明提供了Promethazine在制备抑制肝癌和/或结肠癌和/或肺癌细胞增殖 产品中的应用。
[0010] 本发明的第三个目的是提供Promethazine的新用途。
[0011] 本发明提供了Promethazine在制备降低肝癌和/或结肠癌和/或肺癌细胞IC50 值产品中的应用。
[0012] 上述应用中，所述肝癌细胞为HUH-7 ;所述结肠癌细胞为L0V0,所述肺癌细胞为 NCI-H2141。
[0013] 上述应用中，所述产品为药物或试剂盒。
[0014] 本发明的第四个目的是提供一种产品。
[0015] 本发明提供的产品，其活性成分为Promethazine;所述产品具有如下至少一种功 能：
[0016] 1)治疗肝癌和/或结肠癌和/或肺癌；
[0017] 2)抑制肝癌和/或结肠癌和/或肺癌细胞增殖；
[0018] 3)降低肝癌和/或结肠癌和/或肺癌细胞IC50值。
[0019] 上述产品中，所述肝癌细胞为HUH-7;所述结肠癌细胞为L0V0,所述肺癌细胞为 NCI-H2141。
[0020] 上述产品中，所述产品为药物或试剂盒。
[0021] 本发明的实验证明，本发明对FDA,CFDA已获批准的药物Promethazine进行肿瘤 药物重定位，根据肿瘤不同的细胞系（组织类型）以及突变位点对适应症不是抗肿瘤的药 物进行筛选，发现Promethazine抗肝癌和/或结肠癌和/或肺癌这种新用途，实现旧药新 用。
【附图说明】
[0022] 图1为96孔培养板药筛药物板型分布。
[0023]图 2 为Promethazine对肝癌敏感；EC50 = 41. 9877 ;IC50 = 31. 3712 ;R2 = 0. 9988〇
[0024]图 3 为Promethazine对结肠癌敏感；EC50 = 18863738. 7272 ;IC50 = 33. 4520 ;R2 =0.9164。
[0025]图 4 为Promethazine对肺癌敏感；EC50 = 33. 9362 ;IC50 = 34. 6324 ;R2 = 0.9670。
【具体实施方式】
[0026] 下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
[0027] 下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0028]下述实施例中待测药物为Promethazine，其化学结构式如下：
[0030] 下面实施例中的肝癌细胞HUH-7和结肠癌细胞L0V0、人卵巢癌细胞SK0V-3和大细 胞肺癌细胞NCI-H661、肺癌细胞NCI-H2141的出处如下：
[0031]
[0032] 下面实施例中的主要的仪器及耗材
[0033] DMSO(fromSigma,Cat.No.D4540)
[0034] 96-well白色底透细胞培养板（fromCorning,Cat.No. 3610)
[0035] CellTiterGlo试剂盒（fromPromega,Cat.No.G7573)
[0036] Doxorubicin阳性药（fromMCE,Cat.No.HY-15142)
[0037] FetalBovineSerum(fromGibco,Cat#10099141)
[0038] 100mm培养皿（fromCorning,Cat#430167)
[0039] RPMI-1640medium(fromGibco,Cat#A1049101)
[0040] DMEMmedium(fromGibco,Cat#l1995081)
[0041] DMEM/F12medium(fromGibco,Cat#l1330057)
[0042] EMEMmedium(fromGibco,Cat#10370021)
[0043] Mutidrop384 细胞分液器（Thermo,Cat#5840150)
[0044] EnSpire多功能读板机（PerkinElmer,Cat#23〇0_001M)
[0045] 实施例1、CELLTITER-GL0检测Promethazine抗肝癌和/或结肠癌
[0046] 一、待测孔板的制备
[0047] 1、细胞铺板
[0048] a)配制各个细胞所需完全培养基。
[0049] b)实验开始前，确认标记在IOOmrn培养皿上的药筛细胞名字，培养基以及传代时 间，代次等信息，确保实验无误。
[0050] C)贴壁细胞操作参考步骤d)到i)，悬浮细胞操作参考步骤j)到1)。
[0051] d)无菌操作时利用真空栗吸取细胞培养基。
[0052] e)用2ml的无菌PBS溶液润洗细胞表层，再用真空栗吸出PBS废液。
[0053] f)向培养皿轻轻加入Iml0.25% (w/v)Trypsin-0. 038% (w/v)EDTA溶液消化细 胞，轻轻混匀几下，溶液覆盖住细胞表层，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，在细胞将要 脱落时终止胰酶消化作用。
[0054] g)向培养皿中加入5ml37°C预热好的完全培养基，用移液管轻轻吹打细胞，使其 从培养皿底部脱落下来。
[0055] h)将此细胞悬液转移到15ml或50ml无菌离心管中，1000 rpm离心5min。
[0056] i)利用真空栗无菌操作吸出上清培养基。加入5ml37°C预热好的完全培养基重 悬细胞沉淀，轻轻吹打混匀。
[0