铁代谢改善剂的制作方法
【专利说明】
[0001] 本申请是申请号为200780045678.X、申请日为2007年12月10日、发明名称为"铁 代谢改善剂"的中国专利申请的分案申请。
技术领域
[0002] 本发明设及改善生物体内铁代谢的铁代谢改善剂，特别设及使接受了血液透析、 血液过滤和血液过滤透析等血液净化疗法的慢性肾衰竭患者的生物体内铁代谢得到改善 的铁代谢改善剂。
[0003] 进而，本发明设及通过对于接受血液透析、血液过滤和血液过滤透析等血液净化 疗法的慢性肾衰竭患者给予该铁代谢改善剂而改善生物体内的铁代谢的方法，特别设及通 过使用含有该铁代谢改善剂的透析液和/或透析用补充液而使生物体内的铁代谢得到改 善的方法。
[0004] 进而本发明还设及血液净化方法，该方法包含对于慢性肾衰竭患者，使用含有该 铁代谢改善剂的透析液进行血液净化的血液透析和血液过滤透析，进而设及血液净化方 法，该方法包含对于慢性肾衰竭患者，使用含有该铁代谢改善剂的透析用补充液进行血液 净化的血液过滤透析和血液过滤。
【背景技术】
[0005] 接受了W血液透析为代表的血液净化疗法的慢性肾衰竭患者由于多种并发症而 使其Q0L(生存质量）降低或住院、死亡的危险率增高，作为其因子，存在有慢性炎症状态、 营养障碍、动脉硬化、再者是促红细胞生成素巧P0)抵抗性肾性贫血，通过它们相互作用， 而使预后恶化，运是普遍知道的事实。
[0006] 与运些病况有关的一元机理还没有搞清，猜想其一个原因是伴随肾衰竭的铁代谢 异常，即铁在各种脏器·组织中的蓄积W及由W催化铁的芬顿反应为介导的氧化应力（酸 化スhkス）的增幅所导致的细胞障碍。
[0007] 接受了血液净化疗法的慢性肾衰竭患者所发生的肾性贫血是由于伴随肾功能降 低而在肾组织内产生的促红细胞生成素相对生成不足，从而骨髓中的红细胞生成减少的状 态，作为对于其的治疗，可W使用人基因重组型促红细胞生成素（ril证P0)制剂，另外最近， 对于透析疗法引入前的保存期肾衰竭患者，也使用riluEPO制剂。
[0008] 但是，即使给予ril证P0制剂，也散见由于对于EP0的造血反应性降低而不能使贫 血得到改善的EP0抵抗性肾性贫血。其原因多是因为骨髓中的铁缺乏，而对于慢性肾衰竭， 由ril证P0治疗导致造血亢进，由此铁的需要增加的缘故。但是，已知有下述的状态，即，尽 管由血清铁蛋白浓度可W判断储存了足够的铁，但进而通过给予铁，也缺乏改善贫血的功 能性铁。
[0009] 本发明人们搞清了透析患者的铁代谢异常的存在和其一部分机制（非专利文献 1)。目P，血液透析患者的血清铁与健常人相比是低的值，但血清铁蛋白浓度是有统计学意义 的高值。另外运些患者的多核白细胞内铁浓度升高至健常人的3倍左右，同时铁蛋白浓度 也升高至约1.5倍。
[0010] 进而，即使仅对于血清铁蛋白浓度低的患者进行研究，仍然有同样的细胞内铁浓 度的升高。
[0011] 目P，对于透析患者，与血清铁蛋白浓度无关，多核白细胞内的铁浓度升高。
[0012] 在细胞内铁代谢中有铁输送蛋白参与。对于铁输送蛋白，在细胞水平，特别是对于 十二指肠或网状内皮系细胞可W得到许多新的发现。作为向细胞内摄入铁的蛋白，除了摄 入与3价铁（Fe3+)结合的转铁蛋白的转铁蛋白受体（TfR)W外，还已知有输送2价铁（Fe2+) 的二价金属离子转运体l(DMTl)，另外作为向细胞外汲出铁的蛋白，已知有膜铁转运蛋白 (7工口术一ナシ）1(FP1)。
[0013] 本发明人们另外对于多核白细胞的细胞内铁浓度的升高与铁输送蛋白的关联性 进行阐明（非专利文献1)。目P，确认TfR与铁向多核白细胞细胞内的摄入有关，FP1与铁的 汲出有关。另外，可知在血液透析患者的多核白细胞中，与健康正常人相比，在mRNA水平和 蛋白水平作为铁摄入蛋白的TTR表达增加，作为铁汲出蛋白的FP1表达降低。
[0014] W上暗示了对于血液透析患者，由于运些铁输送蛋白的调节异常，即"铁的包裹"， 导致多核白细胞内的铁过剩蓄积。
[0015] 在全身的细胞中都发现有铁输送蛋白，因此在透析患者的多核白细胞中确认的同 样的表达变化即使在网状内皮系中也有发生的可能性。
[0016] 生物体中最重要的铁代谢是在老化的红细胞网状内皮系中贪食、从血红蛋白将铁 取出并在骨髓中用于造血而使铁再利用的所谓再生体系。通过该体系，一天有约20~25mg 的铁得到再利用。当在肝脏或脾脏的网状内皮系和骨髓巨隧细胞中产生"铁的包裹"时，铁 代谢的再生体系丧失，虽然血清铁蛋白值为高值，但陷入铁不足的功能性铁缺乏的状态。
[0017] 另一方面，对于多数慢性肾衰竭患者，认为其作为炎症反应急性期指标之一的 C-反应性蛋白质（CR巧为高值，处于慢性炎症状态。一直W来，对于伴随慢性炎症性疾患的 慢性病贫血，报道了其机理为在脾脏和肝脏的巨隧细胞中蓄积了铁，W及由于网状内皮系 中"铁的包裹"而导致再利用障碍（非专利文献2)。
[0018] 另外，EP0抵抗性肾性贫血的一部分也表现与慢性炎症状态关联（非专利文献3)。
[0019] 最近，报道了慢性病贫血的病况与炎症性细胞因子的关联性（非专利文献4)，因 此作为透析患者的铁输送蛋白调节障碍的原因物质，炎症性细胞因子受到人们的瞩目。
[0020] 本发明人们使用来源于人单核细胞的培养细胞，研究了运些炎症性细胞因子给铁 输送蛋白所带来的影响（非专利文献5)。其结果认为，在mRNA水平和蛋白水平上有TfR、 DMT1的表达增加和FP1的表达抑制。另外，即使使铁处于前负荷的状态，利用细胞因子刺激 也有同样的变化。目P，在网状内皮系中，细胞因子与细胞内铁浓度无关，暗示引起了铁输送 蛋白调节障碍。
[002。 在现有的市售透析剂中，为了稳定化而含有少量（8~12mEq/L)的乙酸，也暗示了 该乙酸有可能通过刺激单核细胞而助长高细胞因子血症。另一方面，在作为巧樣酸转换酶 的乌头酸酶中，其活性中屯、存在铁-硫配位化合物，当细胞内铁浓度低时，铁-硫配位化合 物分解，酶活性降低。另外，报道了细胞质中存在的作为铁代谢控制蛋白的IRP(铁调节蛋 白，ironregulatcxryprotein)的内IRP1在缺乏铁的情况下，与在铁输送蛋白的mRNA中 存在的IRE(铁应答型元件，ironresponsiveelement)结合，产生TfR和DMT1的mRNA的 分解障碍和FPl的mRNA的翻译引发障碍（非专利文献6)。已知IRPl在细胞内铁浓度高时 具有乌头酸酶活性，因此巧樣酸通过乌头酸酶活性的升高而减弱IRP1-IRE的结合，有纠正 铁输送蛋白异常的可能性。
[0022] 综上所述，源于透析患者呈现的高细胞因子血症，在网状内皮系细胞中引起与多 核白细胞同样的铁输送蛋白调节障碍，由网状内皮系中"铁的包裹"导致的铁利用障害成为 EP0抵抗性肾性贫血的主要原因，进而，在影响患者预后的各种并发症的发病、发展中扮演 着中屯、性的角色。
[0023] 因此，依据W上各点，对于接受了血液透析、血液过滤和血液过滤透析等血液净化 疗法的慢性肾衰竭患者，通过防止高细胞因子血症或者纠正铁输送蛋白的调节异常，网状 内皮系的"铁的包裹"可W得到解放，随之血清铁浓度升高，铁的利用性增加，因而由此可W 改善EP0抵抗性肾性贫血，回避并发症发生的风险，并有助于患者的WL提高或预后的改 善。
[0024] 但是，现状是没有公开在接受了血液净化疗法的慢性肾衰竭患者中产生的铁代谢 异常的改善，即改善铁向细胞内的过剩摄入和释放抑制的具体手段，或转移在网状内皮系 中蓄积的铁W在造血体系中利用的解决方法。另外，现状是作为对于呈现EP0抵抗性贫血 的慢性肾衰竭患者的治疗手段，利用服用铁剂的EP0制剂疗法的辅助疗法是有效的，但除 了依赖于专业医师的经验W外，没有特别的方法。
[00巧]【非专利文献l】0takiY，等：Am.J.Ki化巧Dis. :43,1030-1039(2004)
[0026] 【非专利文献 2】AliM，等：Lancet:20,652-655(1982)