一种治疗胃溃疡的樱桃叶提取物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中药领域，具体涉及一种治疗胃溃疡的樱桃叶提取物及其制备方法
【背景技术】
[0002] 樱桃叶为蔷薇科植物樱桃的叶。夏、秋季采叶晒干。
[0003] 原植物樱桃为落叶灌木或乔木，高3-8m。树皮灰白色，有明显的皮孔；幼枝无毛或 被疏柔毛。叶互生；叶柄长〇. 7-1. 5cm，被疏柔毛，先端有1或2个大腺体；托叶披针形，有 羽裂腺齿，早落；叶片卵形或长圆状卵形，长5-12cm，宽3-5cm，先端渐尖或尾状渐尖，基部 圆形，边有尖锐重锯齿，齿端有小腺体，上面暗绿色，近无毛，下面淡绿色，沿脉或脉间有稀 疏柔毛；花两性，花序伞房状或近伞形；有花3-6朵，先叶开放；花梗长8-19mm，被疏柔毛； 萼筒钟状，外被疏柔毛；萼片5,三角卵圆形或卵状长圆形；先端急尖或钝；花瓣5,白色，卵 圆形，先端下凹或二裂；雄蕊30-35,栽培者可达50枚；花柱与雄蕊近等长，无毛雌蕊1，子 房下位。核果近球形，红色，直径9-13mm，种子1颗，包围于黄白色木质内果皮中。花期3-4 月。果期5-6月。生于海拔300-600m的山坡向阳处或沟边。分布华东及辽宁、河北、甘肃、 陕西、湖北、四川、广西、山西、河南等地。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种樱桃叶提取物，该提取物的制备方法和液相分析方 法，含有该提取物的药物制剂及利用该提取物制备治疗胃溃疡药物的用途。
[0005] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0006] -种樱桃叶提取物，该提取物由以下方法制备：
[0007] (a)以重量计，每100份药材包含干燥的樱桃叶80~90份和干燥的苦参10~20 份，混合粉碎；(b)用乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液；（c)对步骤 (b)浓缩液依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸 乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（d)正丁醇萃取物用大孔树脂富集，先用20~30%乙醇冲洗 7~9个柱体积除杂，再用55~65%乙醇洗脱9~11个柱体积，收集55~65%乙醇洗脱 液，减压浓缩，喷雾干燥。
[0008] 进一步地，步骤（d)中所述大孔树脂为AB-8型大孔树脂。
[0009] 进一步地，步骤（b)中所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为65~75%。
[0010] 进一步地，步骤（b)中所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为70%。
[0011] 进一步地，步骤（d)为用正丁醇萃取物用大孔树脂富集，先用25%乙醇冲洗8个柱 体积除杂，再用60%乙醇洗脱10个柱体积，收集60%乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥。
[0012] 为了能够通过建立HPLC指纹图谱的方法控制不同产地、批次药材制备的樱桃叶 提取物批间差异，所述提取物的液相分析方法为：
[0013] 色谱柱：Agilent Zorbax SB C18 柱（4. 6mmX 250mm，5 μ m);
[0014] 流动相：A为乙腈，B为0. 1 %甲酸溶液（三乙胺调节pH值至6. 0);
[0015] 梯度洗脱程序：0 ~5min，A 35%;5 ~10min，A 35%-70%;10 ~15min，A 70% -35% ;15 ~20min，A 35% ;
[0016] 流动相流速：1. OmL · min S
[0017] 检测波长：274nm;
[0018] 柱温：30°C ;
[0019] 进样量 10 μ L。
[0020] 药物制剂，含有治疗有效量的所述樱桃叶提取物和药学上可接受的载体。
[0021] 所述的樱桃叶提取物在制备治疗胃溃疡的药物中的应用。
[0022] 所述的药物制剂在制备治疗胃溃疡的药物中的应用。
[0023] 本发明提取物用作药物时，可以直接使用，或者以药物制剂的形式使用。
[0024] 所述药物制剂含有治疗有效量的本发明樱桃叶提取物，其余为药物学上可接受 的、对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0025] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物制剂以单位体重服用量的形式使用。本发明提取物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
[0026] 本发明的优点：本发明通过对樱桃叶药材进行提取、除杂、富集处理，能得到对胃 溃疡具有治疗作用的提取物；本发明提供的液相分析方法可以用于建立该提取物的指纹图 谱，用于控制不同产地、批次药材制备的提取物的批间差异。
【附图说明】
[0027] 图1为樱桃叶提取物HPLC液相图谱。
【具体实施方式】
[0028] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0029] 实施例1 :樱桃叶提取物制备
[0030] 药材来源：樱桃叶和苦参购自安徽亳州中药材市场。
[0031] 主要试剂：食品级乙醇购自上海凌峰化学试剂有限公司；医药级AB-8大孔树脂购 自天津波鸿树脂有限公司；乙腈为HPLC级，购于TEDIA ;85 %磷酸为HPLC级，购于TEDIA ; 色谱用纯净水为哇哈哈纯净水。
[0032] 将8. 5kg干燥的樱桃叶和1. 5kg干燥苦参混合粉碎，用70%乙醇热回流提取 (25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液^L);对浓缩液依次用石油醚（6LX3 次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水饱和的正丁醇（6LX3次）萃取，分别得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大孔树脂 (2kg，柱体积1. 5L)富集，先用25%乙醇冲洗8个柱体积（12L)，再用60%乙醇洗脱10个柱 体积（15L)，收集60%洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥得樱桃叶提取物浸膏粉约155g。
[0033] 实施例2 :樱桃叶提取物②制备（80份樱桃叶，20份苦参）
[0034] 制备方法：将8. 0kg干燥的樱桃叶和2. 0kg干燥苦参混合粉碎，用70%乙醇热回 流提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液（6L);对浓缩液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水饱和的正丁醇（6LX3次）萃取，分别得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大 孔树脂（2kg，柱体积1. 5L)富集，先用25%乙醇冲洗8个柱体积（12L)，再用60%乙醇洗脱 10个柱体积（15L)，收集60%洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥得樱桃叶提取物浸膏粉约155g。
[0035] 实施例3 :樱桃叶提取物③制备（90份樱桃叶，10份苦参）
[0036] 制备方法：将9. 0kg干燥的樱桃叶和1. 0kg干燥苦参混合粉碎，用70%乙醇热回 流提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液（6L);对浓缩液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水饱和的正丁醇（6LX3次）萃取，分别得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大 孔树脂（2kg，柱体积1. 5L)富集，先用25%乙醇冲洗8个柱体积（12L)，再用60%乙醇洗脱 10个柱体积（15L)，收集60%洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥得樱桃叶提取物浸膏粉约155g。
[0037] 实施例4 :樱桃叶提取物④制备（75份樱桃叶，25份苦参）
[0038] 制备方法：将7. 5kg干燥的樱桃叶和2. 5kg干燥苦参混合粉碎，用70%乙醇热回 流提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液（6L);对浓缩液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水饱和的正丁醇（6LX3次）萃取，分别得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大 孔树脂（2kg，柱体积1. 5L)富集，先用25%乙醇冲洗8个柱体积（12L)，再用60%乙醇洗脱 10个柱体积（15L)，收集60%洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥得樱桃叶提取物浸膏粉约155g。
[0039] 实施例5 :樱桃叶提取物⑤制备（95份樱桃叶，5份苦参）
[0040] 制备方法：将9. 5kg干燥的樱桃叶和0. 5kg干燥苦参混合粉碎，用70%乙醇热回 流提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液（6L);对浓缩液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水饱和的正丁醇（6LX3次）萃取，分别得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大 孔树脂（2kg，柱体积1. 5L)富集，先用25%乙醇冲洗8个柱体积（12L)，再用60%乙醇洗脱 10个柱体积（15L)，收集60%洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥得樱桃叶提取物浸膏粉约155g。
[0041] 实施例6 :液相色谱分析
[0042] 供试品溶液配制：取实施例1方法制得的提取物浸膏粉5mg至50mL棕色容量瓶 中，加30mL 25%乙腈水溶液超声溶解，冷却至室温后，继续加25%乙腈水溶液定容。
[0043] 分析方法：
[0044] 高效液相色谱仪：Agilent 1100,二元栗；
[0045] 色谱柱：