。
[0030] 将次代培养P.acne接种于LB液体培养基中，37°C需氧培养24h后发现液体混浊， 取一环液体培养基中菌液作镜检，并涂布于平板24h后观察发现，平板菌落形态，革兰染色 及镜下观察细菌特征，触酶试验、吲哚试验、耐氧试验、生化试验结果与前一致。
[0031] 厌氧药敏试验：菌株接种：挑取1-2个菌落接种于LB平板培养基上，37°C需氧培 养24h，将需氧培养24h的纯种P.acne用无菌生理盐水冲洗，冲洗液放入无菌试管中；采 用麦氏比浊法比浊，比浊管用前需振摇10-12次，先比浊至3*10s/mL，再用生理盐水稀释至 105-106/mL备用。LB平板培养基接种：将灭菌的棉棒蘸取菌液，于管壁上挤去多余菌液，在 LB平板培养基上均匀涂布，并沿平皿边缘环扫一圈，盖好平皿，干燥2-3min。将无菌钢杯 (直径为6mm)轻放于平板培养基上，加满备用样品液，放入37°C需氧培养24h，发现平皿内 无细菌生长，继续37°C需氧培养24h后见有抑菌圈形成。
[0032] 测抑菌圈直径，判定结果，将4组抑菌圈直径值取平均值。试验组抗菌药敏等级划 分：抑菌环直径大于20mm为高敏，10-20mm中敏，小于10mm为耐药。
[0033] 试验结果：见表1。
[0034] 表1抑菌结果对比结果
[0035]
[0036] 试验结论：上述试验结果表明，试验1组、试验2组并没有产生抑菌效果，而加入微 量的蜜柑果皮提取物、黄檗树皮提取物和视黄醇棕榈酸酯后，产生中敏抑菌（试验3组）， 而加大蜜柑果皮提取物、黄檗树皮提取物和视黄醇棕榈酸酯抑菌效果没有产生显著性变化 (依然是中敏），因此，我们保留试验3组为祛痘组分。
[0037] 二、验证试验：对兔耳痤疮模型治疗作用的试验研究
[0038] 试验1组：1，3_ 丁二醇8g、鲸蜡硬脂醇5g、聚二甲基硅氧烷3g、异壬酸异壬酯 2g、PEG-45硬脂酸酯lg、鹿糖硬脂酸酯lg、甘油硬脂酸酯0· 6g、β-葡聚糖0· 4g、二（月 桂酰胺谷氨酰胺）赖氨酸钠〇. 4g、氢氧化钠0. 4g、精氨酸0. 3g、卡波姆0. 3g、白柳树皮提 取物〇.lg、氢化卵磷脂〇.lg、白藜芦醇〇. 〇5g、银耳多糖0. 05g、甘油辛酸酯0. 07g、茵陈 蒿花提取物〇. 〇7g、黄原胶0. 04g、聚甘油-10月桂酸酯0. 02g、喷替酸五钠0.Olg、软骨 素硫酸钠0. 〇lg、三磷酸腺苷0. 〇lg、水解植物蛋白0. 〇lg、香橙果提取物0. 004g、肌醇六 磷酸0. 0015g、丁香花提取物0. 001g、抗坏血酸磷酸酯钠0. 0001g、l，2-丙二醇0. 0005g、 菜蓟叶提取物〇. 〇〇〇4g、氧化银0. 000162g、梅果提取物0. 00001g、白花春黄菊花提取物 0. 0000075g、铂粉〇.〇〇〇〇〇〇02g、淀粉辛烯基琥珀酸铝2g、水杨酸lg、PCA锌0. 4g、葡萄糖酸 锌0.lg、烟酰胺0. 05g、蜜柑果皮提取物0. 001g、黄檗树皮提取物0. 001g、视黄醇棕榈酸酯 0. 001g〇
[0039] 精华霜的制备方法为：
[0040] (1)取水50g、l，3_ 丁二醇4g、二（月桂酰胺谷氨酰胺）赖氨酸钠、氢化卵磷脂、黄 原胶、卡波姆，加入水相锅，加热至70-75Γ后，搅拌均匀，抽入真空乳化机中；
[0041] (2)取鲸蜡硬脂醇、聚二甲基硅氧烷、异壬酸异壬酯、水杨酸、PEG-45硬脂酸酯、蔗 糖硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯，加入油相锅，加热至70-75Γ，搅拌均匀，抽入真空乳化机中；
[0042] (3)开机搅拌混合均勾，30分钟，lOOOrpm/分，停止搅拌，降温至40°C;加入氢氧 化钠、淀粉辛烯基琥珀酸铝、精氨酸、白藜芦醇、银耳多糖、视黄醇棕榈酸酯、β-葡聚糖、香 橙果提取物、水9g、l，3- 丁二醇4g、菜蓟叶提取物、水解植物蛋白、三磷酸腺苷、软骨素硫酸 钠、PCA锌、喷替酸五钠、肌醇六磷酸、氧化银、丁香花提取物、茵陈蒿花提取物、甘油辛酸酯、 聚甘油-10月桂酸酯、白柳树皮提取物、葡糖酸锌、黄檗树皮提取物、温州蜜柑果皮提取物、 铂粉、抗坏血酸磷酸酯钠、梅果提取物、白花春黄菊花提取物、1，3-丙二醇、烟酰胺，继续搅 拌均匀，冷却至室温；灌装，即得。
[0043] 试验2组：1，3- 丁二醇9g、鲸蜡硬脂醇6g、聚二甲基硅氧烷4g、异壬酸异壬酯3g、 PEG-45硬脂酸酯1. 5g、蔗糖硬脂酸酯1. 5g、甘油硬脂酸酯0. 7g、β-葡聚糖0. 5g、二（月 桂酰胺谷氨酰胺）赖氨酸钠〇. 5g、氢氧化钠0. 45g、精氨酸0. 4g、卡波姆0. 4g、白柳树皮 提取物〇. 2g、氢化卵磷脂0. 2g、白藜芦醇0.lg、银耳多糖0.lg、甘油辛酸酯0. 08g、茵陈蒿 花提取物0. 〇75g、黄原胶0. 05g、聚甘油-10月桂酸酯0. 03g、喷替酸五钠0. 015g、软骨素 硫酸钠0. 〇15g、三磷酸腺苷0. 015g、水解植物蛋白0. 015g、香橙果提取物0. 005g、肌醇六 磷酸0. 0017g、丁香花提取物0. 001g、抗坏血酸磷酸酯钠0. 0001g、l，2-丙二醇0. 0005g、 菜蓟叶提取物〇. 〇〇〇4g、氧化银0. 000162g、梅果提取物0.OOOOlg、白花春黄菊花提取物 0· 0000075g、铂粉0· 00000002g、淀粉辛烯基琥珀酸铝2. 5g、水杨酸L5g、PCA锌0· 5g、葡萄 糖酸锌0. 2g、烟酰胺0.lg、蜜柑果皮提取物0. 002g、黄檗树皮提取物0. 002g、视黄醇棕榈酸 酯 0.001g〇
[0044] 精华霜的制备方法为：
[0045] (1)取水55g、l，3-丁二醇4.5g、二（月桂酰胺谷氨酰胺）赖氨酸钠、氢化卵磷脂、 黄原胶、卡波姆，加入水相锅，加热至70-75Γ后，搅拌均匀，抽入真空乳化机中；
[0046] (2)取鲸蜡硬脂醇、聚二甲基硅氧烷、异壬酸异壬酯、水杨酸、PEG-45硬脂酸酯、蔗 糖硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯，加入油相锅，加热至70-75Γ，搅拌均匀，抽入真空乳化机中；
[0047] (3)开机搅拌混合均勾，30分钟，lOOOrpm/分，停止搅拌，降温至40°C;加入氢氧化 钠、淀粉辛烯基琥珀酸铝、精氨酸、白藜芦醇、银耳多糖、视黄醇棕榈酸酯、β-葡聚糖、香橙 果提取物、水llg、l，3-丁二醇4. 5g、菜蓟叶提取物、水解植物蛋白、三磷酸腺苷、软骨素硫 酸钠、PCA锌、喷替酸五钠、肌醇六磷酸、氧化银、丁香花提取物、茵陈蒿花提取物、甘油辛酸 酯、聚甘油-10月桂酸酯、白柳树皮提取物、葡糖酸锌、黄檗树皮提取物、温州蜜柑果皮提取 物、铂粉、抗坏血酸磷酸酯钠、梅果提取物、白花春黄菊花提取物、1，3-丙二醇、烟酰胺，继续 搅拌均匀，冷却至室温；灌装，即得。
[0048] 试验3组：1，3- 丁二醇10g、鲸蜡硬脂醇7g、聚二甲基硅氧烷5g、异壬酸异壬酯 4g、PEG-45硬脂酸酯2g、鹿糖硬脂酸酯2g、甘油硬脂酸酯0· 8g、β-葡聚糖0· 6g、二（月 桂酰胺谷氨酰胺）赖氨酸钠〇. 6g、氢氧化钠0. 5g、精氨酸0. 5g、卡波姆0. 5g、白柳树皮 提取物〇. 3g、氢化卵磷脂0. 3g、白藜芦醇0. 15g、银耳多糖0. 15g、甘油辛酸酯0. 09g、茵 陈蒿花提取物〇. 〇8g、黄原胶0. 06g、聚甘油-10月桂酸酯0. 04g、喷替酸五钠0. 02g、软骨 素硫酸钠0. 02g、三磷酸腺苷0. 02g、水解植物蛋白0. 02g、香橙果提取物0. 006g、肌醇六 磷酸0. 0020g、丁香花提取物0. 001g、抗坏血酸磷酸酯钠0. 0001g、l，2-丙二醇0. 0005g、 菜蓟叶提取物〇. 〇〇〇4g、氧化银0. 000162g、梅果提取物0. 00001g、白花春黄菊花提取物 0· 0000075g、铂粉(λ00000002g、淀粉辛烯基琥珀酸铝3g、水杨酸2g、PCA锌(λ6g、葡萄糖酸 锌0. 3g、烟酰胺0. 15g、蜜柑果皮提取物0. 003g、黄檗树皮提取物0. 003g、视黄醇棕榈酸酯 0.001g〇
[0049] 精华霜的制备方法为：
[0050] (1)取水69g、l，3_ 丁二醇5g、二（月桂酰胺谷氨酰胺）赖氨酸钠、氢化卵磷脂、黄 原胶、卡波姆，加入水相锅，加热至70-75Γ后，搅拌均匀，抽入真空乳化机中；
[0051] (2)取鲸蜡硬脂醇、聚二甲基硅氧烷、异壬酸异壬酯、水杨酸、PEG-45硬脂酸酯、蔗 糖硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯，加入油相锅，加热至70-75Γ，搅拌均匀，抽入真空乳化机中；
[0052] (3)开机搅拌混合均勾，30分钟，lOOOrpm/分，停止搅拌，降温至40°C;加入氢氧化 钠、淀粉辛烯基琥珀酸铝、精氨酸、白藜芦醇、银耳多糖、视黄醇棕榈酸酯、β-葡聚糖、香橙 果提取物、水llg、l，3-丁二醇5g、菜蓟叶提取物、水解植物蛋白、三磷酸腺苷、软骨素硫酸 钠、PCA锌、喷替酸五钠、肌醇六磷酸、氧化银、丁香花提取物、茵陈蒿花提取物、甘油辛酸酯、 聚甘油-10月桂酸酯、白柳树皮提取物、葡糖酸锌、黄檗树皮提取物、温州蜜柑果皮提取物、 铂粉、抗坏血酸磷酸酯钠、梅果提取物、白花春黄菊花提取物、1，3-丙二醇、烟酰胺，继续搅 拌均匀，冷却至室温；灌装，即得。
[0053] 试验动物：成年新西兰大耳白兔，体质量2. 0~3. 0kg。
[0054] 试验方法：年新西兰大耳白兔右耳内侧耳管开口处2cmX2cm范围，每天涂煤焦油 稀释液（95%乙醇配成的2%浓度煤焦油溶液）0. 25mL-次，左耳不做任何处理作为对比， 肉眼观察造模后兔耳皮损的情况和毛囊口有无角质栓等，连涂14d。随机取2只成年新西兰 大耳白兔，用空气栓塞法处死，取下双耳导管开口处的全层皮肤，10%福尔马林液固定，脱 水后用硬蜡进行包埋，然后切片并烘干。HE染色后进行常规病理观察，验证造模成功。
[0055] 疗效肉眼判