山蜡梅叶片在制备抑制恶性胚胎横纹肌瘤细胞rd细胞增殖药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于中药技术领域，具体设及一种山蜡梅叶片在制备抑制恶性胚胎横纹肌 瘤细胞RD细胞增殖药物中的应用及山蜡梅叶片的制备方法。
【背景技术】
[0002] 山蜡梅叶片标准号WS-11310狂0-1310)-2002,记载于国家中成药标准汇编内科内 科肺系(一)分册。由山蜡梅叶1500g作为原料药制成，具有辛凉解表，清热解毒的功效。用 于风热感冒，发热，恶寒，咽痛。
[0003] 现有技术中，尚未有山蜡梅叶片在在制备抑制人恶性胚胎横纹肌瘤细胞RD细胞 增殖药物中的应用的报道，也未见有山蜡梅叶片提取制备方面采用超临界萃取的报道，而 水煎煮、水蒸气蒸馈法提取挥发油的方法，工艺粗糖、落后，杂质多，导致患者用量过大，不 方便服用，严重影响了本品在临床上应用。
【发明内容】
[0004] 发明目的：本发明的目的在于提供一种山蜡梅叶片在制备抑制恶性胚胎横纹肌瘤 细胞RD细胞增殖药物中的应用。
[0005] 本发明的另一个目的在于提供一种山蜡梅叶片的制备方法。
[0006] 本发明的目的是通过如下的方案实现的： 山蜡梅叶片在制备抑制恶性胚胎横纹肌瘤细胞RD细胞增殖药物中的应用，所述山蜡 梅叶片由山蜡梅叶1500g作为原料药制成，所述山蜡梅叶片的制备方法由下列步骤组成： 取山蜡梅叶，加入到C〇2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百 分比为4-6%，萃取压力15-30MPa，溫度30-50°C，C〇2流量^3ml/g生药·min,萃取时间 700-800min，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成 500片，每片重0. 35邑。
[0007] 优选的，上述的山蜡梅叶片在制备抑制恶性胚胎横纹肌瘤细胞RD细胞增殖药物 中的应用，所述山蜡梅叶片的制备方法由下列步骤组成：取山蜡梅叶，加入到C〇2超临界萃 取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%，萃取压力25MPa，溫度 40°C，C〇2流量2ml/g生药·min,萃取时间750min，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入 淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成500片，每片重0. 35邑。
[000引现有技术中，山蜡梅叶片口服，一次6~7片，一日3次。山蜡梅叶片服药量大。采 用本发明方法制备成的山蜡梅叶片每片重0. 35g，每次仅需3片，一日服用3次。在具有更 多活性成分的条件下大大减少了服用量。此结论可W通过下述试验证明。
[0009] 试验一、不同方法制备的山蜡梅叶片中搬皮素和山奈素含量的比较 1、仪器及试药本发明山蜡梅叶片：按实施例1方法制备，使用1500g原料药，经提取制 成500片，每片重0. 35g。原山蜡梅叶片，按照WS-11310狂0-1310)-2002标准方法制备。 Agilentl200高效液相色谱仪；METTLERAE240电子分析天平；搬皮素和山奈素对照品（中 国药品生物制品检定所)。
[0010] 2、方法 照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VID)测定。
[0011] 色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0. 5% 憐酸溶液（45 : 55)为流动相；检测波长为365nm。理论板数分别按搬皮素、山奈素峰计算 均应不低于1500。
[0012] 对照品溶液的制备精密称取搬皮素、山奈素对照品适量，分别加甲醇制成每1ml 含6μκ、8μκ的溶液，即得。
[0013] 供试品溶液的制备取本发明山蜡梅叶片10片，精密称定，研细，取0. 60g，精密 称定，加甲醇加热回流2次（50ml、50ml)，每次1小时，滤过，合并滤液，残渣加甲醇适量洗 涂，滤过，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水30ml使溶解，用冰醋酸调节抑值至3~4,加醋 酸乙醋振摇提取5次，每次30ml，合并醋酸乙醋液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至 10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
[0014] 对照产品供试品溶液的制备取对照的山蜡梅叶片20片，精密称定，研细，取 1. 2g，精密称定，加甲醇加热回流2次（50ml、50ml)，每次1小时，滤过，合并滤液，残渣加 甲醇适量洗涂，滤过，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水30ml使溶解，用冰醋酸调节抑值至 3~4,加醋酸乙醋振摇提取5次，每次30ml，合并醋酸乙醋液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶 解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
[0015] 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液、对照产品供试品溶液各5μ1， 注入液相色谱仪，测定，即得。
[0016] 3、结果 结果表明，本发明山蜡梅叶片中搬皮素和山奈素的含量为220-362μκ/片；而原山蜡 梅叶片中搬皮素和山奈素的含量为36μκ/粒，每次服用量3片的搬皮素和山奈素含量为原 片剂6粒含量的3-5倍，在服用量减少的情况下，搬皮素和山奈素含量有很大提高。
[0017] 上述研究表明，采用本发明制备方法制备的山蜡梅叶片，有效成分含量远远高于 WS-11310狂D-1310) -2002标准记载的方法制备的山蜡梅叶片。
【具体实施方式】
[0018] 下面结合具体实施例对本发明作更进一步的说明，W便本领域的技术人员更了解 本发明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于W下的实例，凡基于本发明上述 内容所实现的技术均属于本发明的范围。
[001引实施例1 取山蜡梅叶1500g，加入到C02超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶 剂的体积百分比为5%，萃取压力25MPa，溫度40°C，C02流量2ml/g生药·min,萃取时间 750min，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成500 片，每片重0. 35邑。
[0020] 经检测，成品中搬皮素和山奈素的含量为362μκ/片。
[0021] 实施例2 取山蜡梅叶1500g，加入到C〇2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶 剂的体积百分比为4%，萃取压力15MPa，溫度30°C，C〇2流量Iml/g生药·min,萃取时间 SOOmin，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成500 片，每片重0. 35邑。
[0022] 经检测，成品中搬皮素和山奈素的含量为220μκ/片。
[002引 实施例3 取山蜡梅叶1500g，加入到C02超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶 剂的体积百分比为6%，萃取压力30MPa，溫度60°C，C