组合物及其在防治肝脏损伤药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及有机合成和药物化学领域，具体设及组合物、制备方法及其用途。
【背景技术】
[0002] 引起肝损伤的原因有多个：1、病毒感染：由多种肝炎病毒引起，具有传染性强，传 播途径复杂，流行面广泛，发病率高等特点。2、药物或化学毒物：许多药物和化学毒物都可 引起肝脏损伤，发生药物性肝炎或中毒性肝炎。3、醒酒：酒精对肝脏的损害是很严重的，损 害的后果包括酒精性肝炎、酒精性脂肪肝、酒精性肝硬化，主要是由于酒精（乙醇）及其代 谢产物乙醒的毒性对肝细胞直接损害造成的。4、其他原因：原发和继发的肝脏肿瘤、屯、功 能不全导致肝脏渺血、某些先天性肝脏疾病、静脉高价营养等，都可W造成不同程度的肝损 害，运些肝损害的早期表现往往是ALT(转氨酶）或胆红素的升高，不桂除病因，肝脏的损害 会进一步加重。目前在我国由于上述原因每年发生肝损伤的人数众多，形势不容乐观。急 需研发高效低毒的防治肝脏损伤药物。
[0003] 肝脏损伤的治疗目前已有的药物存在毒性大、安全性低的问题，从天然产物中寻 找化合物或先导化合物并进行结构修饰获得其衍生物，从而得到高效低毒的潜在药物具有 重要价值。
[0004] 本发明设及的化合物I是一个2011年发表（AntonellaMaggioetal. , 2011. Artalbicacid,asesquiterpenewithanunusualskeletonfromArtemisia a化a(Asteraceae)fromSicily.TetrahedronLetters, 52(201]_)4543 - 4545)的化合物， 我们对化合物I进行了结构修饰，获得了两个新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化 合物HI和化合物IV制备了组合物并对该组合物抗肝脏损伤活性进行了评价，其具有抗肝 脏损伤活性。
【发明内容】
阳0化]本发明公开了一个新的组合物，该组合物由化合物III和化合物IV组成，该组合 物中化合物III和化合物IV的质量百分数分别为10%和90%。
[0006]
[0007] 本发明公开的组合物可W制成药学上可接受的盐或药学上可接受的载体。
[0008] 药效学实验表明，本发明的组合物具有较好的抗肝脏损伤作用。本发明的药学上 可接受的盐具有同样的药效。
[0009] W下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实 施例的任何限制，而是由权利要求加W限定。
【具体实施方式】
[0010] 实施例1化合物Arta化icacid的制备 |；0011] 化合物Arta化icacidG)的制备方法参照AntonellaMaggio等人发表的 文南犬(AntonellaMa邑邑ioetal. , 2011.Artalbicacid,asesquiterpenewithan unusualskeletonfromArtemisiaalba(Asteraceae)fromSicily.Tetrahedron Letters, 52 (2011) 4543 - 4545)的方法。
[0012]
阳01引实施例2Arta化icacid的0-漠乙基衍生物（II)的合成
[0014] 将化合物I(266mg，1.OOmmol)溶于10血苯，向溶液中加入四下基漠化锭灯BAB) (0.08旨)，1，2-二漠乙烧化760旨，20.00臟〇1)和6血的50%氨氧化钢溶液。混合物在40 摄氏度揽拌16h。1化之后将反应液倒入冰水中，立即用二氯甲烧萃取两次，合并有机相 溶液。然后对有机相溶液依次用水和饱和食盐水洗涂5次，再用无水硫酸钢干燥，最后减 压浓缩去除溶剂得到产物粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油酸/丙酬 =100:1.0,v/v)，收集栋色集中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物II的栋色粉末（272mg， 73% )〇
[0015]电NMR巧00MHz，DMS0-de) 5 11.41(s, 1H)，6. 06(s, 1H)，5. 76(s, 1H)，4. 99(s, 1H)，4 .71 (s, IH), 4. 56 (s, IH), 3. 86 (s, 2H), 3. 54 (s, 2H), 2. 65 (s, IH), 2. 43 (s, 2H), 2. 33 (s, 2H), 2 .10 (s, IH)，1. 64 (s, 3H)，1. 54 (s, IH)，1. 44 (s, 2H)，0. 95 (s, 3H).
[0016] "cNMR(i25MHz，DMS0-d6) 5 201. 95(s), 175. 93(s), 149. 13(s), 148. 15(s), 117. 0 5 (s)，109. 43 (s)，81. 86 (s)，70. 27 (s)，57. 68 (s)，41. 26 (s)，39. 07 (s)，38. 86 (s)，35. 69 (s) ,33. 36 (s), 30. 72 (s), 20. 44 (s), 18. 42 (s).
[0017] HRMS(ESUm/z[M+H]+calcd for C口H2sBr〇4:373. 1014 ;found 373. 1017.
[0018]
[0019] 实施例3Arta化icacid的0-(二乙胺基）乙基衍生物（III)的合成
[0020]将化合物II(187mg，0.5mmol)溶于15血乙腊当中，向其中加入无水碳酸钟 (345mg，2. 5mmol)，舰化钟（84mg，0. 5mmol)和二乙胺（1460mg，20mmol)，混合物加热回流 12h。反应结束后将反应液倒入冰水中，用等量二氯甲烧萃取4次，合并有机相。依次用水 和饱和食盐水洗涂合并之后的有机相，再用无水硫酸钢干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物 粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油酸/丙酬=100:0.5,v/v)，收集栋色 集中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物III的栋色粉末（111. 3mg，61% )。
[0021] 电NMR巧00MHz，DMS0-d6) 5 11.52(s, 1H), 5 6. 13(s, 1H)，5. 81(s, 1H)，4. 73(s, 1H) ，4. 62 (d,J= 10. 9Hz, 2H)，3. 59 (s, 2H)，2. 92 (s, 4H)，2. 68 (d,J= 10. 5Hz, 3H)，2. 56 (s, 2H)， 2. 48 (s, 2H)，2. 22 (s,IH)，1. 70 (s, 3H)，1. 54 (d,J= 10. 2Hz, 3H)，1. 16 (s, 6H)，1. 00 (s, 3H).
[0022] "cNMR(i25MHz，DMS0-d6) 5 201. 95(s), 175. 93(s), 149. 13(s), 148. 15(s), 117. 0 5 (s)，109. 43 (s)，81. 86 (s)，67. 06 (s)，57. 68 (s)，52. 53 (s)，47. 72 (s)，41. 30 (s)，39. 06 (s) ,38. 85 (s), 35. 68 (s), 30. 72 (s), 20. 44 (s), 18. 42 (s), 12. 35 (s).
[0023] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcdforC2化sN〇4:366. 2644 ;found:366. 2640。
[0024]
[0025] 实施例4Arta化icacid的0-(四氨化咯基）乙基衍生物（IV)的合成
[0026] 将化合物II(187mg，0. 5mmol)溶于15血乙腊当中，向其中加入无水碳酸钟 (345111邑，2.51111]1〇1)，舰化钟（84111邑，0.51111]1〇1)和11比咯烧（142〇111邑，2〇1111]1〇1)，混合物加热回流 8h。反应结束后将反应液倒入冰水中，用等量二氯甲烧萃取3次，合并有机相。依次用水和 饱和食盐水洗涂合并之后的有机相，再用无水硫酸钢干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物粗 品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油酸/丙酬=100:1. 0,v/v)，收集栋色集 中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物IV的栋色粉末（107.Img，59% )。 W27]iHNMR巧OOMHz,DMS0-d6) 5 14. 01(S,1H), 6. 15(s, 1H), 5. 83(s, 1H), 4. 7 5 (s,IH), 4. 63 (s,IH), 3. 96 (s,IH), 3. 58 (s, 2H), 2. 70 (d,J= 6.IHz, 3H), 2. 56 -2. 49 (m, 8H)，2. 09 (s,IH)，1. 68 (d,J= 10.OHz, 7H)，1. 58 (s, 2H)，1. 44 (s,IH)，1. 02 (s, 3H). [0028]"cNMR(i25MHz，DMS0-d6) 5 201. 85(s), 175. 85(s), 149. 07(s), 148.ll(s), 117. 0 3 (s)，109. 33 (s)，81. 78 (s)，67. 00 (s)，57. 64 (s)，54. 44 (d,J= 17.IHz)，41. 20 (s)，38. 98 ( s), 38. 79 (s), 35. 64 (s), 30. 70 (s), 25. 21 (s), 20. 35 (s), 18. 36 (s).
[0029] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for Cz化4N04:364. 24 88 ;found:364. 2491。
[0030]
[0031] 实施例4组合物防治肝损伤的作用 阳〇3引（一）组合物对D-氨基半乳糖胺值-galactosamine，D-GalN)诱导的小鼠急性肝 损伤的防护作用
[0033] 组合物的制备：将lOmg化合物III的粉末和90mg化合物IV的粉末装入带盖的小 管中并用满轮揽拌仪混合即得到lOOmg组合物。 W34] 小鼠分5组。对照组W生理盐水灌胃（0. 3血?(! 1)，连续7d;且于第7d还要腹腔注 射生理盐水化15血?lOg1)，腹腔注射1化后取血，测AST及ALT活力。D-GalN组、组合物 3.Omg，kg1组、化合物III组和化合物IV组分别W生理盐水、组合物、化合物HI和化合物 IV灌胃（0. 3血.d1)，连续7d;且于第7d还要腹腔注射D-GalN(800mg.kg1,0. 15血.lOg1)， 腹腔注射1化后取血，测AST及ALT活力。
[0035] 表1组合物对D-GalN诱导的急性肝损伤的防护作用
[0036]
[0037]
[0038]注："!)<0.0 lvs对照组，Olvs D-GalN组
[0039] 由表1可知，组合物能有效抑制D-GalN引起的小鼠AST及ALT活性的显著上升。 化合物III和化合物IV无此作用。 W40](二）组合物对CC1满导的小鼠急性肝损伤的防护作用
[OOW小鼠分5组，对照组W生理盐水灌胃（0.3血.d1)，连续5d，第6d腹腔注射植物油 每只0. 1血?lOgi;CCl4组及组合物、化合物III和化合物IV给药组（3.Omg?kg1)分别W 生理盐水及组合物、化合物III和化合物IV灌胃（0.3血?d1)，连续5d，于第6d腹腔注射 0. 1%CCI4O. 1血?lOg1。2地后处死动物，取血清测AST及ALT活力。
[0042] 表2组合物对CCI4诱导的急性肝损伤的防护作用
[0043]
[0044] 注："!)<0.Olvs对照组，2)j)<〇.OlvsCCI4组 W45] 由表2可知，组合物能抑制CCI4引起的小鼠AST及ALT活性的显著上升。化合物III和化合物IV无此作用。
[0046] 结论：组合物能有效保护D-GalN引起的小鼠肝损伤，组合物能有效保护CCI4引起 的小鼠肝损伤，可W用来制备抗肝损伤药物。化合物HI和化合物IV不能有效保护D-GalN 引起的小鼠肝损伤，不能有效保护CCI4引起的小鼠肝损伤，不可W用来制备抗肝损伤药物。
[0047] 实施例6本发明所设及组合物片剂的制备
[0048] 取2克组合物，加入制备片剂的常规辅料18克，混匀，常规压片机制成100片。
[0049] 实施例7本发明所设及组合物胶囊的制备
[0050] 取2克组合物，加入制备胶囊剂的常规辅料如淀粉18克，混匀，装胶囊制成100 粒。
【主权项】
1. 一种组合物，其特征为该组合物由化合物III和化合物IV组成，该组合物中化合物 III和化合物IV的质量百分数分别为10%和90%，2. 如权利要求1所述的组合物的制备方法，其特征为：将化合物III的粉末和化合物 IV的粉末按照质量百分数分别为10%和90%充分混合。3. -种如权利要求1所述的组合物在防治肝脏损伤药物中的应用。4. 如权利要求3所述的组合物在防治肝脏损伤药物中的应用，其特征为：所述肝脏损 伤为化学物质诱导所致的肝脏损伤。5. 如权利要求4所述的组合物在防治肝脏损伤药物中的应用，其特征为：所述化学物 质为D-氨基半乳糖胺。6. 如权利要求4所述的组合物在防治肝脏损伤药物中的应用，其特征为：所述化学物 质为四氯化碳。
【专利摘要】本发明涉及有机合成和药物化学领域，具体涉及组合物、制备方法及其在制备防治肝脏损伤药物上的用途。本发明公开了一种组合物及其制备方法。药理学实验表明，本发明的组合物具有防治肝脏损伤的作用，具有开发防治肝脏损伤药物的价值。
【IPC分类】A61K31/40, A61K31/195, A61P1/16
【公开号】CN105213376
【申请号】CN201510421020
【发明人】丁秋菊
【申请人】南京海澳斯生物医药科技有限公司
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2015年7月16日