一种防治仔猪腹泻的微生态制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及防治仔猪腹泻的生物制剂，具体地指一种防治仔猪腹泻的微生态制剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002]仔猪由于免疫系统发育不完善，在受到外界刺激时易发生腹泻。尤其是仔猪的早期断奶措施会从营养、心理和环境等方面刺激仔猪，导致仔猪发生早期断奶应激，严重时引起仔猪发生腹泻甚至死亡。生产实践中广泛使用抗生素来缓解仔猪腹泻，但随着抗生素的耐药性和食品安全等问题的日益突出，禁用抗生素已经成为一种必然趋势。
[〇〇〇3]目前常用由益生菌组成的微生态制剂来部分替代猪用抗生素的使用。但这类微生态制剂存在生产程序复杂、生产成本高于抗生素、菌株在运输和储存阶段易失活等不利因素，从而在一定程度上限制了此类微生态制剂的推广与应用。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种防治仔猪腹泻的微生态制剂及其制备方法。该微生态制剂以猪粪便为原料制备而成，用于防治仔猪腹泻，具有显著的效果，从而可以在防治仔猪腹泻过程中减少猪用抗生素的使用量。
[0005]为实现上述目的，本发明提供一种防治仔猪腹泻的微生态制剂，所述微生态制剂由猪的粪便菌液和菌株保护剂组成。其中，每毫升微生态制剂中活菌数量为1〇3?101(]个。
[0006]进一步地，所述猪为生长健康的贵州从江香猪（一种极少发生腹泻的中国地方品种猪）。
[0007]再进一步地，所述猪的粪便菌液制备方法为：收集生长健康的贵州从江香猪粪便，加入到无菌生理盐水中制成悬液，用不锈钢茶漏和细胞筛（孔径为0.224毫米）依次过滤悬液，得到猪的粪便菌液。采用活菌计数法对猪粪便菌液中的活菌计数，并根据计数结果将猪粪便菌液中的活菌含量调整为1〇3?10个/毫升。
[0008]再进一步地，所述猪的粪便菌液中至少含有以下一种或几种门类的细菌和真菌。这些细菌门类包括拟杆菌门、厚壁菌门、螺旋体门、变形菌门、放线菌门、互养菌门、疣微菌门、广古菌门、梭杆菌门、纤维杆菌门、软壁菌门、衣原体门、脱铁杆菌门、迷踪菌门；真菌门类包括子囊菌门、担子菌门、接合菌门。
[0009]进一步鉴定发现，所述猪的粪便菌液中至少含有以下一种或几种属类的细菌和真菌。这些细菌属类包括拟杆菌属、弯曲菌属、梭菌属、脱硫弧菌属、乳杆菌属、颤杆菌克属、普氏菌属、瘤胃球菌属、链球菌属、琥珀酸弧菌属、密螺旋体属；真菌属类包括链格孢属、曲霉菌属、假丝酵母属、枝孢属、德巴利氏酵母属、汉逊酵母属、炭团菌属、青霉属、隔孢伏革菌属、莖点霉属、拟青霉属、踝节菌属、孢圆酵母属、木霉菌属、丝孢酵母属。
[0010]再进一步地，所述菌株保护剂是质量分数为〇. 5%?5%的碳酸氢钠溶液。
[0011]本发明还提供了一种防治仔猪腹泻的微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
[0012]1)收集生长健康的贵州从江香猪粪便，加入到无菌生理盐水中制成悬液，用不锈钢茶漏和细胞筛（孔径为0.224毫米）依次过滤悬液，得到猪的粪便菌液。采用活菌计数法对猪粪便菌液中的活菌计数，并根据计数结果将猪粪便菌液中的活菌含量调整为1〇3?101°个/晕升。
[0013]2)将步骤1)中制得的猪粪便菌液与菌株保护剂按体积比（1:1?5:1)混合均匀，得到微生态制剂。其中，每毫升微生态制剂中活菌数量为1〇3?10 个。
[0014]如需长途运输或者长期存放，为了保持猪粪便和猪粪便菌液中菌的活性，可以使用以下两种方法：
[0015]1)收集生长健康的贵州从江香猪粪便，置于液氮中低温保存。使用前通过37°C水浴快速解冻猪粪便，然后用于制备微生态制剂。
[0016]2)收集生长健康的贵州从江香猪粪便，加入到无菌生理盐水中制成悬液，用不锈钢茶漏和细胞筛（孔径为0.224毫米）依次过滤悬液，得到猪的粪便菌液。采用活菌计数法对猪粪便菌液中的活菌计数，并根据计数结果将猪粪便菌液中的活菌含量调整为1〇4?1011个/毫升。然后向猪粪便菌液中加入甘油得到猪粪便菌液冻存液（甘油的体积分数为10% )，置于液氮中低温保存。使用前通过37°C水浴快速复苏猪粪便菌液中的菌，然后将复苏后的猪粪便菌液中的活菌含量稀释为1〇3?101°个/毫升，最后加入菌株保护剂，混合均匀，制成微生态制剂。
[0017]使用时，将微生态制剂灌服至仔猪胃中，灌服剂量为1?10毫升/次，日服一次。
[0018]本发明的微生态制剂与现有的猪用微生态制剂相比，有以下优点：
[0019]1)本发明的微生态制剂制作过程简单，生产成本较低，具有显著的防治仔猪腹泻效果，且不影响仔猪的生长性能。
[0020]2)本发明的微生态制剂有助于猪粪便的循环再利用，实现变废为宝，减少猪粪便对环境的污染。
【具体实施方式】
[0021]为了更好地解释本发明，以下结合具体实施例进一步阐明本发明的主要内容，但本发明的内容不仅仅局限于以下实施例。
[0022]实施例1
[0023]微生态制剂的制备方法为：
[0024]1)收集生长健康且断奶后第八天的贵州从江香猪仔猪粪便，置于液氮中低温保存。制备猪粪便菌液时，通过37°C水浴快速解冻猪粪便，然后加入到无菌生理盐水中制成悬液。用不锈钢茶漏和细胞筛（孔径为0.224毫米）依次过滤悬液，得到猪的粪便菌液。采用活菌计数法对猪粪便菌液中的活菌计数，并根据计数结果将猪粪便菌液中的活菌含量调整为104?10 11个/毫升，然后向猪粪便菌液中加入甘油得到猪粪便菌液冻存液（甘油的体积分数为10% )，置于液氮中低温保存。
[0025]其中，所述猪的粪便菌液中至少含有以下一种或几种属类的细菌和真菌。这些细菌属类包括拟杆菌属、弯曲菌属、梭菌属、脱硫弧菌属、乳杆菌属、颤杆菌克属、普氏菌属、瘤胃球菌属、链球菌属、琥珀酸弧菌属、密螺旋体属；真菌属类包括链格孢属、曲霉菌属、假丝酵母属、枝孢属、德巴利氏酵母属、汉逊酵母属、炭团菌属、青霉属、隔孢伏革菌属、莖点霉属、拟青霉属、踝节菌属、孢圆酵母属、木霉菌属、丝孢酵母属。
[0026]2)使用前通过37°C水浴快速复苏猪粪便菌液中的菌，然后将复苏后的猪粪便菌液中的活菌含量稀释为1〇3?10 个/毫升。将稀释后的猪粪便菌液与菌株保护剂按体积比（1:1?5:1)混合均勾，得到微生态制剂。其中，每毫升微生态制剂中活菌含量为103?1010 个。
[0027] 在仔猪日龄第10、12、14、16、18天，将制备的微生态制剂灌服至长X大二元杂交仔猪胃中，灌服剂量为1?10毫升/次，日服一次。与未实施该微生态制剂灌服的长X大二元杂交仔猪组相比，该微生态制剂灌服组在断奶（21日龄）后第1?11天阶段的腹泻率显著降低了 60%，生长性能无显著变化。
[0028]实施例2
[0029] 微生态制剂的制备方法为：
[0030]1)收集生长健康且断奶后第八天的贵州从江香猪仔猪粪便，置于液氮中低温保存。制备猪粪便菌液时，通过37°C水浴快速解冻猪粪便，然后加入到无菌生理盐水中制成悬液。用不锈钢茶漏和细胞筛（孔径为0.224毫米）依次过滤悬液，得到猪的粪便菌液。采用活菌计数法对猪粪便菌液中的活菌计数，并根据计数结果将猪粪便菌液中的活菌含量调整为104?10 11个/毫升，然后向猪粪便菌液中加入甘油得到猪粪便菌液冻存液（甘油的体积分数为10% )，置于液氮中低温保存。
[0031]其中，所述猪的粪便菌液中至少含有以下一种或几种属类的细菌和真菌。这些细菌属类包括拟杆菌属、弯曲菌属、梭菌属、脱硫弧菌属、乳杆菌属、颤杆菌克属、普氏菌属、瘤胃球菌属、链球菌属、琥珀酸弧菌属、密螺旋体属；真菌属类包括链格孢属、曲霉菌属、假丝酵母属、枝孢属、德巴利氏酵母属、汉逊酵母属、炭团菌属、青霉属、隔孢伏革菌属、莖点霉属、拟青霉属、踝节菌属、孢圆酵母属、木霉菌属、丝孢酵母属。
[0032]2)使用前通过37°C水浴快速复苏猪粪便菌液中的菌，然后将复苏后的猪粪便菌液中的活菌含量稀释为1〇3?10 个/毫升。将稀释后的猪粪便菌液与菌株保护剂按体积比（1:1?5:1)混合均勾，得到微生态制剂。其中，每毫升微生态制剂中活菌含量为103?1010 个。
[0033] 将制备的微生态制剂分别灌服至15头断奶前发生严重腹泻的仔猪胃中，灌服剂量为1?10毫升/次，日服一次。次日，仔猪的腹泻率降低了 50%。第三日，所有腹泻仔猪的腹泻症状基本消失。
[0034]其它未详细说明的部分均为现有技术。尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。
【主权项】
1.一种防治仔猪腹泻的微生态制剂，其特征在于:所述微生态制剂由猪的粪便菌液和菌株保护剂组成；其中，每毫升微生态制剂中活菌含量为103?10 w个。2.根据权利要求1所述防治仔猪腹泻的微生态制剂，其特征在于:所述猪为生长健康的贵州从江香猪。3.根据权利要求1或2所述防治仔猪腹泻的微生态制剂，其特征在于:所述猪的粪便菌液制备方法为:收集生长健康的贵州从江香猪粪便，加入到无菌生理盐水中制成悬液，用不锈钢茶漏和细胞筛依次过滤悬液，得到猪的粪便菌液，对猪粪便菌液中的活菌计数，并根据计数结果将猪粪便菌液中的活菌含量调整为103?10 个/毫升。4.根据权利要求1或2所述防治仔猪腹泻的微生态制剂，其特征在于:所述菌株保护剂是质量分数为0.5%?5%的碳酸氢钠溶液。5.一种权利要求1所述防治仔猪腹泻的微生态制剂制备方法，其特征在于:包括以下步骤: 1)收集生长健康的贵州从江香猪粪便，加入到无菌生理盐水中制成悬液，用不锈钢茶漏和细胞筛依次过滤悬液，得到猪的粪便菌液，对猪粪便菌液中的活菌计数，并根据计数结果将猪粪便菌液中的活菌含量调整为103?10 个/毫升； 2)将步骤1)中制得的猪粪便菌液与菌株保护剂按体积比1?5: 1混合均匀，得到微生态制剂；其中，每毫升微生态制剂中活菌含量为103?10 w个。
【专利摘要】本发明公开了一种防治仔猪腹泻的微生态制剂及其制备方法。该微生态制剂以猪粪便为原料制备而成，用于防治仔猪腹泻，具有显著的效果，从而可以在防治仔猪腹泻过程中减少猪用抗生素的使用量。该方法首先收集生长健康的贵州从江香猪粪便，加入到无菌生理盐水中制成悬液，用不锈钢茶漏和细胞筛(孔径为0.224毫米)依次过滤悬液，得到猪的粪便菌液。再向猪的粪便菌液中加入菌株保护剂，混合均匀，得到微生态制剂，其中，每毫升微生态制剂中活菌数量为103～1010个。使用时，将微生态制剂灌服至仔猪胃中，灌服剂量为1～10毫升/次，日服一次。本发明的微生态制剂制作过程简单，生产成本较低，具有显著的防治仔猪腹泻的效果，且不影响仔猪的生长性能。
【IPC分类】A61K35/74, A61P1/12, A61K35/24, A61K36/06
【公开号】CN105343125
【申请号】CN201510740876
【发明人】晏向华, 胡军, 聂杨帆
【申请人】华中农业大学
【公开日】2016年2月24日
【申请日】2015年11月3日